光学法检测血小板体外保存期间跨膜电位的变化

目的建立使用流式细胞仪检测血小板跨膜电位的方法,观察血小板在体外保存期间跨膜电位变化。方法使用电压敏感染料Di BAC4(3)对20(人)份血小板(20 m L/份)染色后,用流式细胞仪测定血小板在静息状态下和完全去极化时的荧光强度,根据能斯特方程计算血小板跨膜电位,并利用此方法观察血小板在体外保存期间跨膜电位的变化情况。结果 20人份新鲜血小板跨膜电位平均值为(-56±4)m V,CV=5.5%,与膜电位钳法得到的结果(-50-60)m V相似,保存1、3、5 d的血小板跨膜电位分别为(-56±4)、(-54±8)和(-46±6)m V,其中血小板跨膜电位在血小板保存1 d时明显高于5 d(P0.05)。结论所建立起的方法用于测定血小板跨膜电位准确、可靠。     

4℃冷藏保存血小板对体外大失血模型的纠正效果

目的探讨4℃冷藏保存血小板对体外大失血模型的纠正效果。方法手工汇集(10人份)血小板200mL等分为2×100 mL,分别于4℃冷藏保存和22℃振荡保存,共计制备5×200 mL,等分后放置4℃冷藏冰箱和22℃血小板振荡保存箱。采用血液稀释法(全血∶盐水=1∶9)制备体外大失血模型,应用TEG检测指标及血常规等指标对比、评价悬浮红细胞、新鲜冰冻血浆与4℃冷藏保存血小板(简称4℃血小板)或22℃振荡保存血小板(简称22℃血小板)按1∶1∶1比例对体外大失血模型的纠正效果。结果保存1、3、5 d时,4℃血小板组和22℃血小板组在对相同血样制备的体外失血模型纠正,Plt(×109/L)从20-27分别升至127-161 vs 128-160(P0.05),TEG-MA值(mm)由12.7-14.4分别升至45-51 vs 47-50,TEG-R值(min)由27.7-9.9分别升至4.4-4.3 vs 4.5-4.7(P0.05)。保存7-14 d,4℃血小板组:Plt(×109/L)由18-27纠正到162-161,TEG-MA值(mm)由8.8-14.5纠正为46-43,TEG-R值(min)由24-13纠正为5.5-5.2(P0.05)。结论按悬浮红细胞、新鲜冰冻血浆和4℃冷藏保存血小板作用于体外大失血模型达到了纠正效果,佐证了4℃冷藏保存10-14 d的血小板具有良好的止血效果。     

致耐受树突状细胞治疗免疫性血小板减少症小鼠的研究

目的:探讨地塞米松及1α-25-(OH)2D3诱导的致耐受树突状细胞(TolDC)治疗免疫性血小板减少症小鼠的疗效。方法:用地塞米松及1α-25-(OH)2D3诱导TolDC,光镜观察形态特点,流式检测细胞膜CD80、CD86水平。将TolDC腹腔注射给免疫性血小板减少症小鼠,观察症状并检测小鼠的血小板水平及血小板相关自身抗体。结果:地塞米松及1α-25-(OH)2D3诱导的树突状细胞毛刺少、突起短,CD80、CD86水平低,符合TolDC的特点。TolDC治疗组小鼠血小板水平较模型组高(P<0.05),血小板相关自身抗体水平较模型组低(P<0.05)。结论:地塞米松及1α-25-(OH)2D3诱导的TolDC能避免免疫性血小板减少症小鼠的血小板下降,血小板相关自身抗体减少,为其应用于自身免疫性血小板减少症的治疗提供了理论依据。     

血小板的活化和血小板血栓

血管壁损伤不但激活凝血系统 ,还使血小板粘附于暴露的内皮下组织 (如胶原、ｖＷＦ) ,形成血小板单层 ,激活血小板 ,暴露和激活其表面的糖蛋白ＩＩｂ/ＩＩＩａ受体 ,不同的血小板之间通过纤维蛋白原等配体与糖蛋白ＩＩｂ/ＩＩＩａ受体的结合相互连接起来 ,发生聚集反应 ,形成血小板血栓。血小板内的α颗粒和致密体释放出来 ,血浆血小板第 4因子 (ＰＦ4 )、β血小板球蛋白( β -ＴＧ) 及 5-羟色胺 ( 5-ＨＴ)增加 ,同时血栓素的(ＴＸＡ2 )合成和释放增加。体内常见的血小板聚集剂 (激活并诱发血小板聚集 )包括 :凝血酶、ＡＤＰ(二磷酸腺苷 )、…     

银杏叶提取物和西洛他唑对血小板磷酸二酯酶3活性影响对比研究

目的体外观察银杏叶提取物(EGB)单体成分斛皮素、EGB对血小板磷酸二酯酶(PDE)3活性及血小板聚集率的影响,并与已知的PDE3抑制剂西洛他唑对比,明确EGB抑制血小板PDE3活性强度。方法收集分离2周内未服任何药物的10名健康志愿者的血小板,观察槲皮素、EGB和西洛他唑对血小板聚集抑制率及血小板PDE3活性的影响,设不加药物,加同等体积药物溶剂为空白对照。结果对照组的PDE3活性为(1 835.08±118.61)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1),低浓度组槲皮素、EGB、西洛他唑作用后的PDE3活性分别为(1 303.03±523.52)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1)、(1 283.15±106.87)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1)、(967.34±73.02)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1),中浓度药物组的分别为(1 084.89±120.47)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1)、(1 143.89±98.09)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1)、(766.02±61.31)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1),高浓度药物组的分别为(1 017.06±115.20)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1)、(1 089.21±93.98)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1)、(722.19±58.38)pmol·mg protein~(-1)·min~(-1),统计学分析显示槲皮素、EGB、西洛他唑对血小板PDE3活性均有抑制作用,其中槲皮素、EGB对血小板PDE3的抑制强度相当,弱于西洛他唑。在ADP诱聚剂组,对照组的血小板聚集抑制率为(17.40±3.83)%,低浓度组槲皮素、EGB、西洛他唑作用后的血小板聚集抑制率分别为(45.60±4.06)%、(47.20±3.35)%、(63.10±4.65)%,中浓度药物组的分别为(52.30±2.34)%、(60.00±4.39)%、(65.80±3.34)%,高浓度药物组的分别为(61.90±4.96)%、(56.80±3.70)%、(79.00±2.81)%;在PAF诱聚剂组,溶剂对照组的血小板聚集抑制率为(16.80±7.06)%,低浓度组槲皮素、EGB、西洛他唑作用后的血小板聚集抑制率分别为(43.80±5.26)%、(52.10±3.69)%、(63.90±3.26)%,中浓度药物组的分别为(50.20±4.22)%、(59.10±3.21)%、(71.00±4.57)%,高浓度药物组的分别为(54.10±4.03)%、(67.20±2.85)%、(74.20±3.89)%;结果显示各种浓度的三种药物对血小板聚集均有抑制作用,斛皮素和EGB对血小板聚集抑制的强度弱于西洛他唑;相关性分析显示,血小板PDE3活性与ADP、PAF诱导的血小板聚集抑制率均呈线性负相关(r=-0.58,r=-0.59)。结论斛皮素、EGB对血小板PDE3活性和血小板聚集均有抑制作用,强度弱于西洛他唑。     

血小板CD62p表达率与血小板输注效果的关联分析

目的探讨血小板CD62p表达率与血小板输注效果的关联性。方法根据血小板输注后1及24 h血小板计数增加值(CCI),将黄石市中心医院115名患者分为输注有效组(n=94)和无效组(n=21)。选择2013年6月-2014年12月符合无偿捐献血小板标准的献血者血小板115份,采用SEPSA排除血小板相关抗体引起的血小板输注无效,使用流式细胞术检测输注前CD62p表达水平。结果血小板输注有效组血小板CD62p表达率(10.3±3.2)%高于无效组(21.8±5.2)%(P0.05),血小板CD62p表达率与1h CCI(r=-0.423,P0.001)和24 h CCI(r=-0.541,P0.001)有相关性。结论血小板CD62p表达率对血小板输注效果有影响,血小板CD62p表达率越高,CCI越低,血小板输注效果越差。     

慢性自发性荨麻疹患者维生素D和血小板指标的相关性研究

目的 探讨慢性自发性荨麻疹(CSU)患者维生素D[25-(OH)D]与血小板指标的相关性.方法 选择2019年5-12月在广州医科大学附属顺德医院皮肤科就诊的CSU患者46例为CSU组,选择同期体检健康者50例作为对照组.收集研究对象的基本临床资料,应用7日荨麻疹活动度评分(UAS7)对疾病进行严重程度评分,检测并比较2组人群的外周血血清25-(OH)D及血小板指标[血小板计数(PLT)、血小板容积比(PCT)、血小板平均体积(MPV)和血小板体积分布宽度(PDW)]的差异,分析25-(OH)D与血小板指标的相关性.结果 CSU组和对照组25-(OH)D水平分别为(21.07±3.10)、(28.31±2.98)ng/mL,2组间比较差异有统计学意义(P<0.01);CSU组MPV和PDW高于对照组(P<0.01),PLT和PCT 2组间差异无统计学意义(P>0.05).相关性分析显示,25-(OH)D与MPV、PDW呈显著负相关(r=-0.773、-0.681,均P<0.01),与PLT、PCT无相关性(均P>0.05).UAS7评分显示,中重度组和轻度组25-(OH)D、MPV和PDW差异均有统计学意义(P<0.01).结论 CSU患者有明显血小板激活现象,MPV、PDW与维生素D呈显著负相关,维生素D可能具有抑制血小板活化的治疗潜力.     

浓缩血小板制备血小板裂解液及其质量特性的初步研究

目的探索浓缩血小板制备血小板裂解液的方法并初步确定所制备血小板裂解液的质量特性。方法富血小板血浆法制备浓缩血小板,以-80℃冰冻8 h/12 h/24 h,37℃空气浴融化反复冻融制备血小板裂解液,检测裂解效率。p H计检测p H值,生化分析仪检测TP、ALB浓度,ELISA方法检测PDGF、VEGF、EGF、TGF-β、IGF-1等细胞因子浓度,并以95%参考区间确定其质量特性。结果 -80℃12 h,37℃反复冻融6次血小板裂解达到95%,p H、TP、ALB、PDGF-AA/AB/BB、VEGF、EGF、TGF-β、IGF-1 95%参考区间分别为6.72-7.38、(45-57)g/L、(22-38)g/L、(0.98-2.01)ng/m L、(122-293)ng/m L、(5.35-15.6)ng/m L、(0.49-1.82)ng/m L、(2.97-8.03)ng/m L、(177-290)ng/m L、(95-154)ng/m L。结论建立了以浓缩血小板反复冻融制备血小板裂解液的有效方法并初步确立了其质量标准。     

自动化血小板单采对全身造血生长因子水平的影响

背景 多种造血生长因子调节巨核细胞生成和血小板的产生。这个研究着重于自动化血小板单采术对不同造血生长因子在系统水平的影响。研究设计和方法 在采集血小板前,血浆分离置换进程过半、结束时及之后1、2、7天分别检测21例健康献血者血中的血小板计数、平均血小板容量,及血清中血小板生成素、促红细胞生成素、白细胞介素-1β、白细胞介素-6、干细胞因子的浓度。结果 血小板生成素水平(初始水平为49.5+/-25.3pg/ml)从采集血小板结束时到采集后1天(56.9+/-26.7pg/ml;P=0.01)明显增高。血小板采集期间干细胞因子水平明显下降(P<0.005),在采集后1天达到血小板采集前水平(1679+/-210pg/ml)。促红细胞生成素水平(初始水平为7.5+/-     

自身免疫性血小板减少性紫癜患者在血小板数正常时的出血现象

80%慢性自身免疫性血小板减少性紫癜(ATP) 患者,在类固醇治疗或脾摘除术后,血小板数可达正常,但某些病例仍有持续出血。为此,作者研究了49例ATP患者(男性18人,女性31人,年龄5-63岁),并以49名正常人为对照。病人均无脾肿大,骨髓中巨核细胞数正常或增加,排除了其他原因所致的血小板减少。作者测定病人的血小板数、巨血小板(直径大于3μm)百分数,血小板相关IgG值(PAIgG)及血小板功能试验,包括:出血时间、血小板聚集试验、内源性血清素量、血小板和血浆β-血小板球蛋白(β-     

高量减除血小板治疗对血小板增多症患者白细胞数及血红蛋白水平的影响

目的:探讨高量减除血小板治疗对血小板增多症患者外周血白细胞数(WBC)及血红蛋白(Hb)水平的影响。方法:采用COBE Spectra连续流动离心式血液成分分离机ELP或MNC程序,以ACD-A配方血液保存液作为抗凝剂,对21例血小板增多症患者共实施32次高量减除血小板治疗,每次治疗处理2.5-3.0倍总血容量(TBV),采集1/5-1/4倍TBV的血小板悬液。结果:单次治疗运行时间(212.53±41.54)min;处理血量(8812.63±2087.15)ml;采集血小板悬液容量(798.84±190.77)ml;悬液血小板数(Plt)4486.50(3058.50-5279.50)×10~9/L、血小板总数3455.50(2288.68-4226.71)×10~9;WBC 13.79(10.21-20.72)×10~9/L、白细胞总数11.90(7.81-14.40)×10~9;Hb水平(3.28±1.25)g/L,Hb总量(2.62±1.17)g。治疗前、后患者循环血液Plt分别为1263.00(1052.50-1807.50)×10~9/L、(778.83±247.25)×10~9/L(Z=4.94,P 0.01),WBC分别为9.96(6.44-14.01)×10~9/L、8.59(5.37-13.12)×10~9/L(Z=13.31,P 0.05),Hb水平分别为(112.63±24.56)g/L、(10~9.55±24.46)g/L(t=1.68,P 0.05)。结论:采用连续流动离心式血液成分分离术,对血小板增多症患者实施高量减除血小板治疗,可显著降低患者体内血小板负荷,提高减除血小板治疗的采集效率;虽可导致患者WBC有所下降,但WBC仍可维持在正常范围内;对患者Hb水平没有显著性影响。     

161例心脑血管疾病患者血小板及其参数的测定

凝血和纤溶系统的异常改变是导致心脑血管疾病患者血栓形成的重要原因之一。由于血小板的活性与血小板的大小、数量等密切相关,体积较大的血小板通常更具活性且能释放更多的5-羟色胺和β-血栓性球蛋白。为此,我们研究了年龄、性别相匹配的各类冠心病(CHD)、高血压和脑梗塞患者的血小板(PLT)及其参数——平均血小板体积(MPV)、平均血小板分布宽度(PDW)和大血小板比率(P-LCR),旨在探讨这些变化与心脑血管疾病严重程度的相关性,为预防和治疗心脑血管疾病提供有益的资料。     

富血小板血浆血小板浓度与全血血小板浓度和红细胞比容相关性探讨

目的 探讨富血小板血浆(PRP)血小板浓度与全血血小板浓度、红细胞比容(HCT)相关性.方法 随机收集162例门诊体检志愿者静脉血标本,以EDTA-K2,枸橼酸钠抗凝.枸橼酸钠抗凝血800 r/min(离心半径19 cm)离心5 min,分离富含血小板血浆(PRP),应用Sysmex XE-2100血液分析仪测定全血血小板浓度(X1)和HCT(X2),PRP血小板浓度(Y).以HCT 0.35为界,将数据分为正常组和低值组.结果 所得数据采用多元相关性统计分析得到回归方程Y总=1.309 51X1 +744.294 5X2-262.068(R2 =0.897 8);Y正常组=1.380 208X1 +855.884 8X2-323.374(R2=0.892 9);Y低值组=1.088 972X1 +465.228 8X2-123.101(R2=0.961 1).结论 全血血小板浓度、红细胞比容与富血小板血浆血小板浓度相关显著,由全血血小板浓度和红细胞比容可初步推算富血小板血浆血小板浓度.     

三七皂甙单体2A-1-1对人血小板聚集和钙内流的作用

目的观察三七皂甙单体2A-1-1对人血小板聚集和钙内流的影响,并探讨其对受体操纵性钙通道的作用.方法比浊法测定血小板聚集;Fura-2/Am荧光探针双波长测定细胞胞浆游离钙浓度,观察2A-1-1、硝苯地平、SK＆F96365对二磷酸腺苷(ADP)、环匹阿尼酸(CPA)介导的人血小板钙内流的变化.结果硝苯地平(20μmol/L)不能抑制ADP诱导的血小板聚集,不能抑制ADP或CPA介导的血小板钙内流;SK＆F96365(20μmol/L)可以抑制ADP诱导的血小板聚集,抑制率为59.83%;SK＆F96365(15μmol/L)可以抑制CPA和ADP介导的钙内流;2A-1-1(5,10,20,μmol/L)可抑制ADP诱导的血小板聚集,抑制率分别为47.06%,53.47%,71.52%;2A-1-1(10,20 μmol/L)可抑制CPA和ADP介导的钙内流.结论三七皂甙单体2A-1-1能抑制人血小板聚集,抑制血小板受体操纵性钙通道,从而抑制钙内流,有抗血小板作用.     

白细胞介素-6在肺结核病人反应性血小板增多和急性时相反应的作用

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)在肺结核病人引起反应性血小板增多和急性时相反应的作用。方法根据血小板计数,将72例肺结核病人分为两组,血小板计数正常组37例,血小板计数增多组35例,同时设正常对照组31例。分别测定血清IL-6、C反应蛋白(CRP)、白蛋白(ALB)。结果血小板正常组IL-6浓度为(38±54)pg/ml,血小板增多组IL-6浓度为(99±124)pg/ml,差异有统计学意义。血小板正常组肺结核病人较正常对照组CRP浓度偏高,ALB浓度偏低。而血小板增多组肺结核病人较血小板正常组肺结核病人CRP浓度偏高,而ALB浓度偏低。血清IL-6浓度与血小板计数和C-反应蛋白浓度都呈正相关(r1=0.56、r2=0.54),和白蛋白浓度有负相关性(r3=-0.34)。血小板增多组病人临床表现为体重减轻,发热和盗汗的概率较血小板正常组高。结论白细胞介素-6可能会引起肺结核病人血小板增多和促进急性时相反应。     

急性巨核细胞白血病的血小板功能障碍

作者对3例急性巨核细胞白血病(M7)的血小板功能进行了研究。结果:急性期所有患者血小板计数范围在110-140×10~9/L;血小板容积正常,平均为9.2μm~3;血小板粘附率均降低;出血时间正常2例,显著延长1例,后者伴有严重的出血性素质;在加入各种诱导剂如ADP、胶原、肾上腺素、花生四烯酸、U46619(1种血栓素A_2激动剂)后血小板聚集均有缺陷,血浆β-血栓球蛋白(β-TG)均正常,血小板第4因子(PF4)除1例显著升高外,其余2例也都正常;血小板β-TG水平在正常值上限,丙二醛(MDA)产生减少和血小板5-羟色胺含量低,血小板膜糖蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳正常。对1例急性期与临床缓解期     

小儿急性阑尾炎血小板参数变化的观察

目的探讨血小板参数的变化在小儿急性阑尾炎诊断中的临床价值。方法急性阑尾炎患儿63例纳入观察组,同期健康体检小儿46例纳入对照组,比较两组被试包括血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板宽度(PDW)及血小板压积(PCT)等血小板参数及白细胞计数(WBC)水平,分析各血小板参数及WBC间的关系。结果观察组血清WBC及PLT明显高于对照组,而MPV和PDW明显低于对照组(P<0.05)。PLT与MPV、PDW呈显著负相关性(r=-0.467,P=0.03;r=-0.342,P=0.02)。MPV与PDW呈显著正相关(r=0.725,P=0.00)。PLT与WBC呈显著正相关(r=0.628,P=0.00)。MPV、PDW与WBC呈显著负相关(r=-0.513,P=0.01;r=-0.490,P=0.01)。结论急性阑尾炎患儿的血小板参数以PLT显著升高、MPV和PDW降低为特征,血小板参数结合WBC等炎性反应指标可提高小儿急性阑尾炎的诊断准确度,有利于指导临床治疗,改善患儿的预后。     

单采血小板保存7天:体外研究报道

背景 这项研究的目的是确定单采血小板在血小板保存袋(COBE ELP,Gambro BCT)中保存7天的变化。方法 每袋可控制浓度和容量的单采血小板在血浆中22℃水平摇动保存到8天。体外常规检测血小板参数。耗氧量采用克拉克电极直接检测。所有血小板在第7天作有氧培养。结果 检测了24单位保存状态下的血小板(中位数(范围):340[110-420]ml,1.32[0.99-2.45]×10~6血小板/μl,和每袋有4.8[1.4-5.9]×10~(11)血小     

杀菌通透性增加蛋白体外抑制革兰阴性细菌脂多糖激活血小板的作用

本研究旨在探索杀菌通透性增加蛋白(bactericidal permeability-increasing protein,BPI)能否抑制G-细菌脂多糖(LPS)激活血小板的作用。取10例健康体检者全血制备富含血小板血浆(PRP,1×108/ml)。实验分为4组:正常血小板组:不作任何处理;LPS组:LPS(10μg/ml)刺激6 h;BPI组:BPI(100μg/ml)处理1 h;BPI+LPS组:BPI(100μg/ml)预孵育1 h后,再接受LPS(10μg/ml)刺激6 h。应用流式细胞术(FCM)检测各组血小板膜Toll样受体-4(TLR-4)的表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定PRP上清中细胞因子释放水平,包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)。结果表明,与正常血小板组相比,LPS刺激血小板后血小板膜TLR-4表达及上清中TNF-α和IL-6浓度均明显增高(P<0.001)。在接受BPI预处理后,LPS刺激血小板表达TLR-4及TNF-α和IL-6的作用明显下降,但仍高于正常血小板组。BPI单独刺激血小板不引起血小板TLR-4表达增高及细胞因子水平改变。结论:BPI能够抑制LPS诱导的血小板活化。     

急性脑梗死血小板活性及蛋白激酶C研究

】　目的　研究急性脑梗死血小板蛋白激酶C(PKC)对血小板活性的影响及其致病作用。方法　利用单克隆抗体放射免疫法检测20例急性脑梗死患者血小板膜及血浆内α-颗粒膜蛋白(GMP-140)的量;以血小板膜蛋白的磷酸化程度表达血小板PKC的活性。结果　患者组血小板膜及血浆内GMP-140量［分别为(1 075±234)分子数/血小板、(5.3±1.31)分子数×10