血清TPS、p53抗体及SF联合检测对乳腺癌的诊断价值

目的探讨血清中TPS、p53抗体及SF联合检测在乳腺癌诊断中的临床应用价值。方法以100例乳腺癌患者为实验组,39例乳腺良性病变及37例健康人群为对照组,采用ELISA法测定三组血清中的TPS、p53抗体及SF浓度值。结果乳腺癌组的TPS、p53抗体及SF浓度值均高于良性病变及健康人群组,其中TPS及SF浓度的差异有统计学意义（P〈0．05）,p53抗体则未见差异有统计学意义（P〉0．05）。TPS和SF对乳腺癌的灵敏度分别为89．0％、90．0％,特异度分别为71．1％、80．3％,TPS和SF联合检测的灵敏度为96．0％,特异度为55．3％,且两者的浓度呈正相关关系（P〈0．01）。结论TPS和SF联合检测互相祢补了单一指标的不足,有效提高了对乳腺癌的诊断率。     

p185和p16在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨癌基因c-erbB-2蛋白p185和抑癌基因蛋白p16在乳腺癌中表达的生物学意义。方法：应用免疫组化S-P法检测59例乳腺癌组织中p185和p16蛋白的表达状况。结果：p185和p16阳性率分别为47%和34%。两者无相关性（P＞0.05)。p16表达与临床病理特征无明显相关。淋巴结转移组的p185阳性率为64%,是无淋巴结转移者的两倍（32%）（P＜0.05)。结论：p185过表达的p16失表达在乳腺癌的发生发展中各自发挥独立的作用。p185是乳腺癌重要的肿瘤标志物。     

应用原位免疫PCR技术检测乳腺癌p53抑癌基因过表达

本文应用原位免疫ＰＣＲ技术对２０例ＡＢＣ法染色ｐ５３基因蛋白弱阳性及阴性的乳腺浸润性导管癌石腊组织进行抗原－抗体反应信号放大研究，结果显示１２例ｐ５３蛋白弱阳性病例经该方法放大后呈强阳性反应，２例阴性病例呈显阳性反应、因此，应用该方法可明显提高免疫组化抗原－抗体结合的敏感性。     

p185,cyclinD1,Rb,p53,Bcl—2基因产物与乳腺癌生物学行为和ER表达的相关性研究

目的：探讨p185,cyclinD1,Rb,p53,Bcl-2基因产物与ER的表达及乳腺癌生物学行为的关系,方法：应用甲醛固定石蜡包埋切片行免疫组化色（S－P）法,检测P185,cyclinD1,Rb,p53,Bcl-2基因产物在107例乳腺癌中的表达,分析表达结果与乳腺癌肿块的大小,组织学类型,组织学分级,淋巴结转移,患者生存期,年龄及ER的关系,结果,P185与ER的阳性率,cyclinD1与乳腺癌患者的生存期及ER的阳性率,Rb与组织学分级,p53与组织学分级和ER阳性率,Bcl-2与组织学分级和患者的生存间显著性差异（P＜0．05）,结论：5种基因产物与乳腺癌生物学行 为的关系无规律性,p185,cyclinD1,Bcl-2,Rb,p53基因产物的检测对判断乳腺癌的预后有一定意义。     

应用PCR-SSCP法检测乳腺癌患者血中p53基因突变

[目的]探讨乳腺癌患者外周血p53基因突变的临床意义.[方法]应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP）的方法检测35例乳腺癌患者和20例良性肿瘤患者外周血中p53基因外显子5～8的突变情况.[结果]乳腺癌患者p53基因突变的检出率为40.0%（14/35）,显著高于对照组良性肿瘤患者的5.0%（1/20）（P＜0.05）.[结论]p53基因突变在乳腺癌外周血中有较高的检出率,是乳腺癌发生的早期信号.     

乳腺癌患者血清中p185蛋白BA-ELISA检测方法的建立

目的 建立检测乳腺癌患者血清中p185蛋白的生物素-亲和素酶联免疫法(BA-ELISA法),探讨血清p185蛋白在乳腺癌诊断中的意义.方法 利用自备的生物素化Her-2/neu单克隆抗体,并利用亲和层析法从T6-17细胞培养上清中纯化的p185蛋白作为阳性对照,建立血清p185蛋白BA-ELISA检测方法,对乳腺癌和正常对照血清进行p185蛋白检测,同时对乳腺癌患者组织进行p185蛋白免疫组化染色.结果 BA-ELISA方法检测122例乳腺癌患者血清,血清p185阳性数为39例;检测110例正常人血清,血清p185阳性数为0例.122例乳腺癌患者中免疫组化p185阳性数为43例,其中血清p185升高38例.结论 乳腺癌患者血清p185蛋白对乳腺癌具有诊断意义,血清p185蛋白和组织p185蛋白呈高度相关.     

抗p185erbB2单抗的制备及其生物学活性

目的：制备抗p185^erbB2单克隆抗体，并研究其对表达p185^erbB2肿瘤细胞的结合及生长抑制作用。为后续工作奠定基础。方法：用NIH3T3－erbB2细胞免疫BALB／c小鼠，制备抗p185^erbB2单克隆抗体。经ELISA、免疫沉淀、Western blot及免疫组化检测单抗的结合特异性。并用MTT比色法检测所获抗体对表达p185^erbB2肿瘤细胞的生长抑制作用。结果：经筛选获取1株对表达p185^erbB2细胞反应阳性，不表达p185^erbB2细胞反应阴性的单克隆抗体1H3；免疫沉淀、Western blot均表明1H3可与p185^erbB2分子特异性结合；免疫组化结果显示1H3对c-erbB2阳性的乳癌组织呈特异性着染；MTT比色法检测表明1H3对不同的p185^erbB2阳性肿瘤细胞均有不同程度的生长抑制作用。结论：单克隆抗体1H3能与p185^erbB2特异结合，并可不同程度地抑制NIH3T3－erbB2或SKBR3细胞的生长，除可应用于临床对p185^erbB2的检测外，尚具有肿瘤生物治疗的潜在应用开发价值。     

乳腺癌患者血清CA15-3和CEA联合检测的临床价值

目的 评价乳腺癌患者血清CA15-3和CEA的临床价值.方法 对422 例良恶性乳腺疾病患者进行血清CA15-3和CEA的测定.结果 良性疾病和未转移乳腺癌患者的血清CA15-3(>30U/mL)和CEA(>15ng/mL)阳性率较低,已有转移或复发的乳腺癌患者血清CA15-3的敏感性为75%,CEA的敏感性为33%,CA15-3值升高要比临床诊断早.结论 血清CA15-3和CEA对乳腺癌的敏感性不明显.血清CA15-3和CEA的值同时持续升高或保持阳性,应当考虑诊断乳腺癌有转移或复发.CA15-3比其他监测指标敏感性高.     

p21、p185、p53蛋白表达对卵巢交界性浆液性肿瘤的鉴别诊断价值

目的： 探讨ｒａｓ、ｃ ｅｒｂＢ ２、ｐ５３ 基因产物ｐ２１ 、ｐ１８５ 、ｐ５３ 蛋白表达对卵巢浆液性肿瘤中良性瘤、交界性瘤和癌的鉴别诊断价值。方法： 采用ＬＳＡＢ免疫组化法。结果：３ 种蛋白在良性瘤、交界性瘤和癌中的单一表达均呈递增趋势,差异显著;联合表达,２ 种以上蛋白同时阳性率后两组高于良性瘤组,差异显著,Ｐ＜ ０００５ ;３ 种蛋白同时阳性率癌组高于前两组,差异显著,Ｐ＜ ００５ 。结论：３ 种蛋白的表达可以作为卵巢浆液性肿瘤中良性瘤、交界性瘤和癌的鉴别诊断的客观指标。     

肾肿瘤患者血清p53抗体的测定及临床意义

目的探讨肾肿瘤患者血清p53抗体与临床病理特征之间的关系,以及手术前后血清p53抗体的动态变化规律。方法采用ELISA方法对肾肿瘤患者58例、良性肾疾病患者20例和健康人30例,以及肾肿瘤患者术前和术后7d进行血清p53抗体检测。结果肾肿瘤组中有13例血清p53抗体阳性,阳性率为22.4%,健康组及良性肾疾病组则无1例阳性,差异有显著性（P〈0.05）;肾肿瘤患者血清p53抗体指数和吸收率明显高于健康组及良性肾疾病组,且与肿瘤病理分期及淋巴结转移有密切的关系（均P〈0.05）;与患者年龄、性别、原发肿瘤大小无明显关系（P〉0.05）;肾肿瘤组术后7d血清p53抗体指数及吸收率较术前明显下降,差异有显著性（P〈0.05）。结论血清p53抗体用于肾肿瘤的诊断和鉴别诊断具有良好的特异性。动态监测血清p53抗体水平对判断预后有一定帮助。     

检测乳腺癌患者术后血清肿瘤指标的临床价值

目的研究乳腺癌患者术后血清CA15-3、CEA和CA-125水平与乳腺癌各种临床资料以及病情转归的关系。方法收集我院收治的临床信息完整的219例乳腺癌术后病例。应用化学发光免疫法检测血清CA15—3、CEA和CA-125浓度,统计分析其与各临床参数以及病情转归的关系。结果乳腺癌转移时,血清CA15—3、CEA和CA-125水平均明显高于未转移组（P=0．000）,且三项指标联合检测敏感性达64．1％。转移时血清CA-125和CA15—3水平与ER呈正相关（PCA-125=0．049,PCA15-3=0．039）。多脏器转移者血清CA15-3、CEA和CA-125浓度明显高于单脏器转移者（P=0．000）。远处转移病例CA15-3和CEA水平与局部复发病例存在统计学差异（PCA15-3=0．001,PCEA=0．022）。结论血清CA15—3、CEA和CA-125浓度升高与否是监测乳腺癌转移的有效指标。乳腺癌转移时血清CA15—3和（或）CA-125浓度升高可提示患者对内分泌治疗更敏感。     

血清hsa-miR-486-5p在乳腺癌早期诊断中的价值

目的 探讨与乳腺癌早期诊断密切相关的血清microRNA(miRNA)的临床价值。方法 对乳腺癌发生发展4个阶段（正常-非典型增生-原位癌-浸润性癌）的组织进行miRNA高通量测序,以得到与疾病进展密切相关的目标miRNA,进而利用RT-qPCR技术分析目标miRNA在4个阶段血清中的表达情况。结果 hsa-miR-486-5P在乳腺癌发生发展4个阶段的组织和血清中均随疾病进展呈下调状态,在早期乳腺癌患者血清中呈明显低表达,与乳腺癌分子分型无关（P>0.05）。早期乳腺癌组低表达的血清hsa-miR-486-5p与正常对照组相比呈显著差异性（P<0.01）;ROC曲线分析结果显示ROC曲线下面积（AUC值）为81.2%（95%CI： 0.707～0.917）,灵敏度和特异度分别为62.5%和90.3%。结论 血清hsa-miR-486-5p可以作为诊断早期乳腺癌的生物标志物,具有较高的临床应用价值。     

抗人p185erbB2人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建表达及活性测定

目的:HER2/neu过度表达见于多种恶性肿瘤.作为肿瘤抗原,p185erbB2是一个理想的肿瘤治疗靶点.本实验在既往工作基础上,构建嵌合型抗p185erB2单克隆抗体(单抗)的真核表达载体,并在CHO-dhfr-细胞中表达,从而降低鼠源性抗体的免疫原性,为进一步的应用研究奠定基础.方法:RT-PCR扩增p185erbB2单抗1-2的轻、重链可变区基因,插入嵌合抗体真核表达载体pWSD2中,脂质体转染CHO-dhfr-细胞.经RT-PCR、间接ELISA、Western blot检测人-鼠嵌合抗体的表达水平,用ELISA、免疫沉淀方法对嵌合抗体的亲和力和特异性进行初步鉴定.此外,采用MTT比色法检测嵌合抗体对高表达p185erbB2的乳腺癌细胞系SKBR3的生长抑制作用.结果:用RT-PCR、间接ELISA、Western blot方法证明人-鼠嵌合抗体在CHO-dhfr-细胞中表达;ELISA检测提示嵌合抗体与高表达p185erbB2的细胞反应阳性,与低表达p185erbB2的细胞反应阴性;免疫沉淀结果表明嵌合抗体可与p185erbB2分子特异性结合;MTT比色法检测表明嵌合抗体对过表达p185erbB2的乳腺癌细胞SKBR3的生长有抑制作用.结论:CHO-dhfr-细胞表达的人-鼠嵌合抗体可与p185erbB2特异性结合,并可抑制高表达p185erbB2的肿瘤细胞生长,表明抗人p185erbB2人-鼠嵌合抗体具有肿瘤生物治疗的潜在应用价值.     

乳腺癌患者血清VEGF-C水平变化及临床意义

目的探讨乳腺病患者血清血管内皮生长因子-C(Vascular Endothelial Growth Factor-C,VEGF-C)水平变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(双抗夹心ELISA法)检测54例乳腺癌患者、30例乳腺良性疾病患者血清VEGF-C水平及30例健康者血清VEGF-C水平,并作对比分析。结果乳腺癌患者血清VEGF-C水平(6056.72±123.95pg/ml)明显高于乳腺良性肿瘤患者血清VEGF-C水平(5031.34±209.10pg/ml)及正常对照组血清VEGF-C水平(5029.58±210.86pg/ml),差异有显著意义(P<0.01);晚期乳腺癌(Ⅲ、Ⅳ期)患者血清VEGF-C水平(5863.70±175.92pg/ml)较早期乳腺癌(Ⅰ、Ⅱ期)患者血清VEGF-C水平(5267.72±170.3pg/ml)增高,两组比较差异有显著性(P<0.01);有淋巴结转移的乳腺癌患者血清VEGF-C水平(6369.27±162.49pg/ml)显著高于无淋巴结转移的乳腺癌者(5784.90±147.14pg/ml)(P<0.05);手术前后患者血清VEGF-C水平有明显差异(P<0.05);而不同肿瘤组织学类型的乳腺癌患者血清VEGF-C水平差异无显著性(P>0.05)。结论乳腺癌患者血清VEGF-C水平变化,有可能作为乳腺癌病情进展的动态监测及预后判断的新指标之一。     

应用组织芯片技术检测卵巢癌组织中基质金属蛋白酶-2和p185HER-2/neu的表达及其临床意义

目的：研究基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和p185HER-2/neu在卵巢癌组织中的表达及临床意义,探讨MMP-2和p185HER-2/neu联合和单一检测对卵巢癌诊断的价值。方法：利用组织芯片技术结合免疫组织化学SP法检测80例卵巢癌组织及30例正常卵巢组织MMP-2和p185HER-2/neu的表达。结果：MMP-2和p185HER-2/neu在卵巢癌中的阳性率均明显高于正常卵巢组织（P〈0.01）,MMP-2和p185HER-2/neu的阳性率与分化程度、临床分期及淋巴结转移的差异均有统计学意义（P〈0.05~P〈0.01）,而与组织学类型无明显关系。联合MMP-2和p185HER-2/neu诊断卵巢癌的灵敏度、准确性有所上升,阴性似然比下降。结论：MMP-2和p185HER-2/neu在卵巢癌组织中的表达对卵巢癌的生长、浸润及转移起重要作用,与卵巢癌的分化、临床分期及淋巴结转移相关。HER-2/neu     

乳腺癌P^53蛋白表达及其血清抗体检测分析

目的探讨乳腺癌患者P^53蛋白压抗体表达情况。方法采用免疫PCR方法检测血清抗P^53蛋白抗体，酶免疫组化方法检测组织P^53蛋白表达。结果乳腺癌患者血清抗P^53蛋白抗体阳性率为39．5％，而非癌患者和正常人血清抗P^53蛋白抗体均为阴性（P〈0．01）。P^53蛋白阳性表达的乳腺癌患者抗P^53蛋白抗体阳性率为64．2％，明显高于P^53蛋白阴性表达蛆，血清P抗体测定与P^53蛋白表达密切相关（P〈0．01）。结论检测血清抗P^53蛋白抗体是检测组织P^53蛋白理想的替代工具，可作为乳腺癌血清学诊断新标志，用于乳腺癌的普查和早期诊断。     

p185胞外区基因表达载体的构建

目的 获得p185胞外区基因并与载体相连接,构建重组质粒。方法 从过度表达p185 r NIH3T3-erbB2细胞中提取总RNA,以特异性引物逆转录合成cDNA,再通过PCR扩增出目的基因片断,经酶切后与质粒载体组成重组质粒。用此重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue,在含氨苄青霉素的LB培养基上培养,挑取阳性克隆并鉴定。结果 得到了带有p185胞外区基因的重组质粒。结论 通过逆转录PCR扩增和基因重组到载体pQE40而成功地得到p185胞外区基因表达载体。     

p185~(neu)和p21~(ras)在肺癌组织中表达及相互关系

目的　检测 c- erb B- 2基因产物 p185 neu和 ras基因产物 p2 1ras在肺癌组织的表达情况 ,以揭示 c- erb B- 2和 ras基因在肺癌形成中的作用及其相互关系 .方法　运用免疫组织化学 SABC法检测 5 5例原发性肺癌组织中 2种基因产物 .结果　 10例小细胞肺癌组织均无 p185 neu和 p2 1ras的阳性表达 .2 8例肺鳞癌中 p185 neu和 p2 1ras阳性表达率分别是 46 %(13/ 2 8)和 5 4% (15 / 2 8) .16例肺腺癌中 p185 neu阳性表达率为 5 6 % (9/ 16 ) ,p2 1ras阳性表达率为 6 2 % (10 / 16 ) .肺鳞癌和肺腺癌中 2种蛋白的阳性表达率均无显著性差异 (P>0 .0 5 ) .p185 neu阳性表达与淋巴结转移具有明显相关性 (r=0 .36 ,P<0 .0 5 ) ,与其他临床病理因素无关 ;p2 1ras阳性表达与淋巴结转移、肿瘤大小等临床病理因素无关 .p185 neu和 p2 1ras在肺癌组织中的表达水平呈正相关 (r=0 .5 2 ,P <0 .0 1) .结论　c- erb B- 2和 ras基因的改变与非小细胞肺癌 (NSCL C)的发生有关 ,这 2种基因在 NSCL C的形成和发展中具有协同作用 .同时 ,检测 p185 neu和 p2 1ras还有助于评估肺癌患者的预后     

Pokemon和p53在乳腺癌组织中的表达及其生物学意义

目的 探讨乳腺癌组织中Pokemon和p53蛋白的表达及其相关性,并分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化En Vision 法检测90 例乳腺癌和相应癌旁组织中Pokemon 和p53 蛋白的表达情况。结果 乳腺癌组织中Pokemon和p53蛋白表达阳性率均明显高于癌旁组织（均P＜0.01）;Pokemon 和p53蛋白的表达与乳腺癌患者临床分期及淋巴结转移均有关（均P＜0.01）,而与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型及分级均无关（均P ＞0.05）。Spearman相关分析显示在乳腺癌组织中,Pokemon 和p53 蛋白表达呈正相关（P＜0.01）。结论 Pokemon 和p53蛋白异常表达可能与乳腺癌的发生、发展有关,联合检测两者对评估乳腺癌生物学行为及预后具有较重要的临床意义。