Peutz—Jeghers综合征中表达及临床意义Brgl蛋白的

目的探讨Peutz—Jeghers综合征（PJS）中Brgl蛋白的表达及其在PJS息肉发展过程中的作用。方法应用免疫组化法检测Brgl蛋白在72例PJS息肉组织、12例正常小肠黏膜组织、30例小肠癌组织中的表达,并探讨其与PJs息肉发生、发展及癌变的关系。结果Brgl蛋自在小肠癌组中的阳性表达率为76．67％,PJS息肉组织为54．17％,正常小肠黏膜组织为16．67％;PJS息肉组和正常小肠黏膜组Brgl蛋白阳性表达差异有统计学意义（P〈0．05）;PJS息肉组和小肠癌组Brgl蛋白阳性表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Brgl蛋自在小肠癌组织中存在过高表达,在PJS息肉组织中存在高表达,且可能是PJS息肉癌变的关键因子之一。     

Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达及意义

目的进一步探讨结肠癌的发生、发展机制。方法应用免疫组织化学染色法检测69份结肠癌组织及其对应癌旁良性组织、23份转移淋巴结组织中Ezrin蛋白、Ki-67蛋白表达,分析Ezrin蛋白表达与结肠癌临床病理特征及Ki-67蛋白表达的关系。结果Ezrin、Ki-67蛋白在结肠癌组织及转移淋巴结组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织（P均〈0．01）,Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达与组织分化程度及有无淋巴结转移、浆膜侵犯有关（P均〈0．01）;Ezrin蛋白与Ki-67蛋白表达呈显著正相关,P〈0．05（r=0．317）。结论Ezrin蛋白在结肠癌发生、发展中起重要作用;此为结肠癌的分子靶向治疗提供了依据。     

p28 GANK在结肠癌中的表达及其意义

背景:结肠癌是消化系统常见恶性肿瘤之一。p28GANK促进人类多种肿瘤恶性演变,然而其在结肠癌中的作用尚未明确。目的:探讨p28GANK在结肠癌中的表达及其意义。方法:纳入2006年1月～2007年2月浙江省湖州市中心医院收治的结肠癌患者78例,应用免疫组化法检测患者癌组织及其相应癌旁非癌组织标本p28GANK的表达情况,分析其在结肠癌和癌旁组织中的表达差异,以及p28GANK表达与结肠癌临床病理特征和预后的关系。结果:p28GANK在结肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织[69.2%(54/78)对15.4%(12/78)](P<0.01)。结肠癌组织p28GANK表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Dukes分期相关(P<0.05)。p28GANK阳性表达与结肠癌患者术后生存期缩短显著相关(P<0.01)。结论:p28GANK表达与结肠癌恶性程度相关,其高表达提示患者预后不良。     

骨形成蛋白-2在结肠癌中的表达及意义

目的研究骨形成蛋白-2（BMP-2）在结肠癌中表达及其与临床病理参数间的关系。方法选取结肠癌标本30例作为肿瘤组，正常结肠黏膜标本15例作为对照组，运用免疫组化法检测肠黏膜组织中BMP-2和Smad蛋白表达。结果BMP-2在正常结肠黏膜中和结肠癌组织的阳性表达率分别为100％（15／15）和53．33％（16／30），两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；Smad1在正常结肠黏膜和结肠癌组织的阳性表达率分别为100％（15／15）和50％（15／30），两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；BMP-2和Smad1在结肠癌中的表达之间无相关性（P〉0．05）；BMP-2和Smad1的表达与患者年龄、性别、有无淋巴结转移和有无远处转移无相关性（P〉0．05）。结论BMP-2和Smad1蛋白存在于正常结肠黏膜组织中，BMP-2和Smad1蛋白表达的改变可能参与结肠癌发生发展过程。BMP-2和Smad1蛋白可能与结肠癌细胞生物学行为无关。     

HSP60和nm23蛋白在结肠癌中的表达及意义

目的探讨热休克蛋白60（HSP60）和nm23蛋白在结肠癌及癌旁组织中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化法分别检测HSP60和nm23蛋白在60例结肠癌、45例癌旁不典型增生及20例正常黏膜组织中的表达,并分析两者的表达水平与结肠癌临床病理因素的关系。结果 HSP60在结肠癌、癌旁不典型增生及正常黏膜组织中的阳性表达率依次降低,分别为78.3%、37.8%、20.0%;相反nm23蛋白的阳性表达率依次增高,分别为56.7%、83.2%、91.7%,两者在组间的表达差异均有统计学意义（P〈0.01）。在癌组织中HSP60的表达与淋巴结转移有关（P〈0.05）,nm23蛋白表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）。HSP60与nm23在结肠癌中的表达无相关性（P〉0.05）。结论 HSP60及nm23蛋白在结肠癌组织中的表达状态与结肠癌发生发展有关,联合检测两者对结肠癌的预后判断具有重要意义。     

结肠肿瘤PTHrP的表达及其与P53蛋白表达关系的研究

目的 研究ＰＴＨｒＰ在肿瘤发生过程中的作用以及ＰＴＨｒＰ和Ｐ５３在结肠腺中表达的关系。方法 用免疫组织化学ＡＢＣ法对６８例结肠组织（３０例结肠腺癌,２０例腺瘤性息肉,１８例正常结肠组织）进行ＰＴＨｒＰ检测,并对其中３０例结肠腺癌进行Ｐ５３检测。结果 结肠癌组ＰＴＨｒＰ的阳性率明显高于腺瘤组（Ｐ〈０．０５）和正常组（Ｐ〈０．０５）。绫 ＰＴＨｒＰ的过度表达与细胞的恶性 经有关,与肿瘤分化程度无明显关     

Galectin-3在结肠癌中的表达及其临床意义

目的检测Galectin-3蛋白在结肠癌中的表达情况,初步探讨其与结肠癌临床病理特征的关系。方法用S-P免疫组化法检测92例结肠癌、20例管状腺瘤和20例正常结肠黏膜组织石蜡标本中Galectin-3蛋白的表达情况。结果Galectin-3蛋白的表达定位于细胞的胞质,着色呈黄色至棕褐色,其在结肠癌组织中的表达明显高于腺瘤组和正常黏膜组,差异有显著性(P0.05),在腺瘤组及正常黏膜组间差异无显著性;Galectin-3蛋白的表达与结肠癌分化程度和淋巴结转移相关(P0.05),而与患者年龄、肿瘤大小无关。结论Galectin-3蛋白高表达的结肠癌具有更高侵袭性和淋巴结转移能力,Galectin-3蛋白的差异表达可能与结肠癌的发生发展及转移有关。     

结肠癌组织中细胞周期蛋白E和增殖细胞核抗原表达的研究

目的研究细胞周期蛋白E(CyclinE)和增殖细胞核抗原(PCNA)在结肠癌组织中的表达及二者之间的关系。方法采用原位杂交法和免疫组化S-P法,对40例结肠癌、10例结肠腺瘤和10例结肠正常黏膜组织进行CyclinE mRNA和PCNA的检测。结果结肠癌组织中CyclinEmRNA的阳性表达率为62.5%,PCNA指数为(50.09±11.15),均显著高于结肠腺瘤和结肠正常组织(P<0.05);CyclinE mRNA表达阳性组的PCNA指数明显高于CyclinE mRNA阴性组(P<0.05);CyclinE mRNA与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),与肿瘤的分化程度、有无肝转移不相关(P>0.05);PCNA与肿瘤的浸润深度、分化程度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),与有无肝转移无明显相关(P>0.05)。结论CyclinE可作为结肠癌的又一细胞增殖指标,其对结肠癌的发生、发展起重要作用。     

过氧化物体增生激活受体-γ在结肠腺瘤及腺癌中的表达

目的 观察过氧化物体增生激活受体-γ(PPAR-γ)在结肠腺瘤及腺癌中的表达，初步探讨PPAR-γ在结肠肿瘤发病中的作用。方法 采用免疫组化方法分别测定结肠腺瘤及腺癌中PPAR-γ的表达。结果 PPAR-γ主要表达在细胞核中，腺瘤及腺癌患者PPAR-γ的表达均上升，并与分化趋势相反，分化越高，表达越低。结论 PPAR-γ可能与肿瘤的发生、发展有一定的关系。     

结肠癌中雌激素受体和衔接蛋白p66Shc的表达和意义

背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特点及其临床意义。方法:以免疫组化方法检测65例石蜡包埋结肠癌组织及其癌旁非癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达,分析p66Shc蛋白表达与结肠癌临床病理特征的相关性。结果:ER和p66Shc蛋白表达分别定位于细胞核和细胞质,结肠癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达阳性率显著高于癌旁非癌组织(ER:47.7%对0%,P<0.01;p66Shc:49.2%对0%,P<0.01),且两者呈正相关(r=0.43,P<0.05)。p66Shc蛋白表达与结肠癌患者的性别、年龄以及原发肿瘤部位、肿瘤大小、大体类型、浸润深度、淋巴结转移、AJCC分期均无相关性,而与肿瘤组织学分级相关(高分化:22.2%,中分化:47.7%,低分化:75.0%,P=0.046)。结论:结肠癌可能是一种雌激素敏感性肿瘤。雌激素及其受体可能与p66Shc共同参与了结肠癌的发生、发展。     

Sulfone通过转录因子Elk1调节人结肠癌细胞XAF1表达的研究

背景:Sulfone是一个高效的结肠肿瘤化学预防制剂,具有抗肿瘤功能,但其具体作用机制尚未完全明确。目的:探讨Sulfone在转录水平调节X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)表达的作用机制。方法:以Sulfone干预人结肠癌细胞株HCT116,以蛋白质印迹法检测磷酸化ERK1/2(pERK1/2)、XAF1和ERK1/2表达;构建稳定转染pLuc-291质粒以及pLuc-291-18T、pLuc-291-70T、pLuc-291-IRFm质粒的HCT116细胞(分别为转录因子Elk1、c-ETS、IRF结合序列点突变),以荧光素酶报告基因检测Sulfone对XAF1启动子转录活性的调节作用;以染色质免疫沉淀法检测Elk1-XAF1的DNA结合活性;以实时定量PCR检测Elk1 siRNA对XAF1 mRNA表达的影响。结果:Sulfone可显著抑制pERK1/2表达,显著上调XAF1表达。XAF1启动子Elk1结合序列点突变能显著增加Sulfone诱导的XAF1启动子转录活性,而c-ETS和IRF结合序列点突变对Sulfone诱导的XAF1启动子转录活性无明显影响。XAF1启动子区域存在Elk1的特异性结合序列。以Elk1 siRNA抑制Elk1表达能显著增高XAF1mRNA表达。结论:Sulfone通过抑制ERK1/2信号通路下游转录因子Elk1活性,在转录水平上调人结肠癌细胞XAF1表达。     

一氧化氮供体型NSAIDs在结肠癌化学预防中的作用

一氧化氮供体型非甾体抗炎药（NO—NSAIDs）是由特定的化学连接基团将传统NSAIDs与NO供体部分连接而成,其研发最初系用于减少传统NSAIDs的不良反应。NO-NSAIDs对结肠癌细胞株的生长抑制作用较母体化合物强数百倍,并能在动物模型中有效预防结肠癌的发生,作用机制可能涉及对细胞动力学、细胞信号转导和药物代谢酶的影响。动物实验和前期人体研究已证实NO—NSAIDs是安全的。NO—NSAIDs的高效性和安全性决定了其可能成为具有潜力的结肠癌化学预防剂。     

氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116细胞周期通路相关调控因子的影响

背景：氧化苦参碱为中药苦参的主要有效成分，研究显示其对结肠癌细胞具有杀伤作用。目的：观察氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116细胞周期通路相关调控因子的影响，阐明其抗结肠癌作用的分子机制。方法：分别以2、3、4mg／m1氧化苦参碱干预SW1116细胞24h或48h，以流式细胞仪检测细胞周期，以逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白（cyclin）D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）、CDK抑制剂p53、核转录岗子E2F1和S期激酶相关蛋白2（Skp2）mRNA和蛋白水平的表达。结果：氧化苦参碱干预可使SW1116细胞周期阻滞于G0／G1期，cyc1inD1、CDK4、E2F1和Skp2mRNA和蛋白表达显著下降，p53mRNA和蛋白表达显著上升，作用呈剂量和时间依赖性（P〈0．05）。结论：氧化苦参碱可通过影响细胞周期相关通路以抑制人结肠癌细胞增殖。     

环氧合酶—2蛋白在结肠疾病中的表达

长期使用非甾体类抗炎药（ＮＳＡＩＤｓ）的患者结肠癌发病率明显下降,ＮＳＡＩＤｓ能抑制环氧合酶（ＣＯＸ）,ＣＯＸ－２在结肠癌的发生过程中起有作用。目的：调查ＣＯＸ－２在结肠病变中的表达。方法：用免疫组化方法检测正常和病变吉肠组织中ＣＯＸ－２和ＣＯＸ－１蛋白的表达。结果：ＣＯＸ－２蛋白在正常结肠组织中呈低强度表达,在炎症性肠病（ＩＢＤ）、结肠腺癌和结肠癌组织中表达强度明显增高。ＣＯＸ－１蛋白在正常结肠     

Syndecan-1对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

背景:Syndecan-1是表达于上皮细胞表面的一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,在多种肿瘤细胞中的表达下降,与肿瘤的多种生物学行为密切相关,但其在细胞水平上对结直肠癌发展的作用目前尚无深入的研究。目的:评估Syndecan-1对人结肠癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:分别将Syndecan-1高表达质粒和Syndecan-1 siRNA转染人结肠癌细胞株SW620和SW480,分别以转染空载质粒或无关序列作为阴性对照。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮细胞间质转化主要分子标记物E-cadherin的蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,转染Syndecan-1高表达质粒的SW620细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显降低,同时E-cadherin表达升高;转染Syndecan-1 siRNA的SW480细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显升高,同时E-cadherin表达降低。结论:Syndecan-1能抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与上皮细胞间质转化有关。     

PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖中的作用

结肠癌的发生与肠腔内脱氧胆酸引起的DNA损伤有关,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）对DNA损伤具有修复作用.目的：探讨PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖中的作用及其可能机制.方法：选用不同浓度的脱氧胆酸钠、PARP-1抑制剂5-氨基异喹啉酮（5-AIQ）或两者联合分别作用于人结肠腺癌细胞株HT-29.MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,免疫细胞化学染色检测环氧合酶-2（COX-2）、caspase-3、PARP-1蛋白表达.结果：10～50 μmol/L脱氧胆酸钠能促进HT-29细胞增殖,增加COX-2、PARP-1蛋白表达,减低caspaae-3蛋自表达.100μmol/L 5-AIQ单独作用对HT-29细胞增殖无明显影响,但能减低COX-2、PARP-1蛋白表达.与单独作用相比,10μmol/L脱氧胆酸钠与100 μmol/L 5-AIQ联合能显著抑制HT-29细胞生长,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,COX-2、PARP-1蛋白表达减低,caspase-3蛋白表达无明显变化.结论：COX-2与PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖的过程中可能存在相互作用,PARP-1抑制剂5-AIQ可能用于预防脱氧胆酸诱发的结肠癌.     

PIWI蛋白与结肠癌预后的相关性

背景：PIWI蛋白为人类Argonaute蛋白家族的重要成员,与多种恶性肿瘤的发生、发展和预后相关。本课题组前期研究证实PIWIL1、PIWIL3、PIWIL4与结肠癌的发生、发展显著相关。目的：在前期研究的基础上进一步探讨PIWI蛋白与结肠癌预后的相关性。方法：选择183例携带随访信息的结肠癌病例,按癌组织与癌旁组织配对制成组织芯片,以免疫组化方法检测PIWIL1、PIWIL2、PIWIL3、PIWIL4表达。采用Spearman秩相关系数分析PIWI蛋白表达与结肠癌临床病理指标间的相关性;Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验以及Cox比例风险模型分析PIWI蛋白表达与结肠癌预后间的相关性。结果：PIWIL1-4在结肠癌组织胞质中的表达均显著高于癌旁组织（P=0.000）,且与肿瘤T分期呈正相关（P〈0.01）。生存分析显示癌组织PIWIL1低表达者总生存期显著长于高表达者（P=0.036）,但PIWIL1并非结肠癌预后的独立相关因素。结论：PIWI蛋白参与了结肠癌的发生、发展过程,PIWIL1有望作为结肠癌预后的重要分子标记物。     

siRNA沉默p28GANK对结肠癌细胞增殖的影响

背景：研究发现p28GANK表达与结肠癌恶性程度相关,其高表达提示预后不良。然而,p28GANK在结肠癌中的作用尚未完全明确。目的：探讨沉默p28GANK对结肠癌细胞增殖能力的影响。方法：以针对p28GANK基因的慢病毒携带siRNA转染人结肠癌HT29细胞,以蛋白质印迹法检测干扰效果,以MTr法检测细胞增殖,以平板克隆实验检测细胞克隆能力,以流式细胞术检测细胞周期变化。结果：与HT29、Con—HT29细胞相比,Si—HT29细胞中p28GANK蛋白表达水平显著降低;细胞增殖速度显著减缓;细胞克隆数量显著减少;G0／G1期细胞比例显著增多,S期细胞比例显著减少,PI值显著降低（P〈0．05）。结论：沉默p28GANK在结肠癌细胞中的表达可抑制细胞增殖能力,使细胞周期阻滞。p28GANK可作为治疗结肠癌的新靶点。