布地奈德对哮喘气道重塑大鼠尾加压素-Ⅱ及mRNA表达的影响

 目的 探讨布地奈德对哮喘气道重塑大鼠尾加压素-Ⅱ（U-Ⅱ）及其mRNA表达的影响。方法 24只清洁级雄性SD大鼠分为3组：对照组、哮喘组和布地奈德组。以卵清白蛋白(OVA)致敏激发法制备哮喘大鼠气道重塑模型,应用图像分析技术测定支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中U-Ⅱ的浓度,免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测U-Ⅱ蛋白和U-Ⅱ mRNA在肺组织中的表达。结果 ①哮喘组Wat和Wam均显著高于对照组,布地奈德组Wat和Wam均显著低于哮喘组（均P <0.01）;②哮喘组血清和BALF中U-Ⅱ的浓度均显著高于对照组,布地奈德组上述指标均显著低于哮喘组（均P <0.01）;③免疫组化及RT-PCR结果显示,肺组织中U-Ⅱ蛋白及其mRNA的表达,哮喘组显著高于对照组,布地奈德组较哮喘组显著减弱（均P <0.01）;④相关性分析显示,大鼠肺组织Wat与U-Ⅱ蛋白、U-Ⅱ mRNA表达呈正相关（均P <0.01）,Wam与U-Ⅱ蛋白、U-Ⅱ mRNA表达呈正相关（均P<0.01）。结论 布地奈德对哮喘气道重塑的拮抗作用,可能通过抑制U-Ⅱ的表达起作用。
     

清肺口服液对RSV感染哮喘急性发作小鼠肺组织炎症及气道反应性的影响

目的:探讨清肺口服液对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘急性发作小鼠模型肺组织炎症及气道反应性的影响。方法:60只雄性6~8周龄Balb/C小鼠,每组10只,随机分为正常组,模型组,清肺口服液高、中、低剂量组(2.34,1.17,0.59 g·kg^-1·d^-1),利巴韦林组(0.1 g·kg^-1·d^-1),共6组,卵细胞(OVA)致敏及雾化激发哮喘模型,经RSV隔日滴鼻连续3次感染,获得RSV感染哮喘模型;治疗组予清肺口服液分高、中、低剂量ig;正常予等量生理盐水ig:阳性药组给予利巴韦林注射液ip。末次激发24 h后,用Buxco RC系统检测小鼠气道反应性;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行嗜酸细胞分析;肺组织经HE染色,PAS染色,VG染色评估炎症反应。结果:与正常组比较,模型组小鼠BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS%)明显升高,气道反应性较正常组明显增高(P<0.01),模型组小鼠肺组织呈现哮喘合并感染典型改变,组织充血水肿,分泌物显著增多;气道周围炎性细胞浸润、胶原增生显著;与模型组比较,清肺口服液中剂量组BALF中EOS%明显降低,清肺口服液及利巴韦林干预均可显著改善气道高反应性(P<0.05),其中中剂量清肺口服液效果尤为显著,气道功能与正常组相比差异无显著性,清肺口服液中剂量可以明显减轻小鼠肺组织充血水肿及炎性细胞浸润,气道分泌物及气道周围胶原增生较模型组明显改善。结论:中剂量清肺口服液可以明显减轻RSV感染哮喘急性发作小鼠肺组织炎症及气道高反应性。     

益肺化痰汤减轻哮喘脾虚证大鼠气道高黏状态的作用与机制

目的 探讨益肺化痰汤减轻哮喘脾虚证大鼠气道高黏状态的作用与机制。方法 将55只8~9周龄、清洁级SD大鼠采用中医脾虚证复合西医哮喘动物建模方法制备哮喘脾虚证模型,造模成功后采用随机数字表法分为模型组、地塞米松组、益肺化痰汤低、中、高剂量组,另取11只SD大鼠记为正常组。地塞米松组予0.087 5 mg·kg^-1醋酸地塞米松灌胃,益肺化痰汤低、中、高剂量组分别予0.8、1.6、3.2 g·kg^-1益肺化痰汤流浸膏灌胃,模型组和正常组分别予10 mL·kg^-1蒸馏水灌胃。每日1次,共8周。观察各组一般情况;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-13（IL-13）、γ干扰素（IFN-γ）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肺组织病理改变;阿尔辛蓝-过碘酸雪夫（AB-PAS）染色观察大鼠气道杯状细胞增生与黏液分泌状况;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠肺组织转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、Smad2、Smad3、黏蛋白5AC（MUC5AC）、黏蛋白5B（MUC5B） mRNA表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肺组织TGF-β₁、Smad2、Smad3、MUC5AC、MUC5B蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠存在体质量下降、肌肉消瘦、食量减少、饮水增多、肛温升高、倦怠少动及游泳耐力下降等脾虚证症状,同时伴随喘促、点头等呼吸困难症状。与正常组比较,模型组大鼠BALF中IL-4和IL-13水平显著上升,IFN-γ水平显著下降（P<0.01）,气道黏膜层及黏膜下层见大量炎性细胞浸润、气管平滑肌明显增厚、黏膜处存在大量上皮细胞增生、变形及脱落现象,肺组织病理评分显著上升（P<0.01）,气道可见大量杯状细胞增生、且形成大量黏液栓,气道阳性相对着色面积、TGF-β₁、Smad2、Smad3、MUC5AC、MUC5B mRNA和蛋白质相对表达量显著上升（P<0.01）;与模型组比较,地塞米松组和益肺化痰汤各剂量组BALF中IL-4、IL-13水平下降,IFN-γ水平上升（P<0.05,P<0.01）,气道黏膜层及黏膜下层炎性细胞浸润逐渐减少、气管平滑肌增厚现象逐渐减少、黏膜处上皮细胞增生、变形及脱落现象逐渐减少,肺组织病理评分显著下降（P<0.01）,气道杯状细胞增生逐渐减轻,气道阳性相对着色面积、TGF-β₁、Smad2、Smad3、MUC5AC、MUC5B mRNA和蛋白表达下降（P<0.05,P<0.01）;与地塞米松组比较,益肺化痰汤低剂量组上述指标差异无统计学意义,益肺化痰汤中、高剂量组改善更明显（P<0.05,P<0.01）;上述指标改善益肺化痰汤各剂量组呈剂量依赖性。结论 益肺化痰汤可减轻哮喘脾虚证大鼠气道高黏状态,可能与抑制TGF-β₁、Smad2、Smad3、MUC5AC、MUC5B表达,下调IL-4和IL-13水平,上调IFN-γ水平相关。     

金龙固本合剂治疗支气管哮喘缓解期113例

目的： 观察金龙固本合剂治疗支气管哮喘缓解期（宿痰伏肺证）的临床疗效。 方法： 将223例支气管哮喘缓解期患者随机分为治疗组和对照组,治疗组采用金龙固本合剂口服治疗,对照组不用药物干预,疗程均为120 d,随访期1年。观察两组治疗前后国际哮喘控制测试表（ACT）评分、1秒钟用力呼气量（FEV₁）和最大呼气流量（PEF）变化。 结果： 治疗组可显著改善哮喘缓解期患者的ACT评分、FEV₁和PEF,且疗效持久（P<0.01）;治疗组与对照组比较ACT评分和FEV₁有显著差异（P < 0.01）。 结论： 金龙固本合剂治疗支气管哮喘缓解期患者（宿痰伏肺证）具有良好疗效。     

哮喘大鼠IKK/NF-kB信号通道及银杏叶提取物的调控作用

 目的探讨IkB激酶mRNA(IKKβmRNA)、核转录因子(NF-kB)、IL-5与气道炎症的关系及银杏叶提取物(Egb)对支气管哮喘(简称哮喘)炎症影响的机制。方法36只SD雄性大鼠随机分为正常组(C组)、哮喘组(A组)、Egb治疗组(E组)。复制哮喘大鼠模型,光镜观察病理形态学改变;分类计数法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞计数;分别以原位杂交法和免疫组化检测肺组织IKKβmRNA和NF-kB p65蛋白活性;ELISA法检测血清及BALF中IL-5的浓度。结果A组IKKβmRNA及NF- kB p65表达量均显著高于C组(均为P＜0.01);E组IKKβmRNA和NF-kB p65表达均显著低于A组(均为P＜0.01);A组血清及BALF中的IL-5的浓度均显著高于C组;E组血清及BALF中的IL-5的浓度均显著低于A组(均为P＜0.01);A组BLAF中的嗜酸细胞(EOS)显著高于C组(P＜0.01);E组BLAF中的EOS显著低于A组(P＜0.01)。结论哮喘组肺组织IKKβmRNA,NF-kB p65表达显著增强,Egb能有效抑制哮喘大鼠肺组织IKKβmRNA表达及NF-kB p65的活性,提示Egb能抑制IKK/NF-kB信号通道的活性,从而减轻气道炎症。     

健脾补肺方对幼龄哮喘大鼠cAMP/PKA/CREB信号通路的影响

目的 观察健脾补肺方对卵蛋白（OVA）致敏并攻击复制的幼龄哮喘大鼠模型气道炎症、高反应性及环磷酸腺苷（cAMP）信号通路活性的影响。方法 雄性SD大鼠75只,随机选取15只作为正常组,剩余大鼠随机分为哮喘模型组,健脾补肺方组（8.37 g·kg^-1·d^-1）,氨茶碱组（40 mg·kg^-1·d^-1）和地塞米松组（0.1 mg·kg^-1·d^-1）,每组15只。用0.2% OVA的氢氧化铝凝胶10点致敏,并以1% OVA生理盐水溶液雾化攻击复制幼龄大鼠哮喘模型,并给予相应的药物处理。小动物肺功能仪观察大鼠气道高反应（AHR）变化,支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数及分类计数观察炎症细胞数量变化,苏木素-伊红（HE）,马松（Masson）和碘酸雪夫氏（PAS）染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素（IL）-4,IL-5,IL-13,γ干扰素（IFN-γ）,肿瘤坏死因子（TNF）-α和血浆中cAMP水平变化;免疫组化法观察肺组织蛋白激A（PKA）蛋白表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）观察肺组织环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB） mRNA和蛋白表达变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠气道阻力（RL）明显增加而Cdyn明显降低（P<0.05）,BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例显著升高,外周血IL-4,IL-5,IL-13,TNF-α水平显著升高而IFN-γ水平显著降低（P<0.01）,肺组织病理改变明显;cAMP水平显著下降,肺组织中PKA和CREB的表达显著下调（P<0.01）。与模型组比较,健脾补肺方可以抑制AHR,降低BALF中的白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例及RL（P<0.05）,改善大鼠肺组织病理改变,增加Cdyn（Cdyn）,上调大鼠血清中cAMP水平和肺组织中 PKA和CREB表达（P<0.01）。结论 健脾补肺方能够改善幼龄哮喘大鼠的AHR,抑制气道炎症,减轻肺组织损伤,其机制可能与上调cAMP/PKA/CREB通路活性相关。     

桑苏饮调控TLR4通路抑制哮喘大鼠气道炎症

目的 探讨桑苏饮调控Toll样受体4（TLR4）通路对哮喘大鼠气道炎症的抑制作用。方法 48只SD大鼠中选取40只建立哮喘模型,并按照随机数表法等分为模型组,地塞米松组,桑菊饮低、中、高剂量组5组,剩余8只SD大鼠作为空白组。地塞米松组予以0.005 g·kg^-1灌胃,桑苏饮低、中、高剂量组分别予以2.1,4.2,8.4 g·kg^-1桑苏饮灌胃（给药体积0.01 L·kg^-1）,模型组和空白组分别予以给药体积0.01 L·kg^-1灌胃生理盐水,均每天1次,共7 d。比较干预后各组大鼠过敏反应分级;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠干预后血清,支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞介素-1β（IL-1β）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,γ-干扰素（IFN-γ）水平;苏木精-伊红（HE）染色观察各组肺组织病理改变,比较肺组织炎症细胞浸润评分;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组肺组织TLR4,核转录因子-κB（NF-κB）mRNA表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组肺组织TLR4,NF-κB蛋白表达及磷酸化（p）-NF-κB水平。结果 模型组过敏反应分级、肺组织病理改变较空白组加重,其余各组较模型组均有所减轻;模型组血清,BALF IL-1β,TNF-α水平均高于空白组,其余各组均低于模型组（P<0.01）;模型组血清,BALF IFN-γ水平均低于空白组,其余各组均高于模型组（P<0.05,P<0.01）;模型组肺组织炎症细胞浸润评分,肺组织TLR4,NF-κB mRNA与蛋白表达,p-NF-κB蛋白水平均高于空白组,其余各组均低于模型组（P<0.01）,差异有统计学意义。结论 桑苏饮可抑制哮喘大鼠过敏反应、肺组织病变和气道炎症,可能是通过抑制TLR4通路,下调TLR4,NF-κB mRNA与蛋白表达,降低p-NF-κB水平实现。     

人参皂苷Rb1对术后疲劳综合征老年大鼠海马神经营养因子的影响

目的 研究术后疲劳综合征（POFS）老年大鼠海马神经营养因子（NTF）水平动态变化及人参皂苷Rb₁的抗疲劳机制。方法 将96只老年雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和人参皂苷Rb₁干预组,每组再按时间点分为术后6 h及术后1、3、7 d组。术后对应时间点进行旷场试验,并通过Real-time PCR检测大鼠海马神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）的mRNA表达;放射免疫法检测NGF和BDNF蛋白表达;电镜观察海马CA1区超微结构变化。结果 模型组与假手术组比较,旷场试验中大鼠穿越格子数减少（P＜0.01）,休息时间延长（P＜0.01）;NGF和BDNF mRNA表达降低（P＜0.05、0.01）,其相应的蛋白表达也降低（P＜0.05）。人参皂苷Rb₁组与模型组比较,旷场试验中大鼠穿越格子数增多（P＜0.05）,NGF和 BDNF mRNA表达升高（P＜0.05、0.01）,其相应的蛋白表达也升高（P＜0.01）。电镜结果显示,模型组与假手术组比较,大鼠海马神经元超微结构受损,人参皂苷Rb₁组得到相应改善。结论 POFS老年大鼠海马NTF表达降低,神经元存在一定程度损伤,人参皂苷Rb₁对POFS老年大鼠有一定改善作用。     

五味沙棘散对卵清蛋白诱导的过敏性支气管哮喘大鼠的保护作用及机制

目的 探究五味沙棘散对卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的过敏性哮喘大鼠的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松（0.5 mg/kg）组和五味沙棘散（0.5、2.0 g/kg）组,建立OVA诱导的大鼠早期支气管哮喘模型,苏木素-伊红（HE）和Masson染色观察支气管病理情况及纤维化程度;免疫组化检测支气管间隙连接蛋白43（connexin 43,Cx43）的表达和分布;ELISA检测血清中免疫球蛋白E（immunoglobulin E,IgE）和白细胞介素-13（interleukin-13,IL-13）水平;亚甲基蓝法和WSP-1荧光探针法测定血清中硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）水平。建立CdCl₂诱导的支气管上皮BEAS-2B细胞损伤模型,MTT法检测细胞活性;Hoechest 33342染色法观察细胞核形态变化;MitoSOX染色检测细胞线粒体活性氧（mitochondrial reactive oxygen species,mtROS）水平;Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3,Caspase-3）、核因子红细胞系2相关因子（nuclear factor erythroid 2-related factor,Nrf2）和Kelch样ECH关联蛋白1（Kelch like ECH associated protein 1,Keap1）蛋白表达。结果 五味沙棘散能够减少支气管黏膜上皮细胞脱落和黏液分泌（P＜0.001）,降低胶原纤维的沉积和Cx43的表达及分布（P＜0.05、0.01、0.001）,降低血清中IgE、IL-13水平（P＜0.05）,升高血清中H₂S水平（P＜0.05、0.01）。五味沙棘散含药血清呈剂量相关性地抑制CdCl₂诱导的BEAS-2B细胞凋亡及mtROS水平（P＜0.01、0.001）,上调Caspase-3和Nrf2蛋白表达（P＜0.05、0.01）,下调Keap1蛋白表达（P＜0.01）。结论 五味沙棘散对OVA诱导的哮喘大鼠和CdCl₂诱导的支气管上皮细胞凋亡均具有保护作用,其机制可能与调控Nrf2/Keap1信号通路有关。     

当归芍药散对非酒精性脂肪肝大鼠TLR4/MyD88/JNK信号通路的影响

目的 探讨当归芍药散对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠的治疗作用及其机制。方法 60只清洁级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、易善复组（0.144 g·kg^-1）及当归芍药散低、中、高剂量组（2.44,4.88,9.76 g·kg^-1）。通过喂饲高脂饲料复制NAFLD大鼠模型,造模同时给予相应药物治疗,8周后,采集血清和肝组织标本,检测血清中胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）的含量或活性变化及肝脏TC,TG,游离脂肪酸（FFA）的含量变化;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏中Toll样受体4（TLR4）,髓样分化因子88（MyD88）,c-Jun氨基末端激酶（JNK）的基因和蛋白表达及l磷酸化JNK（p-JNK）的蛋白表达情况;苏木素-伊红（HE）染色和油红O染色观察肝脏病理形态学变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清中TC,TG,ALT,AST,TNF-α以及肝组织中TC,TG,FFA的含量或活性、肝脏中TLR4,MyD88和JNK的mRNA和蛋白表达及p-JNK的蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,IL-10的含量均显著降低（P<0.01）;与模型组比较,当归芍药散各剂量组大鼠血清中TC,TG,ALT,AST,TNF-α和肝组织中TC,TG,FFA的含量或活性、肝脏中TLR4,MyD88,JNK的mRNA和蛋白表达及p-JNK的蛋白表达水平均明显降低（P<0.05,P<0.01）,IL-10的含量均明显升高（P<0.05,P<0.01）,HE染色和油红O染色结果提示其能明显减轻肝脏脂肪变性程度。结论 当归芍药散可能通过抑制TLR4/MyD88/JNK信号通路,减轻炎症反应来治疗NAFLD。     

银杏叶提取物对大鼠哮喘模型中CyclinD1表达的影响

目的：探讨银杏叶提取物对大鼠哮喘模型中CyclinD1表达的影响及其机制。方法：将60只大鼠随机分为正常组、哮喘组和干预组,应用卵蛋白激发大鼠建立哮喘气道重塑模型。采用免疫组化技术检测大鼠气道中CyclinD1的表达。结果：哮喘组中可见气道壁有明显炎症细胞浸润,气道壁的厚度增加,CyclinD1表达水平显著高于正常组和干预组（P〈0．05）。干预组CyclinD1表达水平较哮喘组明显下降。结论：CyclinD1参与了哮喘气道重塑的发生,银杏叶提取物可能通过影响CyclinD1的表达进而影响气道重塑过程。     

止喘汤对哮喘大鼠模型气道重构中MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:观察中药止喘汤对哮喘大鼠气道重构的干预,并探讨其对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法:50只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德(BUD)组、黄芩组及止喘汤组5组。采用卵清白蛋白(OVA)致敏加激发法复制大鼠哮喘模型,苏木精-伊红染色测气道形态学参数,免疫组化染色测定气道壁MMP-9、TIMP-1及IV型胶原含量。结果:哮喘组较正常组大鼠气道壁明显增厚,MMP-9、TIMP-1表达增多(P<0.01)。用中药和BUD干预后大鼠气道壁明显变薄,MMP-9、TIMP-1表达减少,与哮喘组比较有统计学意义(P<0.01);其中复方组肺纤维化轻于单味组,各项指标比较有统计学意义(P<0.05)。大鼠气道壁的厚度、IV型胶原含量、MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP间有相关关系。结论:中药具有干预哮喘大鼠模型气道重构的作用,这些作用可能是通过调节MMP-9和TIMP-1而实现的,基于中医基本病机证型的复方优于单味中药。     

针刺对哮喘大鼠气道重建模型气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白表达的影响

目的:观察针刺抗哮喘气道重建效应,并探讨气道平滑肌细胞T型钙通道在哮喘气道重建效应中的作用机制。方法:将32只大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、假针刺组,每组8只。后3组均造模:大鼠一次性腹腔注射卵蛋白10mg和氢氧化铝200mg的生理盐水混悬液1mL以及1mL灭活百日咳菌苗处于致敏状态14d。模型组第15天起连续14d每天超声雾化吸入1%卵蛋白诱发哮喘30min。针刺组大鼠造模后亦连续14d每天超声雾化吸入1%卵蛋白前针刺"大椎""风门""肺俞",每次30min,每2天1次。假针刺组与针刺组取穴及疗程相同,造模后每天超声雾化吸入1%卵蛋白前针刺穴位皮肤1mm,不留针。正常组不予干预处理。检测各组大鼠气道阻力评价呼吸功能,采用肺组织病理学检测评价气道重建情况,并运用免疫组化技术检测大鼠气道平滑肌T型钙通道3个亚单位Cav3.1、Cav3.2、Cav3.3蛋白表达情况。结果:①模型组气道阻力高于正常组与针刺组(均P<0.05),而针刺组气道阻力低于假针刺组(P<0.05)。②模型组气道壁厚度与气道基底膜周径比值(Awt/Pbm)高于正常组及针刺组(均P<0.05),而针刺组Awt/Pbm比值小于假针刺组(P<0.05)。模型组气道外径与气道内径比值(Po/Pi)高于正常组和针刺组(均P<0.05),针刺组Po/Pi比值小于假针刺组(P<0.05)。③模型组气道平滑肌细胞Cav3.1、Cav3.2平均光密度均高于正常组、针刺组(均P<0.05),模型组气道平滑肌细胞Cav3.3平均光密度高于正常组(P<0.05),低于假针刺组(P<0.05)。结论:针刺能抑制哮喘气道重建,降低气道阻力,抑制气道平滑肌增生,其机制可能与抑制气道平滑肌细胞T型钙通道蛋白,尤其是Cav3.1蛋白表达水平相关。     

射干麻黄汤对哮喘大鼠气道重塑及TNF—α、IL-17的影响

目的观察射干麻黄汤对哮喘大鼠模型气道重塑和TNF-α、IL-17的影响。方法采用卵蛋白（OVA）联合雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,50只SD大鼠随机分为5组。观察治疗后各组大鼠的TNF-α、IL-17含量以及大鼠气道壁厚度。结果地塞米松组及中药组大鼠TNF-α（1．29±0．16,0．84±0．19）、IL-17（1．42±0．44,0．75±0．27）与模型空白组TNF-α（1．68±0．21）、IL-17（2．19±0．34）相比较明显降低（P〈0．01）,且中药组降低的幅度明显大于地塞米松组（P〈0．05）;在气道壁厚度改善方面,中药组的疗效明显好于地塞米松组,差异对比具有统计学意义（P〈0．05）。结论射干麻黄汤可以有效抑制哮喘大鼠的TNF-α、IL-17质量浓度达到抑制炎症的目的,从而缓解哮喘大鼠气道重塑的进程。     

止喘汤对哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响

[目的]观察早期应用中药复方对哮喘气道炎症和气道重塑的治疗作用。[方法]40只SD大鼠随机分为4组:正常组、哮喘组、布地奈德(BUD)组及止喘汤组,采用卵蛋白(OVA)致敏加激发法复制慢性哮喘模型,观察各组大鼠外周血(PB)、支气管肺泡灌洗液(BAL)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数的变化情况,同时对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色测定支气管壁周围EOS个数及气道壁厚度。[结果]哮喘组与正常组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显升高,气道壁明显增厚(P0.01)。药物干预后,干预组与哮喘组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显降低,气道壁明显变薄(P0.01);且药物干预组之间相比较无统计学差异(P0.05)。[结论]止喘汤不但能抑制哮喘气道炎症,而且还具有干预气道重塑的作用。     

六味地黄颗粒协同辅舒酮吸入对哮喘大鼠气道炎症的抑制作用

目的:研究滋阴补肾代表方六味地黄颗粒协同辅舒酮吸入对大鼠哮喘模型过敏性气道炎症的作用。方法:W istar大鼠随机分成6组,除正常动物对照组外,其余各组均以卵蛋白(OVA)辅以氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘,建立哮喘模型。从实验第8天开始,给药组辅舒酮喷雾给药,六味地黄颗粒灌胃给药,正常组和模型组灌服生理盐水。正常组用生理盐水替代卵蛋白进行注射和吸入。结果:六味地黄颗粒加不同剂量辅舒酮组大鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞均比哮喘模型对照组低,其差异均具有显著性意义(P<0.05)。肺支气管病理切片表明六味地黄颗粒协同不同剂量辅舒酮雾化吸入均可减轻特异性的致敏原所诱发的炎症和组织损伤。结论:六味地黄颗粒协同辅舒酮吸入具有减轻哮喘气道慢性炎症的作用。     

椒枝软胶囊对哮喘大鼠Muc5ac mRNA表达的影响

目的:探讨椒枝软胶囊对哮喘气道黏蛋白(Muc5ac)mRNA表达的影响。方法:将健康雄性SD大鼠48只随机分为空白对照组、模型组、强的松组、椒枝软胶囊高剂量组、椒枝软胶囊中剂量组、椒枝软胶囊低剂量组,除空白对照组外,以卵蛋白氢氧化铝混悬液腹腔+多点皮下注射,卵蛋白雾化攻击制作哮喘大鼠模型,从第13天起给予相应药物5天,末次激发后48h处死大鼠,留取肺组织,荧光定量PCR法测定Muc5ac mRNA。结果:哮喘模型组、椒枝软胶囊低、中、高剂量组、强的松组CT值均低于空白对照组(P0.05);强的松组、椒枝软胶囊中、高剂量组均高于哮喘模型组(P0.05);椒枝软胶囊中、低剂量组均低于强的松组,(P0.05);结论:椒枝软胶囊可下调哮喘大鼠气道黏蛋白Muc5ac的表达,从而减少气道黏蛋白分泌。     

中医分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构基质金属蛋白酶-9及其抑制剂表达影响的研究

目的：利用免疫组化、Western Blot和实时荧光定量PCR方法检测哮喘分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构时肺组织中基质金属蛋白酶MMP-9及其抑制剂TIMP-1表达的影响。方法：SD大鼠随机分成7组,即正常组（Z组）、哮喘组（X组）、序贯治疗1组（A1组）、序贯治疗2组（A2组）、序贯治疗3组（A3组）、孟鲁司特钠组（M组）、布地奈德组（B组）,除Z组外,其余各组均以卵蛋白（OVA）辅以氢氧化铝为佐剂,与第1、8、15天注射致敏,22天后隔天雾化吸入卵蛋白8周激发哮喘,建立哮喘模型。从实验第8天开始,A1组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期和稳定期胃饲生理盐水;A2组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期胃饲金水六君煎加减,稳定期胃饲生理盐水;A3组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期胃饲金水六君煎加减方,稳定期胃饲六味地黄颗粒;M组激发后雾吸沙丁胺醇,缓解期和稳定期胃饲孟鲁司特钠;B组激发后雾吸沙丁胺醇,缓解期和稳定期雾吸布地奈德,X组以生理盐水胃饲代替,干预7周后分别运用免疫组化、Western Blot和实时荧光定量PCR方法对SD大鼠进行MMP-9、TIMP-1定位、定量表达的分析, 拟从分子水平、基因水平上探讨哮喘大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1表达影响的生物学机制。结果：免疫组化法、Western Blot法和实时荧光定量PCR法结果均显示：①与正常组比较,哮喘组大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1表达含量明显增高;②与哮喘组比较,各治疗组对哮喘大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达均有所降低。结论：①哮喘时,MMP-9及TIMP-1表达升高;②中药分期序贯治疗具有通过降低哮喘大鼠肺组织中MMP-9及其抑制剂的表达,调节两者比值,达到阻止气道重构的作用,这可能为其重要机制之一。     

加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型气道重塑及转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响

目的:观察加减乌梅丸颗粒对哮喘大鼠激素干预模型气道重塑及转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号通路的影响。方法:选取30只雄性SD大鼠并随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组、布地奈德组及中药组,除正常组外其余组以卵蛋白致敏、雾化激发方法建立哮喘大鼠模型,除正常组和哮喘组外其余均予地塞米松干预并逐步撤减,布地奈德组予以普米克令舒雾化,中药组予以加减乌梅丸颗粒灌胃。光镜下观察各组大鼠肺组织病理形态学改变,测定气道壁面积百分比(Wat%)、气道平滑肌面积百分比(Wam%),免疫组织化学法比较各组Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)表达水平,蛋白质印迹法和荧光定量PCR法比较TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7蛋白及基因表达水平。结果:与正常组比较,哮喘组大鼠气道壁及平滑肌层明显增厚,管腔变窄,Wat%、Wam%升高,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及基因表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05),Smad7表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与哮喘组比较,地塞米松组Wat%降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、Smad3蛋白及基因表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与地塞米松组比较,中药组Wat%降低,差异有统计学意义(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及基因表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:加减乌梅丸颗粒可通过调控TGF-β1/Smad信号通路从而减少气道平滑肌增生以及CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白沉积,抑制气道壁增厚,延缓气道重塑的发展。