成纤维细胞生长因子受体在人正常皮肤和伤口处的免疫定位

成纤维细胞生长因子(FGF)是一个有22个成员的细胞因子家族，与细胞表面受体结合调节细胞生长、增殖、分化和基质合成并参与炎症反应，其作用与细胞分化及生化状态和理化环境有关。目前发现有4种成纤维细胞生长因子受体(FGFR)，作者采用免疫组化技术检测了4种受体在正常皮肤和伤口处的表达。结果：①正常皮肤中FGFR的表达：FGFR-1表达于表皮各层、皮肤附属器、竖毛肌、血管和真皮成纤维细胞；FGFR-2在表皮、毛囊、皮脂腺、小汗腺、血管和成纤维细胞有表达，而且在基底层呈强阳性；FGFR-3在基底层的上部和毛囊内层呈强阳性；FGFR-4主要见于血管平滑肌、竖毛肌和小汗腺；②头皮生长期毛囊FGFR的表达：FGFR-1在毛发基质细胞、内外根鞘和毛乳头细胞强表达；FGFR-2的表达定位与FGFR-1相似，并且在毛囊根部基质细胞呈强阳性而角化区较弱；FGFR-3在毛球至峡部的内毛根鞘内段强表达，也见于外毛根鞘峡部和已分化的皮脂腺细胞及皮脂腺导管；FGFR-4仅见于毛囊周结缔组织鞘；③伤口处FGFR的表达：新生表皮基底层细胞FGFR-1和3呈强表达，而FGFR-2和4的表达较弱；基底层上部的细胞FG．FR-3强表达，而FGFR-1和2表达弱；肉芽和瘢痕组织中成纤维细胞／肌纤维母细胞表面FGFR-1和3的表达较强，而2和4呈弱阳性，而浸润单核细胞表面FGFR-1和3表达较强。讨论：正常表皮中4种FGFR表达的变化，提示在角质形成细胞分化过程中4种受体的表达发生着改变。研究表明，表皮细胞特异性表达FGFR-3亚型Ⅲb，而间质细胞同时表达FGFR-3的两个亚型Ⅲb和Ⅲc。其中Ⅲb与aFGF和FGF-9结合，而Ⅲc与aFGF和FGF-4高亲和力结合，与bFGF结合力弱而不与FGF-5结合。bFGF位于表皮基底层而aFGF则主要存在于棘层。aFGF和FGFR-3在基底层上部的正在分化的角质形成细胞中共表达，提示aFGF可能通过自分泌作用参与角质形成细胞的分化过程。Finch等发现基质细胞表达对人角质形成细胞有强促分裂作用的角质形成细胞生长因子，并发现其受体表达于正常人表皮基底层及银屑病表皮基底层和基底层上方的角质形成细胞。本研究发现，基底层中FGFR-2的表达，可能是角质形成细胞生长因子受体在表皮基底层和外毛根鞘的定位。Gonzalez等发现FGFR-1及其mRNA主要表达于表皮生发层，由此推测bFGF可能通过FGFR-1对基底细胞有促分裂作用，而aFGF则促进棘细胞的有丝分裂。动物实验表明：FGF和FGFR的表达与毛发的生长周期和发育有关。作者发现4种FGFR在正常人皮肤生长期毛囊的表达模式不同，特别在毛球根部毛母质细胞中FGFR-2的表达呈强阳性，结合动物实验结果，本研究提示真皮乳头FGF-2活化毛母质细胞表达FGFR-2并刺激毛母质细胞增生和毛发生长；毛囊内FGFR-1的表达，提示FGFR-1可能在角质形成细胞向毛发分化的终末过程中起一定的作用。FGFR-3在生长期毛囊中内外毛根鞘和皮脂腺的终末分化细胞中表达而在毛基质细胞内不表达，这可能是由于分化类型的差异，角质形成细胞表达不同的FGFR。     

成纤维细胞活化蛋白在瘢痕疙瘩组织中的表达及意义

 目的:了解成纤维细胞活化蛋白（FAP）在瘢痕疙瘩组织中的表达情况,探讨FAP在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法:采用免疫组化染色技术检测30例瘢痕疙瘩组织（病例组）和20例正常皮肤组织（对照组）中FAP的表达强度,并比较两组间及瘢痕疙瘩不同临床分级之间FAP表达阳性率的差异。结果:病例组瘢痕疙瘩组织中FAP在成纤维细胞和血管内皮细胞内表达,阳性率为73.33％;对照组正常皮肤组织中未见FAP表达,两组间FAP表达阳性率比较,差异有统计学意义（  X²=26.19,P=0.001）;瘢痕疙瘩临床分级中,轻度与重度之间及中度与重度之间比较,FAP表达阳性率差异均有统计学意义（P值分别为0.002、0.006）。结论:瘢痕疙瘩组织中FAP表达阳性率明显高于正常皮肤组织;瘢痕疙瘩临床分级越严重,FAP表达阳性率越高;FAP可能参与瘢痕疙瘩的发病机制,针对FAP的干预可能有助于瘢痕疙瘩的治疗。     

蛋白酶活化受体-2与相关皮肤病的研究进展

蛋白酶活化受体-2(PAR-2)是蛋白酶激活受体家族中的一员,属于典型的G蛋白耦联受体,广泛分布于全身多种组织器官,参与多种生理及病理生理过程.近年来蛋白酶活化受体-2在皮肤组织中所起的作用受到越来越多的关注,尤其是在皮肤瘙痒、皮肤炎症、皮肤肿瘤及色素沉着的发病机制方面均有探讨及报道,研究指出PAR-2激活后可以在痒觉过敏、炎症诱发、色素转运和吞噬作用、皮肤肿瘤的侵袭及防护等方面发挥作用.本文对近年来PAR-2与相关皮肤病关系的研究进展作一综述.     

成纤维细胞生长因子及其受体在毛发生长周期中的表达和作用

成纤维细胞生长因子(FGFs)家族各成员及其受体(FGFRs)在毛发生长周期中起重要作用。在毛发生长周期的不同阶段,FGF1、FGF2、FGF5、FGF7、FGF10、FGF13、FGF18及FGF22在毛囊中均有较高的表达,它们通过与其受体结合介导信号通路传递信息至细胞内,在毛囊生长中发挥不同的作用。该文对FGFs与FGFRs在毛发生长周期作用的研究进展作一综述。     

MAPK信号通路调控长波紫外线诱导的皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达

【摘要】 目的 研究MAPK信号通路调控长波紫外线（UVA）诱导皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K（CatK）的表达。 方法 原代培养的皮肤成纤维细胞取自儿童包皮。Western印迹检测10 J/cm2 UVA照射前及照射后0.75、1.5、3和6 h皮肤成纤维细胞中磷酸化JNK（p-JNK）、JNK、磷酸化P38（p-P38）、P38蛋白的表达。800 nmol/L SP600125（SP）、10 μmol/L SB203580（SB）分别孵育皮肤成纤维细胞,实验分为无UVA照射的对照组、SP组、SB组及10 J/cm2 UVA照射的对照（UVA）组、UVA-SP组、UVA-SB组。先以Western印迹检测各组UVA照射后1.5 h磷酸化c-Jun（p-c-Jun） 和磷酸化MAPKAPK2（p-MAPKAPK2）表达,再以RT-PCR 和Western印迹检测各组照射后48 h CatK mRNA、蛋白的表达。 结果 皮肤成纤维细胞在UVA照射后0.75、1.5 h,p-JNK表达的灰度值分别为4.77 ± 0.19和4.68 ± 0.09,p-P38分别为2.44 ± 0.13、2.30 ± 0.04,均较照射前（p-JNK为3.2 ± 0.27,p-P38为1.61 ± 0.08）显著升高（均P ＜ 0.05）;而在照射后3、6 h的表达与照射前相比差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。p-c-Jun在UVA-SP组表达（2.55 ± 0.48）、p-MAPKAPK2在UVA-SB组表达（1.16 ± 0.12）均显著低于UVA组（分别为4.85 ± 0.96和2.46 ± 0.09）,均P ＜ 0.05。UVA-SP组、UVA-SB组CatK mRNA、蛋白的表达分别降为UVA组的38.9%、28.7%和55.7%、49.6%（P ＜ 0.05）,UVA-SP组CatK mRNA、蛋白的表达也均显著低于UVA-SB组（P ＜ 0.05）。 结论 JNK和P38信号通路在调控UVA上调的皮肤成纤维细胞CatK表达中起重要作用。     

UVA照射对皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达的影响

目的 探讨皮肤成纤维细胞中组织蛋白酶K(Cathepsin K,CatK)的表达随UVA照射后时间及其剂量的变化.方法 原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮,10代以内的细胞行后续实验.先以10 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,在照射后24、48、72 h提取照射组和对照组细胞蛋白和mRNA.再以10 J/cm2、20 J/cm2、30 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,在照射后48 h收集细胞.用RT-PCR和Western印迹法分别检测各组间CatK mRNA、蛋白的表达的差异.结果 10 J/cm2 UVA照射后1、2、3d,照射组CatKmRNA表达分别为0.351±0.038(对照组0.177±0.006)、0.510±0.017(对照组0.176±0.002)、0.313±0.012(对照组0.173±0.002).照射组CatK蛋白灰度值分别为1.76±0.27(对照组0.82±0.45)、2.97±0.36(对照组1.58±0.15)、2.23±0.14(对照组1.29±0.32),照射组CatKmRNA、蛋白表达均较对照组升高(P＜0.05),且以照射后第2天表达最高.10、20、30 J/cm2UVA照射后,48 h皮肤成纤维细胞中CatK mRNA表达分别为对照组的2.34、2.91、3.18倍,CatK蛋白表达分别为对照组的1.77、2.82、3.64倍,均随UVA剂量的升高而增加,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CatK在UVA照射后皮肤成纤维细胞中的表达升高.     

天冬氨酸/半胱氨酸组织蛋白酶在光老化成纤维细胞中的表达变化

目的 探讨天冬氨酸组织蛋白酶（cathepsin D）及半胱氨酸组织蛋白酶（cathepsin K）在光老化成纤维细胞中的表达变化。方法 培养原代人皮肤成纤维细胞,在50 mg/L的8-甲氧沙林（8-MOP）培养基中避光孵育24 h后,用80 kJ/m2 UVA照射,体外诱导培养细胞光老化。衰老相关-β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色证明老化诱导成功。Western印迹及实时定量RT-PCR对比检测光老化成纤维细胞及正常成纤维细胞cathepsin K和cathepsin D蛋白及基因表达。结果 Western印迹结果显示,光老化组表达的cathepsin D的灰度值为3.25 ± 0.33,对照组为14.18 ± 2.25,t = 30.61,P < 0.01,两组间差异有统计学意义;光老化组表达的cathepsin K灰度值为2.39 ± 0.66,对照组为29.38 ± 4.62,t = 12.63,P < 0.01,两组差异有统计学意义。光老化组cathepsin D mRNA的ΔCt值为2.79 ± 0.17,对照组为4.54 ± 0.34,根据2-ΔΔCt值计算得cathepsin D mRNA在光老化组的表达下调为对照组的0.24 ± 0.021（t = 20.78,P < 0.01）;光老化组cathepsin K mRNA的ΔCt值为-0.92 ± 0.06,对照组为2.57 ± 0.13,根据2-ΔΔCt值计算得cathepsin K mRNA在光老化组的表达下调为对照组的0.09 ± 0.005（t = 28.50,P < 0.01）。结论 cathepsin D及cathepsin K在光老化成纤维细胞中表达均下调。     

长波紫外线对皮肤成纤维细胞表达和分泌组织蛋白酶G的影响

目的 研究长波紫外线（UVA）照射对皮肤成纤维细胞组织蛋白酶G（CatG）表达和分泌的影响。 方法 原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮,10代以内的细胞行后续实验。①以10 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,24、48、72 h后提取照射组和对照组细胞蛋白和mRNA,并收集细胞上清液;②分别以10、20、30 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,24 h后收集细胞和上清液。用RT-PCR 和Western印迹分别检测各组细胞CatG mRNA及蛋白的表达,ELISA检测细胞上清液CatG的含量。 结果 10 J/cm2 UVA照射后24、48、72 h,照射组细胞CatG mRNA表达分别为0.376 ± 0.014、0.308 ± 0.022和0.296 ± 0.032,对照组分别为0.183 ± 0.003、0.185 ± 0.005、0.182 ± 0.004;照射组细胞CatG蛋白灰度值分别为1.80 ± 0.12、1.41 ± 0.17和1.27 ± 0.09,对照组分别为0.96 ± 0.06、0.95 ± 0.22、1.00 ± 0.14;照射组细胞CatG mRNA、蛋白表达及细胞上清液CatG含量较相应的对照组升高（均P < 0.05）,且以照射后24 h表达最高。10、20、30 J/cm2 UVA照射后24 h,皮肤成纤维细胞CatG mRNA表达分别为对照组的1.90、2.51、3.04倍,细胞CatG蛋白表达分别为对照组的1.88、3.97、4.72倍,细胞上清液CatG含量分别为对照组的1.36、1.50、1.66倍,均随UVA剂量的升高而增加,其差异有统计学意义（均P < 0.01）。 结论 急性UVA照射促进皮肤成纤维细胞表达和分泌CatG。     

人真皮网状层成纤维细胞在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布

目的 探讨人真皮乳头层成纤维细胞(Fp)、网状层成纤维细胞(Fr)和肌成纤维细胞(MFB)在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布.方法 2019年5-12月在武汉大学人民医院皮肤科门诊确诊的15例瘢痕疙瘩患者,男8例,女7例,年龄20 ～ 50岁,取皮损组织,以15例年龄匹配的女性乳房整形术正常皮肤组织为对照.采用双重免疫荧...     

以碱性成纤维细胞生长因子及其受体为靶点的黑素瘤治疗

碱性成纤维细胞生长因子的促增殖和促血管形成的功能在黑素瘤的发生、发展和转移中起重要作用。近来关于以成纤维细胞生长因子及其受体为靶点的黑素瘤治疗的研究逐渐增多，抗肿瘤生物治疗的特异性和靶向性已成为当前肿瘤治疗学中的研究热点。     

真皮纤维化疾病及其成纤维细胞研究

真皮纤维化疾病及其成纤维细胞研究何威综述刘荣卿审校第三军医大学新桥医院皮肤科（邮政编码６３００３７）真皮纤维化以胶原为主的细胞外基质（Ｅｘｔｒａｃｅｌ－ｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）成分在真皮中过度积聚为特征。现就真皮纤维化疾病及其成纤维细胞（Ｆｉ...     

体外培养毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞形态结构和bFGF、EGFR表达差异

Gharzi等[1]初步证实毛囊真皮鞘细胞参与皮肤损伤修复,但相关作用机制研究报道不多.成纤维细胞是皮肤创伤愈合主要效应细胞,毛囊真皮鞘细胞与皮肤成纤维细胞一样均属于间充质细胞.本研究旨在通过两种细胞形态结构及部分愈合相关蛋白表达差异研究,初步探讨毛囊真皮细胞在创伤愈合中的作用.     

L929成纤维细胞在皮肤B16黑素瘤细胞成瘤中的作用

目的研究成纤维细胞在皮肤黑素瘤成瘤中的作用。方法以小鼠皮肤成纤维细胞系L929与小鼠皮肤黑素瘤细胞系B16为研究对象,细胞共培养体外诱导L929成纤维细胞分化为肌成纤维细胞,免疫细胞学检测a-SMA的表达,Western blot证实表型的变化;建立C57小鼠皮肤黑素瘤移植瘤动物模型,研究L929成纤维细胞对B16黑素瘤移植成瘤率的影响。结果B16黑素瘤细胞可以诱导部分L929成纤维细胞发生表型变化;L929成纤维细胞可提高B16黑素瘤细胞移植成瘤率。结论肿瘤细胞外基质中的成纤维细胞与皮肤黑素瘤细胞的成瘤性有关。     

组织蛋白酶B在光老化皮肤中的表达及意义

目的 探讨组织蛋白酶B在光老化皮肤中的表达意义。方法 6例成人曝光和非曝光皮肤标本,采用免疫组化法定位及对比组织蛋白酶B的表达。体外培养原代人皮肤成纤维细胞,甲氧沙林 ＋ UVA法体外诱导培养细胞光老化。衰老相关-β-半乳糖苷酶染色证明老化诱导成功。Western印迹技术及RT-PCR对比检测光老化成纤维细胞及正常成纤维细胞组织蛋白酶B蛋白及基因表达。结果 6例成人曝光和非曝光活体皮肤均见组织蛋白酶B阳性染色,和非曝光部位相比,曝光部位皮肤阳性染色A值降低。Western印迹结果示,成纤维细胞光老化诱导组蛋白表达较UVA诱导组、甲氧沙林孵育组及空白组明显下调。光老化成纤维细胞诱导后1周,组织蛋白酶B与内参的灰度比由28.099 ± 0.054下降为25.103 ± 0.102,诱导后3周灰度值进一步下降为17.693 ± 0.099。实时定量RT-PCR结果示,光老化细胞组织蛋白酶B mRNA表达下调为正常组的64％（P < 0.05）。结论 组织蛋白酶B在光老化皮肤及老化成纤维细胞中表达降低,且有时间依赖性,与光老化皮肤自我修复能力下降有关。     

组织蛋白酶B在急性光损伤皮肤成纤维细胞中的表达及意义北大核心CSCD

目的 探讨组织蛋白酶B（CatB）在急性光损伤人皮肤成纤维细胞（HDF）中的表达变化及意义.方法 体外培养原代HDF,选取第4～8代细胞进行实验.实验设长波紫外线（UVA）照射组和不照射的对照组.CCK8法分别检测5、10、15、20和25 J/cm2 UVA照射后HDF的增殖率.用10 J/cm2 UVA单次照射致HDF急性光损伤,Western印迹及实时定量逆转录（RT）-PCR分别检测急性光损伤组HDF及对照组HDF照射后24、48、72 h CatB蛋白及mRNA表达;另外分别用10、15、20、25 J/cm2 UVA照射HDF,Western印迹及实时定量RT-PCR分别检测急性光损伤组及对照组HDF照射后48 h CatB蛋白及基因表达.数据采用SPSS 13.0统计软件行方差分析,两组间比较采用最小显著差异法（LSD）.结果 UVA照射导致HDF增殖率下降;当UVA剂量≤10 J/cm2时,细胞存活率均保持在85％以上,各照光组分别与对照组24、48、72 h时比较,均P＜0.05.Western印迹结果显示,急性光损伤组（10 J/cm2 UVA照射）CatB蛋白灰度值在照射后24 h（0.76±0.14）、48 h（1.34±0.38）、72 h（0.82±0.09）均较对照组（分别为0.35±0.01、0.45±0.12、0.61±0.06）升高（均P＜0.05）.实时定量RT-PCR显示,在急性光损伤组CatB的mRNA表达在照射后24 h（0.149±0.009）、48 h（0.173±0.009）、72 h（0.185±0.158）也较对照组（分别为0.089±0.015、0.091±0.010、0.111±0.017）上调（均P＜0.05）.10、15、20、25 J/cm2 UVA照射HDF后48 h,CatB的蛋白灰度值分别为0.99±0.07、1.49±0.14、1.89±0.08、2.07±0.06,均较对照组（0.60±0.05）升高（均P＜0.05）,CatB的mRNA表达也较对照组升高.结论 UVA致急性光损伤的皮肤成纤维细胞中CatB蛋白及mRNA表达均上调.     

基质金属蛋白酶表达在皮肤光老化皱纹形成中的作用

目的 探讨皮肤光老化皱纹形成与真皮成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)-1,MMP-3mRNA及其组织抑制剂(TIMP)-1表达的关系。方法 采用原位杂交和免疫组化的方法检测紫外线光化学疗法(PUVA)治疗期间及治疗后不同时间银屑病患者背部非皮损区真皮成纤维细胞MMP-1,MMP-3mRNA及TIMP-1蛋白的表达并定量分析。结果 在PUVA治疗期间、治疗后1~6个月及治疗后6个月以上的银屑病患者背部非皮损区真皮成纤维细胞均持续表达MMP-1、MMP-3mRNA,而TIMP-1蛋白仅在治疗期间一过性轻度表达。结论 PUVA治疗引起的皮肤光老化皱纹形成可能与真皮成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达失衡密切相关。     

结节性痒疹患者皮损中蛋白酶活化受体2的表达与分布

目的:观察蛋白酶活化受体2(PAR-2)在结节性痒疹(PN)患者皮损组织中的表达及分布,探讨PAR-2在结节性痒疹瘙痒发病中的作用。方法:应用免疫组化方法检测22例PN患者皮损组、非皮损组及20例正常对照皮肤组织中PAR-2的表达及分布,比较PAR-2在三组间的表达水平;采用视觉模拟评分法(VAS)对PN患者主观瘙痒程度进行评分,分析VAS评分与PAR-2表达水平的相关性。结果:PN患者皮损、非皮损及正常人皮肤组织中的PAR-2均呈阳性表达,主要集中于表皮的棘层及基底层KTC的胞质和胞膜,PN皮损中的PAR-2表达水平较PN患者非皮损组织、正常皮肤组织明显增高(t值分别为2.34、2.10,P值均0.05),PN患者主观瘙痒程度与皮损部位PAR-2表达水平呈正相关(r=0.62,P0.05)。结论:PAR-2的激活和表达可能与PN患者皮肤瘙痒的发生机制有关。     

SSc患者外周血外泌体通过microRNA-21介导成纤维细胞活化北大核心CSCD

目的比较系统性硬皮病患者(systemic sclerosis,SSc)与正常人外周血外泌体(exosome)中microRNA-21-5p(miR-21-5p)的表达差异,评估外周血中外泌体对人皮肤成纤维细胞功能状态的影响。方法提取SSc患者及正常人外周血外泌体,荧光定量PCR法检测miR-21-5p表达情况;外泌体刺激人皮肤成纤维细胞,CCK-8法检测细胞增殖能力,免疫印迹检测CollagenⅠ,Ⅲ及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平。结果 SSc患者外周血外泌体中miR-21-5p显著高于正常人。与正常人相比,患者外泌体可明显增强人皮肤成纤维细胞的增殖能力及上调CollagenⅠ,Ⅲ,α-SMA的水平,上述作用可被转染miR-21-5p抑制剂阻断。结论 SSc患者循环外泌体通过转运miR-21-5p介导人皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞分化。miR-21-5p可能是SSc潜在的生物标记物。     

UVB对皮肤成纤维细胞相关骨架蛋白表达的影响

目的:确定UVB对皮肤成纤维细胞骨架蛋白的影响.方法:用150 mJ/cm2的UVB照射培养的皮肤成纤维细胞,用MTT法检测细胞活性,用Western blot法检测α-微管蛋白、β-微管蛋白、β-肌动蛋白和波形蛋白的含量.结果:150 mJ/cm2 UVB照射后β-微管蛋白含量逐渐降低,波形蛋白逐渐升高,α-微管蛋白和β-肌动蛋白改变不明显.结论:在UVB诱导人皮肤成纤维细胞光损伤过程中,β-微管蛋白和波形蛋白可能发挥着重要作用.     

成纤维细胞在皮肤衰老中的作用机制研究进展

在过去的20余年间,对皮肤衰老机制的探索是一个生命科学研究领域的热门话题。皮肤真皮中最重要的细胞成分是成纤维细胞,它与组织创伤修复密切相关。皮肤衰老与成纤维细胞数量减少、形态改变、分泌合成功能减弱或衰退等有关。研究成纤维细胞在皮肤衰老中的作用机制,包括ROS-PTEN-PI3K、Smad3-I型胶原蛋白、miRNAs等,为研究预防和延缓皮肤衰老提供新的思路以及指导意义。该文就成纤维细胞在皮肤衰老中的作用机制进行综述。