以免疫斑点化学发光法检测大肠杆菌

免疫斑点法是以纤维膜为载体的免疫酶技术。常用辣根过氧化物酶(HRP)标记系统,底物为二氨基联苯胺(DAB)加H_2O_2,形成棕色斑点。近来,化学发光检测技术已应用子免疫测定。在过氧化物酶催化的鲁米诺化学发光反应中,若固定发光系统中鲁米诺及H_2O_2的量,则反应产生的光强度与过氧化物酶的含量在一定范围内正相关。据此,     

雅培全自动化学发光免疫分析仪i2000SR故障维修一例

0 引言 全自动化学发光免疫分析仪是医院检验科常用设备之一,大连大学附属中山医院使用的是美国雅培公司i2000SR全自动化学发光免疫分析仪,可同时检测25个项目,每小时能完成200个测试,具有较高的工作效率及准确性和灵敏度. 化学发光免疫分析(chemilumineseent immunoassay,CLIA)是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物直接标志抗体或抗原的数量,进而对抗体或抗原进行特定量检测的一类免疫分析法.检测技术中检测小分子抗原使用竞争法,检测大分子抗原用夹心法.i2000SR全自动免疫发光分析仪中肝炎检测项目优势明显,在肝炎定量检测方面属于全球金标准测试,其中的HbsAg和HbsAb为全定量检测,HbeAg、HbeAb、HBcAb为半定量检测.i2000SR全自动免疫发光分析仪对甲状腺的检测项目中促甲状腺素(thyroid Stimulating Hormone,TSH)具有最优灵敏度.     

国产和进口化学发光免疫分析系统检测血清ProGRP的比对分析

目的 探讨国产自主研发AE-180全自动化学发光免疫分析系统和进口的罗氏cobas e 601电化学发光免疫分析系统同时检测血清ProGRP结果的可比性.方法 依据美国国家临床实验室标准化协会(NCCLS)指南文件EP9-A2[1]文件要求,以罗氏cobas e 601电化学发光免疫分析仪为对比仪器,苏州长光华医自主研发的AE-180全自动化学发光免疫分析仪为实验仪器,采用患者血清样本检测胃泌素释放肽前体(ProGRP)含量,通过实验数据的比对分析,对两套分析系统之间的偏倚进行评估.结果 在ProGRP测定的线性范围内,两套系统相关性好,r=0.997,直线回归方程为Y=0.9944X+0.5892,在ProGRP医学决定水平处的偏倚可接受.结论 两套系统检测ProGRP结果具有较好的一致性,国产自主研发的AE-180全自动化学发光免疫分析系统检测检测血清ProGRP能够满足临床需要,适于临床实验室推广使用.     

化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用分析

目的 通过对比,探讨了化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值.方法 选取2013年5月至2015年5月在我院的疑似乙型肝炎患者80例,抽取空腹血液样本后都分别进行乙肝病毒以及核心抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测,并对其检测结果进行分析.结果 化学发光酶免疫分析法检出乙型肝炎病毒阳性78例,检出率为97.5％;而ELISA检出乙型肝炎病毒阳性76例,检出率为95.0％,两种方法的检出率对比差异无统计学意义(P＞0.05).化学发光酶免疫分析法对于乙肝病毒核心抗体IgM与IgG的检测阳性率分别为80.0％和70.0％,而ELISA法检测两种抗体的阳性率则分别为18.8％和20.0％,化学发光酶免疫分析法对乙肝核心抗体IgM与IgG的检测阳性率明显高于ELISA法(P＜0.05).ELISA法检出HBc-IgM的最低限为0.135 IU/ml,检出HBc-IgM最低限为0.143 IU/ml;化学发光酶免疫分析法检出HBc-IgM最低限为0.032 IU/ml,检出HBc-IgG最低限为0.038 IU/ml.结论 化学发光酶免疫分析法在乙型肝炎检测中具有高的检出率,尤其对乙肝病毒的核心抗体的检测敏感度较高,值得在临床推广应用.     

癌抗原15-3酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立癌抗原15-3(CA15-3)酶促化学发光免疫分析方法.方法 利用双抗体夹心法建立CA15-3化学发光检测体系,分别对该体系的最低检测限、线性、分析特异性、准确度和精密度进行评估,并与进口全自动化学发光检测结果进行对比.结果 本方法灵敏度为0.26 U/mL,线性范围为0～ 300 U/mL,与CEA和CA125无交叉反应,添加回收率在97.0％ ～105.6％之间,分析内与分析间CV均小于10％,与进口全自动化学发光试剂同时检测160份样本的CA15-3浓度,检测结果的线性相关系数为0.987.结论 成功建立了CA15-3酶促化学发光免疫分析方法.该方法灵敏度高、重复性好,在临床应用中可替代进口化学发光检测试剂.     

化学发光免疫分析定量检测乙肝病毒标志物方法学研究

采用碱性磷酸酶标记,金刚烷衍生物发光,自动化学发光分析仪测量等,进行乙肝病毒五种标志物化学发光免疫分析(CLIA)方法学研究.结果表明这五种标志物CLIA方法的精密度、灵敏度、回收率和临床符合率等技术参数均达到方法学和临床诊断的要求.CLIA方法比ELISA和RIA更简便、快速而实用,为临床诊断和科研工作提供了一种有用的检测手段.     

化学发光磁酶免疫法检测O157:H7大肠埃希菌

目的：建立灵敏稳定检测O157：H7大肠埃希菌的化学发光磁酶免疫法.方法：利用AMPPD-ALP化学发光体系,通过磁珠酶联免疫法对O157：H7大肠埃希菌进行检测.结果：其检测灵敏度达到850个,线性范围为1 000～50 000个,批间变异小于15%,批内变异小于20%,与人工计数培养检测相比相关系数达0.9807.结论：化学发光磁酶免疫分析法操作简便,检测精密度和灵敏度高,是一种很有发展前景的可靠方法.     

在社区医疗机构中运用VIDAS检测AFP初探

目的 比较分析VIDAS 30全自动酶联免疫萤光分析仪与罗氏E170全自动电化学发光免疫分析仪上各项检测参数结果的精密度和相关性.方法 选取53份新鲜血清标本对2台仪器进行AFP测定,统计学分析两种仪器检测结果的一致性.结果 两台仪器检测结果相关系数的平方在0.967 1～1.999 4之间,校正后取得了较好一致性.结论 两台仪器间相关性较好,VIDAS 30全自动酶联免疫萤光分析仪可以在社区医疗机构中运用于AFP检测,从而满足临床的需要.     

两种免疫分析系统对甲状腺过氧化物酶抗体的一致性评价

目的 评估国产和进口两种化学发光法免疫分析系统检测血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)结果的一致性,探讨国产化学发光法免疫分析系统(MAGLUMI 4000PLUS全自动化学发光法免疫分析系统)检测TPOAb的可行性和实用性.方法 用两种方法检测130份血清样本TPOAb水平,比较两种检测方法的相关性、符合率,并对国...     

Access全自动微粒子化学发光免疫分析系统检测运动员兴奋剂122例报道

化学发光免疫分析包括三大类型: 即标记化学发光物质的化学发光免疫分析、标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析和标记酶的化学发光酶联免疫分析.化学发光免疫分析技术可测定内分泌激素、肿瘤标志物、血药浓度、传染病和心血管疾病标志物、贫血及过敏原等项目[1].     

两种检验AFP方法的相关与回归分析

在定量免疫分析中,一个指标往往有多种检测方法,如放射免疫分析、酶联免疫分析、（电）化学发光免疫分析,等等,在试剂来源方面更是五花八门。于是,同一个指标不同检测之间的相关性研究在学术期刊中经常见到,其中最多的是直线相关与回归分析。例如,Roche Elecsys 2010电化学发光免疫分析法AFP和Abbott IMX微粒子酶联免疫分析AFP,     

甲状腺过氧化物酶抗体光激化学发光间接检测法的建立

目的:利用抗免疫复合物IgG多抗体在光激化学发光(Lica)平台上建立间接法检测甲状腺过氧化物酶抗体(Anti-TPO)。方法:以人体IgG对兔子进行免疫耐受,以兔红细胞和人体血清构建免疫复合物IgG并免疫兔子。用纯化的抗免疫复合物IgG多抗和甲状腺过氧化物酶组成一步间接法,检测甲状腺过氧化物酶抗体浓度,并评估其最低检测限、回收率和批内精密度,与传统两步化学发光法(贝克曼)进行比较。结果:甲状腺过氧化物酶的检测方法的最低检测限为0.09 U/ml,平均回收率为96.26%,重复性变异系数(CV)为1.58%～1.97%,与贝克曼方法的结果的相关性r=0.989。结论:成功建立了光激化学发光定量检测Anti-TPO的方法(间接法)。该方法与传统两步间接化学发光法的相关性较好,弥补了光激化学发光平台无法使用间接法进行检测的缺陷。     

IMMULITE Ⅰ型全自动分析系统使用初评

本文通过测定血清中T3,T4含量为例,介绍IMMULITE Ⅰ型酶放大化学发光免疫分析仪及化学发光法与放射免疫分析法(RIA)的比较.IMMULITE Ⅰ型分析仪测得血清中T3,T4重复性良好,批内变异和批间变异均小于5%.在对T3值是432ng/dL和377ng/dL的血清样品作回收实验,回收率为103.2%-116.9%.两种方法测得T3结果呈相关,相关系数 0.91,回归方程为Y=1.06X+0.159.IMMULITE Ⅰ型分析仪测量,在25min后出第一个样品结果,以后每35sec出另一个结果,而RIA通常需要几小时或更长时间,才能出结果.因此IMMULITE Ⅰ型分析仪操作简便,其采用的化学发光法可与RIA媲美,是一种功能全,运行平稳的化学发光分析仪,值得进一步推广使用.     

化学发光磁酶免疫法检测O157∶H7大肠埃希菌

目的建立灵敏稳定检测O157∶H7大肠埃希菌的化学发光磁酶免疫法。方法利用AMPPD-ALP化学发光体系,通过磁珠酶联免疫法对O157∶H7大肠埃希菌进行检测。结果其检测灵敏度达到850个,线性范围为1000~50000个,批间变异小于15%,批内变异小于20%,与人工计数培养检测相比相关系数达0.9807。结论化学发光磁酶免疫分析法操作简便,检测精密度和灵敏度高,是一种很有发展前景的可靠方法。     

Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测血栓分子标志物的性能评价与分析

目的 应用CLSI评价方案对Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测血栓分子标志物项目进行性能验证。方法 根据CLSI系列文件(EP15-A、EP6-A),对Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测系统的血栓分子标志物项目的精密度、线性、参考区间、正确度进行评价与分析,结果与厂商声明的性能进行比较。结果 血栓分子标志物4个检测项的实验室内变异系数结果均小于厂家声明的批内变异系数(CV<10%)。且该4项的线性回归方程的斜率均在1.00±0.05范围内,相关系数均R²≥0.99。它们的参考区间验证结果均有95%以上检测值在参考范围内。该4项正确度均通过验证。结论 Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测血栓分子标志物项目的实验结果与厂商声明的性能基本符合质量目标要求。     

促甲状腺激素生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光底物,采用夹心法,建立TSH酶促化学发光免疫分析方法。结果方法分析灵敏度为0.01mIU/L,批内变异系数为2.01%～5.40%,批间变异系数为2.96%～17.9%,回收率为90.6%～114.4%,高值促甲状腺激素血清样品经系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性关系,相关系数大于0.99,与原子高科TSH免疫放射分析方法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有良好的相关性。结论生物素-亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点,具有广阔的应用前景。     

基于光电倍增管的化学发光免疫检测系统的研制

基于光电倍增管(PMT)设计了全自动化学发光免疫检测总体方案,以泌乳素(PRL)作为检测对象,标记酶采用辣根过氧化物酶(HRP),发光体为Pierce的鲁米诺(激发底物),对化学发光免疫检测系统PMT数据进行处理。通过检测5种不同浓度的HRP稀释液的发光数进行标定,后对数据进行线性化处理,得到PRL浓度与发光数的关系。两检测样本PRL分别取阳性范围浓度值(样本A)和阴性范围浓度值(样本B),同时将检测结果与LUMO与Liaison两种化学发光仪的检测结果进行比较。对于样本A,本系统、LUMO和Liaison的检测结果分别为51.724、46.198、43.792 ng/mL;对于样本B,本系统、LUMO和Liaison的检测结果分别为11.702、15.133、8.069 ng/mL。实验结果表明,所设计的全自动化学发光免疫检测系统可以确定被测样本的阴阳性,能够满足免疫分析应用需求。     

化学发光免疫法测定人体甲状腺激素的性能验证及其临床应用

目的 评估化学发光免疫系统在临床甲状腺素检测中的应用效果.方法 选取我院2018年6月至2019年11月区间内的100例甲亢患者、100例甲低患者和100例甲状腺功能正常者作为试验对象,将化学发光免疫法(CLIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫测定法(RAI)检测结果比较.结果 使用化学发光免疫系统实测血清促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)时,所得线性范围、准确度、总精密度均较好,标准变异系数(CV)1.58％～6.44％、灵敏度较高且方法总回收率在99.7％～104.6％;且实际样本检测结果优于ELISA法、RAI法.结论 利用化学发光免疫法对甲状腺功能异常患者进行血清中甲状腺素及其抗体检测,可显著提高检测结果准确性并缩短检测周期,具有较高的临床医学推广价值.     

化学发光法和酶联免疫法在乙型肝炎病毒血清学检验中的效果比较

目的 比较化学发光法和酶联免疫法在乙型肝炎病毒血清学检验中的效果。方法 选取2017年2月~2019年5月我院收治的疑似乙型肝炎患者63例作为研究对象,均予以酶联免疫法、化学发光法进行血清学检验,以荧光定量PCR为金标准,比较两种检验方式准确性、血清学指标检出率。结果 共63例疑似乙肝患者,荧光定量PCR检验阳性38例、阴性25例;酶联免疫法和化学发光法中准确度、灵敏度、特异度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。38例乙肝阳性患者中,酶联免疫法HBsAb、HBcAb阳性检出率与化学发光法比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;酶联免疫法HBeAb、HBeAg、HBsAg阳性检出率低于化学发光法,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 乙型肝炎病毒血清学检验中,采用酶联免疫法、化学发光法均具良好诊断效果,但在血清标志物检验中,化学发光法检出效果更佳,有利于保证临床诊断准确性。     

化学发光法测定血清SCC正常参考值的调查

鳞状细胞癌抗原（SCC）在原发性和复发性鳞状细胞癌,特别是对于耳、鼻、咽喉区域肿瘤中对病程和疗效的监测有很大的临床意义。SCC的常用测定方法有放射免疫分析、酶联免疫分析、免疫比色法和化学发光法,各种方法的正常人群参考值有所不同。随着化学发光法的日益推广,SCC的临床应用日渐受到重视。我们应用美国Abbott公司i2000型化学发光仪测定了1229例正常人的SCC值,旨在建立化学发光法检测的正常人群参考值,以供临床参考。