食管癌标本中人乳头状瘤病毒(HPV)DNA序列的检测

鉴于HPV与人类一些部位的肿瘤有关,我们在国内外首次开展了HPV与人食管癌关系的研究,初步的研究结果显示:27%(25/90)的食管癌标本中含HPV—DNA序列;另有一株食管鳞状上皮癌细胞(Ecal09)中,也含HPV—DNA序列。此外,四例胎儿的食管HPV—DNA全部阳性,其意义目前尚难评价,有待于进一步研究。HPV—DNA序列在食管癌中的检出,给食管癌的病因探讨带来了新的课题。     

原位杂交法检测太行山猕猴食管癌的人乳头瘤病毒

乳头瘤病毒(简称PV)是一组DNA致瘤病毒,可感染人和高等动物的鳞状上皮,引起疣状增生性病变。运用分子生物学技术,目前已发现人类许多器官发生人乳头瘤病毒(简称HPV)感染。周健等用分子杂交技术证实了人食管是HPV感染的多发部位之一,并在食管癌高发区的人食管癌标本中检测到HPV。最近,在食管癌高发区太行山生长的太行山猕猴发现两例自发性食管癌。猕猴的食管癌是否也与HPV感染有关,国内外尚未见报道。我们用人乳头瘤病毒探针对这两例太行山猕猴自发食管鳞状细胞癌标本进行了检测。     

多聚酶链反应检测食管癌组织中HPV DNA及其临床意义

人类乳头状瘤病毒（HPV）是人类易感病毒,近年来,已阐明HPV感染和许多肿瘤的发生有关,且尤其与人类鳞状上皮有高度亲和性。食管癌绝大多数为鳞癌,为了探讨HPV和食管癌的关系,进一步拓宽食管癌病因学的研究领域,本文采用多聚酶链反应（PCR）技术检测34例食管癌患者癌组织中的HPV DNA,结果显示阳性20例,阳性率约为58.8％。这一结果说明食管癌组织DNA中确有HPV DNA整合,食管癌的发生确与HPV感染有关,并为积极防治食管癌及进一步研究HPV的致癌机理奠定了理论基础。     

河南食管癌高发区同一样本新鲜和石蜡固定组织人乳头瘤病毒检测差异分析

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）在高发区食管癌中差异性检测的原因.方法：利用聚合酶链式反应（PCR）,对同一食管癌手术切除标本,从新鲜组织和石蜡固定组织两方面进行HPV16-DNA检测.结果：30例食管癌新鲜组织HPV16感染率为84%,对应石蜡固定组织为53%; 新鲜组织中3例HPV16阴性的标本在其对应的石蜡固定组织中3例均为阴性,27例HPV16阳性的新鲜组织标本中其对应石蜡固定组织中仅16例检测到HPV16-DNA.结论：HPV16-DNA在食管癌中的差异性检测结果与材料处理方式不同有关,尤其是固定组织在处理过程中,DNA断裂,形成一些小分子片段,以至于超出所要扩增的范围.     

乳头状瘤病毒与人类肿瘤

本课题组近3年来,以食管癌为主,用PCR、RNA原位杂交及免疫组化的方法检测了人类乳头状瘤病毒(HPV)在肿瘤组织及癌前病变中的存在,发现在食管癌、乳腺癌和卵巢癌中均有很高比例的HPV检出率(63%、66%及50%)以及活跃的病毒mRNA或蛋白表达.在食管癌高发人群的普查标本上,随着食管癌上皮癌前病变程度的加重,HPV检出率和表达率逐渐增高.我们同时发现选择不同的病毒靶位开展PCR会得到不同的检出率.E6/E7片段可较真实地反映HPV感染情况. 我们的结果提示:HPV-16与食管癌、乳腺癌和卵巢癌的发生密切相关;HPV DNA的存在和活跃的表达与细胞癌变相关;HPV-16E6/E7与L1片段相比,检出率大大提高.我们认为HPV与人类肿瘤的关系应该受到更多的关注,结合对HPV感染的人群筛选遗传易感基因,对高危人群识别、预防、早诊和治疗,以降低肿瘤的发病率具有重要意义.     

基因芯片技术检测新疆哈萨克族食管癌HPV感染状况及基因型分析

目的：探讨人乳头瘤状病毒（Human papillomavirus,HPV）在新疆哈萨克族食管癌中的型别分布情况。方法：采用基因芯片技术对194例哈族食管癌石蜡组织标本进行23种HPV基因型别检测,同时,对检测HPV单一型别阳性样本进行DNA测序验证。结果：共检测出7种HPV型别,HPV总感染率为32.5%（63/194）,其中,高危型HPV16的感染率最高为27.8%（54/194）,检出其他高危型为HPV18、HPV35和HPV52。低危型中HPV6感染率最高为5.2%（10/194）,其他低危型HPV11,HPV43各检出1例。多重感染率为11.1%（7/63）,并全为二重感染。按照食管癌类型、年龄、性别对哈族食管癌中的HPV感染状况进行比较分析,差异均无统计学意义。食管鳞癌中HPV基因型分布也与病理分化程度无关。结论：新疆哈萨克族食管癌存在HPV感染,HPV感染可能与食管癌的发生、发展有一定的相关性,且HPV16是哈族食管癌的主要感染型别。     

PCR和原位杂交技术检测新疆哈萨克族食管癌中HPV感染情况

目的:检测人乳头状瘤病毒(HPV)在新疆哈萨克族食管癌及癌旁组织中的感染情况.方法:分别采用PCR法和原位杂交法检测60例食管鳞癌组织及相应癌旁正常鳞状上皮组织中HPV感染情况.结果:PCR和原位杂交检测食管癌组织中的HPV阳性率为51.7%和45% ;正常食管癌癌旁组织中 HPV阳性率为25%和15%.统计学结果显示食管癌组与癌旁正常鳞状上皮组中HPV感染,差异有统计学意义P<0.05.结论:新疆哈萨克族食管癌组织中存在HPV感染,HPV感染可能是其发病的危险因素之一.     

荧光偏振检测西北地区宫颈病变组织中HPV感染分型的研究

目的:分析西北地区宫颈疾病组织标本中感染HPV病毒型别的分布与患者疾病病程和年龄的关联性。方法:分别提取425例西北地区宫颈疾病组织DNA,GP5+/GP6+非对称扩增荧光偏振检测方法检测每例宫颈疾病标本组织DNA的15种HPV型别,统计分析HPV型别检测结果。结果:425例CIN及宫颈癌组织标本中,417例检测出HPV感染,感染率为98%。其中HPV16型感染101例,HPV11型感染69例,HPV6型感染56例,HPV18型感染51例,多重HPV型别感染39例。CIN I级中,高危型HPV感染阳性率为27.3%,CIN II级中,高危型HPV感染阳性率为65.1%,CIN III级中,高危型HPV感染阳性率为65%;宫颈癌中,高危型HPV感染阳性率高达70%。CIN III级中,多重HPV感染阳性率为16.8%;宫颈癌中,多重HPV感染阳性率达16%。不同年龄组,低危型HPV检测阳性率差异较大。结论:本研究中,宫颈疾病标本中HPV感染率为98%,其中,高危型和多重感染在高CIN级别、宫颈癌及60岁以上组中的感染率呈上升趋势,提示HPV感染型别与病程和年龄有一定关联。     

100例食管癌中的人乳头瘤病毒感染检测

目的　检测食管鳞癌中的人乳头瘤病毒 (HPV)感染 ,探索HPV与食管癌大体生长方式的关系。方法　应用通用引物PCR法和多重PCR法检测 10 0例食管癌组织标本中的HPV感染。结果　共检测出HPV阳性 2 6例 (2 6 / 10 0 ) ,按照食管癌的病理大体分型 ,其中溃疡型食管癌中HPV阳性 5例 (5 / 2 5 )、蕈伞型中阳性 3例 (3/ 2 5 )、缩窄型中阳性 12例 (12 / 2 5 )、髓质型中阳性 6例 (6 / 2 5 )。对 2 6例HPV阳性标本中的 2 0例进行了多重PCR检测 ,发现HPV6 / 11型 6例、HPV16型 11例、HPV18型 3例。结论　我国食管癌中存在HPV感染 ,存在HPV感染的食管癌可能并不是在HPV引起的湿疣样病变基础上发展而来。     

漯河地区食管癌患者癌组织中人乳头状瘤病毒感染的检测

目的检测漯河地区食管癌患者中人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况,探讨HPV感染与我国河南省漯河地区食管癌发生的相关性。方法应用HPV L1通用引物GP5+/6+、HPV16E6和HPV18E6型特异性引物多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测漯河地区食管癌组织中HPV存在状况。结果 115例食管癌组织中,86例检测到HPV阳性,阳性率为74.8%;其中56例检测到HPV16E6基因,阳性率为48.7%;20例检测到HPV18E6基因,阳性率为17.4%;12例HPV16E6和HPV18E6基因均阳性为混合感染。结论我国河南省漯河地区食管癌与HPV DNA感染存在相关性,并且HPV感染可能是食管癌发生的重要因素之一。     

内蒙古地区蒙古族妇女子宫颈鳞癌组织中人乳头瘤病毒的基因分型

目的回顾性分析内蒙古地区蒙古族妇女子宫颈鳞癌标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染率与型别分布,为蒙古族妇女子宫颈癌的预防提供相关信息。方法运用线形探针反向杂交技术检测标本中的HPV基因型别。结果63例蒙古族子宫颈癌患者的子宫颈鳞癌蜡块组织标本中HPV总感染率为93·7%,HPV阳性率在不同临床分期与不同病理组织学分级的子宫颈鳞癌组织间差异无显著性(P>0·05),HPV16亚型在不同年龄分组中的感染率差异无显著性(P>0·05)。感染率居前5位的是:HPV16(69·8%)、HPV18(4·8%)、HPV31(4·8%)、HPV39(4·8%)和HPV52(3·2%)。结论HPV感染与蒙古族妇女患子宫颈鳞癌密切相关,HPV16型是蒙古族妇女子宫颈鳞癌的主要感染型别,HPV18、31、39型位居其后。HPV感染对蒙古族妇女子宫颈鳞癌的进展以及组织分化无影响。     

南通地区食管癌中HPV感染与Ki-67的关系

目的：研究人乳头状瘤病毒（HPV）在南通地区食管癌、癌旁组织中的感染情况和Ki-67表达的关系。方法：采用原位杂交法检测90例食管癌组织及相应癌旁组织中HPV感染情况,免疫组化SP法检测Ki-67的表达。结果：90例食管癌组织、癌旁组织HPV感染阳性率分别为43.3%、5.6%,2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,Ki-67蛋白的检出率为93.3%。结论：南通地区食管癌组织中存在HPV感染,与食管癌的发生、发展有关,与Ki-67的表达有一定的相关性。     

内蒙古准格尔旗妇女人乳头瘤病毒感染的危险因素分析

目的：探讨影响内蒙古准格尔地区高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染的危险因素,为HPV感染和子宫颈癌的防治工作提供依据.方法：2011年8～9月对内蒙古准格尔地区1 983名45～54岁有性生活妇女进行流行病学调查和子宫颈癌筛查.所有妇女均接受一般妇科检查、醋酸染色（VIA）和人乳头瘤病毒检测（HC-Ⅱ）,VIA和HC-Ⅱ检测任一阳性者转诊做阴道镜和活检.利用x2检验和非条件Logistic回归模型分析HR-HPV感染的危险因素.结果：多因素分析显示,影响本地区HR-HPV感染的危险因素为阴道滴虫感染、配偶婚外性行为、饮水来源.结论：通过宣传教育使妇女养成良好的性行为和保持生殖道健康,对降低HPV感染及相关疾病负担有重要意义.同时,应加强对具有高危因素妇女的检测.     

某市食管癌组织中人类乳头状瘤病毒感染情况的研究

目的研究河南省食管癌高发区食管癌组织中人类乳头状瘤病毒感染与食管鳞状细胞癌发生的关系。方法利用PCR和免疫组织化学技术检测68例食管癌,15例非典型增生食管上皮和53例正常食管黏膜组织中人类乳头状瘤病毒HPV16／18感染和HPV16／18E6蛋白的表达情况。结果68例食管癌中,HPV DNA阳性率为67．6％（46／68）。在正常食管黏膜、非典型增生上皮及鳞状细胞癌组织中HPV16／18E6的阳性率分别为9．4％（5／53）、40．0％（6／15）和61．2％（42／68）,癌组织中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率明显高于非典型增生上皮和正常食管黏膜（P〈0．05）,非典型增生上皮中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率亦明显高于正常食管黏膜（P〈0．05）。结论HPV16／18型感染可能在某食管癌高发区食管癌的发生中起重要作用。     

汕头地区食管癌人乳头状瘤病毒的原位杂交检测

55例新鲜食管癌冰冻切片用ISH检测HPV感染状况，45例阳性，阳性率81.8%。不同病变HPV感染率不同，正常（87.50%)和单纯增生(81.40%)感染率明显高于原位癌(38.39%)和浸润癌(27.27%),不典型增生居中(64.70%);而且不同病变ISH阳性信号分布特征不同,在正常和单纯增生上皮呈层状分布,表层阳性细胞数多,信号强;原位癌层状分布特征消失,较弥散,浸润癌呈区域性阳性,本实验表明汕头食管癌组织HPV感染率高,HPV18可能在该地区食管癌的发病过程中起重要作用。     

THE STUDY OF INTERRELATION BETWEEN HUMAN PAPILLOMAVIRUS INFECTION AND LANGERHANS CELL IN THE CARCINOGENESIS OF ESOPHAGEAL CARCINOMA

为了解人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）对免疫Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞（ＬＣ）的影响及ＨＰＶ的致癌机理，采用地高辛配基标记的ＨＰＶ１６／１８ＤＮＡ探针和抗Ｓ１００蛋白抗体，分别用原位分子杂交和免疫组化ＬＳＡＢ法，检测了４０例食管鳞状细胞癌中ＨＰＶＤＮＡ序列及分布，重点观察了ＨＰＶ感染时局部癌旁上皮内Ｓ１００蛋白阳性Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ细胞的分布、数量及形态改变。结果显示：在有ＨＰＶ感染时，上皮内ＬＣ数量明显少于无感染者。上皮内残留的少数ＬＣ的分布及形态也有改变。结果提示：ＨＰＶ可能通过减少局部的ＬＣ，破坏机体局部的免疫监视系统，并与其他致癌因素协同作用，进而导致食管癌的发生。     

HPV的快速检测与分型

以通用引物PCR初筛158例标本，凡HPV感染阳性标本再用型持异引物PCR作分型检测，结果：疣、乳头瘤等良性病变的HPV检出率为61．1％（55／90），主要检出HPV6和／或HPV11，占阳性例数的89．1％（49／55）；食管癌组织有较高的HPV感染率（66．2％，45／68），以检出HPV6，11，16为主，并明显高于HPV8（X2检验，P＜0．01），提示HPV感染可能与本地区食管癌发生密切用关。本研究建立的HPV快速检测和分型方法，用于临床检测和回顾性研究均可获得满意结果。     

HPV16/18在泰兴地区食管鳞癌中的表达及相关性研究

目的:探讨人乳头状瘤病毒16/18(HPV16/18)在食管鳞癌中的表达及相关性.方法:应用双探针原位杂交检测HPV16/18在72例食管鳞癌,18例正常食管黏膜,12例低级别上皮内瘤变,18例高级别上皮内瘤变中的表达并分析其与食管鳞癌的关系.结果:食管鳞癌HPV16/18阳性率为55.56%(40,72).正常食管上皮、高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变HPV16/18阳性率均明显低于食管鳞癌,有统计学差异(P<0.05).结论:HPV16/18与食管鳞癌的临床分期、病理分级、组织大体形态、淋巴结转移、性别、年龄、浸润深度无相关性,与食管的鳞状上皮恶变有一定相关性,可为食管鳞癌病因预防治疗提供依据.