抗氧化酶对隐睾生精细胞凋亡的影响

目的 :探讨超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSHPx)对隐睾生精细胞凋亡的影响。　方法 :4 8只未成熟SD雄性大鼠随机分为隐睾组和对照组 ,于术后第 1、3、7d采集睾丸。TUNEL法检测其生精细胞凋亡 ;化学比色法测定其SOD、CAT、GSHPx的活性和丙二醛 (MDA)含量。　结果 :术后第 7d ,与对照组相比 ,隐睾重量、SOD活性、CAT活性和SOD/ (CAT +GSHPx)比值均显著降低 (P均 <0 .0 1) ,GSHPx的活性无显著变化 (P >0 .0 5 ) ,生精细胞凋亡指数和MDA含量均显著增加 (P均 <0 .0 1)。　结论 :隐睾生精细胞的凋亡与抗氧化酶活性的降低密切相关     

隐睾及睾丸固定术后对大鼠生精能力的影响

目的 观察隐睾及睾丸固定术后对睾丸生精能力的影响.方法 通过手术方法对80只SD大鼠制作单侧隐睾模型,随机分为10组,其中4组(每组10只)于隐睾术后7、14 d切取患侧睾丸组织,6组于隐睾术后7、14d行睾丸固定术,分别于术后2、4、6周取材.将所取得的睾丸组织称重后行流式细胞仪检测其细胞凋亡率和各生精细胞百分比以及组织中B淋巴细胞/白血病-2( bcl-2)和bax基因表达量.结果 隐睾睾丸重量明显下降,隐睾组1C细胞(7d组:10.61 ±1.10,14d组:11.79 ±0.91)较对照组降低(16.48±1.60,P＜0.05)、4C细胞也明显降低,而2C细胞(7d组:40.41±2.93,14 d组:51.41±6.45)较对照组增加(30.17±3.24,P＜0.05).隐睾各组生精细胞凋亡率(7d组:14.9±1.26,14 d组:6.90±0.96)高于正常对照组(2.50±0.44,P＜0.01),而睾丸复位固定术后各组生精细胞凋亡率均下降(P＜0.05).隐睾7、14 d睾丸中bc1-2蛋白表达量(7d组:4.68±0.47;14 d组:5.66 ±0.71)较对照组(7.47±1.01)降低而bax蛋白表达量(7d组:8.27±1.08;14 d组:6.26±0.21)较对照组(5.82 ±0.47,P＜0.05)升高,睾丸固定术后各组bcl-2蛋白表达量升高而bax蛋白表达量降低(P＜0.01).结论 隐睾可以使睾丸生精细胞凋亡增加,睾丸复位固定术后,睾丸生精功能可部分或全部恢复,其恢复程度和隐睾时间长短有关;bcl-2和bax表达在生精细胞凋亡的调控中起重要作用.     

他达拉非对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨5型磷酸二酯酶抑制剂他达拉非在大鼠睾丸缺血再灌注模型中的保护作用。方法:将84只健康成年雄性SD大鼠随机分成4组,A组:假手术组;B组:小剂量他达拉非组;C组:大剂量他达拉非组;D组:安慰剂组。每组21只,B、C、D组建立右侧睾丸扭转复位模型(720°,2 h)。术后立即予A、B组按他达拉非剂量为0.5 mg/(kg·d)灌胃,C组按他达拉非剂量为2 mg/(kg·d)灌胃,D组用等剂量的生理盐水灌胃,用药3、7、14 d后,取各组7只大鼠扭转侧睾丸,检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并光镜检测睾丸组织病理学参数。结果:B组[3 d:(254.46±7.43)n U/mg prot;7 d:(278.49±8.33)n U/mg prot;14 d:(317.99±3.31)n U/mg prot]、C组[3 d:(277.12±8.80)n U/mg prot;7 d:(309.40±2.14)n U/mg prot;14 d:(320.39±4.72)n U/mg prot]SOD活性均显著高于同期D组[3 d:(223.21±4.65)n U/mg prot;7 d:(231.45±4.16)n U/mg prot;14 d:(248.28±5.74)n U/mg prot],MDA含量均显著低于同期D组。C组3、7 d的SOD活性显著高于同期B组(P0.01),而MDA含量显著低于同期B组(P0.01),14 d时的SOD与MDA两组间没有显著性差异(P0.05)。睾丸组织的病理学改变:A组睾丸组织未见明显损伤,B组3、7、14 d之间病理学参数(生精上皮层数、睾丸结构得分、生精小管直径)存在显著差异(P0.01),B组14 d时和C组7 d时测得的生精上皮层数、睾丸结构评分、生精小管直径与A组14 d时没有显著性差异。结论:他达拉非可明显改善睾丸扭转后的缺血再灌注损伤,改善程度与用药时间、用药剂量呈明显的相关性。     

大鼠睾丸扭转损伤后白藜芦醇对损伤睾丸的保护和修复的研究

目的探讨不同白藜芦醇(resveratrol,Res)剂量对大鼠睾丸扭转损伤复位后的超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(CAT),丙二醛(MDA),白介素-6(IL-6)及睾丸脑红蛋白(neuroglobin,NGB)的影响。方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为扭转复位组为A组;白藜芦醇低剂量(25mg/kg)为B组;白藜芦醇高剂量(50mg/kg)为C组;对照组为(D)组。按Turner法建立单侧睾丸扭转模型。每组根据设定处理方式的不同分别进行处理。扭转复位术后48h,采集左侧睾丸并进行指标(SOD、cAT、MDA及IL-6含量)检测;采用原位缺口末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡指数(AI);HE染色及Johnsen评分评估睾丸组织病理改变;电镜观察睾丸组织内生精小管及生精细胞超微改变;RT-PCR法检测睾丸组织中NGB mRNA的表达情况。结果睾丸扭转损伤后,MDA为(2.890±6.5I)mg/L,IL-6为(31.221±7.02)u g/L明显升高,SOD为(240.985±8.19)mg/L,CAT为(1.006±0_31)mg/L及NGB mRNA为(0.35±0.01)明显减少,睾丸组织细胞人量凋亡。应用白藜芦醇后能改善上述改变,且随剂量增大,炎症改变叫显减轻:脑红蛋白基因表达量明显增高,其中A组;B组;C组;D组NGB mRNA含量分别为0.35±0.01;0.42±0.13;0.81±0.19;0.55±0.41,且组间两两比较均有统计学意义(P0.05)。结论白藜芦醇埘大鼠睾丸扭转具有保护作用,随剂量增中,其保护作用更加显著,同时具有提高抗氧化酶系统的抗氧化及降低血清炎症因子能力,其机制可能是通过诱导NGB mRNA表达而实现。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠精索静脉曲张生精细胞Caspase-3酶及bcl-2基因的影响

目的 探讨精索静脉曲张大鼠睾丸组织中一氧化氮(NO)与生精细胞凋亡之间的关系并研究其机制.方法 实验分3组:对照组(假手术组)、曲张组(精索静脉曲张组)和药物组,每组10只大鼠.(45±5)d的SD雄性大鼠复制左侧曲张模型.药物组为术后8周起腹腔注射N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME),剂量:50mg/lg·d-1),每组10只大鼠.术后10周用流式细胞仪检测睾丸生精细胞凋亡,分光光度法检测Caspase3活性,用硝酸还原酶法测定睾丸组织NO含量和NOS活性.逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2基因mRNA的表达.结果 与对照组对应侧相比较,曲张组大鼠双侧睾丸组织NO含量增加,NOS活性显著升高(P＜0.01),流式细胞仪枪测生精细胞凋亡率显著增加(P＜0.01),生精细胞Caspase-3酶的活性显著升高(P＜0.01),bcl.2基因mRNA表达明显减少(P＜0.01).药物组较曲张组大鼠对应侧睾丸组织NO含量、生精细胞凋亡显著减少(P＜0.01),生精细胞Caspase-3酶的活性显著降低(P＜0.01),bcl-2基因mRNA表达明显增加(P＜0.01).结论 精索静脉曲张明显诱导大鼠睾丸组织生精细胞凋亡.其机制可能与NO含量增加,NOS活性升高,生精细胞中Caspase-3酶的活性升高及bcl-2基因表达下调有关.L-NAME对曲张大鼠乍殖细胞有保护作用.曲张对睾丸的影响是是双侧性的.     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能保护作用的研究

目的探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的保护作用。方法观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响。测定各组实验大鼠睾丸超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱脂酶(ACE)活性和脂质过氧化物(LPO)、一氧化氮(NO)含量。结果治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组,SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.01)。结论生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精子质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关。     

大鼠单侧隐睾对侧睾丸的损害与抗氧化酶mRNA的表达

目的　从基因表达水平探讨单侧隐睾对侧睾丸损害机制。方法　 3 0只SD雄性大鼠分为对照组与隐睾组 ,每组各 15只。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测对侧睾丸中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)、铜 /锌超氧化物岐化酶 (Cu/Zn SOD)、过氧化氢酶 (CAT)mRNA的表达 ;化学比色法测定丙二醛 (MDA)的含量 ;生物素 dUTP/酶标亲和素法检测睾丸生殖细胞的凋亡。结果　术后 2周 ,与对照组比较 ,隐睾组GSH PX和SODmRNA表达明显下降 ,MDA和生殖细胞凋亡明显升高 (P <0 .0 1) ,而CATmRNA表达无明显改变 (P >0 .0 5 )。结论　单侧隐睾对侧睾丸存在GSH PX和SODmRNA表达降低 ,氧自由基升高和生殖细胞过度凋亡。     

肝再生增强因子在隐睾生精细胞中的表达及意义

目的:探讨肝再生增强因子(ALR)在隐睾生精细胞中的表达及其意义。方法:建立SD大鼠隐睾模型(n=20),设立正常(n=10)和手术对照(n=10)。分别采用免疫组化法、免疫荧光法检测术后10、40d(即PND30和PND60)大鼠睾丸组织生精细胞ALR和细胞色素C氧化酶亚单位Ⅱ(COXⅡ)表达情况;Perls染色法检测睾丸中三价铁含量。结果:正常和手术对照组精原细胞ALR呈强表达,隐睾组精原细胞ALR表达显著减弱;同年龄段各组间两两比较,COXⅡ表达水平差异无显著性;术后10d(PND30)隐睾组三价铁含量较同年龄段正常对照组和手术对照组显著减少(P<0.05)。结论:ALR在生精细胞发育的早期起着重要作用,隐睾ALR缺陷所引起的代谢障碍可能是其精子发生障碍的重要机制之一。     

葡萄籽原花青素对小鼠睾丸扭转复位后生精功能的保护作用

目的:探讨葡萄籽原花青素(GSP)对小鼠睾丸扭转复位后生精功能的保护作用。方法:24只健康雄性昆明小白鼠(8周龄,25～27 g)随机分为3组:对照组、扭转组、治疗组,每组8只。扭转组及治疗组建立单侧睾丸扭转复位动物模型,治疗组于扭转复位前30 min腹腔注射GSP(50 mg/kg),术后采用腹腔注射方式连续给药3 d,每天1次,每次50 mg/kg。扭转组方法同治疗组,治疗同体积生理盐水。术后第4天取扭转侧睾丸,检测组织病理学参数和生精细胞凋亡指数(AI),并检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。对照组行假手术。结果:治疗组与扭转组相比,Johnsen评分上升[(7.38±0.92)分vs(5.00±1.85)分,P<0.05],生精小管直径略增大[(178.75±1.58)μm vs(176.50±1.60)μm,P>0.05],生精细胞层数增加[(5.75±0.71)层vs(3.75±1.03)层,P<0.05],生精细胞凋亡指数AI明显降低[(16.25±1.67)%vs(40.50±1.60)%,P<0.05)],SOD活性明显上升[(52.67±3.57)U/mg prot vs(29.04±4.46)U/mg prot,P<0.05],MDA含量明显下降[(2.91±0.04)nmol/mg prot vs(4.63±0.05)nmol/mg prot,P<0.05]。结论:GSP对小鼠睾丸扭转复位后生精功能损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与其能清除氧自由基、抑制脂质过氧化、提高机体抗氧化能力有关。     

黄芪注射液对大鼠扭转复位后睾丸组织的保护作用

目的:探讨黄芪注射液对雄性Wistar大鼠扭转复位后睾丸的保护作用。方法:30只大鼠随机分为假手术组(A组)、睾丸扭转复位组(B组)、黄芪注射液治疗组(C组),每组10只,Turner法建立单侧睾丸扭转复位模型,原位缺口末端标记法检测各组睾丸组织中生殖细胞凋亡,化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果:黄芪注射液治疗组与睾丸扭转复位组比较,SOD含量明显升高,MDA含量明显降低,生精细胞凋亡指数明显降低。睾丸扭转复位组、黄芪注射液治疗组与假手术对照组比较,SOD含量明显降低,MDA含量明显升高,生精细胞凋亡指数明显升高。结论:黄芪注射液可减少大鼠睾丸扭转复位后睾丸组织的双侧睾丸生殖细胞凋亡,对扭转复位后睾丸生殖细胞有保护作用。其机理可能与提高抗氧化酶活性及减少氧自由基的产生从而减轻大鼠睾丸扭转复位后的缺血再灌注损伤有关。     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。