胃痛消痞方对肝郁脾虚型功能性消化不良大鼠胃及下丘脑BDNF影响的实验研究

目的观察胃痛消痞方对肝郁脾虚型功能性消化不良(FD)大鼠脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法选用改良郭氏夹尾刺激法联合张氏不规则喂食法复制FD大鼠模型,以西药莫沙必利片为阳性对照,中药干预以胃痛消痞方灌胃治疗。实验结束后,观察各组大鼠的一般状态,免疫组化法(IHC)观察胃窦及下丘脑组织BDNF蛋白表达,实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time,RT-PCR)观察胃窦及下丘脑组织中BDNF mRNA的变化,蛋白印记(Western blot,WB)法检测各组大鼠胃窦及下丘脑组织中BDNF蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠胃窦及下丘脑组织中BDNF表达(IHC)、BDNF mRNA相对表达量(RT-PCR)、BDNF蛋白表达(WB)均降低(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组大鼠胃窦及下丘脑组织中BDNF表达(IHC)、BDNF相对表达量(RT-PCR)、BDNF蛋白表达(WB)均增高(P<0.05);与西药组比较,中药组BDNF表达效果(IHC)更好(P>0.05),BDNF mRNA相对表达量(RT-PCR)效果更好(P<0.05),BDNF蛋白表达量(WB)增加明显,效果更好(P<0.05)。结论胃痛消痞方对FD大鼠的胃窦、下丘脑组织BDNF表达有明显改善,并可有效调节胃窦、下丘脑组织中BDNF基因及蛋白表达,胃痛消痞方对肝郁脾虚型FD的治疗作用可能是通过改善BDNF水平实现的。     

神经肽Y和5-羟色胺在腹泻型肠易激综合征模型大鼠中表达的研究

目的探讨神经肽Y(NPY)和5-羟色胺(5-HT)对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)发病机制的影响,为从脑肠轴方面分析研究D-IBS的发生机制提供理论依据。方法采用母乳分离+醋酸刺激+四肢束缚制作D-IBS大鼠模型,通过免疫组化法检测大鼠结肠组织中5-HT的蛋白表达水平,采用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠下丘脑和结肠组织中NPY mRNA的表达。结果与正常组相比,NPY mRNA表达在肠易激综合征模型大鼠结肠和下丘脑组织均降低(P<0.05)。5-HT蛋白表达在模型大鼠结肠中升高(P<0.05)。结论脑肠肽NPY和5-HT可能参与D-IBS脑肠轴异常机制的调节。     

黄芩素调控热休克蛋白70表达对溃疡性结肠炎大鼠的影响

目的研究黄芩素调控热休克蛋白70(HSP70)表达对溃疡性结肠炎大鼠的影响。方法用三硝基苯磺酸(TNBS)法构建溃疡性结肠炎大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、实验组及对照组,各15只,另外选取10只大鼠为正常组。实验组建模后第2天灌胃50 mg·kg^-1黄芩素,对照组灌胃0.42 g·kg^-1美沙拉嗪缓释颗粒,正常组与模型组则灌胃等量生理盐水,每天1次,连续干预2周。每天记录各组大鼠体重变化,进行疾病活动指数(DAI)评分;以苏木精-伊红染色观察大鼠结肠组织病理学形态;以免疫组化、蛋白质印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应检测结肠黏膜组织HSP70表达。结果治疗后,正常组、模型组、实验组和对照组大鼠DAI评分分别为0,(3.15±0.21),(0.89±0.14),(0.75±0.12)分,结肠黏膜组织损伤评分(CMIS)分别为(0.14±0.03),(2.86±0.23),(1.59±0.11),(1.35±0.10)分,结肠黏膜组织HSP70蛋白相对表达量分别为0.93±0.16,0.43±0.11,0.86±0.12,0.75±0.11,HSP70 mRNA相对表达量分别为1.32±0.23,0.21±0.06,0.78±0.11,0.65±0.08,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩素可有效减轻溃疡性结肠炎大鼠炎性反应及结肠黏膜组织炎性病理损伤,其作用机制可能与有效上调结肠黏膜组织HSP70表达相关。     

吗啡依赖自然戒断后大鼠造抑郁样模型探讨

目的:观察吗啡依赖大鼠自然戒断后行为学表现,初步探讨戒断后能否导致抑郁行为的发生以及抑郁样行为的变化。方法:选取敞箱测试和基础蔗糖水测试相接近的大鼠30只,随机分为吗啡给药组和生理盐水对照组,采用腹腔注射(ip)给药7 d建立吗啡依赖大鼠模型,分别用敞箱、蔗糖水偏爱测试评价戒断d3和d9的行为学表现。结果:吗啡依赖大鼠在戒断期间饮食量下降,体重先下降后缓慢增加,在戒断d3,敞箱活动总路程、垂直运动得分下降,蔗糖水饮用减少(P<0.05);在戒断d9,敞箱中活动总路程、垂直运动得分、蔗糖水饮用较正常组下降,两组间无明显统计学差异。结论:吗啡依赖戒断能导致大鼠抑郁样行为发生,这种状态随着戒断时间的延长而逐渐消失。     

金荞麦总黄酮下调NR2B表达改善IBS大鼠痛觉过敏

目的观察金荞麦总黄酮(Fag)对IBS样结肠刺激大鼠模型(CI模型)内脏敏感性的改善作用和对模型脊髓后角和海马内NMDA受体亚基NR2A、NR2B的影响。方法采用结肠刺激新生期乳大鼠法来制作IBS样CI模型。CI大鼠成年后给予口服Fag 2周,并用腹壁撤退反射(AWR)评分评价给药后CI大鼠内脏高敏感性的变化,用免疫组化法和蛋白印迹法进一步观察其脊髓后角和海马内NMDA受体亚基NR2A、NR2B的变化。结果和对照组比,CI组AWR评分明显增高,而高剂量Fag明显降低CI组的AWR评分。对照组脊髓后角、海马均可见NR2A、NR2B亚基表达,但CI组只有NR2B亚基表达增强,且高剂量Fag可降低其表达,NR2A亚基表达在各组变化不大。结论 Fag通过下调致敏中枢上脊髓后角和海马的NR2B表达对IBS样CI大鼠的痛觉过敏有改善作用。     

盐酸帕罗西汀对卒中后抑郁大鼠行为和下丘脑室旁核fos蛋白表达的影响

目的:探讨抗抑郁药治疗卒中后抑郁的分子作用机制。方法:应用线栓法致大脑中动脉闭塞制备脑卒中模型结合束缚应激和孤养法复制了卒中后抑郁症(poststroke depression,PSD)大鼠模型。观察PSD大鼠模型行为学改变和下丘脑室旁核c-fos表达,及盐酸帕罗西汀对PSD的干预作用。结果:PSD模型大鼠蔗糖水消耗量降低、Open-Field测定直立评分和水平评分减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);药物组糖水消耗量增加、Open-Field测定水平得分和直立得分增加,与PSD组比较差异有统计学意义(P<0.01)。PSD组下丘脑室旁核c-fos蛋白的表达较卒中组或抑郁组有所增加,且差异有统计学意义(P<0.05);与PSD组比较药物组下丘脑室旁核c-fos蛋白的表达减少,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论:盐酸帕罗西汀可以改善PSD大鼠抑郁行为,其抗抑郁作用可能与下调下丘脑室旁核c-fos基因表达有关。     

超负荷血糖对鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及FADD、Daxx表达的影响

目的 观察超负荷血糖对大鼠脑缺血再灌注缺血半暗带侧皮质区FADD、Daxx表达的影响,进一步探讨超负荷血糖加重脑缺血再灌注损伤的分子机制.方法 SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素(STZ),建立糖尿病高血糖大鼠模型,之后应用栓线法建立大鼠脑缺血再灌注模型.随机分为三大组:假手术组(A)、脑缺血再灌注组(B)和糖尿病脑缺血再灌注组(C).于缺血1h再灌注12h行神经功能评分,TTC染色测梗死面积,Tunel法检测细胞凋亡数目,免疫组化及Western blot检测FADD、Daxx的表达,并进行图像分析.结果 糖尿病脑缺血再灌注组的神经功能评分为(3.50±0.55),梗死面积为(39.99±2.23),细胞凋亡数为(27.51土3.43),免疫组化检测FADD为(110.18±4.21)、Daxx为(101.26士3.27);Western blot检测FADD为(1.191±0.041),Daxx为(1.389±0.052).脑缺血再灌注组的神经功能评分为(2.67±0.81),梗死面积为(30.13±2.04),细胞凋亡数为(18.28±2.09),免疫组化检测FADD为(131.46士3.24),Daxx为(123.16士2.19);Western blot检测FADD为(1.035±0.032),Daxx为(1.146±0.083).与脑缺血再灌注组相比,糖尿病脑缺血再灌注组的神经功能评分、梗死面积、细胞凋亡数、FADD及Daxx蛋白表达均明显增加(P＜0.05).结论 FADD、Daxx可能参与了超负荷血糖加重脑缺血再灌注损伤过程,上调FADD、Daxx表达可能是超负荷血糖加重脑缺血再灌注损伤的机制之一.     

一种白僵菌代谢产物BCEF0083对慢性应激抑郁大鼠下丘脑、垂体精氨酸加压素含量及海马GR mRNA表达的影响

目的：研究一种白僵菌代谢产物(BCEF0083)对实验性慢性应激抑郁大鼠下丘脑、垂体精氨酸加压素(AVP)含量及海马糖皮质激素受体mRNA(GRmRNA)表达的影响。方法：采用慢性不可预见性应激法造成大鼠抑郁模型，用放射免疫分析法测定抑郁模型大鼠下丘脑、垂体AVP含量，采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定海马GR mRNA表达。 结果：BCEF0083可降低慢性应激抑郁大鼠下丘脑、垂体AVP含量，上调海马GR mRNA表达。结论：BCEF0083的抗抑郁作用可能与其降低慢性应激大鼠下丘脑、垂体AVP含量及上调海马GR mRNA表达有关。     

金荞麦提取物改善肠易激综合征大鼠内脏痛觉过敏的效果及其机制

目的 观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏痛觉过敏的影响及其机制.方法 采用腹壁撤退反射(AWR)评分观察Fag(6、24 g·kg-1)口服给药两周后的IBS大鼠模型的内脏痛觉过敏的变化,并用免疫荧光法观察腰骶段脊髓背根神经(DRG)的辣椒素受体亚型TRPV1表达水平;采用细胞膜片钳记录Fag(0.1、0.3、1、3 g·L-1)对辣椒素(CAP)激活大鼠的DRG细胞TRPV1电流(ITRPV1)的影响.结果 Fag 24 g·kg-1在体内可显著降低升高的IBS大鼠AWR评分,IBS大鼠腰骶段DRG的TRPV1表达增高;Fag 6、24 g·kg-1干预后DRG的TRPV1表达下降;体外0.1、0.3、1、3 g·L-1 Fag可浓度依赖地抑制CAP激活的分离DRG神经元ITRPV1,IC50为0.83 g·L-1.结论 Fag可通过下调IBS大鼠TRPV1受体表达改善大鼠痛觉过敏,可抑制DRG神经元ITRPV1峰值,调节痛觉信号传递.     

贝母甲素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究贝母甲素对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法将SD大鼠随机分为5组:正常组,模型组,贝母甲素2.5、5、10 mg组,每组15只大鼠。采用大脑中动脉线栓法制局灶性脑缺血模型,贝母甲素给药组大鼠在手术前10 d每日分别灌胃贝母甲素2.5、5、10 mg·kg-1,在手术24 h后再连续3 d分别灌胃贝母甲素2.5、5、10 mg·kg-1。正常组和模型组在同一时间灌胃等量生理盐水。给药结束后进行神经功能评分,HE染色观察脑组织损伤,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量,免疫组化法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,ELISA法检测白细胞介素(IL)-6、IL-18和IL-1β的含量,Western blotting法检测caspase-9、caspase-3、bax、bcl-2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、beclin1、p62、PI3K、Akt和mTOR蛋白的表达。结果正常组大鼠神经功能评分为0分,模型组神经功能评分为(2.8±0.4)分。与模型组相比,贝母甲素2.5、5、10 mg组大鼠的神经功能评分显著降低(P <0.05),脑组织形态得到改善;caspase-9、caspase-3、bax表达显著下调,bcl-2表达显著上调(P <0.05);MDA和LDH含量显著降低,SOD含量显著升高(P <0.05);ICAM-1阳性细胞比率显著降低,IL-6、IL-18和IL-1β的含量明显降低(P <0.05);p62、PI3K、Akt和mTOR表达明显下调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和beclin1表达明显上调(P <0.05),且效果随着给药量的增加而呈增强趋势。结论贝母甲素对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用,减轻病理损伤和神经功能障碍,这可能与其抑制细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,调节PI3K/Akt/mTOR自噬通路有关。     

金双歧对肠易激幼鼠肠道菌群影响的研究

目的通过金双歧治疗肠易激幼鼠模型观察金双歧对幼鼠肠道菌群的影响。方法建立幼鼠肠易激模型,共20只,随机选同期正常生长幼鼠10只为正常组A,另取肠易激模型幼鼠10只为模型组B,取10只用金双歧治疗为实验组C。然后对三组幼鼠分别作粪便含水量检测及肠道菌群检测。结果小鼠建立肠易激模型后肠杆菌、肠球菌数量明显增多（P〈0.05）,双歧杆菌、乳酸杆菌数量大量减少（P〈0.05）：用金双歧治疗10d后,肠杆菌、肠球菌数量减少（P〈0.05）,双歧杆菌、乳酸杆菌大量增多（P〈0.05）,3组鼠粪便干湿重及粪便含水量比较,B组与A、C组间有显著差异（P〈0.05）。结论金双歧治疗肠易激综合症对幼鼠粪便性状症状及肠道菌群有明显改善,为应用益生菌治疗肠易激综合症提供理论依据。     

加味柴胡疏肝颗粒对抑郁大鼠模型的影响

目的观察加味柴胡疏肝颗粒对抑郁大鼠行为及中枢神经递质改变的影响。方法采用多种不良刺激方法制作抑郁大鼠模型,将实验动物分为正常对照组、抑郁非干预组、加味柴胡疏肝颗粒治疗组、氯米帕明对照组,定期测定各组大鼠的体重及糖水消耗量;以敞箱实验方法测定大鼠水平及垂直活动;利用荧光分光光度法测定动物NE、DA、5-HT含量的变化。结果与对照组相比,抑郁组大鼠体重增加数和糖水消耗量均下降(P<0.01);Open-Field法测定行为水平活动和垂直活动次数均下降(P<0.01);同时,抑郁大鼠脑内NE、DA、5-HT含量也明显下降(P<0.01)。加味柴胡疏肝颗粒治疗组(10g/kg,ig,连续12d)大鼠糖水消耗量增加,水平活动和垂直活动次数明显增加;同时脑神经递质NE、DA、5-HT含量明显增加(P<0.05)。结论早期应用中药加味柴胡疏肝颗粒改善抑郁模型大鼠抑郁状态,其作用机制可能是通过增加脑神经递质NE、DA、5-HT含量,从而改善抑郁模型大鼠消极行为症状。     

APETx2及粪菌移植对母婴分离诱导肠易激综合征大鼠内脏敏感性的影响及机制

目的 探讨粪菌移植对母婴分离诱导的肠易激综合征（IBS）大鼠内脏敏感性的影响并观察酸敏感离子通 道3（ASIC3）抑制剂APETx2对其作用及可能机制。方法 取SD孕鼠10只,待其生产后取仔鼠,采用母婴分离法构 建IBS模型,收集建模成功的大鼠粪便制成粪菌液。18只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照（Con） 组、母婴分离（NMS）组、NMS+APETx2 处理组,每组 6 只。NMS 组、NMS+APETx2 组均予以含有抗生素的鸡尾酒 （ABX-water）连续灌胃5 d,构建伪无菌鼠模型,之后给予NMS大鼠粪菌液（1.6 mL/kg）灌胃;Con组给予等体积生理盐 水灌胃,每天1次,连续灌胃5 d。灌胃结束后,NMS+APETx2组给予100 μg/kg APETx2连续腹腔注射7 d,每天1次。 采用墨汁推进实验测定肠道推进率,结直肠扩张刺激后评估内脏敏感性。免疫组化染色法检测结肠组织中ASIC3、 c-kit蛋白表达。分离3组大鼠结肠cajal间质细胞（ICC）,显微镜观察细胞形态学和数量变化。结果 与Con组比较, NMS组肠道推进率减慢,腹部回撤反射（AWR）评分升高,内脏敏感性增加,结肠组织ASIC3、c-kit表达上调,ICC形态 改变。与NMS组相比,NMS+APETx2组肠道推进率加快,AWR评分下降,内脏敏感性降低,结肠组织ASIC3、c-kit表 达下调,ICC形态趋于正常,数量明显减少。结论 IBS粪菌移植可以诱导内脏高敏感发生和降低肠道传输速率, APETx2可改善其内脏敏感性和肠道传输速率,其机制可能与APETx2下调ASIC3表达、抑制与ICC相关的c-kit信号 有关。     

逍遥散不同提取部位对慢性轻度不可预知应激模型大鼠行为学及海马中单胺类神经递质的影响

建立了慢性轻度不可预知应激(CUMS)模型大鼠,分别灌胃给予逍遥散石油醚部位(1)、95%乙醇部位(2)、1+2及盐酸文拉法辛(阳性药),考察大鼠行为学和海马中单胺类神经递质(去甲肾上腺素、5-羟色胺和5-羟基吲哚乙酸)的变化。采用旷场试验和糖水消耗试验结果及大鼠体重评价其行为学改变,并以HPLC-电化学方法检测海马内单胺类神经递质的含量。结果表明,单用1及1+2联用与阳性药具有相似的抗抑郁效果,对大鼠行为学和3种神经递质的回调均有显著改善;而单用2的疗效不显著,在3种神经递质中仅对去甲肾上腺素有显著的回调作用。     

抑郁型动脉粥样硬化大鼠模型的建立与评价

目的探讨建立抑郁型动脉粥样硬化大鼠模型的实验方法并评价模型的有效性。方法给大鼠喂食高脂饲料,利用慢性不可预见性应激造成抑郁表现,观察动物摄食量的变化,用旷场试验测定动物行为,检测血清学生化指标,HE染色观察腹主动脉和肝组织病变情况。结果与正常组相比,模型组大鼠食物消耗量明显减少(P<0.01);旷场实验中垂直得分、水平得分、总得分均明显降低(P<0.01);肝、脾、胸腺的脏器系数明显减少(P<0.01);血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、碱性磷酸酶(ALP)、丙二醛(MDA)含量明显升高(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)含量明显降低(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)活性降低(P<0.05);主动脉内膜-中膜明显增厚、内膜单核细胞、巨噬细胞浸润与聚集增多,内膜表层可见脂纹脂斑病变。结论高脂饲料饲养叠加慢性不可预见性应激,可造成大鼠兼具动脉粥样硬化和抑郁两方面的症状,与伴有抑郁症的动脉粥样硬化病人的临床表现有较好的相似性,是较理想的动物模型。     

六味安消胶囊联合枯草二联杆菌胶囊治疗便秘型肠易激综合征的疗效研究

目的 评估六味安消胶囊联合微生态制剂枯草二联杆菌胶囊治疗便秘型肠易激综合征(IBS)的效果和安全性.方法 采用完全随机方法将100例便秘型IBS患者分为治疗组和对照组,各50例.治疗组给予六味安消胶囊,4粒/次,3次/d;枯草二联杆菌胶囊500 mg/次,3次/d.对照组给予莫沙必利,5mg次,3次/d,餐前15～30 min服用.试验期为6周:1周基线期,4周治疗期,1周随访期,对患者全部IBS症状进行总体评估,对患者每个IBS参数的改善程度以及安全性进行评估.结果 治疗后治疗组和对照组患者的大便性状评分均比治疗前明显改善[(4.34±1.00)分比(1.56±0.61)分,(3.28±0.67)分比(1.64±0.63)分,均P＜0.05].2组治疗前后大便评分增加值比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组和对照组症状总积分治疗前后自身比较差异有统计学意义[(6.72±1.43)分比( 13.30±1.34)分,(9.10±1.94)分比(13.28±1.43)分,均P＜0.05],且治疗组症状改善较对照组更明显(P＜0.05).治疗组和对照组生活质量评价总评分治疗前后自身比较差异有统计学意义[(7.72±1.43)分比(19.30±1.34)分,(15.10±1.94)分比(19.28±1.43)分,均P＜0.05],且治疗组对生活质量改善更明显(P＜0.05).安全性分析结果显示,2组间不良事件、不良反应等指标的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 六味安消胶囊联合枯草二联杆菌胶囊能有效改善便秘型IBS患者的症状,效果稳定,并且具有良好的安全性和耐受性.     

帕罗西汀对心理应激大鼠血浆皮质醇和行为的影响

目的：观察帕罗西汀对心理应激大鼠血浆皮质醇和行为的影响。方法：建立大鼠心理应激模型,观察抗焦虑药物帕罗西汀用药组大鼠下丘脑室旁核c-fos表达、血浆皮质醇和旷场行为。结果：与正常对照组比较,心理应激大鼠下丘脑室旁核c-fos表达显著增加（P〈0.05）,血浆皮质醇含量明显升高（P〈0.05）,在旷场中的穿行格数和直立次数明显增加（P〈0.05）,而帕罗西汀用药能减少大鼠下丘脑室旁核c-fos表达、血浆皮质醇含量和在旷场中的活动（P〈0.05）。结论：帕罗西汀通过抑制c-fos基因表达,下调了下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）水平,从而减轻了心理应激所致的焦虑症状。     

利福昔明-双歧杆菌乳杆菌三联活菌片序贯疗法治疗肠易激综合征的临床观察

目的 探讨利福昔明-双歧杆菌乳杆菌三联活菌片序贯疗法治疗肠易激综合征（IBS）的临床效果.方法 将276例IBS患者随机分为3组,每组各92例,A组（序贯组）采用利福昔明-双歧杆菌乳杆菌三联活菌片序贯治疗＋谷维素;B组（菌剂组）采用双歧杆菌乳杆菌三联活菌片＋谷维素;C组（对照组）采用谷维素治疗;观察3组的治疗效果.结果 序贯组的总有效率为95.65％,显著高于菌剂组和对照组的79.35％、73.91％（P＜0.05）.治疗后序贯组的症状程度评分和症状频率评分为（1.48±0.87）分和（1.39±0.98）分,明显低于菌剂组与对照组的（2.24±1.23）分和（2.28±1.16）分、（2.38±1.13）分和（2.48±1.27）分（P＜0.05）.3组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 利福昔明-双歧杆菌乳杆菌三联活菌片序贯治疗IBS方法简便、疗效显著,可能成为治疗IBS的新方法.