细胞骨架分子与喉鳞状细胞癌患者复发及预后的关系

目的 观察细胞骨架分子Fascin-1,Ezrin及Paxillin在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织中的表达,并评价三者对喉鳞癌复发风险及预后的预测价值.方法 采用免疫组化Max Vision二步法观察三种蛋白在199例患者喉鳞癌组织中的表达情况,通过非条件Logistic回归及单因素、多因素生存分析,总结三者在喉鳞癌复发风险预测及预后评估中的价值.结果 三种蛋白分别在低分化、颈淋巴转移及临床晚期(Ⅲ+Ⅳ)喉鳞癌组织中表达增强趋势(P值均＜0.05),且三者表达呈正相关趋势(P值均＜0.001).三种蛋白分别在复发组中的表达强度高于未复发组(x2值分别为42.479,43.673和22.261,P＜0.05).三种蛋白联合高表达患者中复发病例构成比为69.1％,高于其他联合表达模式组中的构成比(P ＜0.001),且Fascin-1(比值比为7.89,95％可信区间为2.26～27.53,P=0.001)及Ezrin(比值比为2.51,95％可信区间为1.18 ～5.32,P＜0.001)为影响喉鳞癌复发的独立危险因素.三种蛋白分别高表达患者的5年无瘤生存率均降低(P＜0.05),而三者联合高表达患者5年无瘤生存率更低,为26.4％ (P＜0.05).三种蛋白均为影响患者预后独立危险因素(P＜0.05).结论 Fascin-1,Ezrin,Paxillin不仅与喉鳞癌的恶性进展相关,还与复发风险及预后不良相关.联合检测三者表达情况,有助于喉鳞癌复发风险预测及预后评估.     

高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.     

下调组蛋白去乙酰化酶6对Hep-2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的 观察下调组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylation 6,HDAC6)对人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)Hep-2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用并探讨其体内抗肿瘤机制.方法 将喉鳞癌Hep-2细胞注射入裸鼠皮下,1周后裸鼠荷瘤模型建成.将裸鼠分为3组进行治疗,即空白对照组、空载体组和HDAC6小干扰RNA( siRNA)组,监测肿瘤生长变化.采用免疫组织化学法检测不同组别裸鼠移植瘤瘤体内Ki-67增殖情况的变化.采用Western blot法检测转染HDAC6前后不同组别裸鼠移植瘤组织凋亡相关基因B淋巴细胞-2(bcl-2)及bcl相关X蛋白(bcl-associated x protein,Bax)表达的变化.采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL法)检测转染HDAC6前后裸鼠移植瘤组织凋亡情况的变化.结果 HDAC6 siRNA转染荷瘤裸鼠后,与空载体组及空白对照组相比,HDAC6 siRNA组荷瘤裸鼠肿瘤体积显著下降(F =64.783,P＜0.05);原位杂交、免疫组织化学及Western blot结果表明,HDAC6 siRNA转染组裸鼠肿瘤组织中HDAC6 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P值均＜0.05);Western blot结果显示HDAC6 siRNA转染组裸鼠肿瘤组织中Bax蛋白表达显著上调而Bcl-2的表达则显著下调,三组间比较差异具有统计学意义(P值均＜0.05);免疫组织化学结果显示转染HDAC6 siRNA组Ki-67染色阳性细胞数显著少于空载体组及空白对照组(F=25.793,P＜0.05);TUNEL结果表明,HDAC6转染组中细胞明显发生凋亡.结论 HDAC6 siRNA能有效抑制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤的生长,并降低HDAC6和Bcl-2的表达,提高Bax的表达,为喉鳞癌的分子治疗提供了理论依据.     

缺氧诱导因子1α和环氧化酶2在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨喉鳞癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)和环氧化酶2(cyclooxygenage-2,COX-2)的表达情况及其与患者临床病理资料的关系和对预后的影响.方法 免疫组化Envision二步法检测60例喉鳞癌标本中HIF-1α和COX-2蛋白的表达,15例不典型增生、10例声带白斑、10例声带息肉标本作对照.结合喉鳞癌患者临床和病理资料进行分析.结果 60例喉鳞癌组织中HIF-1α呈高表达为35.0%(21/60),COX-2高表达为38.3%(23/60).两者阳性表达率与不典型增生、声带白斑及声带息肉组相比差异均具有统计学意义(Fisher确切概率法,P值均<0.01).喉鳞癌组织中HIF-1α和COX-2的表达结果 呈正相关(r=0.526,P<0.01).喉癌HIF-1α高、低表达组在临床分期(X2=4.331,P<0.05)及淋巴转移方面(Fisher确切概率法,P<0.05)组间差异具统计学意义;COX-2高、低表达组在T分期及临床分期方面组间差异具统计学意义(X2值分别为6.792和8.539,P值均<0.01).单因素分析HIF-1α高、低表达组间生存率及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为6.003和5.010,P值均<0.05),COX-2高、低表达组生存率差异及无瘤生存率差异均具统计学意义(X2值分别为9.489和6.102,P值均<0.05).多因素分析提示复发及COX-2表达是影响喉癌患者预后的重要危险因素(相对危险度分别为7.104和5.714,P值均<0.01).结论 HIF-1α和COX-2在喉鳞癌发生、发展中起重要作用,两者可能有协同关系.COX-2表达及肿瘤复发情况可能作为评估喉鳞癌预后的重要危险因素.     

喉鳞癌中P糖蛋白表达与细胞增殖、凋亡及预后的关系

目的 探讨P糖蛋白在喉鳞癌组织中表达与肿瘤细胞的增殖、凋亡活性,及其临床病理特征与患者预后的关系。方法 应用免疫组化技术检测86例患者喉鳞癌组织中P糖蛋白、Ki 67的表达,TUNEL法测定喉鳞癌细胞凋亡率。结果 P糖蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率为39.5％(34/86),与喉鳞癌的临床分期、组织学分级、淋巴结转移及患者术后生存率有关(均P＜0.05);P糖蛋白表达阳性组的肿瘤细胞凋亡率比阴性组低(P＜0.05),而增殖率差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 P糖蛋白可能对喉鳞癌细胞的凋亡活性具有一定抑制作用;P糖蛋白阳性表达率对于评估喉鳞癌病程进展及预后具有一定价值。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

喉鳞癌中P21 WAF1/CIP1、C-erbB-2的表达及其临床意义

目的研究喉鳞癌组织中P21WAF1/CIP1、C-erbB-2的表达,探讨它们在喉鳞癌的增殖、侵袭、转移中的作用.方法选取60例喉鳞癌作为研究对象,15例声带息肉组织作为对照,所有标本均切片作HE染色.用链霉素亲生物素-过氧化酶法(s-P法)研究肿瘤及声带息肉组织中P21WAF1/CIP1和C-erbB-2蛋白的表达,显微镜下计数阳性细胞,并分析阳性细胞百分率.结果(1)P21WAF1/CIP1在声带息肉组织中低表达,在喉癌组织中高表达,二者阳性率差异有显著性(P＜0.05);P21WAF1/CIP1在喉癌组织中的表达与肿瘤组织分级(P＜0.05)及临床分期(P＜0.05)有关,与年龄、性别、肿瘤部位及有无淋巴结转移无显著相关性;(2)C-erbB-2在声带息肉组织中低表达,在喉鳞癌中高表达,两者差异有显著性(P＜0.05);C-erbB-2在喉癌组织中的表达与各临床病理因素无显著相关;(3)经Spearman等级相关分析,P21WAF1/CIP1、C-erbB-2在喉鳞癌中表达呈正相关(P＜0.05).结论P21WAF1/CIP1可以作为一种独立的预后预测因子;C-erbB-2在某种程度上反应了肿瘤的生长特性,但不能判断喉癌预后;在喉鳞癌中P21WAF1/CIP1和C-erbB-2间存在正调控机制.     

DJ-1蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及其与复发和转移的关系

目的 探讨喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中DJ-1蛋白表达水平与喉鳞癌临床病理特征的关系.方法 将1995年1月至2006年1月收治的71例喉鳞癌患者术后肿瘤组织和9例非喉癌者喉黏膜组织应用免疫组织化学法检测,分析其DJ-1蛋白表达水平与临床病理特征的关系.结果 喉鳞癌组织中DJ-1蛋白阳性表达率为85.9%(61/71),与非喉痛的喉黏膜组织55.5%(5/9)比较,差异有统计学意义(精确概率法P<0.05).分别就患者的性别、年龄、原发部位、T分期、临床分期、淋巴转移和肿瘤的病理学分级等情况进行分组比较,各组间喉鳞癌组织中DJ-1蛋白表达水平的差异均无统计学意义;DJ-1蛋白高表达患者其肿瘤复发率(53.3%)明显高于DJ-1蛋白低表达患者的复发率(26.8%;x2=5.164,P<0.05).Kaplan-Meier法和Cox回归分析发现喉鳞癌患者的肿瘤原发部位、性别、年龄、T分期、临床分期和肿瘤病理学分级对术后累积生存率影响均无统计学意义;DJ-1蛋白表达水平和淋巴转移对术后累积生存率影响有统计学意义(X2值分别为6.20和3.97,P值均<0.05).结论 DJ-1蛋白在喉鳞癌组织的表达水平高于喉黏膜组织.DJ-1蛋白表达水平较高的喉癌患者生存率可能低.     

增殖细胞核抗原与喉癌生物学行为相关性的研究

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)表达与喉癌生物学行为的相关性.方法采用流式细胞免疫法检测40例喉鳞状细胞癌患者PCNA的表达,同时检测8例癌旁组织作为对照.结果高中分化鳞癌与低分化鳞癌差异有高度显著性(P＜0.01),淋巴结转移阳性组与阴性组差异有显著性(P＜0.05),早期组(I,Ⅱ)与晚期组(Ⅲ,Ⅳ)差异无显著性(P＞0/05),癌组织与癌旁组织间PCNA指数差异有高度显著性(P＜0.001).结论PCNA表达与喉癌的病理分级、淋巴结转移呈显著正相关,与临床分期无关,PCNA高表达是喉癌的重要生物学特征.     

肿瘤转移抑制基因KAI1在喉鳞状细胞癌中表达的研究

目的　探讨肿瘤转移抑制基因KAI1在喉鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )中的表达及其与之发生、发展的关系。方法　采用原位杂交方法检测 84例原发性喉鳞癌 (primarylaryngealsquamouscellcarcinoma ,PLSCC)、2 7例喉癌前病变不典型增生 (laryngealprecancerouslesion ,LPL)、10例声带息肉(vocalcordpolyp ,VCP)和 10例正常喉黏膜 (normallaryngealtissues ,NLT)石蜡标本组织细胞中KAI1mRNA的表达。结果　NLT、VCP、LPL和PLSCC 4种组织中KAI1阳性表达的积分吸光度值 ( x±s)分别为 (136 2 0 6 8± 36 6 75 5 )、(1336 74 5± 4 2 85 8 5 )、(90 36 8 8± 2 5 70 1 9)和 (6 7880 6± 2 8189 5 ) ,其中NLT组和VCP组之间差异无显著性 (t=0 14 2 ,P >0 0 5 ) ,NLT组和LPL组之间差异有显著性 (t =4 2 81,P <0 0 1) ;PLSCC组中KAI1表达普遍下调 ,且病理分化G1 2组阳性表达水平高于G3组 ;T1 2病变组高于T3 4组 ;颈淋巴结NO组高于N1及N1以上组 ;临床Ⅰ Ⅱ期组高于临床Ⅲ Ⅳ期组 (P值均 <0 0 1)。KAI1表达与患者性别无关 (P >0 0 5 )。结论　KAI1低表达在喉鳞癌的发生、发展中可能起着重要作用 ,可望作为喉鳞癌早期诊断、评估肿瘤细胞侵袭转移潜能及患者病程发展阶段的指标之一。     

Jab1基因沉默对裸鼠人喉癌移植瘤生长影响的研究

目的 探讨Jab1重组质粒对人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 利用喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,通过向瘤体内注射pJab1、阴性对照质粒和生理盐水,观察瘤体增长情况,通过免疫组化方法、反转录聚合酶链反应( RT-PCR)观察瘤体内Jab1、p27的mRNA及蛋白表达水平的变化.结果 pJab1质粒组的肿瘤体积为(267.60±88.19)mm3((x)±s,以下同),与阴性对照组的(832.20±140.39) mm3及生理盐水组的( 895.40±145.93) mm3相比,差异有统计学意义(F=36.73,P＜0.001);免疫组化结果显示pJab1质粒组瘤内的Jab1蛋白的表达率降低为32.40％±5.59％,p27蛋白的表达率增高到76.80％±6.30％(P＜0.001),与阴性对照组及生理盐水组比较,差异有统计学意义;RT-PCR结果显示实验组瘤内Jab1的mRNA相对表达水平降低至0.65±0.03(F=558.00,P＜0.001),p27的mRNA无明显变化,为0.80±0.02(F=1.52,P＞0.05).结论 pJab1干扰质粒可明显降低裸鼠肿瘤组织内Jab1基因的表达并抑制瘤体的生长;pJab1质粒能有效抑制Jab1基因的表达,有望成为临床治疗喉癌的新途径.     

缺氧诱导因子-1α与P糖蛋白在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨H IF-1α、P-gp在喉鳞癌及喉黏膜正常上皮中的表达差异,两者在喉鳞癌中表达与临床病理特征的关系及表达间的相关性。方法应用免疫组化染色技术检测H IF-1α和P-gp在86例喉鳞癌及32例喉黏膜正常上皮中的表达。结果H IF-1α与P-gp在喉鳞癌组织中阳性表达率均高于喉黏膜正常上皮组织(P0.05)。喉鳞癌组织中H IF-1α阳性表达率与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关(P0.05);P-gp阳性表达率与肿瘤临床分期、组织学分级、淋巴结转移有关(P0.05)。H IF-1α和P-gp蛋白在表达水平上成正相关(r=0.442,P0.01)。结论H IF-1α与P-gp的高表达可能在喉鳞癌病情进展中起一定作用,并可作为评估喉鳞癌临床病理特征的有效生物学指标。     

喉鳞状细胞癌手术切缘翻译启动因子4E蛋白表达与预后的关系

目的　探讨喉鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )手术病理检查切缘翻译启动因子 4E (eukaryotictranslationinitiationfactor 4E ,eIF4E)蛋白表达与预后的关系。方法　选择 1989年 1月～ 1996年 12月中山大学肿瘤防治中心喉鳞癌手术切缘病理检查没有发现癌细胞患者共 6 7例 ,用免疫组化方法检测切缘与原发灶中eIF4E蛋白的表达 ,比较阳性及阴性表达两组患者的生存率。结果　喉鳞癌手术切缘和原发灶eIF4E表达阳性率分别是 32 8% ( 2 2 6 7)和 10 0 0 % ( 6 7 6 7)。eIF4E切缘阳性组复发、转移和死亡 14例 (达 6 3 6 % ) ,阴性组 13例 (占 2 8 9% ) ,差异有显著性 (P =0 0 0 6 ) ;寿命表法统计两组的 5年生存率分别为 4 3 31%与 77 5 2 % ,差异有显著性意义 (P =0 0 0 0 6 )。结论　喉鳞癌手术切缘病理检查没有发现癌细胞而eIF4E蛋白表达阳性者预后较差。     

EB病毒潜伏膜蛋白1和鼻咽癌上皮间质转化相关分子与颈淋巴结转移关系

目的:评价EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP-1)和鼻咽癌上皮间质转化相关分子与颈淋巴结转移关系.方法:88例鼻咽癌活检标本依据病理检查或MRI检查分成病理转移组(18例)、MRI转移组(40例)和无转移组(30例).免疫组织化学检测鼻咽癌组织中潜伏膜蛋白1(LMP-1)、STAT3、Twist、E-cadherin和Vimentin的表达情况.结果:88例鼻咽癌组织中,LMP-1阳性表达见于35例,阳性率为38.7%.病理转移组、MRI转移组和无转移组的LMP-1阳性率分别为38.9%(7/18)、47.5%(19/40)和30.0%(9/30),3组间差异无统计学意义.LMP-1表达分别与Twist和Vimentin表达呈正相关(r=0.276和0.282,均P<0.01),与STAT3和E-Cadherin表达无相关性.88例鼻咽癌组织中STAT3、Twist和Vimentin阳性率以及E-Cadherin异常表达率分别64.8%(57/88)、54.5%(48/88)、20.0%(22/88)和60.2%(53/88).STAT3、Twist和Vimentin阳性率以及E-Cadherin异常表达率在病理转移组、MRI转移组和无转移组间差异均分别有统计学意义(均P<0.05).STAT3表达分别与Twist和Vimentin表达均呈正相关性(r=0.712和0.316,均P<0.01).结论:EMT在鼻咽癌转移过程中起着重要作用.LMP-1可能仅作为上游影响因素之一间接影响EMT的发生,但与颈部淋巴结转移可能无直接相关性.     

TGF-β1/Smad4信号通路在喉鳞癌中的作用及意义

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)及其信号通路在喉鳞癌发生发展和转移中的作用.方法 采用免疫组织化学二步法,检测TGF-β1及其受体Ⅱ(TβRⅡ)和通路下游关键分子Smad4在44例喉鳞癌和10例正常喉黏膜组织中的表达情况,分析其与喉鳞癌发生发展和转移的关系.结果 TGF-β1蛋白在喉鳞癌组的阳性表达率为68.2%,高于正常喉黏膜组30%(P<0.05),且与临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05).TβRⅡ和Smad4蛋白在喉鳞癌组的阳性表达率分别为40.9%、34.1%,在正常喉黏膜组中的阳性表达率分别为80%、80%,差异有统计学意义(P<0.05).TβRⅡ的阳性表达率与临床分期呈负相关(P<0.05),但与淋巴结转移无关(P>0.05);Smad4表达与组织分化、临床分期及淋巴结转移呈负相蔓(P<0.05).结论 Smad4介导的TGF-β1信号通路异常与喉鳞癌的发生发展密切相关,Smad4低表达可促进喉鳞癌的淋巴结转移.     

与喉乳头状瘤恶变进程及预后相关分子标志物研究

目的 基于生物信息学分析筛选影响喉乳头状瘤恶变进程及预后的分子标志物。方法 从GEO和TCGA数据库分别下载成人喉乳头状瘤数据集GSE10935和喉鳞癌转录组数据,使用R语言筛选两组数据差异表达基因(DEGs)。利用韦恩图分析筛选两组共同DEGs后,使用GEPIA数据库绘制Kaplan-Meier生存曲线进行生存分析,筛选出候选基因。利用HPA数据库分析候选基因的蛋白表达情况得到关键基因后,进行单/多因素COX回归分析,及GO、KEGG功能富集分析。结果 从GSE10935数据集筛选出112个与喉乳头状瘤发生发展相关的DEGs,从喉鳞癌转录组数据筛选出1817个与喉鳞癌发生发展相关的DEGs。通过韦恩图分析得到共同DEGs 24个。GEPIA在线网站分析显示与正常组织相比,FSCN1、MMP1、IFI27在头颈鳞癌组织(HNSCC)中高表达,ALDH3A1、HLF、MMRN1低表达,差异均有统计学意义(FSCN1:P=0.002 9、MMP1:P=0.047、IFI27:P=0.035、ALDH3A1:P=0.024、HLF:P=0.008、MMRN1:P=0.036)。生存分析显示F...     

一氧化氮合酶(NOS)在喉鳞癌中的表达及意义

目的：检测喉鳞状细胞癌组织中一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase,NOS）的表达,并分析其表达与喉鳞癌病理特性的关系。方法：应用免疫组织化学技术对42例喉鳞癌,15例喉乳头状瘤,5例声带息肉组织中的iNOS,eNOS表达情况进行对比。结果：喉鳞癌中iNOS的阳性表达率为83．3％（35／42）,喉乳头状瘤阳性表达率为40．0％（6／15）,二者比较有显著性差异（x2＝9．47,P＜0．05）;eNOS在喉鳞癌组阳性表达为52．4％（22／42）,喉乳头状瘤组为6．7％（1／15）,二者比较有显著性差异（x2＝9．59,P＜0．05）;iNOS和eNOS的表达与喉鳞癌的临床分期无显著相关性（P＞0．05）。iNOS在低分化癌表达率为86．7％（13／15）,在高分化癌为75．0％（12／16）,但iNOS强阳性表达在高分化型鳞癌中为12.6％（2／16）,在低分化鳞癌中为53．3％（8／15）,其差异显著;eNOS在低分化和高分化癌中的表达率分别为73．3％（11／15）和31．3％（5／16）,其差异均有显著性（P＜0．05）。结论：NOS在喉鳞癌有较高的表达,可能为肿瘤细胞间的异常介质信号,与喉癌的发生和分化有关,肿瘤组织内有新生血管形成,其血流由一氧化氮（nitricoxide,ON）调节,明确其作用机理,将可能为喉癌的生物治疗提供理论依据。     

人β-防御素-2在喉癌组织中的表达及与CD1a~+树突状细胞浸润的相关性

目的 研究喉癌组织中人β-防御素-2(human beta-defensin-2,HBD-2)mRNA和蛋白的表达,探讨其在机体抗肿瘤免疫中的潜在价值.方法 采用链霉亲合素-生物素酶复合物法(strept actividin-biotin complex,SABC)检测34例喉鳞癌石蜡标本中HBD-2蛋白表达及CD1a~+树突状细胞(dendritic cell,DC)的浸润;收集18例喉鳞癌患者术中切除的新鲜肿瘤组织及其中5例距肿瘤边缘2 cm的癌旁上皮组织,应用互补DNA(cDNA)探针原位杂交检测HBD-2 mRNA的表达.分析HBD-2在不同的临床和病理状态下的表达及与CD1a~+树突状细胞浸润的关系.结果 ①免疫组化结果显示,在不同的病理分化组中HBD-2的表达差异有统计学意义(F=6.809,P＜0.05),高分化组HBD-2表达水平明显高于中分化和低分化组(P值均＜0.05).不同临床分型、T分期及有无淋巴转移组中HBD-2的表达水平差异无统计学意义.②原位杂交结果显示,18例喉鳞癌和5例癌旁上皮组织中HBD-2 mRNA的表达存在差异,喉癌低分化组明显弱于高分化组和癌旁上皮组织(F=16.391,P＜0.05).③连续切片染色结果显示,HBD-2蛋白表达水平与CD1a~+DC浸润程度呈正相关(r=0.343,P＜0.05),连续切片结果显示,图片染色的阳性区域相互对应,表示存在位置上的相关性.结论 HBD-2在喉鳞癌中的表达与癌细胞的分化程度有关,并受到转录水平和翻译水平上的调节;HBD-2可能通过趋化CD1a~+DC在肿瘤局部的浸润及功能的活化在机体获得性抗肿瘤免疫中发挥作用.     

头颈鳞癌组织和细胞系中免疫球蛋白M表达的初步研究

目的 明确头颈鳞癌组织及传代细胞系中免疫球蛋白M(IgM)的表达情况.方法 采用免疫组化染色(SABC法)检测头颈鳞癌组织及阴性对照组织中IgM蛋白的表达情况,比较分析IgM在头颈鳞癌与对照组织间的表达差异;采用Western Blot、流式细胞仪间接免疫荧光法检测IgM在头颈鳞癌细胞系中的表达情况.结果 IgM在头颈鳞癌及阴性对照组织中的阳性表达率分别为68.6％和24.5％,差异具有统计学意义(P＜0.05).随着鳞状上皮及鳞癌细胞分化程度的降低,IgM的表达部位有从细胞膜向细胞浆转变的趋势(P＜0.05);头颈鳞癌细胞裂解液中存在与人IgMμ链分子量一致(75KD)且能与抗人IgMμ链抗体发生特异性反应的蛋白; 4种头颈鳞癌细胞系中IgM平均免疫荧光强度为9.25±0.82％ (CNE-1),8.76±0.54％ (Tca8113),13.72±1.73％ (Hep-2)和12.1±1.19％ (HNE-1),与阴性对照组1.87±0.24％比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 头颈鳞癌组织和传代细胞系中存在IgM蛋白的表达,且IgM表达部位与鳞状上皮细胞的分化程度有关,但IgM在头颈鳞癌表达的临床意义、生物学作用和机制等尚有待进一步探讨和研究.