RNA干扰沉默Aurora-A基因抑制喉癌Hep-2细胞生长的实验研究

目的 研究RNA干扰沉默Aurora-A基因后对喉癌Hep-2细胞体外体内生长的抑制作用.方法 构建靶向Aurora-A的小干扰RNA(siRNA)表达质粒并转染喉鳞癌Hep-2细胞株,采用CCK-8实验、Transwell实验、软琼脂克隆形成实验和裸鼠体内接种观察Aurora-A沉默后Hep-2细胞的增殖、侵袭和克隆形成能力以及体内肿瘤生长情况,Western blot和免疫组化检测参与细胞黏附侵袭的重要因子黏着斑激酶和基质金属蛋白酶-2的表达情况.结果 Hep-2细胞转染Aurora-A siRNA 后,siRNA-3实验组的Aurora-A蛋白的表达下降了52％,CCK-8实验中siRNA-3组细胞的平均(x±s)吸光度值为(3.268±0.106),低于Hep-2细胞组的(3.722 ±0.152),差异有统计学意义(F=17.634,P＜0.01);Transwell实验显示,siRNA-3组每个视野的平均侵袭细胞数目为(110.0±18.0)个,较Hep-2组的(236.0 ±26.0)个减少,两组差异有统计学意义(F=26.462,P＜0.01);克隆形成实验中,siRNA-3组平均集落数目(31.0±6.6)个,低于Hep-2组平均细胞集落数目(104.0±14.0)个(F=75.321,P＜0.001).接种后,体内移植瘤生长受到抑制,siRNA-3组的肿瘤平均体积为(127.77±174.83) mm3,低于Hep-2组的肿瘤平均体积(837.26±101.80) mm3(F=28.187,P＜0.001).在体外和体内黏着斑激酶和基质金属蛋白酶-2的表达也下降.结论 抑制Aurora-A基因后,通过降低黏着斑激酶和基质金属蛋白酶-2的表达,抑制Hep-2细胞的生长,减弱肿瘤细胞的恶性侵袭性,Aurora-A可以成为喉鳞癌治疗良好的干预靶点.     

Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义

目的:探讨Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测50例喉鳞状细胞癌组织和10例癌旁正常组织中Jab1和p27kip1的表达。采用人工合成Jab1siRNAⅡ用脂质体2000包裹后转染Hep-2细胞,用RT-PCR方法分析转染后喉癌细胞中Jab1和p27kip1基因的表达情况。结果:Jab1和p27kip1蛋白的阳性表达定位为细胞核中,Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中高表达,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1在人喉癌组织中弱表达,正常喉黏膜中强表达;两者呈负相关。Jab1siRNAⅡ可降低Jab1mRNA表达,并且随着时间的延长,Jab1mRNAⅡ在Hep-2细胞中的表达逐渐减弱,而p27kip1 mRNA的表达则无明显变化。结论:Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中表达增强,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1则正好相反。两者在喉癌中的表达呈负相关。Jab1siRNAⅡ可以特异性降低Jab1mRNA在喉癌Hep-2细胞中的表达,为进一步研究Jab1基因在喉癌中的作用奠定了基础。     

下调组蛋白去乙酰化酶6对Hep-2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的 观察下调组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylation 6,HDAC6)对人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)Hep-2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用并探讨其体内抗肿瘤机制.方法 将喉鳞癌Hep-2细胞注射入裸鼠皮下,1周后裸鼠荷瘤模型建成.将裸鼠分为3组进行治疗,即空白对照组、空载体组和HDAC6小干扰RNA( siRNA)组,监测肿瘤生长变化.采用免疫组织化学法检测不同组别裸鼠移植瘤瘤体内Ki-67增殖情况的变化.采用Western blot法检测转染HDAC6前后不同组别裸鼠移植瘤组织凋亡相关基因B淋巴细胞-2(bcl-2)及bcl相关X蛋白(bcl-associated x protein,Bax)表达的变化.采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL法)检测转染HDAC6前后裸鼠移植瘤组织凋亡情况的变化.结果 HDAC6 siRNA转染荷瘤裸鼠后,与空载体组及空白对照组相比,HDAC6 siRNA组荷瘤裸鼠肿瘤体积显著下降(F =64.783,P＜0.05);原位杂交、免疫组织化学及Western blot结果表明,HDAC6 siRNA转染组裸鼠肿瘤组织中HDAC6 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P值均＜0.05);Western blot结果显示HDAC6 siRNA转染组裸鼠肿瘤组织中Bax蛋白表达显著上调而Bcl-2的表达则显著下调,三组间比较差异具有统计学意义(P值均＜0.05);免疫组织化学结果显示转染HDAC6 siRNA组Ki-67染色阳性细胞数显著少于空载体组及空白对照组(F=25.793,P＜0.05);TUNEL结果表明,HDAC6转染组中细胞明显发生凋亡.结论 HDAC6 siRNA能有效抑制人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤的生长,并降低HDAC6和Bcl-2的表达,提高Bax的表达,为喉鳞癌的分子治疗提供了理论依据.     

沉默survivin抑制喉癌细胞Hep-2生长的实验研究

目的 探讨沉默survivin对喉癌细胞Hep-2生长的影响.方法 将重组质粒(psi-survivin)和阴性对照质粒(psi-scramble)用脂质体包裹转染人喉癌细胞株Hep-2,分别用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)从mRNA和蛋白水平检测survivin的表达.四甲基偶氮唑蓝(MTT)观察喉癌细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡.建立裸鼠喉癌移植瘤模型,将psi-survivin和psi-scramble注射于肿瘤周围,观察其抗肿瘤的效果.免疫组化法和Western blot法检测重组质粒对肿瘤Survivin蛋白表达的影响.末端脱氧核苷酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记技术(Tunel)观察肿瘤细胞的凋亡.结果 psi-survivin不仅在mRNA水平(抑制率为54.4%),而且蛋白水平也抑制Survivin表达,抑制率为37.0%.MTT证实psi-survivin明显抑制喉癌细胞的增殖,抑制率达71.7%.流式细胞仪结果显示psi-survivin组细胞凋亡明显增加,凋亡率达(13.05±0.56)%((-x)±s,下同).体内实验表明,质粒注射后第32天,盐水组瘤体积为(1443.9±230.5)mm3,psi-scramble组为(1348.5±198.4)Rim3,而psi-survivin组为(624.6±188.4)mm3,与对照组相比,差异有统计学意义(t=-5.917,P＜0.01).psi-survivin能明显抑制肿瘤survivin的表达,抑制率为41.8%,与对照组相比,差异有统计学意义(t=-80.343,P＜0.01).Tunel染色结果显示psi-survivin组肿瘤组织中出现较多凋亡细胞,而对照组未见凋亡细胞.结论 沉默survivin能明显抑制喉癌细胞Hep-2的生长.     

小干扰RNA对喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原及p53蛋白表达的影响

目的：应用小干扰RNA（siRNA）技术抑制裸鼠喉癌皮下移植瘤人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因表达,探讨移植瘤中增殖细胞核抗原（PCNA）及p53蛋白表达的变化。方法：根据hTERT cDNA序列构建表达短发夹RNA（shRNA）的、靶向hTERT mRNA的真核表达质粒pshRNA,其载体质粒含荧光素报告基因。建立人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型,将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤体内的表达;以免疫组织化学SP法检测PCNA及p53蛋白在肿瘤内的表达。结果：所有裸鼠均接种成功,5d后可见皮下肿瘤形成,14d左右肿瘤直径达5～7mm。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后,共聚焦显微镜下见癌组织中有绿色荧光表达。病理学检查发现：pshRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞分裂少见,可见大量癌细胞坏死。与注射生理盐水的对照组比较,转染质粒完毕后7d抑瘤率为76．50％,P〈0．01。pshRNA治疗后瘤体内PCNA蛋白表达显著下调（P〈0．05）,p53蛋白表达显著上调（P〈0．05）。结论：靶向hTERT mRNA的shRNA可显著抑制人喉癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导PCNA下调,促进p53蛋白表达所致。     

Jab1和p27kip1蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达

目的 探讨Jun激活区域-连接蛋白1(c-Jun activation domain-binding p rotein 1,Jab1)和p27kip1的表达与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC)发生、发展的关系及两种蛋白之间的相关性.方法 免疫组织化学SP法检测23例正常喉黏膜(normal laryngeal tissues,NLT)和68例LSCC组织中Jab1和p27kip1的表达.结果 NLT和LSCC组织中,Jab1和p27kip1蛋白阳性表达率差异均有显著性(P＜0.01).LSCC中Jab1的过表达与临床分期及颈淋巴结转移显著相关(P＜0.05),p27kip1的表达与颈淋巴结转移显著相关(P＜0.05),Jab1的表达与p27kip1的表达呈负相关(P＜0.05).生存率分析表明,Jab1的过表达与患者的总生存率呈负相关(P＜0.05).结论 Jab1可能通过对周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(cell cycle inhibitory protein,CKI)p27kip1蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展,联合检测Jab1及p27kip1蛋白的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为及预后.     

RNA干扰沉默NF-κBp65基因表达对喉癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:探讨靶向转录因子NF-κB p65的siRNA对人喉癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法:将人喉癌Hep-2细胞注射入裸鼠皮下建立裸鼠移植瘤模型。将15只裸鼠喉癌模型随机分为3组:实验组、阴性对照组与正常对照组,分别给予NF-κB p65siRNA、FAM-Control siRNA和PBS治疗3周。治疗过程中观察肿瘤体积的变化,治疗结束时处死裸鼠,肿瘤称取质量,取肿瘤组织切片进行TUNEL标记及免疫组织化学检测NF-κB p65及Bcl-xL蛋白的表达情况。结果:治疗后实验组平均瘤重(0.53±0.03)g,低于阴性对照组[(0.70±0.04)g]和正常对照组[(0.72±0.07)g],差异有统计学意义(P<0.05);实验组移植瘤体积(1 313.58±114.72)mm3,小于阴性对照组[(1 536.92±80.30)mm3]和正常对照组[(1 661.01±161.84)mm3],差异有统计学意义(P<0.05);实验组NF-κB p65、Bcl-xL蛋白表达水平明显下调,细胞凋亡率增高。结论:siRNA明显抑制了NF-κB p65表达,并抑制肿瘤生长,其机制可能与下调Bcl-xL蛋白表达而诱导细胞凋亡有关。     

RNA干扰抑制c-Met表达对喉癌Hep-2细胞体内外生长的影响

目的 采用RNA干扰(RNAi)技术抑制人喉癌Hep-2细胞c-Met基因表达,观察对其体外生物学活性和体内生长的影响.方法 构建能够表达针对c-Met的小干扰RNA的RNAi质粒和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNAi质粒,采用阳离子脂质体Lipofectamine2000作为转染试剂将其转染人喉癌细胞株Hep-2,通过RT-PCR及Western Blot方法检测转染效率,筛选出抑制效果最好的c-Met-siRNA序列;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、运动实验及侵袭实验比较转染前后细胞的生长、运动及侵袭能力.在裸鼠喉癌皮下荷瘤模型模拟c-Met-siRNA基因治疗实验中,采用Western Blot法检测重组质粒对c-Met基因及MMP-9、VEGF基因表达的影响.结果 pSilencer2.0/c-Met-shRNA转染人喉癌细胞株Hep-2后,c-Met的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P值分别为0.003和0.02),细胞的生长、运动及侵袭均受到明显抑制(P值分别为0.001,0.004和0.004).肿瘤接种到裸鼠后第35天,重组质粒组肿瘤体积为(138±27)mm~3,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);重组质粒组瘤体内c-Met、MMP-9、VEGF基因表达率比对照组明显降低(P<0.05).结论 c-Met-siRNA能成功下调靶基因的表达,并能显著抑制喉癌Hep-2细胞的生长、运动、侵袭及移植裸鼠成瘤后的生长,siRNA表达质粒介导的基因治疗有希望成为喉癌靶向性c-Met治疗的新策略.     

慢病毒介导的基质金属蛋白酶2基因沉默抑制喉癌侵袭生长的实验研究

目的 探讨siRNA(小干扰RNA)重组慢病毒介导的基质金属蛋白酶2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)基因沉默对喉鳞癌侵袭生长的抑制作用.方法 采用RNA干扰技术,将MMP-2基因siRNA的重组慢病毒(MMP-2-RNAi-Lentivirus)转染喉鳞癌Hep-2细胞,并运用蛋白印记法检测Hep-2细胞MMP-2基因的蛋白表达;通过博伊登(Boyden)侵袭小室观察MMP-2-RNAi-Lentivirus转染后喉癌细胞侵袭能力的变化.构建喉癌移植瘤裸鼠模型,瘤内注射MMP-2-RNAi-Lentivirns,观察抑瘤效果;透射电镜观察肿瘤形态;运用免疫组化方法检测移植瘤中增殖细胞核抗原的表达,以评估细胞增殖的情况.结果 MMP-2-RNAi-Lentivirus能高效地转染靶细胞,转染效率在90%以上.蛋白印迹法检测显示,转染后的Hep-2细胞中MMP-2蛋白表达阴性.侵袭实验显示,MMP-2-RNAi-Lentivirus转染后的实验组Hep-2细胞中穿过人工基底膜的平均细胞数(x±s,以下同)为(12±4)个,明显少于空载体对照组的(35±6)个(t=14.492,P<0.01).体内实验显示,MMP-2-RNAi-Lentivirus瘤内注射后,裸鼠移植瘤平均重量和平均体积均明显小于对照组,抑瘤率为44.2%.透射电镜观察到MMP-2-RNAi-Lentivims治疗组肿瘤细胞侵袭表型降低,治疗组肿瘤增殖细胞核抗原指数(49.588±6.995)也明显小于对照组(71.434±7.043,t=9.573,P<0.01).结论 siRNA重组慢病毒介导的MMP-2基因沉默能有效地抑制喉癌的侵袭、生长及增殖,为喉癌的基因治疗提供一定的实验依据.     

选择性环氧化酶-2抑制剂对Hep-2细胞裸鼠移植瘤血管生成的影响

目的研究选择性环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂尼美舒利对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞(简称Hep-2细胞)裸鼠移植瘤血管生成的影响,并探讨其相关作用机制。方法建立Hep-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,实验组予以尼美舒利腹腔注射治疗,对照组腹腔等量注射生理盐水,4周后处死裸鼠并取肿瘤组织,利用免疫组化染色法检测移植瘤组织中CD31表达,并计算微血管密度(microvessel density,MVD),利用RT-PCR和免疫组化染色法分别检测移植瘤组织中COX-2、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、碱性成纤维生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)mRNA和蛋白的表达,比较分析实验组与对照组MVD及COX-2、Ang-2、bFGF表达差异。结果实验组MVD值为12.83±3.06,明显低于对照组25.50±4.85,实验组移植瘤组织中COX-2、Ang-2、bFGF的mRNA和蛋白水平与对照组相比明显降低,且MVD与COX-2、Ang-2、bFGF蛋白表达水平关系密切。结论尼美舒利能有效抑制Hep-2细胞裸鼠移植瘤血管生成,其机制可能与抑制Ang-2、bFGF直接产生抗血管生成作用以及减少COX-2表达有关。     

泪囊在鼻内镜泪囊鼻腔造口术中的解剖学研究及临床应用

目的 探讨经鼻内镜泪囊鼻腔造口术中泪囊在鼻腔外侧壁的解剖学定位.方法 对12具(24侧)成人尸头的泪囊在鼻腔外侧壁上的投影位置进行解剖学测量,为62例(85侧)慢性泪囊炎鼻泪管阻塞患者行经鼻内镜鼻腔泪囊造口术.结果 解剖学测量结果提示,15侧(62.5%)泪囊上界位于中鼻甲腋上方,9侧(37.5%)泪囊上界位于中鼻甲腋下方.临床结果:62例(85侧)术后随访6个月以上,治愈50例(70侧,82.3% ),好转8例(9侧,10.6%),无效4例(6侧,7.1%),总有效率为92.9%.结论 以中鼻甲腋前上0.7 cm为上界,腋前下0.3 cm为下界,钩突前缘向上延线为泪囊后界定位泪囊进行鼻腔泪囊造口为较佳选择.     

肠球菌属益生菌提取物LFK对变应性鼻炎小鼠血清IL-12的影响

目的 变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠模型经口途径给予经热处理及酶裂解的肠球菌faecalis FK-23菌株(lysed Enterococcus faecalis FK-23,LFK),观察对血清IL-12水平的影响,探讨LFK对实验性AR的抗变态反应作用。方法 BALB/c小鼠75只,随机分为阳性对照组、LFK干预组和阴性对照组。采用OVA腹腔注射及鼻腔激发建立小鼠AR模型,阴性对照组小鼠采用生理盐水代替OVA进行腹腔注射及滴鼻。用益生菌提取物LFK 0.5mL(60mg)对AR小鼠模型进行灌胃,共计21d;阳性和阴性对照组以生理盐水 0.5mL代替LFK灌胃处理。第22天取材,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清IL-12水平。结果 血清IL-12水平阳性对照组较阴性对照组显著降低(P＜0.001),LFK干预组较阳性对照组显著升高(P＜0.001),但与阴性对照组相比仍明显降低(P＜0.001)。结论 肠球菌属益生菌提取物LFK对细胞因子IL-12具有一定的调节作用,推测其与抗变态反应作用有关。     

口腔矫治器治疗对OSAHS患者焦虑抑郁及心理状态影响的研究

目的 探讨口腔矫治器治疗对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者焦虑抑郁情绪及心理状态的影响。方法 对48名轻、中度OSAHS患者采用下颌前移矫治器进行治疗,在治疗前及治疗6个月后采用多导睡眠图(PSG) 监测、白天过度嗜睡(EDS)、症状自评量表(SCL-90)、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)对治疗的疗效及患者的心理状况进行评分并进行统计学分析。结果 OSAHS患者的主客观症状均有显著改善;患者治疗前SCL-90各因子评分均高于中国正常成人常模,在戴用口腔矫治器治疗6个月后,SCL-90各因子及焦虑、抑郁评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 OSAHS患者心理健康水平较低,口腔矫治器治疗可以有效地改善OSAHS患者的心理状况。     

周围性面瘫的MRI增强扫描检查和损伤节段观察及预后相关性分析

目的 探究周围性面瘫的MRI检查和损伤节段观察及预后相关性。方法 周围性面瘫患者15例,用Siemens Magnet V1.5 T超导型磁共振,头线圈,扫描双侧颞骨,单侧面瘫扫描双侧面神经,健侧为阴性对照。常规T1WI、T2WI轴面及冠状面薄层扫描后,行T1WI-vibe横断位、T2WI-TSE冠状位、T2WI-SPACE横断位、增强后T1WI-Vibe横断位及T1WI-TSE冠状位扫描及钆喷替酸葡甲胺(Gd-DTPA)增强扫描(对比剂剂量0.1mmol/kg),延时30min对病变进行MRI扫描及图像多平面重建。结果 ①与手术相关者3例,面神经MRI重建显示面神经全程完整1例,没有中断、水肿。3个月后恢复,为H-B 1级。术前就发生面瘫的岩部巨大胆脂瘤患者1例,显示全程水肿,但没有中断,术后恢复十分缓慢,为H-B 3级。第3例巨大听神经瘤患者,MRI重建显示面神经仍连续,与术中观察一致。术前面瘫H-B 6级,术后仍为6级;②Bell氏面瘫者6例中,显示内听道段至鼓室段均有强化1例,强化在膝状神经节至乳突段2例,只在内听道段2例,在内听道段、迷路段、膝状神经节及鼓室段1例,术后均痊愈,H-B分级全部达到1级;③HUNT综合征患者6例中,未见面神经异常1例,强化在内听道2例,另膝状神经节强化3例,其中2例伴内听道内强化,只有1例还涉及乳突段,伴有耳蜗增强改变5例,治疗后H-B分级全部达到1级。结论 MRI增强和重建,可以很好地显示面神经损伤的节段和范围,也能为预后判定提供一些信息。     

低温等离子射频消融治疗常年性变应性鼻炎合并支气管哮喘的疗效及安全性评价

目的 探讨低温等离子射频消融治疗常年性变应性鼻炎合并支气管哮喘的疗效及安全性。方法 选择80例常年性变应性鼻炎合并支气管哮喘患者的临床资料,其中,观察组40例采用低温等离子射频消融术进行治疗,对照组40例采用微波治疗,比较两组的临床效果。结果 观察组支气管哮喘总有效率为90%,其常年性变应性鼻炎总有效率为95%,均明显高于对照组(P<0.05)。观察组鼻结膜炎生存质量问卷(RQLQ)评分、视觉模拟量(VAS)评分以及成人哮喘生存质量问卷(AQLQ)评分均较对照组明显改善(P<0.05)。结论 低温等离子射频消融术治疗常年性变应性鼻炎合并支气管哮喘疗效显著,改善了患者生活质量,值得临床应用。     

Assessment of Nutrient Supplement to Reduce Gentamicin-Induced Ototoxicity

Gentamicin is an aminoglycoside antibiotic used to treat gram-negative bacterial infections. Treatment with this antibiotic carries the potential for adverse side effects, including ototoxicity and nephrotoxicity. Ototoxic effects are at least in part a consequence of oxidative stress, and various antioxidants have been used to attenuate gentamicin-induced hair cell death and hearing loss. Here, a combination of nutrients previously shown to reduce oxidative stress in the hair cells and attenuate hearing loss after other insults was evaluated for potential protection against gentamicin-induced ototoxicity. Guinea pigs were maintained on a nutritionally complete standard laboratory animal diet or a diet supplemented with β-carotene, vitamins C and E, and magnesium. Three diets with iterative increases in nutrient levels were screened; the final diet selected for study use was one that produced statistically reliable increases in plasma levels of vitamins C and E and magnesium. In two separate studies, significant decreases in gentamicin-induced hearing loss at frequencies including 12 kHz and below were observed, with less benefit at the higher frequencies. Consistent with the functional protection, robust protection of both the inner and outer hair cell populations was observed, with protection largely in the upper half of the cochlea. Protection was independently assessed in two different laboratories, using two different strains of guinea pigs. Additional in vitro tests did not reveal any decrease in antimicrobial activity with nutrient additives. Currently, there are no FDA-approved treatments for the prevention of gentamicin-induced ototoxicity. The current data provide a rationale for continued investigations regarding translation to human patients.     

Evaluation of airway obstruction using virtual endoscopy

OBJECTIVES: This study examines the use of virtual endoscopy (VE) in the evaluation of patients with upper airway obstruction. The utility of VE compared with actual endoscopy was investigated with respect to accuracy of diagnosis and reproduction of endoscopic images. STUDY DESIGN: A random cohort of 30 patients with various causes of airway obstruction was examined. METHODS: The computed tomography (CT) data were reconstructed using a proprietary VE software program, FreeFlight, blind to the actual endoscopic findings. The cause of obstruction was identified and compared with actual endoscopic findings. This included 21 patients with airway stenoses, 8 patients with laryngotracheomalacia, 3 tracheal tumors, 2 glottic webs, 5 patients with innominate artery compression, 2 tracheal granulomas, and 7 patients with impaired true vocal cord mobility. RESULTS: Virtual endoscopic evaluation was accurate in assessing stenosis width and length of fixed airway lesions. Correlation of stenosis shape and contour between actual endoscopy and VE was excellent. The stenosis-to-lumen ratios were compared between VE and actual endoscopy and were found to be within 10% (SD = 8). However, virtual endoscopic evaluation could not illustrate one of the glottic webs, half of the cases of tracheomalacia, or any of the cases of impaired true vocal cord mobility. CONCLUSIONS: Virtual endoscopy was not as sensitive as actual endoscopy in detecting the cause of airway obstruction that was based on dynamic movement. However, VE was excellent for the measurement and definition of fixed airway lesions.     

慢性鼻-鼻窦炎的组织重塑研究进展

慢性鼻-鼻窦炎的病理特点是鼻腔及鼻窦黏膜存在持续炎症浸润,依据是否存在鼻息肉,被分为伴息肉及不伴息肉型。现有的研究表明,慢性鼻-鼻窦炎的发生、发展中存在组织重塑,其中TGF-β及基质金属蛋白酶是影响重塑最重要的细胞因子。研究重塑过程中的细胞因子及其作用机制,有助于选择最佳的治疗靶点。未来研究应进一步明确慢性鼻-鼻窦炎组织重塑复杂径路。     

离体培养时Wnt3a对椭圆囊毛细胞再生的影响

目的 在小鼠椭圆囊体外培养模型上,通过Wnt3a激活经典WNT信号,与DMSO共同作用,研究其对椭圆囊毛细胞再生的影响。方法 40只小鼠随机分成8组。实验第一部分：小鼠椭圆囊经4mmol/L新霉素处理后,在不同浓度(0、25、100、200ng/mL)Wnt3a的培养液中继续培养1d,培养结束后对β-catenin,毛细胞纤毛及细胞核进行免疫荧光染色。实验第二部分：小鼠椭圆囊经4mmol/L新霉素处理后,在含25ng/mL Wnt3a的培养液中培养6d,分别在空白对照组,50μmol/L DAPT、0.1%DMSO、50μmol/L DAPT+25ng/mL Wnt3a培养液中继续培养7d,共培养14d。在所有培养过程中均加入10μmol/L Brdu。培养结束后Brdu,Myocin7a及细胞核进行免疫荧光染色。结果 实验第一部分：在25ng/mL Wnt3a组中可见β-catenin在支持细胞胞浆中有阳性表达,β-catenin阳性细胞数与其他各组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。实验第二部分：DMSO组中可见Myosin7a染色阳性细胞,对照组、Wnt3a+DAPT组及DATP组中可见大量Brdu阳性细胞而未见Myosin7a染色阳性细胞,DMSO组中Myosin7a阳性细胞数与其他3组相比较,组间差异具有显著性(P<0.01)。结论 顺序联合应用Wnt3a和DMSO可通过激活经典WNT信号途径,促使椭圆囊内细胞向毛细胞样细胞转分化。