125例乙型肝炎病毒携带产妇血清及乳汁HBV DNA含量的检测

乙型肝炎(简称乙肝)是危害我国人民身体健康的主 要传染病之一。传播途径除血源性传播外也可经口、母 子垂直传播等[1]。因此乙肝病毒(HBV)携带产妇能否母 乳喂养日益受重视。我们用荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)对125例HBV携带产妇的血清和乳汁进行了HBV DNA定量测定,不仅可以避免常规PCR扩增物易污染而 导致的假阳性,也可避免酶免法对患者血清中的特异性 抗原抗体系统进行检测时,缺乏对病毒本身复制的直观 了解缺点[2]。FQ PCR可观察HBVDNA在体内复制的情 况,为临床正确诊断和及时采取恰如其分的治疗措施提 供依据,同时…     

125例乙型肝炎病毒携带产妇血清及乳汁HBV DNA含量的检测

乙型肝炎(简称乙肝)是危害我国人民身体健康的主要传染病之一。传播途径除血源性传播外也可经口、母子垂直传播等。因此乙肝病毒(HBV)携带产妇能否母乳喂养日益受重视。我们用荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)对125例HBV携带产妇的血清和乳汁进行了HBV DNA定量测定,不仅可以避免常规PCR扩增物易污染而导致的假阳性,也可避免酶免法对患者血清中的特异性抗原抗体系统进行检测时,     

乙型肝炎病毒携带产妇母乳喂养问题研究现状与对策

母乳作为婴儿最理想的天然食品。不仅各种成分易于吸收。而且含有丰富的抗体和免疫细胞。母乳喂养更能促进母子之间感情。对婴儿的心理、智力、身体发育都十分重要。因此母乳喂养已日益受到普遍重视。但我国每年有数十万的乙型肝炎表面抗原携带分娩。关于乙肝血清学指标阳性的母亲能否哺乳仍有争议。因而乙肝血清学指标阳性的母亲是否适于哺乳的问题值得进一步探讨。     

乙型肝炎病毒载量与ABO血型的关系

目的探讨乙型肝炎（下称乙肝）病毒携带者病毒载量与ABO血型的相关性。方法对乙肝病毒携带者进行DNA测定及ABO血型鉴定。结果乙肝病毒携带者病毒载量在各血型之间的构成比依次为O〉A〉B〉AB。结论乙肝病毒携带者及病毒载量与ABO血型无关。     

HBV携带产妇血清与乳汁HBV-DNA载量的临床分析

目的 通过检测HBsAg阳性产妇的血清及乳汁HBV-DNA载量,探讨产妇血清和乳汁HBV-DNA的相关性,以指导母乳喂养.方法 选取2006年5月至2010年11月在产科住院分娩的HBsAg阳性产妇220例,采用荧光定量聚合酶链反应检测产妇血清和乳汁HBV-DNA载量.结果 (1)220例HBsAg阳性产妇中135例HBV-DNA阳性,阳性率为62.3%;220例中85例HBV-DNA阴性产妇的初乳、半月乳及满月乳HBV-DNA均阴性;135例HBV-DNA阳性产妇的初乳HBV-DNA检测26例阳性,阳性率为19.3%(26/135);余109例HBV-DNA阳性产妇复检半月乳HBV-DNA 阳性47例,阳性率为43.1%(47/109);再余62例HBV-DNA阳性产妇复检满月乳HBV-DNA阳性35例,阳性率为56.5%(35/62);135例HBV-DNA阳性产妇中27例的初乳、半月乳及满月乳HBV-DNA均阴性,阴性率为20.0%(27/135).(2)半月乳及满月乳分别与初乳比较,HBV-DNA阳性率均显著增高,差异有统计学意义(P＜0.01);半月乳(54.1%)及满月乳(80.0%)分别与初乳(19.3%)比较,HBV-DNA累计阳性率均显著增高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 血清HBV-DNA阴性产妇的乳汁是相对安全的,HBV-DNA阳性产妇乳汁中大多有HBV的存在,应避免母乳喂养,以防止传染.检测HBsAg阳性产妇乳汁HBV-DNA载量,可以直接反映产妇传染性的强弱,对指导母乳喂养提供了可靠依据.     

高病毒载量血清HBV DNA定量方法的评价

摘要：目的：探讨血清HBV DNA定量检测结果高于检测上限时,能否直接延伸标准曲线,用于HBV DNA定量分析。 方法：以上海申友生物公司HBV DNA荧光定量检测试剂盒为例,选择HBV DNA＞3×10⁷ IU/mL的血清标本30例。每例血清在3个不同时间点提取DNA,或将血清以10、100和1 000倍稀释后提取DNA,或将未稀释血清提取的DNA以10、100和1 000倍稀释后进行HBV DNA定量检测,检测结果以10为底数进行对数转换后进行统计学分析。 结果：经对数转换,3个不同时间点HBV DNA定量检测结果的组间相关系数为0.356（F=2.66,P＜0.01）;36.7%（11/30）的标本最大差值＜0.5,60.0%（18/30）介于0.5~1.0,3.3%（1/30）达1.01;血清稀释后定量检测HBV DNA,96.7%（29/30）的标本最大差值为0.02~0.45,均＜0.5,3.3%（1/30）为0.53,介于0.5~1.0;组内相关系数为0.960（F=72.57,P<0.01）。稀释DNA定量检测HBV DNA,最大差值为0.02～0.44,均＜0.5;组内相关系数达0.973（F=107.66,P<0.01）。3组均数经方差分析,F=1.66,P＞0.05,差异无统计学意义,且43.3%（13/30）的标本的最大差值为0.15~0.48,均<0.5;56.7%（17/30）为0.5~0.85,均介于0.5~1.0。 结论：定量检测HBV DNA水平超过检测上限时,直接延伸标准曲线可获得较准确的HBV DNA定量结果;但若需准确定量,最好用原倍血清提取DNA经100倍稀释后检测。     

慢性乙型肝炎产妇血液、初乳、满月乳HBV DNA载量分析

众所周知,母乳中含有丰富的营养成分和免疫物质,是婴儿的天然食品,然而,携带乙型肝炎病毒的产妇能否母乳喂养一直是个值得探讨的问题。PCR技术在中国已趋于成熟,HBV DNA成为乙肝病毒存在和复制的直接证据。若母乳有HBV DNA存在,建议避免母乳喂养,防止感染,这一观点已被大多数学者认可,且应用于临床。若母亲血液有HBV DNA存在而母乳中检测不到,是否可以母乳喂养目前尚未见这方面的报到。为此,作者对乙肝阳性产妇血液与初乳及满月乳HBV DNA载量进行了研究分析。     

探讨乙型肝炎病毒携带产妇HBV-DNA水平对新生儿的影响

目的探讨乙型肝炎病毒携带产妇血清HBV－DNA水平对乳汁和新生儿HBVDNA水平的影响,以此指导孕期处理和喂养方式。方法选择2012年1～12月的乙型肝炎病毒携带产妇120例,检测产妇血清、乳汁和新生儿血清中的HBV-DNA水平,对结果进行综合分析。结果64例产妇血清HBV－DNA〈500copies／mL,其乳汁HBV－DNA检出阳性为1例,新生儿血清HBVDNA检出阳性1例;29例产妇血清HBV－DNA水平为500copies／mL至1．0×106copies／mL,其中4例乳汁HBVDNA检出阳性,新生儿血清HBV-DNA检测均为阴性;27例产妇血清HBV-DNA水平大于或等于1．0×106copies／mL,其中25例乳汁HBV-DNA阳性,1例新生儿血清HBV-DNA检测阳性。结论产妇血清HBV-DNA水平大于或等于1．0×106copies／mL时,产妇乳汁中的HBV-DNA阳性检出率将大幅度增加,应该禁止母乳喂养;产妇血清中HBV-DNA水平对于宫内传播无明显影响。     

HBV—DNA含量与乙型肝炎病毒血清标志物的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV—DNA）含量与乙肝患者血清病毒标志物（HBV—M）的相关性。方法对2009年1月至2011年12月同时采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）技术对681例乙型肝炎患者进行乙型肝炎两对半免疫指标和HBV-DNA含量检测,并进行相关性分析。结果血清学检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）＋乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）十乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）阳性（大三阳）患者HBV-DNA和乙型肝炎表面抗原（HBsAg）＋乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性率明显高于其他类型（阳性率94．9％和94．3％）,且其病毒载量显著高于其他组。结论乙型肝炎病毒血清标志物与HBV—DNA存在相关性,能较准确地判断HBV复制的程度及其传染性的强弱,将二者结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断和治疗数据。     

乙型肝炎产妇血清与乳汁HBV标志物检测意义

目的调查乙型肝炎(下称乙肝)病毒携带产妇血清乙肝病毒DNA(HBV-DNA)含量、乙肝血清免疫学指标与乳汁中HBV-DNA含量及阳性率的关系,以指导母乳喂养。方法选择血清乙肝表面抗原(HBsAg)为阳性的乙肝携带者的产妇116例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及乳汁中免疫血清学标志物;荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术测定血清与乳汁与中HBV-DNA含量,并对所有检测指标进行相关性分析。结果在ELISA检测中HBsAg乳汁中阳性率为62.1%,低于血清结果差异有统计学意义(P0.01);其他免疫学标志物乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒表面抗体(HBsAb)、乙肝病毒e抗体(HBeAb)、前S1抗原差异无统计学意义(P0.05)。HBV-DNA检测结果中HBeAg阳性组血清HBV-DNA阳性率97.6%,乳汁HBV-DNA阳性率85.7%,二者差异无统计学意义(P0.05);HBeAb阳性组血清HBV-DNA阳性率12.1%,乳汁HBV-DNA检2例,阳性率2.7%,二者差异有统计学意义(P0.05)。乳汁HBV-DNA的含量随血清HBV-DNA含量的升高而增大,二者呈正相关(r=0.864,P0.05)。结论乙肝产妇免疫学标志物不只是能决定进行母乳喂养的指标,同时还应检测血清HBV-DNA与乳汁HBV-DNA,两者均为阴性才能进行哺乳。     

HBV DNA定量与乙肝标志物检测结果对比分析

目的 探讨血清中HBV DNA定量与乙肝标志物（HBV-M）之间的关系及临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和ELISA法分别检测535例门诊病人的血清HBV DNA含量和HBV-M,并对结果进行对比分析.结果 HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为88.8%（207/233）,平均拷贝数为1.0＊10^8/ml;HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为31.6%（50/158）,平均拷贝数为6.2＊106/ml;HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为21.7%（15/69）,平均拷贝数为1.8＊106/ml;HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为6.2%（1/16）,平均拷贝数3.2＊103/ml;全阴性组血清HBV DNA检出率为5.0%,平均拷贝数为2.0＊103/ml;其他组合,HBV DNA检出率为0.结论 对临床HBV感染、复制及传染性的判断,除乙肝标志物ELISA检测外,加做HBV DNA FQ-PCR检测具有重要意义.     

乙型肝炎病毒DNA定量与血清学标志物的关系

目的探讨乙型肝炎（下称乙肝）病毒（HBV）DNA定量与HBV血清学标志物（HBVM）的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测225例乙肝感染者血清的HBV DNA含量,并用酶联免疫吸附试验（ELISA）对其血清学标志物进行检测。结果在不同HBV M模式中,HBV DNA与HBV前S1抗原（preS1Ag）总检出率差异无统计学意义。在模式乙肝病毒表面抗原（HBsAg）（＋）、乙肝病毒e抗原（HBeAg）（＋）和抗核心抗原抗体（＋）中血清HBV DNA含量明显高于其他模式。在139例HBV DNA阳性的标本中,HBV DNA与preS1Ag检出率差异无统计学意义（P〉0．05）,HBV DNA与HBeAg检出率差异有统计学意义（P〈0．01）,同时preS1Ag阳性组HBV DNA定量值显著高于preS1Ag阴性组。结论HBV DNA或preS1Ag与HBV复制密切相关,preS1Ag较HBeAg更能敏感反应HBV复制,联合检测HBV DNA与HBVM在乙肝的诊断治疗中更有重要的临床指导价值。     

HBV DNA含量与前S1蛋白抗原和HBV血清学标志物的相关性分析

目的 探讨HBV DNA检测、前S1蛋白抗原与乙型肝炎血清标志物的相关性.方法 采用PCR法检测HBVDNA;ELISA法检测前S1蛋白抗原及乙型肝炎血清学标志物:HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb.结果 644例HBV DNA≥1.0×103Copies/m乙肝患者血清中A组:HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性占50.47%(325/644);B组:HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性占38.82%(250/644);C组:HBsAg、HbcAb阳性占10.71%(69/644).Pre-S1阳性532例.占82.6%.结论 Pre-S1抗原与HBVDNA、HBeAg有较好的一致性和互补性.可作为乙肝病毒存在和复制的观察指标,对病情的预后及疗效判断具有指导意义.     

裂解液加热煮沸法在血清HBV DNA抽提中的应用

目的建立裂解液加热煮沸法抽提血液HBV DNA的方法。方法选取浓度分别为10^6、10^5、10^4、10^3copies/ml的HBV DNA阳性血清,采用5种方法抽提HBV DNA,并用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测抽提产物。结果在HBV DNA浓度为10^6、10^5、10^4copies/ml时5种抽提法（异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/kit/SDS加热煮沸/chelex-100加热煮沸）均能得到阳性结果,而在HBV DNA为低浓度10^3copies/ml时,只有异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/chelex-100加热煮沸能得到阳性结果。结论chelex-100裂解液加热煮沸抽提HBV DNA操作简便、省时、经济,为血液标本HBV基因检测在临床上的大规模应用奠定基础。     

乙型肝炎患者血清HBV DNA与前白蛋白定量检测的意义

目的探讨乙型肝炎(乙肝)患者HBV DNA与血清前白蛋白(PA)定量检测的意义,比较两者在乙肝中的临床应用价值。方法采用荧光定量PCR法和免疫比浊法,对312例5组携带乙肝不同病毒标志物的慢性乙肝患者进行HBVDNA定量和PA检测。结果临床各型慢性乙肝患者PA水平均降低,组间比较有显著性差异(F=63.97,P<0.05),PA值随肝病病情加重呈进行性下降,下降幅度与肝脏病变严重程度相平行。HBV DNA阳性率与慢性乙肝病情的严重程度不一致,乙肝患者HBV DNA阳性组与阴性组间PA水平及异常率均无明显差异(F=0.86,P>0.05;χ2=2.14,P>0.05),HBV复制组PA水平与HBV不复制组比较,亦无显著性差异(t=0.236,P>0.05)。结论慢性乙肝患者HBVDNA定量检测是了解HBV复制和感染的可靠指标,但HBV DNA不能反映乙肝病情的临床严重程度。血清PA是反映肝细胞受损的敏感指标,对乙肝病情和预后判断有重要价值。PA水平与HBV复制及HBV DNA含量无明显关系。     

慢性乙肝患者血清趋化因子MCP-1浓度与病毒载量关系的研究

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血清中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达水平与HBV DNA载量之间的相关性.方法 用ELISA检测CHB患者和健康对照者血清中的MCP-1 蛋白浓度,以实时荧光定量PCR检测CHB患者血清中HBV DNA拷贝数.结果 CHB组血清中MCP-1浓度是157±80 ng/L,健康对照组MCP-1浓度是265±44 ng/L,CHB组血清中MCP-1浓度显著低于健康对照组,t=5.355,P＜0.001,差异有统计学显著性意义;CHB患者血清中MCP-1浓度与血清中HBV DNA拷贝数呈负相关(r=-0.602,P＜0.001).CHB患者血清中MCP-1的浓度是降低的,MCP-1浓度与血清中HBV DNA 载量之间呈负相关(r=-0.602,P＜0.001).结论 乙肝病毒与宿主细胞相互作用下调机体MCP-1表达,可能对HBV致病机理的研究提供一个新的视点.     

乙肝病毒Pre S1与HBV M和HBV DNA检测的相关性分析

目的　了解PreS1与HBVM和HBVDNA检测的关系及其临床应用价值。方法　PreS1检测采用ELISA方法 ,HBVM检测采用电化学免疫发光法 ,HBVDNA检测采用荧光定量PCR法。结果　PreS1在HBeAg(+)组的检出率86 9% ,明显高于其他HBVM模式组 (P <0 0 1) ;PreS1检出乙肝病毒的灵敏性高于HBeAg检测 ,检测灵敏度为 80 9%(HBeAg为 6 1 8% ) ,检测有效率为 86 1% (HBeAg为 75 7% )。结论　PreS1与HBeAg具有较好的相关性 ,其检测灵敏性 (与HBVDNA的相关性 )和检测有效率都优于HBeAg检测 ,具有较好的临床应用价值。     

HBV DNA含量与T淋巴细胞的相关性研究

目的 观察乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV DNA的含量与T淋巴细胞亚群的相关性,探讨HBV感染者细胞免疫功能的变化.方法 收集60例HBV感染者的血清,用荧光定量PCR仪检测其HBV DNA的含量,按HBV DNA的浓度分为HBV DNA阴性组(<500.00 copy/mL)、HBV DNA低浓度组[(500～1)×105 copy/mL]和HBV DNA高浓度组(1×105～1×108 copy/mL),另外取20例健康人的血清作对照,同时取上述80例的新鲜外周血,用流式细胞仪检测他们的T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+及CD3+CD4+/CD3+、CD8+,对其结果 进行分析.结果 HBV DNA阴性组和低浓度组的CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD3+CD4+/CD3+CD8+与健康对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),HBV DNA高浓度组的CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD3+CD4+/CD3+CD8+与健康对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),HBV DNA低浓度组和高浓度组的HBV DNA含量与CD3+CD4+和CD3+CD4+/CD3+CD8+呈现负相关关系,与CD3+CD8+呈现正相关关系,相关系数分别为0.46、0.69和0.52.结论 HBV DNA对细胞免疫产生了影响,HBV DNA含量与T淋巴细胞亚群的分布存在一定的相关性.     

PreS1、乙肝两对半与HBV—DNA检测相关性分析

[目的]探讨慢性乙型病毒肝炎病人乙肝两对半（HBV—M）、前S1（PreS1）及HBV—DNA检测的相关性。[方法]HBV—M和PreS1采用ELISA法检测，HBV—DNA采用Real—time PCR法检测。[结果]131例慢性乙肝病人的HBV—M检测中，HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、抗-HBc（＋）（1．3．5阳性）俗称“大三阳”，HBsAg（＋）、抗-HBe（＋）、抗-HBc（＋）（1．4．5阳性）俗称“小三阳”，HBsAg（＋）、抗-HBc（＋）（1．5阳性）3种典型感染模式为126例，占96．2％；其中72例1．3．5阳性病例中PreS1和HBV—DNA阳性分别为60例和72例，阳性率分别为83．3％和86．1％，而42例1．4．5阳性病例中PreS1和HBV—DNA阳性分别为12例和28例，阳性率为28．6％和66．7％；在78例PreS1阳性病人中HBV—DNA阳性占68例，其阳性率为87．2％，48例PreS1抗原阴性的病人中HBV—DNA阳性为32例，其阳性率为66．7％。[结论]在慢性乙型肝炎患者HBV—M检测“大三阳”模式中PreS1与HBV—DNA均表现高阳性率，二者具有良好的相关性（P〈0．01）；而“小三阳”模式中PreS1阳性率较低，但HBV—DNA仍有较高的阳性率，表明在慢性乙肝患者“小三阳”模式中HBV—DNA检测比PreS1检测更有价值（P〈0．01）。值得注意的是在我们的观察中PreS1阳性和阴性病人均有较高的HBV—DNA阳性率，二者没有明显差异（P〉0．05）。因而，在临床诊断、治疗和疗效观察中HBV—DNA可作为检测“金标准”，而PreS1检测时PreS1阴性的病人也不应忽视。     

HBV DNA定量与乙型肝炎临床及病理关系的探讨

目的　探讨HBVDNA定量与各型乙型肝炎临床及病理的关系。方法　采用美国PE公司生产的 5 70 0型荧光定量PCR仪 ,对 83 8例乙型肝炎病毒单纯感染的各型肝炎患者行HBVDNA定量检测 ,并同时检测其它乙型肝炎病原学标志物 ,对部分患者行肝穿刺病理检查。结果　慢性乙型肝炎、肝硬变、慢性重型肝炎中 ,HBVDNA定量检测与乙型肝炎血清学标志有明显的一致性。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性模式、HBsAg、HBcAb阳性模式和HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性模式与HBVDNA阳性的符合率分别为 94.3 8%、3 8.5 6%、2 7.3 0 %。各型肝炎的HBVDNA定量比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但慢性乙型肝炎HBVDNA阳性率明显高于肝硬变及慢性重型肝炎组 (P <0 .0 0 1)。 15例患者的HBVDNA定量与肝脏病理学分析 ,HBVDNA定量与肝组织炎症及纤维化无明显相关。结论　HBVDNA定量检测特异性强 ,灵敏度高 ,与HBeAg阳性呈正相关 ,是乙型肝炎诊断和观察抗病毒治疗的一项可靠的判断指标。但与肝组织炎症及纤维化无明显相关。