Dact1基因在结直肠癌组织中的表达及其相关性研究

目的：观测Dact1基因在结直肠癌组织的表达及其启动子甲基化状态,并探讨它们之间的关系及在结直肠癌发生中的作用.方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测结直肠癌组织、癌旁组织各50例及正常对照组织20例Dact1基因mRNA的表达情况,甲基化特异性PCR（MSP）检测Dact1基因启动子甲基化状态.结果：结直肠癌组中,9例Dact1基因mRNA失表达（18%）,20例表达低于正常对照组（40%）;癌旁组织组中,1例Dact1基因mRNA失表达（2%）,3例表达低于正常对照组（6%）;正常对照组中,1例Dact1基因mRNA低表达（5%）.Dact1基因在癌组织、癌旁组织、正常对照组织中的甲基化阳性率分别为46%、12%、5%,癌组织组与癌旁组织组及正常对照组阳性率比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,而癌旁组织组和正常对照组阳性率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.Dact1基因mRNA的失表达（低表达）与其启动子甲基化状态的相关性分析有统计学意义（P＜0.05）.结论：Dact1基因mRNA的失表达（低表达）可能参与了结直肠癌的发生发展,其失表达可能与Dact1启动子区甲基化相关.     

结直肠癌组织多基因甲基化的检测及其临床意义

目的： 检测结直肠癌组织中脾酪氨酸激酶（Syk）、E-钙黏附素（E-cadherin,CDH1）和组织金属蛋白酶抑制因子-3(TIMP-3)多基因甲基化水平,并探讨多基因甲基化在结直肠癌发病机制中的作用与复发转移和术后预后的关系。方法: 采用巢式甲基化特异性PCR(n-MSP)方法检测120例结直肠癌肿瘤组织Syk的甲基化水平, 及其中100例结直肠癌肿瘤组织CDH1和TIMP-3的甲基化水平。结果: 1个及以上基因共甲基化率为74%,2个基因同时甲基化率为21%, 3个基因共同甲基化为8%。3个基因同时甲基化阳性与淋巴结转移无关（2=0.725,P>0.05）;CDH1基因甲基化与肝肺转移显著相关（2=6.938,P<0.01）,Syk和TIMP-3基因甲基化与肝肺转移无关;Syk甲基化、TIMP-3甲基化、CDH1及TIMP-3同时甲基化是结直肠癌术后生存的相对危险因素,而3个基因同时甲基化则是非相对危险因素。结论: 结直肠癌组织中存在多基因共同甲基化率,多基因共同甲基化在结直肠癌发病机制、侵袭复发机制及影响预后生存中并非必需条件。     

结肠镜取组织中PRL-3、XRCC2检测在结直肠癌中的临床意义

目的:分析结肠镜取组织X射线交叉互补修复基因2(X-ray repair cross-complementing gene,XRCC2)和促肝细胞再生磷酸酶-3(Phosphatase of Regenerating Liver-3,PRL-3)对结直肠癌患者的意义.方法:选择本院自2019年3月-2022年3月期间接收的78例结直肠癌患者作为研究对象,采用免疫组织化学法对其结直肠癌组织和癌旁组织进行检测分析,对比在不同组织中PRL-3、XRCC2表达水平;比较结直肠癌患者不同分期的结直肠癌组织PRL-3、XRCC2表达水平;对比PRL-3、XRCC2表达与结直肠癌病理特征的关系:包括年龄、肿瘤大小、肝脏转移及淋巴结转移.结果:结直肠癌组织PRL-3阳性率(69.23％)高于癌旁组织阳性率、XRCC2阳性率(61.54％)也高于癌旁组织阳性率(P＜0.05);结直肠癌组织Ⅲ-Ⅳ期PRL-3、XRCC2阳性率均高于0-Ⅱ期(P＜0.05);PRL-3、XRCC2表达与年龄无显著关系(P＞0.05);PRL-3、XRCC2表达与肿瘤大小、淋巴结转移及肝脏转移有关(P＜0.05).结论:PRL-3的表达与结直肠癌细胞迁移及增殖有密切关联,而XRCC2的异常表达影响了癌细胞病灶的形成,两者均可作为结直肠癌诊断、治疗及预后的观察指标.     

RhoGDI2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的：探讨RhoGDI2在结直肠癌中表达及临床意义。方法：通过免疫组化检测 RhoGDI2 在结直肠癌组织、癌旁组织及转移淋巴结中表达,分析其与CRC患者临床因素及生存期之间的关系。结果：RhoGDI2在癌旁组织、肿瘤原发灶及转移淋巴结中表达逐渐升高,差异有统计学意义（P＜0.001）; RhoGDI2表达与淋巴结转移、远处转移关系密切（P＜0.05）;高表达RhoGDI2者总生存期及无病生存期短。结论：RhoGDI2在结直肠癌组织中高表达,且与结直肠癌淋巴结转移、远处转移明显相关,高表达RhoGDI2者总生存期及无病生存期短。     

高尔基体磷蛋白3在结直肠癌组织中表达及其对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 分析高尔基体磷蛋白3（GOLPH3）在结直肠癌组织中的表达情况,及其对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 收集术前未经放、化疗治疗,经手术切除患者的结直肠癌组织及其相应的癌旁组织（40例）;采用免疫组织化学法检测组织中GOLPH3的表达,分析GOLPH3与结直肠癌临床病理特征的关系;构建稳定沉默GOLPH3的结直肠癌细胞株,并设立阴性对照组和空白对照组,Western blotting法检测3组细胞中GOLPH3蛋白的表达,MTT法检测3组细胞的增殖活性,Transwell实验分别检测3组细胞的侵袭和迁移能力。结果 GOLPH3在癌组织中主要为阳性表达,且阳性表达率（65.0%）显著高于癌旁组织（35.0%）（P＜0.05）;GOLPH3在TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、浸润深度≥2 cm、中低分化及有淋巴结转移的癌组织中的阳性表达率明显高于TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、浸润深度＜2 cm、高分化及无淋巴结转移的癌组织（P＜0.05）。与阴性对照组和空白对照组比,基因沉默组GOLPH3蛋白表达量、细胞增殖活性、侵袭能力及迁移能力均明显降低（P＜0.05）。结论 GOLPH3在结直肠癌组织中高表达,其表达与肿瘤分期、侵袭深度、分化程度及淋巴结转移有关,抑制GOLPH3基因表达可下调GOLPH3蛋白表达,抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移。     

NPM1在结直肠癌的表达及临床价值

目的 观察核仁磷酸蛋白（NPM1）在结直肠中的表达及其意义.方法 用免疫组化法对50例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中的NPM1表达进行分析.结果 NPM1在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P ＜0.001）;NPM1表达上调与肿瘤直径、TNM分期、Dukes分期、淋巴结转移及远处转移显著相关,而与患者性别、年龄及结直肠癌分化水平无关（P＞0.05）.结论 NPM1的表达与结直肠癌的发生发展有关.     

结直肠癌中S100A4的表达及意义

目的探讨S100A4在结直肠癌组织及细胞系中的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的相关性。方法采用免疫组化法检测65例结直肠癌及对应癌旁正常结直肠组织中S100A4蛋白的表达;分别采用RT-PCR法和Western blot法检测S100A4 mRNA和蛋白在7个人类结直肠癌细胞系中的表达。结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示S100A4在多数结直肠癌细胞中均有表达。免疫组化检测结果显示S100A4阳性表达主要定位于结直肠癌细胞质内,结直肠癌组织中S100A4蛋白阳性率高于癌旁正常结直肠组织(P0.000 1)。S100A4蛋白表达与结直肠癌患者年龄、性别有关,高龄组阳性率高于低龄组(P=0.026),男性组S100A4蛋白阳性率高于女性组(P=0.038),其表达与肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移均无相关性(P0.05)。结论 S100A4在多数结直肠癌细胞中均有表达,在癌组织中的表达高于癌旁组织,S100A4蛋白表达与结直肠癌患者年龄、性别有关,可能为结直肠癌患者的个性化诊断及治疗提供指导。     

XKRX在结直肠癌的表达和临床意义

目的　探讨XKRX（XK related, X-linked）在结直肠癌组织中的表达和临床意义。 方法　收集TCGA公共数据库中结直肠癌芯片数据,对结直肠癌组织样本中XKRX基因表达数据以及对应的临床资料进行回顾性分析和生存分析。在临床上收取结直肠癌样本,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹（western blot）实验验证XKRX表达水平是否与芯片结果一致,为研究XKRX基因提供新的实验数据。 结果　芯片结果显示XKRX在结直肠癌组织的表达水平明显高于癌旁正常组织（P＜0.0001）。利用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测21例结直肠癌临床样本中XKRX表达水平,结果显示结直肠癌组织中XKRX的信使RNA（mRNA）和蛋白质表达水平明显高于癌旁正常组织。XKRX表达与性别（P=0.9034）、年龄(P=0.886)、TMN分期(P=0.3979)、淋巴结转移(P=0.7995)和远处转移(P=0.6032)无明显统计学差异。但XKRX高表达组的生存时间明显低于低表达组（P=0.0075）。 结论　XKRX在结直肠癌组织中表达上调,可能发挥原癌基因的作用,影响结直肠癌的恶性进展,进而降低患者的生存时间,提示患者不良预后。     

MTA1基因过表达与直肠癌浸润和转移的关系

目的：研究MTA1基因mRNA在直肠癌中的表达,阐明该基因可能是直肠癌浸润和转移的分子机制之一。方法：建立测定MTA1基因mRNA表达的逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）最适条件,在半定量水平测定42 例直肠癌标本癌组织和癌旁正常粘膜组织MTA1基因mRNA表达的相对水平,探讨与临床和病理组织学特征的关系。结果：42例直肠癌中有17例MTA1基因mRNA过度表达（癌组织与癌旁正常粘膜组织MTA1基因mRNA表达半定量之比≥2）,过度表达MTA1基因mRNA的直肠癌浸润层次深,淋巴结转移率高,与剩余病例组比较有显著差异（P<0.05）。结论：MTA1基因过度表达与直肠癌浸润和转移相关。     

Lumican基因在结直肠癌中表达的相关研究

目的探讨Lumican基因的表达与结直肠癌发生、发展之间的关系。方法应用RT- PCR方法检测49例结直肠癌组织及其癌旁正常黏膜上皮组织内Lumican mRNA的表达水平,并进行统计学分析。结果RT-PCR结果表明结直肠癌组织中Lumican mRNA均呈阳性表达,癌旁正常黏膜上皮组织内Lumican mRNA的表达显著低于癌组织(P<0.01)。Lumican mRNA的表达水平与患者的性别、年龄、组织病理分型、淋巴结转移及Dukes分期无关。结论结直肠癌组织中Lumican mRNA的表达增强提示Lumican mRNA在结直肠癌组织中的高表达对结直肠癌的发生发展可能起重要作用。     

VEGFR3与结肠癌淋巴结转移的临床研究

探讨血管内皮生长因子受体(VEGFR3)在结肠癌淋巴结转移中的意义.对99例术后结肠癌及其癌旁组织石蜡包埋标本构建组织芯片并进行免疫组织化学染色,探测其表达强度并结合临床资料进行分析.结果表明结肠癌细胞表达VEGFR3与Duke's分期有关,Duke's C,D期结肠癌细胞表达VEGFR3较Duke's A,B期显著升高(P＜0.01),与局部淋巴结转移相关(P＜0.05).癌与癌旁组织表达差异显著(P＜0.01).分化良好者与分化不良者表达差异显著(P＜0.01).结论:结肠癌随病情加重,肿瘤细胞表达VEGFR3与诱发局部淋巴结转移相关.     

食管鳞癌组织中TIG1基因甲基化及其mRNA表达的研究

 目的：探讨他扎罗汀诱导基因1（tazarotene-induced gene-1, TIG1）基因甲基化及表达与食管鳞癌发生、发展的关系。方法：采用甲基化特异性PCR检测43例食管鳞癌组织、20例癌旁组织和15例正常组织中TIG1基因甲基化状态;实时荧光定量PCR法法检测TIG1 mRNA的表达。结果：食管鳞癌组织TIG1基因启动子甲基化率为25.6%（11/43）,癌旁组织5.0%（1/20）,正常组织中未检测到其甲基化,差异有统计学意义（P<0.05）;其甲基化水平与患者性别、年龄、肿瘤生长部位和分化程度无关（P>0.05）,但与患者TNM分期（P<0.01）及淋巴结转移（P<0.05）有关。鳞癌组织TIG1 mRNA显著低于癌旁组织（P<0.05）及正常组织（P<0.01）,甲基化组织TIGI mRNA表达显著低于非甲基化组织（P<0.01）。结论：甲基化可能是食管鳞癌中TIG1基因失活的重要机制,与患者病理分期及淋巴结转移有关。     

CDH1基因启动子甲基化在上皮性卵巢癌转移方面的研究

目的探讨CDH1基因启动子甲基化对上皮性卵巢癌转移的影响。方法采用免疫组织化学方法检测38例正常卵巢上皮和80例上皮性卵巢癌组织中E-钙黏附素（E-cadherin）表达;应用甲基化特异的PCR（MSP）检测上述组织中CDH1基因启动子区甲基化;应用5-氮-2＇-脱氧胞苷（5-aza-CdR）使SKOV3细胞去甲基化,观察SKOV3细胞体外侵袭性的改变,并通过RT-PCR检测CDH1基因的改变。结果E-cadherin在正常卵巢组织中表达明显高于上皮性卵巢癌（P〈0．05）。34例CDH1基因启动子区甲基化全部出现在卵巢癌组织中,有淋巴结转移组织中甲基化明显高于无淋巴结转移者（P〈0．05）,而CDH1基因启动子区有甲基化的卵巢癌组织中E-cadherin表达明显降低（P〈0．05）。经5-Aza-CdR处理后的SKOV3细胞体外侵袭性降低（P〈0．01）,CDH1基因的表达明显上调（P〈0．01）。结论E-cadherin表达降低与上皮性卵巢癌转移关系密切,CDH1基因启动子区甲基化可能是导致E-cadherin蛋白表达减低的重要原因之一,因此启动子区甲基化与上皮性卵巢癌转移有关。     

结直肠癌患者BRAF,KRAS,NRAS和PIK3CA基因突变与其病理正的关系

目的:探讨265例结直肠癌患者BRAF,KRAS,NRAS和PIK3 CA基因突变及其病理特征关系.方法:选取2014年12月至2016年12月的265例结直肠癌患者肿瘤组织标本进行回顾性分析,采用PCR扩增-直接测序法检测BRAF基因(1 5外显子600密码子),KRAS基因(12,13,61密码子突变),NRAS(2号与3号外显子的12密码子、13密码子与61密码子常见的12个突变位点)及PIK3 CA(第9,20外显子)基因的突变状态,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系.结果:265例患者中存在BRAF基因突变率为6.8％(18/265),KRAS基因突变率为32.1％(85/265),NRAS基因突变率为5.7％(15/265),PIK3 CA基因突变率为11.3％(30/265).NRAS基因和KRAS基因突变与年龄有关(P＜0.05),与性别、原发部位、组织学类型、分化程度、TNM分期、区域淋巴结转移、远处转移、术后复发转移均无关(P＞0.05);BRAF,PIK3 CA基因在原发部位为右半结肠患者中的突变率明显升高(P＜0.05),但与年龄、性别、组织学类型、分化程度、TNM分期、区域淋巴结转移、远处转移、术后复发转移均无关(P＞0.05).结论:NRAS,PIK3 CA基因在中国结直肠癌患者中的突变率较低.KRAS,NRAS基因突变与年龄相关,BRAF,PIK3 CA基因与肿瘤原发部位相关,联合检测这些基因的突变情况可以判断疾病的发生发展.     

血管内皮生长因子D和血管内皮生长因子受体3在人结肠癌中的表达及淋巴道转移中的作用

目的 观察血管内皮生长因子D(VEGF-D)和血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)在人结肠癌组织中的表达,检测结肠癌组织中的微淋巴管密度(LMVD),探讨VEGF-D和VEGFR-3在淋巴管生成以及结肠癌淋巴道转移中的作用.方法 选择55例不同时期,不同分化程度的人结肠癌组织样本,应用免疫组织化学染色的方法,观察VEGF-D和VEGFR-3在人结肠癌组织中的表达,应用Podoplanin标记淋巴管,检测结肠癌组织中的淋巴管密度.结果 在55例结肠癌组织中,VEGF-D的阳性表达率为54.5%,明显高于在癌周正常组织内的表达(P＜0.05);结肠癌组织中VEGFR-3表达的阳性率为69.1%,明显高于在癌周正常组织内的表达(P＜0.01);并且VEGFR-3的表达与VEGF-D的表达具有显著相关性(P＜0.01).在结肠癌组织中,淋巴结转移阳性组,浸润深度超过肌层组,DukeC、D期的VEGF-D的表达水平和LMVD明显高于淋巴结转移阴性组,浸润深度未超过肌层组,Duke A、B期(P＜0.01),经计数淋巴管数量,癌组织中的LMVD明显高于癌周正常组织(P＜0.01),并且LMVD与VEGF-D的表达显著相关(P＜0.01).结论 结肠癌组织中VEGF-D的表达水平随着癌的浸润和转移程度的增强而增高,并且通过上调其受体VEGFR-3的表达而促进癌组织中淋巴管的生成,从而促进癌的浸润和转移.     

甲状腺乳头状癌CD151和CK19mRNA表达及意义

目的探讨甲状腺乳头状癌中CD151和CK19 mRNA表达及其意义。方法采用RT—PCR方法检测54例甲状腺的良恶性病变组织中CD151和CK19 mRNA的表达,并与临床及病理资料进行分析比较。结果CD151和CK19 mRNA在甲状腺乳头状癌组中的表达与滤泡性腺瘤组、结节性甲状腺肿组以及正常甲状腺组比较均差异具有显著性（P〈0．01）;CK19 mRNA表达与甲状腺癌淋巴结转移有关（P〈0．05）;在甲状腺乳头状癌中,CD151和CK19基因mRNA的表达呈正相关（P〈0．01）。结论CD151和CK19基因共同参与甲状腺癌的发生、发展,并对淋巴结转移的判断有意义。     

FAT10基因表达与结直肠癌患者临床病理因素及预后的关系

目的:探讨结直肠癌(CCT)组织中FAT10(Diubiquitin,双泛素)的基因表达与其病理因素及预后的关系。方法:收集我院2000～2003年73例有5年以上完整随访资料的结直肠癌术后患者,采用RT-PCR方法检测FAT10 mRNA在CCT、癌旁组织(TCT)和正常结直肠组织(NCT)中的表达情况,并分析临床病理因素对FAT10阳性表达率和相对表达量的影响,以及FAT10表达与预后的关系。结果:FAT10 mRNA在CCT阳性表达率为52.24%(35/67),且在CCT的相对表达量(0.735±0.034)明显高于TCT(0.561±0.044)和NCT(0.397±0.028)(P<0.05);FAT10 mRNA的阳性表达率及相对表达量受临床进展、淋巴结转移和TNM分级的影响较明显(P<0.05),而患者年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度等对其无明显影响(P>0.05);Log-Rank检验显示CCT患者中,FAT10表达阳性者生存率明显低于FAT10表达阴性者(P<0.01)。结论:FAT10在CCT的表达状况与CCT转移及预后关系密切,可以作为反映生物学行为和判断预后的有效指标。     

环氧化酶2在反流性食管炎和食管癌中的表达

目的 检测环氧化酶2(COX-2)在反流性食管炎和食管癌中的表达,探讨其与临床病理的关系.方法 应用免疫组化染色法检测并以计分法判定35例反流性食管炎胃镜活检组织、89例手术切除的食管癌组织和20例正常食管黏膜组织COX-2的表达.分析反流性食管炎中COX-2的表达与年龄、性别、不典型增生的程度和内镜下分级等临床病理的关系.分析食管癌中COX-2的表达与肿瘤部位、病变长度、浸润深度、区域淋巴结转移、远处转移、鳞癌分化程度等临床病理参数的关系.结果 COX-2在正常食管黏膜、反流性食管炎、食管癌中的表达率分别为60.00%、88.57%、94.38%,且食管癌组着色最强、正常食管组着色最弱.反流性食管炎中,COX-2的表达与不典型增生呈正相关(r,=0.490,P<0.01);食管癌中,COX-2的表达与肿瘤浸润深度呈正相关(rs=0.215,P<0.05),与鳞癌细胞分化程度呈负相关(rs=-0.427,P<0.01).COX-2的表达与其它临床病理参数,包括性别、年龄、反流性食管炎内镜下分级、食管癌生长部位、大小、区域淋巴结转移、远处转移无关.结论 COX-2在正常食管黏膜、反流性食管炎、食管癌组织中的表达呈逐级上调的趋势.反流性食管炎不典型增生越严重,COX-2的表达越强;食管癌肿瘤浸润越深、鳞癌分化程度越低,COX-2的表达越强.     

Expression of TGF-beta1, TbetaRII and Smad4 in colorectal carcinoma

BACKGROUND: Many colorectal carcinomas are resistant to the growth inhibitory response of transforming growth factor-beta (TGF-beta) due to alterations of components along the TGF-beta signaling pathway. The aim of this study was to examine the expression of TGF-beta1, TbetaRII and Smad4 in human colorectal carcinoma and their relationships with cancer growth. METHODS: Immunohistochemistry and in situ hybridization were performed in 38 cases of colorectal carcinoma. RESULTS: Intense signal for TGF-beta1 protein and TGF-beta1 mRNA were found in 71.1% (27/38) and 77.8% (21/27) of colorectal carcinoma, respectively. Intensive TbetaRII mRNA were detected only in 40% (11/27) cancer tissues (p<0.05). 65.8% (25/38) of colorectal carcinoma displayed decreased expression in TbetaRII immunoreactivity staining (p<0.05). Smad4 protein and Smad4 mRNA were reduced in 63.2% (24/38) and 63% (17/27) of tumors, respectively. Smad4 expression was related to tumor differentiation and Duke's stage (p<0.05). Furthermore, TGF-beta1-positive tumors with lymph node metastasis preferentially had significant reduced Smad4 expression (p<0.05). CONCLUSIONS: Down-regulation of TbetaRII as well as the over-expression of TGF-beta1 play a possible role for the escape of colorectal carcinoma from TGF-beta-mediated growth inhibition. Reduced Smad4 is associated with malignancy and progression of colorectal carcinoma.