血小板衍生生长因子

1971年Balk在体外培养研究鸡胚成纤细细胞的生长调节时,观察到正常鸡胚成纤维细胞在含有热处理(56℃,30分)过的血浆培养基中,细胞分化相当缓慢,而在经同样处理的血清培养基中,细胞很快分化增     

PCR方法检测犬细小病毒生长动态及与其它方法的比较

将可疑犬细小病毒（CPV）粪样分别接种于KF81、MDCK、BHK21、Vero细胞及鸡胚成纤维细胞中，用PCR、HA、ELISA三种方法检测在上面5种细胞中CPV的生长动态，结果表明：PCR方法能在第1、2、3代FK81细胞中检出CPV的生长，而HA、ELISA则只在第3代FK81细胞中才能检出CPV的生长；PCR方法能在MDCK、BHK21、Vero细胞及鸡胚成纤维细胞中检CPV生长，而HA、ELISA则均不能。因此，PCR方法可作为培养细胞中检测病毒生长动态的一种灵敏、快速的方法。     

逐步降低牛血清浓度培养人二倍体细胞试验的探讨

目的 逐步降低新生牛血清（以下简称牛血清）浓度培养人胚肺二倍体细胞，以适应无血清培养人胚肺二倍体细胞的需要。方法 应用美国生命公司无血清培养基（以下简称无血清培养基）和日水制药株式会社MEM培养基（以下简称MEN培养基），加入相同浓度牛血清配制的生长液，同时传代培养人胚肺二倍体细胞，随着每次细胞的传代培养而同时降低牛血清的浓度，观察人胚肺二倍体细胞是否保持其原有生物性能。结果 无血清培养基，牛血清降低的极限为0．5％，MEM培养基牛血清降低的极限为l％，细胞可传代培养。结论 人胚肺二倍体细胞在两种培养基配制的生长液中传代培养后，细胞形态有显著差异。随着牛血清浓度的逐渐降低，细胞形态无显著改变，活细胞数逐渐递减，细胞生长速度变慢，生长周期延长。     

鸡胚内神经营养活性物质的提取及其生物活性

 【目的】从鸡胚内提取具有神经营养生物活性的组分。【方法】分别取胚龄为E10、E16、E19的鸡胚，匀浆离心后，上清超滤，获得5个组分，即相对分子质量Mr〈3×10^3、Mt=3×10^3～〈10×10^3、Mt=10×10^3～〈30×10^3、Mr=30×10^～≤50×10^3与Mr〉50×10^3。采用新生大鼠海马神经元与鸡胚背根节体外培养方法，观察各组分的促神经元存活及突起生长的作用。用MTT法测定神经元的活性。【结果】胚龄E16与E19的鸡胚内相对分子质量M〉50×10^3的组分有明显的促进海马神经元细胞存活、分化和突起生长及鸡胚背根节突起生长的作用。【结论】鸡胚内含有较强的促进神经元存活、分化与突起生长的神经营养活性物质。     

传染性法氏囊病病毒在鸡胚细胞上的优化繁殖

研究了传染性法氏囊病病毒在鸡胚细胞上繁殖上的优化条件，结果表明，鸡胚细胞体外增殖培养后对ＩＢＤＶ的敏感性并不减弱，而且有提高。维持培养基中血清浓度的变化对病毒的繁殖影响不大。     

明胶作载体对NGF生物活性的影响

作者将明胶＋神经生长因子（Nervegrowthfactor，NGF），单纯NGF，明胶和单纯0．9％生理盐水4种物质分别：①加到无血清培养基中，观察对鸡胚背根神经节突起生长的影响．②注入大鼠坐骨神经12mm缺损的再生硅胶管小室内，术后5周、8周、12周进行光镜、电镜、图像分析等检测．结果：明胶＋NGF和单纯NGF一样可促进鸡胚背根神经节的存活并促进其细胞突起的生长和大鼠坐骨神经再生，证明明胶对NGF的生物活性无影响．     

人内皮抑素基因的克隆及其表达产物抗肿瘤活性

目的：克隆人内皮抑素（endostatin)基因并对其表达产物进行抗肿瘤活性研究。方法：从人肝cDNA文库中获得人endostatin基因，构建人载体PET15b，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，将表达产物（rhEndostatin)纯化后应用于小鼠Lewis肺癌治疗，并通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验。观察rhEndostatin的血管抑制作用。结果：rhEndostatin可抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成，明显抑制小鼠Lewis肺癌的生长。结论：rhEndostatin具有抗肿瘤活性。且此活性可能与其抑制肿瘤新生血管形成有关。     

神经生长导向因子Slit在鸡胚脊髓中的表达

目的：探讨神经生长导向因子S1it在鸡胚脊髓中的表达模式对发育和再生神经轴突的导向作用。方法：制备地高辛标记的RNA探针，应用原位杂交技术检测Slit基因mRNA在鸡胚不同发育期脊髓中的表达情况。结果：Shit基因mRNA的表达在中线结构区呈现优势。结论：神经生长导向因子Slit在鸡胚脊髓发育期轴突投射和神经通路形成中起重要作用。     

杂色曲霉素体外对人胚肺细胞致恶性转化作用的研究

目的：研究杂色曲霉素对人肺组织的致癌作用。方法：以组织培养方法研究了杂色曲霉素体外对人胚肺细胞致恶性转化作用。结果：发现杂色曲霉素处理４周后，体外培养的人胚肺细胞增殖旺盛，并出现细胞异型性变化，并可见复层交叉生长的转化灶。杂色曲霉素处理２４周，处理细胞可在软琼脂培养基上形成集落，杂色曲霉素１μｇ／ｍｌ、３μｇ／ｍｌ组平均集落数分别为１５．３、１６．１个／皿。结论：杂色曲霉素可诱发体外培养的人胚肺细胞发生恶性转化     

尖锐湿疣与基底细胞癌的促血管生长作用的比较研究

以早期尖锐湿疣为研究对象，通过在鸡胚绒毛尿囊膜的种植，考察其促血管生长作用，并与有强ＡＧＡ的基底细胞癌进行比较。结果发现，早期ＣＡ这种良性增殖性病变敢有明显的ＡＧＡ。推测其物质基础可能是某种形式的ＡＦ。探讨了ＣＡ的ＡＦ物质的产生方式。     

乳酸对海水鱼类细胞系CHSE生长和代谢的影响

在鲑鱼胚胎细胞(CHSE)培养中，低乳酸浓度(1．1～6．14mmol／L，相应渗透压为644～673kPa)对细胞生长无明显影响，主要的代谢特征基本不变；在高乳酸浓度(13．1～41，58mmol／L，相应渗透压为701～944kPa)下培养，细胞生长受到抑制，代谢发生明显变化。乳酸对cHsE细胞生长的抑制作用主要由乳酸导致培养基pH下降和渗透压增加引起。在CHSE细胞批培养中，维持正常的pH，7mmol／L的乳酸浓度，不会明显抑制CHSE细胞的生长。     

再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响

目的 研究再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞生长的影响。方法 采用静置贴壁培养法在再生丝素膜上体外培养鼠胚真皮层成纤维细胞，并用活细胞计数法及MTT比色法观察再生丝素膜对细胞的形态、功能和生长的影响。结果 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞的贴壁能力和形态及其代谢功能未见明显改变，也未见明显毒性，并能支持细胞正常生长，呈现正常的生长繁殖曲线。结论 再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞具有良好的细胞相容性。     

蚕丝蛋白材料对鼠胚表皮细胞毒性的实验研究

目的研究不同蚕丝蛋白材料对鼠胚表皮细袍的毒性及其影响细胞增殖的因素。方法采用组织块培养法体外原代培养鼠胚表皮细胞，用直接接触法和浸提液法体外培养鼠胚表皮细胞，MTT比色法检测其在不同蚕丝蛋白材料上的增殖活力和细胞相对增殖率，进行毒性分析；并用活细胞计数法观察不同蚕丝蛋白材料对鼠胚表皮细胞生长的影响。结果鼠胚表皮细胞在1、2、4、5、7、8、10号各型蚕丝蛋白材料上生长，其增殖活力与细胞对照组相当（P〉0.05）；在3、6、9号化学交联或HY-823交联型蚕丝蛋白材料上生长，其增殖活力均低于细胞对照组（P〈0．05）；而在11号蚕丝蛋白材料其增殖活力显著低于细胞对照组（P〈0．01）。1、7号丝胶材料细胞毒性分级为0级（无毒），2、3、4、5、6、8、9、10号各型蚕丝蛋白材料细胞毒性分级为1级（轻微毒），而11号蚕丝蛋白材料细胞毒性分级为2级（中度毒）。活细胞计数结果与MTT检测结果基本相一致。结论除11号蚕丝蛋白材料外，1～10号各型蚕丝蛋白材料无明显细胞毒性，能支持鼠胚表皮细胞正常生长，具有良好的细胞相容性。     

大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定

利用无血清培养和细胞克隆技术从孕鼠(14d)胚胎中分离出神经干细胞，并进行传代培养，采用免疫细胞化学技术检测神经巢蛋白和成熟脑细胞特异性抗原神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)的表达，同时采用H-E染色法鉴定神经细胞类型。证实从大鼠胚胎大脑皮质分离出的细胞具有连续的克隆能力，并表达神经巢蛋白，分化的细胞表达神经元和神经胶质细胞的特异性抗原，为中枢神经系统的干细胞。     

大鼠胚胎神经干细胞的培养及分化的观察

目的探索大鼠胚胎神经干细胞的培养、传代和冻存、复苏的方法,以及观察胚胎神经干细胞在自然条件下分化为神经元细胞和神经胶质细胞的过程.方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞,采用无血清培养技术进行培养、传代和鉴定.诱导分化后采用SABC法对分化的细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)检测以作细胞鉴定.结果成功培养出大鼠胚胎神经干细胞,并对其进行传代、冻存及复苏,培养的细胞能分化为神经元细胞和神经胶质细胞.结论大鼠胚胎神经干细胞能在体外适宜的培养条件下进行长期的培养、传代及冻存、复苏,并具有多向分化潜能.     

体外培养的人胚胎脑皮层神经干细胞的生长特性

目的从胎龄10～12周的人工流产胚胎脑皮层分离、培养神经干细胞后观察其生长特性.方法分别分离、鉴定孕10～12周人工流产的人胚胎脑皮层及孕16d Wistar大鼠脑皮层来源的神经干细胞,并在体外培养增殖.通过普通及电子显微镜观察、生长情况测定等方面的比较来观察其生长特性.结果不同来源的神经干细胞均保持着未分化状态,能够自我更新以及具有多向分化潜能.但来源于人胚胎脑皮层的神经干细胞生长速度明显较慢,且其生长需多种细胞因子的联合刺激.结论人胚胎脑皮层神经干细胞体外培养存在生长速度慢,分裂相所占比例低,群体倍增时间长以及其生长需多种细胞因子的联合刺激等问题.     

LaZ转基因小鼠腹侧中脑神经干细胞的扩增与诱导分化

目的构建LaZ转基因小鼠腹侧中脑神经干细胞的扩增与诱导分化技术平台,为进行体内移植携带报告基因的神经干细胞研究奠定基础.方法利用无血清培养基,分离并体外培养LaZ转基因胚胎小鼠腹侧中脑神经干细胞,连续稳定传代20代后,以免疫荧光、免疫细胞化学法及组织化学方法检测神经球Nestin和分化后细胞中神经纤维（NF）、胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、Galc和半乳糖苷酶（X-Gal）的表达.结果从LaZ转基因小鼠腹侧中脑分离的细胞群具有连续形成神经球的能力,其Nestin表达阳性.分化后的细胞可表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原.所有细胞半乳糖苷酶组织化学均为阳性.结论LaZ转基因小鼠腹侧中脑神经干细胞可稳定扩增,具有多向分化潜能,分化后细胞携带LaZ报告基因,可用于进一步的移植实验研究.     

三种人脐静脉内皮细胞分离方法的比较

目的 建立人脐静脉内皮细胞（HUVECs）分离和培养的方法.方法 分别采取“灌注消化法”、“机械刮取法”和“灌注搓揉法”来分离HUVECs.通过苔盼蓝排斥法检测细胞活力并计数,进行免疫荧光法鉴定,比较这3种方法在获取的细胞数目、细胞活力和纯度方面的差异.常规进行细胞的原代培养和传代培养.取第3代培养细胞绘制细胞生长曲线,根据细胞生长特点,形态及表型特征对培养细胞进行鉴定.结果 “灌注搓揉法”所分离的细胞无论从细胞数目、细胞活力和纯度方面均优于传统的“灌注消化法”和“机械刮取法”.培养的细胞从形态、生长特点和表型鉴定证实为血管内皮细胞（ECs）.结论 “灌注搓揉法”是一种获取血管ECs成功率高,可靠的方法.     

培养细胞中间纤维表达的研究

应用角蛋白PKK_1、PKK_2、PKK_3、波状蛋白、结蛋白、神经纤维蛋白与胶质纤维酸性蛋白5类7种单克隆抗体研究食管上皮细胞、食管癌、肝癌、肺癌、人胚肺转化细胞、胃癌、星形胶质细胞瘤(BT_(420),BT_(325))、肌细胞、肺细胞及神经纤维细胞等11种培养细胞的中间纤维表达。结果表明,不同细胞具有不同的中间纤维表达的特异性。据此特异性可鉴定胶质细胞、神经细胞、间质细胞、肌细胞与上皮细胞的类型及鉴别正常细胞与肿瘤细胞系的性质与来源。PKK_3还可用于腺癌细胞检测。     

恶性胶质瘤细胞诱导内皮细胞三维成型的体外实验

目的观察在三维胶原体外培养条件下恶性胶质瘤细胞体外诱导内皮细胞血管生成的作用.方法采用鼠尾胶原作为内皮细胞样细胞ECV-304培养的支架,以恶性胶质瘤细胞系SHG-44作为诱导条件,观测ECV-304细胞生长和小管样结构形成的过程,测定形成曲线、小管管径和管长以及细胞周期,比较有和无SHG-44细胞诱导ECV-304细胞形成小管样结构的差异.结果 SHG-44细胞对体外三维培养的ECV-304细胞具有诱导小管形成的作用,所诱导的小管管径和管长数值均较对照组大,小管形成时间早.结论恶性胶质瘤细胞能促进内皮细胞的生长、迁移和小管结构的形成,是研究体外血管生成研究的良好模型.