神经生长因子对严重烫伤大鼠海马神经元的保护作用

观察大鼠严重烫伤时海马神经元的病理变化,探讨ＮＧＦ对烫伤大鼠海马神经元的保护作用及其可能机制。ＳＤ大鼠侧脑室埋管,分成假烫组、烫伤组、烫伤＋ ＮＧＦ小剂量组、烫伤＋ ＮＧＦ大剂量组;大鼠在麻醉下造成３０％ ＴＢＳＡⅢ度烫伤,伤后３ ｄ,测定脑组织含水量,海马乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和一氧化氮（ＮＯ）的含量;部分脑组织做病理切片,尼氏染色。烫伤后７２ ｈ,脑组织含水量增加,海马出现明显的病理变化,尼氏小体减少或消失,胞体肿胀;ＬＤＨ和ＮＯ的含量明显增加;给予ＮＧＦ后,能明显改善上述病理变化,并能降低脑组织含水量、海马ＬＤＨ 和ＮＯ的含量。烫伤可引起海马神经元损伤、海马组织ＮＯ含量升高;ＮＧＦ对烫伤后海马神经元的损伤有保护作用,并能降低ＮＯ含量。     

培养海马CA1神经细胞中谷氨酸受体介导BDNF mRNA的表达

用原位杂交法观察了培养海马神经元中ＢＤＮＦｍＲＮＡ的表达，得出与他人报道略有不同的结果，上述神经元经ＫＡ处理后，ＢＤＮＦｍＲＮＡ表达增高不仅可经非ＮＭＤＡ受体介导，而且可通过谷氨酸的释放再间接活化ＮＭＤＡ受体。     

脑缺血再灌注后脑内脑源性神经营养因子的基因表达与调节

探讨：探讨脑缺血再灌注损伤后脑内脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｍＲＡＮ水平的变化,推测ＢＤＮＦ对损伤病理的影响。方法线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模,原位交检测大鼠海马神经元内ＢＤＮＦｍＲＮＡ,图像分析间接定量ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平。结果（１）脑缺血及缺血再灌注均能诱导双侧海马神经元ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平增高;（２）缺血损伤过重后海马神经元ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平增高的程度反而小;（３）再灌注后ＢＤＮＦｍＲＮ     

人神经生长因子对大鼠中枢胆碱能神经元损伤后作用的实验研究

目的　研究人神经生长因子（ Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 对大鼠中枢胆碱能神经元轴突切断后的保护作用。方法　向双侧海马伞切断所致的痴呆大鼠脑室内注入 Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ， 采用穿梭箱训练， 检测大鼠学习记忆功能恢复状况， 对脑内隔斜带复合体（ Ｓ Ｄ Ｂ） 中隔区（ Ｍ Ｓ） 胆碱能神经元采用胆碱乙酰基转移酶（ Ｃ Ｈ Ａ Ｔ） 免疫组化法观察其存活状态。结果　 Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ 组大鼠术后两周内穿梭箱回避次数高于对照组（ Ｐ＜ ００１） ， 回避潜伏期短于对照组（ Ｐ＜ ００１） 。免疫组化及图像分析显示， 其胆碱能神经元存活状态优于对照组。结论　 Ｈ Ｎ Ｇ Ｆ 对大鼠中枢胆碱能神经元损伤具有短期保护作用； 减缓轴突切断引起的退行性变， 对痴呆大鼠学习记忆功能恢复有促进作用。     

脑源性神经营养因子及其TrkB受体在大鼠脊髓组织中的表达

目的和方法利用ＢＤＮＦ、ＴｒｋＢ的抗体及地高辛标记的ＢＤＮＦＤＮＡ探针，应用免疫组化及原位杂交方法，对正常成年大鼠腰段脊髓ＢＤＮＦ及其ＴｒｋＢ受体的分布与细胞定位进行了研究，结果ＢＤＮＦ及其ｍＲＮＡ在脊髓各型神经元中都有明显的表达，ＴｒｋＢ受体则主要分布在腹角运动神经元中，中间带及背角部分细胞亦有表达。胶质细胞中同时有ＢＤＮＦ及其ｍＲＮＡ、ＴｒｋＢ受体的表达。结论研究结果提示脊髓各型神经元，不仅是ＢＤＮＦ的效应细胞，其自身亦表达ＢＤＮＦ，靶源性、旁分泌、自分泌方式产生的ＢＤＮＦ共同参与了脊髓神经元的调节。胶质细胞不仅为神经元提供旁分泌因子，其自身亦受ＢＤＮＦ的调节。     

皮质醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马γ-氨基丁酸免疫组化分布的影响

为了解皮质醇对马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫组化分布的影响，应用免疫组化方法研究３组大鼠大脑皮层、海马γ－氨基丁酸免疫反应（ＧＡＢＡ－ＩＲ）阳性细胞的分布，以探讨马桑内酯致痫及人工合成皮质醇－地塞米松（Ｄｅｘ）的抗痫是否与ＧＡＢＡ系统相关。结果显示：马桑内酯致痫后大鼠大脑皮层、海马齿状回ＧＡＢＡ－ＩＲ阳性细胞较正常组明显减少，应用Ｄｅｘ后再致痫，大鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ－ＩＲ细胞数居正常及致痫组之间，３组ＧＡＢＡ－ＩＲ细胞数经Ｆ检验有非常显著性差异（大脑皮层Ｆ值＝２０．９，Ｐ＜０．００１，海马Ｆ值＝４７．７，Ｐ＜０．０１），表明马桑内酯致痫可能有ＧＡＢＡ系统的参与，ＧＡＢＡ－ＩＲ阳性细胞的减少使大脑皮层及海马神经元脱抑制，临床表现抽搐。Ｄｅｘ可能通过抑制ＧＡＢＡ的再摄取、促使ＧＡＢＡ神经元蛋白合成，参与兴奋的抑制。     

脑缺血再灌流大鼠脑胶质源性神经营养因子基因表达的变化

探讨脑缺血再灌流不同时程及不同程度缺血对海马及皮层胶质源性神经营养因子（ｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ, ＧＤＮＦ）基因表达的影响,以及Ｎ甲基Ｄ天冬氨酸（Ｎｍ ｅｔｈｙｌＤｓａｐａｒｔａｔｅ, ＮＭＤＡ）受体拮抗剂,钙离子通道阻断剂是否能调节缺血病态下ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ的表达。参照Ｓｍ ｉｔｈ 等方法建立大鼠前脑缺血再灌流动物模型。用ＤＩＧＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ３′ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ Ｋｉｔ,标记５１ ｍ ｅｒ的ＧＤＮＦ寡核苷酸探针在含有海马结构的冰冻组织切片上进行原位杂交检测ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ的表达。１０ ｍ ｉｎ 缺血再灌流２ ｈ,齿状回ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ表达上调。再灌流６ ｈ,ＣＡ１,ＣＡ３ 和皮层ＰＡＲ区ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ表达亦见增多,２４ ｈ 达高峰。Ｋｅｔａｍ ｉｎｅ 可使ＧＤＮＦ的基因表达在海马结构及皮层ＰＡＲ区明显低于相应的缺血再灌流组,统计学差异显著（Ｐ＜ ００５）。脑缺血再灌流时ＧＤＮＦ基因表达增加,对缺血神经元可能起保护作用。Ｋｅｔａｍ ｉｎｅ可阻断缺血后ＧＤＮＦｍ ＲＮＡ 的表达增加,提示ＮＭＤＡ谷氨酸受体很可能参与介导了缺     

青霉素对体外培养鼠脑γ－氨基丁酸能神经元及胶质细胞的影响

以免疫细胞化学方法观察了分离培养４天、１０天鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ能神经元以及ＧＦＡＰ免疫反应阳性星形胶质细胞对大剂量致痫剂青霉素（Ｐｅｎｉｃｉｌｉｎ，ＰＥＮ）的反应。结果大剂量ＰＥＮ（３００μ／ｍｌ培养液）可引起培养海马及皮层γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）能神经元数目明显减少，星形胶质细胞显著增生，且尤以海马胶质细胞增生明显。提示：（１）脑内尤其海马区星形胶质细胞增生与癫痫发生、发展有一定的关系；（２）传统致痫剂ＰＥＮ可能是通过抑制ＧＡＢＡ能神经元功能、刺激星形胶质细胞增生，从而导致癫痫发作     

神经生长因子对严重烫伤大鼠纹状体及海马NOS阳性神经元的影响

应用ＮＡＤＰＨ－ｄ 酶组织化学方法，观察了大鼠烫伤后脑内ＮＯＳ阳性神经元数目和阳性反应面积的变化及ＮＧＦ对其影响。结果显示：大鼠体表烫伤后３ 天，纹状体ＮＯＳ阳性神经元数目明显增加，染色呈强阳性，阳性反应面积增加。海马的ＮＯＳ阳性神经元数变化不明显，仅见阳性反应面积增加，ＮＧＦ可降低纹状体的ＮＯＳ阳性神经元数目、阳性反应面积，ＮＯＳ阳性神经元着色较淡；海马的ＮＯＳ阳性反应面积减少，ＮＧＦ的作用与Ｌ－ＮＡＭＥ抑制ＮＯＳ的作用相似。这些结果提示，ＮＧＦ可能通过降低ＮＯＳ活性，从而减轻烫伤引起的神经元损伤。     

神经生长因子对严重烫伤大鼠纹状体及海马NOS阳性神经元？…

应用ＮＡＤＰＨ－ｄ酶组织化学方法，观察了大鼠烫伤后脑内ＮＯＳ阳性神经元素数目和阳性反应面积的变化及ＮＧＦ对其影响。结果显示：大鼠体表烫伤后３天，纹状体ＮＯＳ阳性神经元数目明显增加，染色呈强阳性，阳性反应面积增加。海马的ＮＯＳ阳性神经元数变化不明显，仅见阳性反应面积增加，ＮＧＦ可降低纹状体的ＮＯＳ阳性神经元数目、阳性反应面积，ＮＯＳ阳性神经元着色较淡；海马的ＮＯＳ阳性瓜面积减少，ＮＧＦ的作用与－Ｎ     

青霉素对体外培养鼠脑γ—氨基丁酸能神经元及胶质细胞的影响

经免疫细胞化学方法观察了分离培养４天，、１０天鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ能神经元以及ＧＦＡＰ免疫反应阳性星形胶质细胞对大剂量致痫剂青霉素的反应。结果大剂量ＰＥＮ可引起培养海马及皮层γ－氨基丁酸能神经元数目明显减少，星形胶质细胞显著增生，且尤以海马胶质细胞增生明显。提示：（１）脑内尤其海马区星形胶南细胞增生与癫痫发生，发展有一定的关系。（２）传统致痫剂ＰＥＮ可能是通过抑制ＧＡＢＡ能神经元功能、刺激星形     

脑源性神经营养因子抗体对海马一氧化氮合酶阳性神经元的影响

一氧化氮 (ＮＯ)是一种神经递质 ,与学习和记忆有着密切联系。正常浓度的ＮＯ起着生理性的信息传递作用 ,而高浓度的ＮＯ主要表现为细胞毒性作用 ,导致神经细胞坏死。由于ＮＯ在体内存在时间极短 ,因此人们对其合成酶一氧化氮合酶 (ＮＯＳ)进行了更多的研究。本文通过脑室内注射脑源性神经营养因子 (ＢＤＮＦ)抗体阻断内源性ＢＤＮＦ的营养作用 ,探讨ＢＤＮＦ抗体对大鼠海马ＮＯＳ阳性神经元的影响。材料和方法 :健康雄性ＳＤ大鼠正常对照组 6只 ,通过微量注射泵侧脑室注射正常羊血清ＩｇＧ ;实验组 7只 ,侧脑室注射羊抗ＢＤＮＦ抗体。侧脑…     

脑源性神经营养因子与及TrkB受体大鼠脊髓组织中？…

目的和方法 利用ＢＤＮＦ，ＴｒｋＢ的抗体及地高辛标记的ＢＤＮＦＤＮＡ探针，应用免疫组化及原位杂交方法，对正常成年大鼠腰段脊髓ＢＤＮＦ及其ＴｒｋＢ受体的分布与细胞定位进行了研究。结果 ＢＤＮＦ及其ｍＲＮＡ在脊髓各型神经抑中都有明显的表达，ＴｒｋＢ受体则正主要分布在腹角运动神经元中，中间带及背角部分细胞亦有表达。胶质细胞中同时有ＢＤＮＦ及其ｍＲＮＡ，ＴｒｋＢ受体的表达。结论 研究结果提示脊髓各型神经元     

神经生长因子在老年性痴呆发生中的作用机制

老年性痴呆(ＡＤ)是老年人多发的慢性进行性退化性疾病,以进行性记忆和识别功能损伤为主要表现,与中枢胆碱能神经元变性密切相关。而动物实验发现,中枢胆碱能神经元均为神经生长因子(ＮＧＦ)依赖性的,如给予外源性的ＮＧＦ可使已损伤的胆碱能神经功能及动物的学习、记忆力明显提高。这使ＮＧＦ的研究备受关注。     

反复惊厥对P77PMC大鼠脑内BDNF蛋白表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了反复听源性惊厥（ＡＣＳ）对遗传性癫痫易感大鼠Ｐ７７ＰＭＣ脑内脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）蛋白表达的影响。结果发现,在未发生ＡＣＳ的Ｐ７７ＰＭＣ大鼠脑内,ＢＤＮＦ蛋白的基础表达可见于海马齿状回门区神经元、ＣＡ３区锥体细胞及大脑皮质神经元的胞浆内,在经过３０次ＡＣＳ发作后,鼠脑内齿状回门区、ＣＡ１－ＣＡ３区以及皮质区免疫标记阳性的的神经元数目增多,标记强度增强。除了胞体,在神经元突起上也可见明显的免疫标记。这表明在Ｐ７７ＰＭＣ这种遗传性癫痫易感大鼠模型中,非人为伤害因素造成的惊厥反复发作能导致脑内ＢＤＮＦ表达显著增高。     

老龄大鼠全脑缺血再灌注部分脑区NGF、BDNF的表达

目的　探讨老龄大鼠全脑缺血再灌注损伤对颞叶、杏仁核和尾状核 Ｎ Ｇ Ｆ、 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ 的含量影响。方法　采用 Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ Ｂｒｉｅｒｌｅｙ ４ 血管阻塞法制作全脑缺血 １５ｍ ｉｎ、再灌注 １ｈ、６ｈ、２ｄ、４ｄ、９ｄ 模型，检测颞叶、杏仁核和尾状核 Ｎ Ｇ Ｆ、 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ 的表达。结果　全脑缺血再灌注损伤时，颞叶迅速出现中量 Ｎ Ｇ Ｆ 表达；杏仁核仅再灌注早期出现 Ｎ Ｇ Ｆ 表达量增加；尾状核 Ｎ Ｇ Ｆ 的表达很快消失。缺血再灌注损伤没有引起颞叶、杏仁核的 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ表达量改变；但引起尾状核 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ表达量增加。结论　颞叶具有较好的 Ｎ Ｇ Ｆ 保护机制，杏仁核对缺血再灌注损伤具有反应迅速、短期的 Ｎ Ｇ Ｆ 保护机制，而尾状核缺乏良好的 Ｎ Ｇ Ｆ 保护机制。颞叶和杏仁核具有良好的 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ 保护机制，尾状核具有反应迅速、作用持久的 Ｂ Ｄ Ｎ Ｆ保护机制。     

关节炎大鼠疹髓背角内脑源性神经营养因子和促肾上腺皮 …

研究表明，外周感染可导致脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）的过度表达，ＢＤＮＦ可影响其他神经递质的合成。采用免疫组化和原位杂交的方法观察了完全福氏佐剂所致的关节炎大鼠脊髓内ＢＤＮＦ及其功能性受体酷氨酸蛋白激酶Ｂ（ｔｒｋＢ）的表达和促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）ｍＲＮＡ的水平。实验发现，在皮下注射完全福氏佐剂后４ｈ，脊髓腰膨大同侧背角中的ＢＤＮＦ免疫活性神经元和ＣＲＦ ｍＲＮＡ阳性神经元数升高，在２     

P物质对大鼠新鲜分离DRG神经元NMDA及GABA激活电流的调制作用

实验应用全细胞膜片钳技术在大鼠新鲜分离的背根神经节（ＤＲＧ）神经元胞体膜上观察到Ｐ物质（ＳＰ）对ＮＭＤＡ和ＧＡＢＡ激活电流有调制作用。单独给予ＳＰ（１０－８～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）可在ＤＲＧ神经元记录到一幅值较小的，浓度依赖性的无明显去敏感之内向电流。预加ＳＰ３０ｓ后，其对ＮＭＤＡ和ＧＡＢＡ激活电流分别具有明显的增强和抑制作用，而且ＳＰ对ＮＭＤＡ和ＧＡＢＡ激活电流的增强和抑制作用也是剂量依赖性的。如ＳＰ浓度为１０－７ｍｏｌ／Ｌ时，可使ＮＭＤＡ激活电流较之对照增强４６．３±７．２％（ｘ±ｓ，ｎ＝８）；使ＧＡＢＡ激活电流比对照减小３８．９±７．８％（ｘ±ｓ，ｎ＝６）．ＳＰ的此种调制作用可以在同一ＤＲＧ神经元上观察到。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻一氧化氮介导的谷氨酸神经毒作用

研究垂体腺苷酸环化酶激活肽是和用于一氧化氮代谢途径,减轻谷氨酸神经毒作用。取新生ＳＤ大鼠海马,用Ｂ２７无血清培养基培养神经元;重氮,化反应法测定ＮＯ浓度,则定神经元存活率,ＰＡＣＡＰ能减少谷氨酸引起的海马神经元死亡;谷氨于剂量依赖性地增加海马神经元培养液中ＮＯ的含量,ＰＡＣＡＰ能不同程度地减少ＮＯ的含量,分别给予２ｍｍｏｌ／Ｌ Ｌ－Ａｇ,１００μｍｏｌ／Ｌ ＳＮＰ和２００μｍｏｌ／Ｌ ＳＡＮＰ处理     

谷氨酸载体在鼠脑缺血神经元死亡中的作用

目的研究谷氨酸载体在脑缺血神经元死亡中的作用。方法用原位杂交和免疫组织化学方法观察大鼠脑缺血后脑内谷氨酸载体ＧＬＡＳＴｍＲＮＡ和胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）表达的变化，用药理分析手段观察谷氨酸载体摄取抑制剂Ｌ反式吡咯烷２，４二羧酸（ＬｔｒａｎｓＰＤＣ）对脑缺血致神经元损伤的影响。结果脑缺血后２４小时，大脑皮层缺血周边区ＧＬＡＳＴｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ表达无显著变化；而缺血后７２小时，缺血周边区ＧＬＡＳＴｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ表达都显著增加，脑缺血后２４小时和７２小时，缺血侧海马ＣＡ１区ＧＬＡＳＴｍＲＮＡ表达则无显著变化；与侧脑室注射生理盐水组相比，侧脑室注射１μｇ或２μｇＬｔｒａｎｓＰＤＣ有使脑梗塞体积增大的趋势，但差异无显著意义；侧脑室注射５μｇＬｔｒａｎｓＰＤＣ使脑梗塞体积显著增大。结论脑缺血后谷氨酸载体功能可能呈代偿性增强，提示谷氨酸载体在限制脑缺血时谷氨酸神经毒中起重要作用。