原发性睾丸弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床病理及预后

目的观察原发性睾丸弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床病理、免疫表型特征及患者存活情况,探讨该肿瘤的病理诊断、鉴别诊断及预后。方法按WHO（2001）淋巴瘤分类标准收集14例原发性睾丸弥漫性大B细胞淋巴瘤,中位年龄62岁,按AnnArbor分期标准,Ⅰ期10例,Ⅱ期3例,Ⅳ期1例。11例有随访资料,其中3例存活,最长存活时间86个月;8例死亡,存活时间5～19个月,中位存活时间为11个月。总结14例的组织病理学、免疫表型特征,并进行存活分析。结果单侧睾丸无痛性肿大是最常见的临床表现。形态学变型全部为中心母细胞性。免疫分型,生发中心样B细胞型（GCB型）1例,非生发中心样B细胞型（non—GCB型）13例。10例p53蛋白表达阳性,肿瘤细胞增殖活性高,6例肿瘤细胞表达bcl-2蛋白。存活分析表明,1、2、5年生存率分别为45．5％、17．0％、17．0％。结论原发性睾丸弥漫性大B细胞淋巴瘤多为外周活化的B细胞起源,预后差,易复发和转移;病理活检加免疫表型检测对肿瘤的诊断和鉴别诊断有重要作用。     

bcl-10蛋白异常表达对黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤的诊断价值

目的探讨bcl-10蛋白表达对黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤（MALT淋巴瘤）的诊断价值。方法收集140例不同部位的MALT淋巴瘤,包括胃38例、眼眶35例、肠16例、皮肤15例、涎腺15例、肺14例、甲状腺3例、其他部位4例。对照：10例扁桃体反应性滤泡增生（RFH）、5例眼眶的淋巴组织增生和143例非MALT淋巴瘤、不同类型的非霍奇金淋巴瘤（NHL）,包括20例NK／T细胞淋巴瘤、20例滤泡性淋巴瘤（FL）、20例间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）、20例淋巴结内弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、10例原发胃DLBCL、13例淋巴结边缘区淋巴瘤（NMZL）、12例套细胞淋巴瘤（MCL）、11例脾脏边缘区淋巴瘤（SMZL）、6例血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）、6例外周T细胞淋巴瘤（PTCL）、3例B．小淋巴细胞淋巴瘤（B-SLL）、1例淋巴浆细胞性淋巴瘤（LPL）和1例浆细胞瘤。免疫组织化学EnVision法检测bcl-10蛋白;免疫组织化学双标记法检测CD20与bcl-10的共表达。结果在扁桃体RFH中,bel-10蛋白呈中等强度表达于生发中心B细胞质中,套细胞不表达,边缘区细胞和副皮质区T细胞呈弱表达。在眼眶淋巴组织增生中,2例bel-10阴性,3例主要呈淋巴滤泡生发中心B细胞质阳性,与扁桃体RFH的表达类似。在非MALT淋巴瘤的其他类型NHL中,除3例（3／10）原发胃DLBCL呈胞核阳性外,其余均未见胞核表达;在不同NHL中的胞质阳性分别为：结内（12／20）和胃（7／10）DLBCL、FL和ALCL（16／20）、PTCL（5／6）、AILT（6／6）、NMZL（13／13）、SMZL（11／11）、B-SLL（3／3）和浆细胞瘤（1／1）,11例MCL呈胞质可疑阳性,20例NK／T细胞淋巴瘤和1例LPL阴性;在部分淋巴瘤中可见肿瘤性细胞表达而反应性小淋巴细胞不表达：MALT淋巴瘤之bcl-10的总表达率为92．1％（129／140）,其中54．3％（76／140）胞质阳性,37．9％（53／140）胞核阳性;但不同部位之胞核阳性率有所不同。在MALT淋巴瘤中,bcl-10蛋白核强表达最常见于眼眶（25．7％,9／35）;除出现异常bcl-10胞核表达外,约20％有反应性滤泡的病例呈生发中心失表达。双标记显示bcl-10阳性细胞为CD20阳性细胞,但CD20阳性细胞多于bcl-10阳性细胞。结论（1）淋巴细胞增生性病变中bcl-10蛋白普遍表达,细胞质表达可出现在多数NHL和反应性增生中,但在淋巴瘤中呈肿瘤细胞表达而反应性细胞不表达,提示bcl-10异常可能与部分淋巴瘤的形成有关;（2）细胞核内bcl-10异常表达主要见于MALT淋巴瘤;眼眶、肺等部位的胞核强阳性和生发中心阴性的特殊模式,对MALT淋巴瘤的诊断及其与反应性病变的鉴别诊断有一定辅助意义。     

原发性骨非霍奇金淋巴瘤临床病理预后和病因学分析

目的探讨原发性骨非霍奇金淋巴瘤（PNHLB）的临床病理特征、预后指标及病因学。方法复习17例PNHLB患者的临床资料,同时进行免疫组织化学EnVision法检测免疫标志物、原位杂交检测EBER及PCR检测bcl-2／JH基因重排,并对血清LDH、治疗、国际预后指数（IPI）、免疫标志物与预后的关系进行分析。结果17例PNHLB以弥漫性大B细胞淋巴瘤为主（94．1％）,患者的5年生存率为68．8％,IPI高危类、bcl-2过表达对预后不利（2者的P值分别为0．031和0．028）,治疗方式和CD10、MUM-1、bcl-6的表达对预后的判断差异无统计学意义（P〉0．05）。8例人类B-珠蛋白基因扩增阳性的骨DLBCL患者中1例Bcl-2／JH基因重排扩增阳性。EBER原位杂交仅1例阳性。结论PNHLB预后较好,IPI及免疫组织化学检测bcl-2过表达是判断预后的指标。EB病毒与病因无相关性。     

原发骨髓淋巴瘤4例临床病理学分析

目的探讨原发骨髓淋巴瘤(PBML)临床与病理特征, 以提高认识, 避免误诊和漏诊。方法回顾性分析4例PBML的临床表现、病理学特点、免疫表型及治疗与预后特征, 结合文献报道进行总结。结果 4例PBML患者年龄67～81岁(平均72.5岁), 均为女性。1例出现B症状, 2例表现为乏力、纳差, 1例表现为活动后憋喘。骨髓内肿瘤细胞占比30%～80%;瘤细胞体积中等偏大, 2例以中心母细胞为主, 1例以浆样形态大细胞为主, 1例以免疫母细胞为主;2例瘤细胞弥漫型浸润, 2例为弥漫型和间质型浸润模式。4例均表达常用B细胞标志物(CD20、PAX5等), CD10均阴性, 2例表达bcl-6, 1例表达MUM1, 3例表达bcl-2, 2例表达MYC。2/3例行流式细胞检测发现异常成熟B细胞群, 其中例1为双克隆性, 结合形态和免疫组织化学诊断为B细胞淋巴瘤难以分类。另3例诊断为弥漫性大B细胞淋巴瘤, 包括1例生发中心B细胞型(GCB型), 2例非GCB型伴MYC/bcl-2双表达。结论 PBML多无特异性临床症状, 早期诊断困难, 充分认识临床病理及免疫表型特点, 并严格排除系统性淋巴瘤累及...     

伴有MYC、bcl-2和bcl-6基因重排的高级别B细胞淋巴瘤的临床病理特征北大核心CSCD

目的 探讨伴有MYC、bcl-2和bcl-6基因重排的高级别B细胞淋巴瘤（HGBL）的临床和病理学特点.方法 应用双色分离探针MYC、bcl-2和bcl-6对2016年1月至2017年4月中国医学科学院 北京协和医学院血液病医院收集的158例B细胞淋巴瘤患者的石蜡组织切片进行荧光原位杂交（FISH）检测,并结合临床病理资料进行分析.结果 158例B细胞淋巴瘤中MYC、bcl-2和bcl-6基因重排的HGBL为3例,1例合并CCND1/IgH阳性.3例均为中老年男性,多部位受累,乳酸脱氢酶（LDH）水平升高,Ann Arbor分期均为Ⅳ期;2例行高强度化疗,未缓解,生存期分别为9个月和11个月;1例未治疗,正在随访中.3例具有不同形态谱系,初诊分别为淋巴母细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和套细胞淋巴瘤.免疫表型检测示2例为生发中心B细胞型,1例为非生发中心B细胞型,Ki-67染色示3例均具有较高的增殖指数（60%~90%）.结论 伴有MYC、bcl-2和bcl-6基因重排的HGBL侵袭性强,以多器官受累为主,分期晚,疗效差.需要结合病理组织学和FISH检测确诊,并需要与多种淋巴瘤鉴别.其生存期短,需要早期诊断与强化治疗.     

原发性骨恶性淋巴瘤临床病理及免疫表型观察

目的：观察原发性骨恶性淋巴瘤（PLB）的临床病理及免疫表型特征。方法：对8例PLB进行临床病理学观察及免疫组织化学染色（ABC法）。结果：8例PLB平均年龄51岁。X线片示溶骨性破坏或伴有骨质疏松;组织学观察均为弥漫性非霍奇金淋巴瘤（NHL）,大细胞性4例,中心细胞性2例、混合细胞性（中心细胞－中心母细胞）和淋巴交细胞样各1例;免疫化显示B细胞6例、T细胞2例。结论：PLB好于50岁左右,X线片主要表现为溶骨性破坏和骨质疏松。病理类型为弥漫性NHL,细胞形态主要是大细胞,免疫表型则以B细胞多见,免疫化有助于PLB的鉴别诊断。     

原发性乳腺恶性淋巴瘤临床病理分析

目的：探讨原发性乳腺恶性淋巴瘤的临床病理、免疫组织化学及预后特征。方法：对8例原发性乳腺恶性淋巴瘤的临床资料、术前诊断、病理形态、免疫组织化学及预后进行分析。结果：8例原发性乳腺恶性淋巴瘤患者均为女性,发病年龄34－65岁,平均年龄46．4岁。左乳4例,右乳3例,双侧乳腺发病1例。7例患者为临床IE期,1例为ⅡE期。5例为弥漫大B细胞淋巴瘤,其中4例为中心母细胞形态,1例为免疫母细胞形态;3例为黏膜相关淋巴组织型边缘区淋巴瘤。8例均为白细胞共同抗原（LCA）、CD20、CD45RA阳性;CD43、CD45RO、CD5、CD10均阴性,3例雌、孕激素受体均阴性。治疗大多采用综合治疗,术后6例随访8－108个月未见复发。结论：原发性乳腺淋巴瘤少见,术前诊断较难。组织学类型主要为弥漫大B细胞淋巴瘤和黏膜相关淋巴组织淋巴瘤,经综合治疗后,原发性乳腺淋巴瘤的预后较好。     

宫颈淋巴瘤样病变与宫颈淋巴瘤的鉴别

目的探讨宫颈淋巴瘤样病变和宫颈淋巴瘤的临床病理特点及免疫球蛋白重链（IgH）基因重排在两者鉴别诊断上的价值。方法对10例宫颈淋巴瘤样病变和16例宫颈淋巴瘤进行临床资料分析和组织病理学观察,以免疫组织化学（EnVision法）检测B、T淋巴细胞标记物和免疫球蛋白轻链（κ,λ）的表达,并应用半套式聚合酶链反应方法检测了4例淋巴瘤样病变和4例淋巴瘤中IgH基因重排的情况。结果宫颈淋巴瘤样病变患者年龄24—54岁（中位年龄43岁）,临床多表现为宫颈糜烂或息肉,镜下观察可见表浅分布的、局灶或弥漫性免疫母细胞样大细胞浸润,伴淋巴细胞转化成熟现象和多型性炎性细胞浸润（多量成熟浆细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞）。宫颈淋巴瘤患者年龄28—78岁（中位年龄58岁）,临床表现为宫颈肿块或弥漫性宫颈肥大,镜下观察示12例弥漫性大B细胞淋巴瘤和4例滤泡性淋巴瘤,二者组织学形态分别以弥漫分布、形态单一的肿瘤性大淋巴细胞浸润和肿瘤性滤泡形成为特点,病灶中少有多型性炎性细胞浸润,也不出现淋巴细胞转化成熟现象。宫颈淋巴瘤样病变中,免疫母细胞样大细胞κ和λ染色结果欠满意。4例宫颈淋巴瘤病例和2例宫颈淋巴瘤样病变中检出单克隆性IgH基因重排。结论宫颈淋巴瘤样病变和淋巴瘤主要依据不同的临床和病理形态特点相互区分。IgH基因重排检测对于二者鉴别有帮助,但需注意部分良性病变也有单克隆性淋巴细胞增生。     

非霍奇金B细胞淋巴瘤369例病理形态观察--2001年世界卫生组织淋巴组织肿瘤新分类应用体会

目的探讨非霍奇金B细胞淋巴瘤(B—NHL)的病理形态和免疫表型在B—NHL诊断中的价值,评价2001版世界卫生组织(WHO)淋巴瘤分类的可行性。方法依据2001版WHO淋巴瘤分类,应用HE、免疫组织化学(LSAB法)和原位杂交技术对369例B—NHL重新诊断分型。结果369例B—NHL确定了11个类型,未观察到毛细胞白血病和B-前淋巴细胞白血病,其中最常见的3个类型依次是：弥漫大B细胞淋巴瘤(189例,51．2％),黏膜相关淋巴组织结外边缘区细胞淋巴瘤(55例,14．9％),滤泡淋巴瘤(39例,10．6％)。发生于淋巴结者占42．8％(158例),结外为57．2％(211例)。单纯HE形态诊断对比形态结合免疫表型的诊断结果,符合率达80％,免疫组织化学可将B—NHI。的诊断正确率提高近20％。结论病理形态是淋巴瘤诊断的基础,免疫表型在诊断和分型中起重要作用,二者与临床特征结合可使绝大多数淋巴瘤得到明确诊断。2001版WHO淋巴瘤分类具有较强的实用性。     

儿童腹腔非霍奇金B细胞淋巴瘤的临床病理及免疫表型分析

目的 探讨儿童腹腔原发性非霍奇金B细胞淋巴瘤的临床病理、免疫表型与EBER特征及其病理诊断和鉴别诊断.方法 按WHO(2008年)淋巴瘤分类标准分析74例儿童腹腔原发性非霍奇金B细胞淋巴瘤的临床病理资料,制备组织芯片,进行免疫组织化学SP法染色,EBER原位杂交和c-myc基因荧光原位杂交,观察CD20、CD79a、CD3、CD10、bcl-6、MUM1、bcl-2、CD43、CD38和Ki-67蛋白的表达和EBER表达特征,并区分伯基特淋巴瘤(BL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和介于BL和DLBCL之间的不能分类的B细胞淋巴瘤(DLBCL/BL)病理类型,在DLBCL中再区分其生发中心B细胞型(GCB)和非生发中心B细胞型(non-GCB)的分化特征.结果 儿童腹腔非霍奇金B细胞淋巴瘤中BL为65例(87.8%),DLBCL为4例(5.4%),DLBCL/BL为5例(6.8%).临床以腹痛、腹部包块、肠梗阻及肠套叠为主要发病症状.BL免疫组织化学表达CD20(65例)、CD79a(65例)、CD10(63例)、bcl-6(62例)、MUM1(15例)、CD43(46例)和CD38(63例);不表达CD3、bcl-2;27例(41.6%)EBER阳性;54例(93.0%)c-myc基因位点断裂.DLBCL免疫组织化学表达CD20(4例)、CD79a(4例)、CD10(3例)、bcl-6(2例)、MUM1(2例)、bcl-2(3例)、CD43(2例)、CD38(2例);不表达CD3;其中2例GCB,2例non-GCB;EBER阴性;1例c-myc基因位点断裂.DLBCL/BL免疫组织化学表达CD20(5例)、CD79a(5例)、CD10(5例)、bcl-6(4例)、MUM1(3例)、CD43(5例)、CD38(3例),不表达CD3和bcl-2;4例EBER阴性;3例c-myc基因位点断裂.结论 儿童腹腔非霍奇金B细胞淋巴瘤具有侵袭性生长的特点,以BL为主要病理类型.临床以腹痛、腹部包块、肠梗阻及肠套叠为主要发病症状,主要累及回盲部肠组织及周围系膜淋巴结,病理形态、免疫表型、EBER、c-myc基因的检测对BL、DLBC及DLBCL/BL淋巴瘤的诊断和鉴别诊断有重要作用.     

结内外弥漫性大B细胞淋巴瘤的免疫表型和分化特征及预后的比较

目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的临床生物学特征和预后并比较结内与结外的差异。方法分析142例DLBCL的临床病理资料,结内90例,结外52例（胃肠30例,其他22例）,并随访2～108个月,制备组织芯片,并经免疫组织化学EnVision法染色,观察CD10、bcl-6、MUM1蛋白的表达并进一步区分其生发中心B细胞（GCB细胞）和非生发中心B细胞的分化特征。结果胃肠道DLBCL常为Ⅰ～Ⅱ期,国际预后指标评分低,预后也好于结内及其他结外DLBCL。单个抗原的表达率,CD10为19％（27例）,bcl-6为51％（72例）,MUM1为58％（82例）。36％（51例）的DLBCL显示GCB细胞分化特征,64％（91例）的DLBCL显示非GCB细胞分化特征。结外DLBCL的bcl-6的表达（63％）高于结内DLBCL（43％）。在不同的结外部位,甲状腺等部位多见为GCB细胞分化的DLBCL;睾丸等部位多见为非GCB细胞分化的DLBCL。结论DLBCL显示生发中心B细胞和非生发中心B细胞分化特征,结内外以及结外不同部位的DLBCL有着不同的生物学特征和预后。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤基因表达谱的初步研究

目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）不同免疫表型组的基因表达谱状况。方法根据CD10、bcl-6和MUM1的表达状况对156例DLBCL进行分组：CD10^＋和（或）bcl-6^＋、MUM1-（第1组）;CD10^＋和（或）bcl-6^＋、MUM1^＋（第2组）;CD10^-和bcl-6^-、MUM1^＋（第3组）。从各组中各选择3例共（9例）临床分期为Ⅳ期的病例标本,另取3例正常扁桃体组织作为对照,采用Affymetrix U133 plus2．0寡核苷酸芯片研究12例样本的基因表达谱。结果通过unsupervised等级聚类分析,12例样本被分成了4组,分别命名为A、B、C、D组。经与免疫表型分组结果对照显示两种分组结果完全一致：A、B、C组分别对应第1、2、3组,D组对应正常对照组。在DLBCL病例组中（A、B、C组）有81个基因显著表达下调,有86个基因显著表达上调。而其中的一个组（B组）虽然具有混合性生发中心B细胞样（GCB,A组）和活化的外周血B细胞样（ABC,C组）DLBCL的免疫表型,但在聚类分析中发现其基因表达谱与A组和C组均不同,有45个基因表达上调,并且有27个特异性表达基因。结论初步结果显示,DLBCL全基因组表达谱在分子水平上有不同的亚群,且可能通过免疫表型来区分。还提示基因表达谱B组DLBCL可能存在除细胞起源以外的不同异质性因素,而这种因素可能与DLBCL的发病机制相关。     

弥漫大B细胞淋巴瘤组织bcl-6蛋白表达及基因重排

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中bcl-6和CD10蛋白表达以及基因重排的特点及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学EnVision法分析51例DLBCL(22例为淋巴结内,29例为淋巴结外)和10例淋巴结反应性增生石蜡组织中bcl-6蛋白表达,并与CD10的表达作比较分析;应用断裂分离探针及间期核荧光原位杂交(FISH)技术检测32例淋巴结内DLBCL(22例为石蜡组织,10例为新鲜组织)和5例淋巴结反应性增生石蜡组织中bcl-6基因的重排。结果(1)淋巴结内、外DLBCL和淋巴结反应性增生中bcl-6蛋白均呈细胞核表达,阳性率分别为72.7%(16/22)、75.9%(22/29)、100.0%(10/10);CD10的阳性率分别为40.9%(9/22)、41.4%(12/29)、100.0%(10/10),所有CD10阳性肿瘤均共同表达bcl-6蛋白。(2)40.9%(9/22)的淋巴结内DLBCL和41.4%(12/29)的淋巴结外DLBCL为两蛋白共同阳性表达;将之与两蛋白均不表达的DLBCL(27.3%,6/22和24.1%,7/29)相比,前者(Ⅰ或Ⅱ期)的临床分期低于后者(Ⅲ或Ⅳ期,P<0.05)。(3)淋巴结内DLBCL样本中bcl6基因重排阳性率为28.1%(9/32),其中石蜡组织样本阳性率为27.3%(6/22),新鲜组织样本阳性率为30.0%(3/10),P>0.05。5例淋巴结反应性增生样本中均未检测到bcl-6基因重排,与DLBCL相比P<0.05。结论(1)在DLBCL中bcl6有较高的阳性表达率,bcl-6和CD10蛋白的联合检测可以协助DLBCL的诊断和鉴别诊断;bcl6和CD10共同阳性的DLBCL可能具有更好的预后。(2)bcl-6基因重排可能参与了部分DLBCL的发生,并可作为DLBCL诊断的参考指标。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤t(14;18)易位及bcl-2基因扩增的检测

目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）t（14;18）染色体异位及bcl-2基因扩增在其分类及临床分期、疗效评估中的作用。方法先对60例DLBCL的标本进行显微切割,获取相对比较纯的肿瘤组织,再使用细胞核芯片荧光原位杂交（FISH）对标本进行t（14;18）易位及bcl-2基因扩增检测,采用免疫组织化学SP法在组织微阵列上同步观测CD20、CD10、bcl-6、MUM1的表达,进行生发中心样（GCB）和非生发中心样（non-GCB）分类;通过病例分析得出治疗效果及临床分期的信息,并统计分析以上各因素之间的关系。结果在60例DLBCL中,10例bcl-2／IgH阳性,18例bcl-2基因扩增;GCB29例（48．3％）,non-GCB31例（51．7％）。经FISH检测t（14;18）阳性10例中,GCB8例,non-GCB2例,差异有统计学意义（P=0．031）。t（14;18）阳性及bcl-2基因扩增的病例bcl-2表达均增高。在36例正规CHOP治疗的病例中,bcl-2扩增13例,无扩增23例,bcl-2扩增的13例之治疗结果显效、部分有效、无效率分别为3例（23．1％）、4例（30．8％）和6例（46．2％）;临床分期情况为Ⅰ-Ⅱ期1例（7．7％）,Ⅲ-Ⅳ期12例（92．3％）,这两项指标与bcl-2不扩增的相比差异均有统计学意义（P=0．019、0．046）。结论t（14;18）易位及bcl-2基因扩增均是引起DLBCL之bcl-2蛋白表达的原因,bd-2阳性者与预后有关的原因难以确定,可能是由于引起其阳性表达的原因不同所致;bcl-2基因扩增与治疗效果较差及临床分期较晚有关;FISH检测t（14;18）染色体易位可用于DLBCL的分类。     

儿童散发性伯基特淋巴瘤的分子遗传学特征分析

目的 研究儿童散发性伯基特淋巴瘤(BL)的分子遗传学特征及其诊断和鉴别诊断.方法 对64例儿童BL和6例儿童弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)进行免疫组织化学染色(SP法)和荧光原位杂交(FISH)技术检测c-myc、bcl-2、bcl-6、IgH、myc/lgH及bcl-2/IgH基因重排的情况.根据细胞起源分类分为生发中心组(GC组)、生发中心晚期组(late-GC组)、生发中心后组(post-GC组).结果 BL表达CD20(64例)、CD10(63例)、bcl-6(62例)、MUM1(15例)、bcl-2(0例).GC组49例(76.6%)、late-GC组14例(21.9%)、post-GC组1例(1.6%).c-myc基因断裂54例(93.1%);IgH基因断裂48例(82.8%);c-myc与IgH基因同时断裂并myc/IgH基因易位46例(85.2%);c-myc基因断裂、IgH和myc/IgH基因正常4例(7.4%);c-myc、IgH和myc/IgH基因均正常4例(7.4%);bcl-2基因正常61例(100%);bcl-6基因正常59例,1例断裂并扩增具有BL的病理形态和免疫表型特征,同时具有c-myc基因断裂,将病理诊断修改为介于DLBCL和BL之间的未分类的B细胞淋巴瘤(DLBCL/BL).6例DLBCL中c-myc基因断裂2例;2例bcl-6基因扩增,其中1例伴c-myc基因断裂;无bcl-2/IgH基因重排.结论 儿童散发性BL大多数来源于生发中心B细胞,c-myc基因的断裂是其主要分子遗传学改变.应用FISH进行多基因的检测,有助于提高儿童BL的诊断和鉴别诊断水平.     

Comparative immunohistochemical analysis of pediatric Burkitt lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma

Burkitt lymphoma (BL) and diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) account for nearly all pediatric nonlymphoblastic B-cell lymphomas. Because clinical behavior, prognosis, and response to therapy might differ, diagnostic accuracy is important. Morphologic examination often is sufficient, but occasionally, diagnostic ancillary studies are required. In adults, immunophenotyping is useful; however, pediatric data are limited. We characterized the immunohistochemical expression of 6 proteins (c-myc, CD10, bcl-6, bcl-2, CD138, and MIB-1) in pediatric BL (33 cases) and DLBCL (20 cases) with classic morphologic features. Significant differences in c-myc (BL, 30/33 [91%] vs DLBCL, 5/20 [25%]; P < .0001), bcl-2 (BL, 1/25 [4%] vs DLBCL, 7/19 [37%]; P < .02), and mean MIB-1 (BL, 99% vs DLBCL, 56%; P < .0001) expression were observed. There were no significant differences for CD10 (100% expression in BL and DLBCL), bcl-6 (BL, 23/33 [70%] vs DLBCL, 15/20 [75%]), or CD138 (no expression). Thus, pediatric BL and DLBCL have distinctive immunohistochemical profiles, and staining for c-myc, MIB-1, and bcl-2 might be useful in morphologically difficult cases.     

人弥漫性大B细胞淋巴瘤移植瘤模型的建立及生长特性观察

目的 建立人弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞株LY8裸鼠皮下移植瘤模型并观察其生长特性,为探讨淋巴瘤发病机制及治疗策略提供手段.方法 将人DLBCL细胞株LY8种植于裸鼠右前肢肩胛背侧皮下,成瘤后无菌套管针抽吸法抽取约1.5 mm×1.5 mm×1.5 mm大小组织块进行皮下种植,观察成瘤率和组织形态特点;用免疫组织化学EnVision法观察白细胞共同抗原(LCA)、CD20、CD79α、Ki-67、CD3、CD45RO、bcl-6、MUM-1、CD10、bcl-2等指标的表达;用聚合酶链反应(PCR)扩增检测移植瘤和LY8细胞株的IgH基因克隆性重排和针对3个微卫星位点(D14S68、D18S69、D20S199)的基因组DNA微卫星序列.结果 运用LY8细胞株成功进行了人DLBCL的种植,且生长稳定,已传至第9代,共移植裸鼠124只,其中114只成瘤,成瘤率达91.9%.每代移植瘤的生长特点均相似,于移植后约2周长出,约在3周左右长至最大径1.3 cm,随后即进入快速生长期,4周左右达2.0 cm大小.移植瘤形态符合DLBCL,肿瘤细胞免疫组织化学显色呈LCA、CD20、CD79α、bcl-6、MUM-1、CD10、bcl-2阳性;裸鼠移植瘤与LY8有相同的IgH基因克隆性重排,经3个位点的微卫星引物扩增后获得相同片段的产物.表明移植瘤与人DLBCL细胞相似,并证实了其生长的稳定性和可重复性.结论 建立了可稳定传代的DLBCL的裸鼠模型,为研究人DLBCL的生物学特性及试验治疗提供了较理想的动物模型.

Abstract：

Objective To establish a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL)-mice model using human DLBCL cell line LY8, to investigate its characteristics of growth and to provide a model for in vivo study of DLBCL pathogenesis and treatment. Methods LY8 cells were injected subcutaneously into the right flank of nude mice. Harvested tumor tissues were cut into small pieces of 1.5 mm × 1.5 mm × 1.5 mm and implanted subcutaneously into nude mice. Tumor growth was visualized and the histologic characteristics were documented. Expression of LCA, CD20, CD79α, Ki-67, CD3, CD45RO, bcl-6, MUM-1, CD1O and bcl-2 were examined by using immunohistochemistry. IgH clonal rearrangement and status of three microsatellite loci (D14S68, D18S69, D20S199) in the xenografted tumor samples and the parental cell line LY8 were detected using PCR amplification followed by PAGE. Results The subcutaneous xenograft DLBCL model was successfully established by using cell line LY8, and a stable growth was achieved up to the 9th generation. The tumor in each generation showed similar growth characteristics and the rate of subcutaneous tumor formation was 91.9% (114/124). The tumor growth was observed from the 2nd week after implantation, reaching 1.3 cm in major diameter at the 3rd week and 2. 0 cm at the 4th week. The tumor had identical morphological characteristics with those of human DLBCL, and expressed LCA, CE0,CD79α, bcl-6, MUM-1, CD1O and bcl-2. The tumor of xenograft mice and cell line LY8 showed identical IgH rearrangement and microsatellite length. Conclusions A human DLBCL bearing mouse model was successfully established. The mice model is similar to human counterpart with high stability and repeatability. Therefore, it provides an ideal animal model for in vivo studies of the biological characteristics and treatment of DLBCL.     

Prognostic significance of CD44 expression in diffuse large B cell lymphoma of activated and germinal centre B cell-like types: a tissue microarray analysis of 90 cases

BACKGROUND: Gene expression profiling of diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) revealed three disease types: germinal centre B cell-like (GC), activated B cell-like (ABC), and a "third" type. Expression of CD44 variant isoforms (CD44v) is associated with an unfavourable clinical outcome in DLBCL, but previous studies did not consider the clinicopathological heterogeneity of this disease. AIMS: To analyse the expression and prognostic significance of CD44 in DLBCL types. METHODS: A tissue microarray (TMA) comprising 90 DLBCLs was constructed. CD10, CD20, bcl-2, bcl-6, CD44 standard isoform (CD44s), and CD44v4, CD44v6, and CD44v9 were analysed immunohistochemically and correlated with clinical follow up. RESULTS: TMA expression of CD10, CD20, bcl-2, and bcl-6 showed 100% concordance with results from conventional sections in 60 cases. Samples were segregated into 22 GC (bcl-6+/CD10+/bcl-2-), 25 ABC (bcl-6-/CD10-/bcl-2+), and 35 unclassifiable DLBCLs. Overall survival (OS) at 30 months was 89%, 44%, and 58% in GC, ABC, and unclassified types, respectively. CD44v6 was coexpressed with bcl-2, appeared predominantly on bcl-6 negative cases, and correlated with disease stage. Cases negative for CD44s could be separated into CD44v6 negative (OS, 82% at 70 months) and CD44v6 positive (OS, 58%). CONCLUSIONS: TMA technology is useful for immunophenotyping and clinicopathological analysis of large lymphoma populations. The GC phenotype of DLBCL is of independent prognostic significance for OS. Expression of CD44v6 correlates with disease stage, and might contribute to lymphoma dissemination. CD44v6 is expressed predominantly in ABC DLBCL, and in CD44 negative cases is associated with worse OS.     

弥漫大B细胞淋巴瘤免疫表型分型与预后的关系

目的 探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的免疫表型之生发中心B细胞样（GCB）和非GCB两个亚型的特征及其与DLBCL预后的关系。方法 根据肿瘤细胞免疫组织化学EnVision法标记CD10、bc1-6、MUM-1的表达情况,将133例DLBCL分为GCB和非GCB两个亚型。对以下指标的5年总生存率（OS）及5年无进展生存率（PFS）进行了比较：（1）CD10、bc1-6和MUM-1的阳性和阴性病例;（2）GCB亚型与非GCB亚型;（3）不同国际预后指数（IPI）分组中GCB亚型与非GCB亚型的关系。结果 133例DLBCL中,44例（33．1％）CD10阳性,48例（34．6％）bc1-6阳性,60例（45．1％）MUM-1阳性。CD10阳性DLBCL患者的5年OS及PFS均明显高于CD10阴性患者（P=0．041和0．031）;bc1-6阳性DLBCL患者的PFS明显高于bc1-6阴性患者（P=0．044）,MUM．1阳性DLBCL患者的5年0s及PFS均明显低于MUM-1阴性患者（P=0．031和0．028）。GCB型54例（40．6％）,非GCB型79例（59．4％）。GCB型5年OS及PFS均明显高于非GCB型（P=0．004和0．003）。国际预后指数（IPI）0-1分组及2-5分组中,GCB型5年OS及PFS均明显高于非GCB型（IP10-1分组P=0．019和0．014,2-5分组P=0．006和0．009）,其中IPI2-5分组中的非GCB预后最差。结论 DLBCL亚型及其与IPI联合分析可以作为预测患者预后的有效指标。