输精管结扎4月大鼠血清与前列腺组织的前列腺酸性磷酸酶活力变化

成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，随机分为输精管结扎组（ＶＧ）和假手术组（ＳＯＧ）。术后第４个月检测了前列腺酸性磷酸酶（ＰＡＰ）等代表前列腺功能与肿瘤标志的酶学指标。结果表明，（１）血清ＰＡＰ活力，ＶＧ为４．９６±３．４Ｕ／ｍｌ，ＳＯＧ为５．６３±１．６９Ｕ／ｍｌ，两组无显著差异（Ｐ＞０．０５）；ＶＧ前列腺组织ＰＡＰ活力（１８．００±８．８１Ｕ／ｇ）略高于ＳＯＧ的（１５．０４±１１．９０Ｕ／ｇ），但无显著性。Ｐ／Ｔ百分比值ＶＧ为６５．０２±２５．３６％，ＳＯＧ为６８．６５±１１．６５％，Ｐ大于０．０５。（２）血清与前列腺组织碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）与磷酸肌酸激酶（ＣＫ）活力，两组均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

前列腺特异抗原和酸性磷酸酶测定用于鉴别前列腺癌和前列腺肥大

本文报告了１８０名正常人，１１８例前列腺癌和９５３例前列腺肥大病人的ＰＳＡ和ＰＡＰ测定结果。正常人、前列腺肥大和前列腺癌病人血清ＰＳＡ水平的中位数依次为１．３、３．０和１５２μｇ／ｌ、血清ＰＡＰ的中位数为０．６、１．２和１３．５μｇ／ｌ。如分别以４．２μｇ／ｌ和２．８μｇ／ｌ为正常上限，则前列腺肥大的阳性检出率为３８．９％和１８．７％。推荐血清ＰＳＡ以２０μｇ／ｌ、ＰＡＰ以１０μｇ／ｌ为鉴别前列腺癌和前列腺肥大的有效水平，此时ＰＣａ的阳性检出率分别为９７．２％和５９．２％，但ＢＰＨ的交叉率下降到５．４％和３．１％。     

前列腺酸性磷酸酶碘标方法的比较

前列腺酸性磷酸酶碘标方法的比较王桂莲，黄飙，浦洪波，李文新，朱寒珍前列腺酸性磷酸酶（ＰＡＰ）是前列腺癌较为特异的标志物，本文以Ｉｏｄｏｇｅｎ法进行１２５Ｉ－ＰＡＰ的制备，并与氯胺－Ｔ法进行了比较。１．材料ＰＡＰ和兔抗ＰＡＰ血清由本所制备。牛血清白蛋白...     

抗利尿激素单克隆抗体的制备及初步应用

应用B淋巴细胞杂交瘤技术,成功地建立了分泌抗抗利尿激素(ADH)的单克隆抗体细胞株。新获的细胞株分泌的单克隆抗体类型属IgG2a。具诱生腹水抗体滴度可达1.2×10~4稀释度,灵敏度为2.5ng/ml。抗体的亲和常数为3.11×10~9L/mol,亲和力受温度影响明显。ADH McAb与催产素等11种神经肽进行竞争抑制试验均无交叉反应,静脉注射McAb可使新西兰白免尿量明显增加。用PAP免疫组化的方法对人和大鼠下丘脑神经细胞进行ADH定位检测,视上核及室旁核的神经细胞及神经纤维均有明显清晰的染色颗粒。应用放射免疫方法检测大鼠垂体,下丘脑组织ADH含量分别为186.46±53.23ng/mg,3.32±1.69ng/mg。因此,抗ADH McAb在八DH的组织学定位,组织含量的测定,以及作为中和剂应用在各种疾病的研究上都有重要的意义。     

抗人肿瘤细胞核单克隆抗体的制备及鉴定

根据Epstein等报告,肿瘤坏死部分的不溶性抗原可以作为放射免疫检测与治疗的靶部位。作者制备了抗人肿瘤细胞核单克隆抗体(McAbs),并对其性质进行了鉴定。放射性同位素标记的抗核McAds的初步生物分布试验表明,抗核McAds确可到达肿瘤坏死部位。     

宫颈癌抗独特型单克隆抗体的制备和鉴定

目的：制备宫颈癌抗独特型单克隆抗体并鉴定其抗原模拟特性。方法和结果：以识别小鼠和人宫颈癌相关抗原分子共同表位的单克隆抗体AU14-1（Ab1）为免疫原在含免疫反应剂的无血清培养液中致敏小鼠脾细胞,并将其与SP2/0融合,经筛选和克隆化,建成一株能分泌抗独特型单克隆抗体（Ab2）的杂交瘤细胞系。Ab2的抗原模拟特性经ELISA、结合和竞争抑制试验以及免疫组化染色,表明为Ab2β,具有宫颈癌细胞膜表面抗原的“内影像”。结论：获得一株具有宫颈癌抗原内影像的抗独特型单克隆抗体。     

抗人肺癌细胞转移相关抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定

用转移能力及其它生物学特性不同的2个人肺腺癌细胞系免疫BALB/c小鼠,制备出一组可与人肺腺癌细胞发生特异性反应,而与其它脏器肿瘤组织无交叉反应的单克隆抗体。经初步鉴定,其中的3个单抗分别识别低转移或高转移肺腺癌细胞系表面抗原。     

前列腺特异抗原和酸性磷酸酶测定用于鉴别前列腺癌？…

本文报告了１８０名正常人，１１８例前腺癌和９５３例前列腺肥大病人的ＰＳＡ和ＰＡＰ测定结果。正常人、前列腺肥大和前列腺病人血清ＰＳＡ水平的中位数依次为１．３、３．０和１５２μｇ／ｌ、血清ＰＡＰ的中位数为０．６、１．２和１３．５μｇ／ｌ。如分别以４．２μｇ／ｌ和２．８μｇ／ｌ为正常上限，则前列腺肥大的阳性检出率为３８．９％和１８．７％。推荐血清ＡＰＳ以２０μｇ／ｌ、ＰＡＰ和１０μｇ／ｌ为鉴别前列腺癌和     

抗人hnRNP A1单克隆抗体的制备及在颅咽管瘤组织中的应用

目的制备核不均一核糖核蛋白Al（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein Al，hnRNPAl）的单克隆抗体，探讨hnRNP Al蛋白的生物学功能。方法利用重组hnRNPA1蛋白为免疫原，免疫BALB／c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2／0进行常规融合，通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化。获得鼠抗hnRNPAl单克隆抗体的杂交瘤细胞株，通过ELISA、Western Blot和免疫组织化学实验等方法分别对其效价和特异性进行鉴定。结果成功地建立了3株稳定分泌抗hnRNPAl的单克隆抗体杂交瘤细胞株。分别命名为E006、E009和E012。3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。3株单克隆抗体通过组织化学实验和Western Blot实验都能特异性地结合真核细胞内源性的hnRNPAl蛋白。结论获得了效价高、特异性好的抗hnRNPAl蛋白的单克隆抗体，这为进一步研究hnRNPAl的生物学功能及它在癌发生事件中的作用奠定了基础。     

运动神经元单克隆抗体的制备及初步鉴定

以猪脊髓前角运动神经细胞制备的匀浆免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠。按常规方法制备、筛选抗运动神经元单克隆抗体。总计３５株杂交瘤细胞所分泌的ＭｃＡｂ，与大鼠半月神经节细胞免疫组化反应均呈阴性，３０株与脊髓前角运动细胞（Ｍｎ）呈阳性反应、其中５株ＭｃＡｂｓ免疫组化反应特异性较强，用ＥＬＩＳＡ方法测定其滴度在２０４８～４０９６之间，免疫双扩散法测定，５株杂交瘤均分泌ＩｇＧ。     

抗精氨酸支原体单克隆抗体的制备

本室制备了4株(A11、E5、F5、D1)抗精氨酸支原体的单克隆抗体(McAb )。用APAAP桥联酶标技术测定该抗体腹水效价为1:640～1:40 960,A11抗体的Ig类型是IgM,而E5、F5及D1均为IgG1。建立的4株能稳定分泌抗精氨酸支原体的McAb,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。该McAb用于检测细胞培养中的支原体污染,可特异性地检出精氨酸支原体,达到快速、准确的要求。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备

作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。     

抗rHuIL-8单克隆抗体的制备和初步鉴定

本文以单核细胞衍生的基因重组人IL-8(MIL-8)为免疫原,经常规免疫、融合、克隆化制备了6株抗MIL-8的单克隆抗体(2G2、4E1、4C3、4D7、5C9、5A4)。其中5株(除4D7)对MIL-8的嗜中性粒细胞趋化活性具有中和作用,6株单抗均与内皮细胞衍生的重组人IL-8(EIL-8)具有交叉反应,但与表达IL-8的载体菌裂解液均无交叉反应。     

抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定

运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,Westernblot结果表明对内皮细胞中的ESM 1蛋白及细胞培养上清中的ESM 1均可特异性识别。并观察到ESM 1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中。在肾组织中 ,ESM 1定位于血管内皮细胞 ,且肾癌标本中ESM 1阳性表达显著高于正常肾组织。免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性。     

人促甲状腺激素单克隆抗体的制备及鉴定

目的：制备特异性强、灵敏度高的人促甲状腺激素（hTSH）单克隆抗体,为建立高灵敏性和高特异性的hTSH检测方法奠定基础。方法：人工合成人促甲状腺激素（hTSH）上的28个氨基酸,采用戊二醛交联法与牛血清白蛋白（BSA）构建完全抗原。用人工免疫原免疫BALB／c小鼠,利用杂交瘤技术建立分泌抗hTSH单克隆抗体的杂交瘤细胞,并对得到的单抗进行鉴定。结果：建立了一株杂交瘤细胞4E5,制备了腹水单抗,经鉴定,抗体重链属于IgG1类型,轻链属于K型,McAb腹水ELISA效价达1：1．6×10^5,与促黄体生成激素（LH）、促卵泡激素（FSH）、人绒毛膜促性腺激素（HCG）无明显交叉反应,细胞株冻存复苏后抗体分泌稳定。结论：本实验建立的细胞株显示稳定性好,特异性高,McAb腹水效价高,为进一步提高hTSH检测的灵敏性和简便性提供依据。     

抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）。方法利用重组Derf1蛋白为免疫原,免疫BALB／c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western—blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Derf1蛋白和天然的粉尘螨提取物。其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别。结论成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Derf1的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Derf1检测及纯化方法奠定了基础。     

抗人双特异性蛋白磷酸化酶Dusp23单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备高亲和力、高特异性的抗人双特异性磷酸化酶23（Dusp23）单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定,为Dusp23功能的研究奠定基础。方法以纯化的原核表达Dusp23为免疫原,免疫BALB／c小鼠。待免疫小鼠血清效价满足融合需要,取其脾细胞与Sp2／0细胞融合,经多次筛选及克隆化建立可稳定分泌抗Dusp23单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将细胞株打入BALB／c小鼠腹腔制备腹水,用ProteinG亲合层析柱纯化所得腹水获得纯化抗体,ELISA及Western—blot检测抗体的效价和亲和力,并用亚型鉴定试纸条鉴定单克隆抗体的亚型。利用纯化后的两株单克隆抗体对临床收集的肝癌组织标本进行免疫组化分析。结果筛选到2株（N012和N013）可以稳定分泌人双特异性磷酸化酶23（Dusp23）单克隆抗体的细胞株,并对其进行纯化和鉴定,两株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1：5120和1：2560,腹水效价分别为1：25600和1：12800,以肝癌细胞HepG2和重组Dusp23蛋白为抗原,利用纯化后的两株抗体Western-blot鉴定结果均在预期位置出现阳性条带。两株杂交瘤细胞分泌抗体的亚型鉴定N012和N013均为IgG1型,轻链均为K型。两株抗体分别与临床肝癌组织标本免疫组化结果均为阳性。结论成功制备两株能特异性识别Dusp23的单克隆抗体,为进一步研究Dusp23的生物学功能,揭示其与肿瘤发生发展之间的关系奠定了基础。