COMPARISON OF THEOPHYLLINE AND ENPROFYLLINE EFFECTS ON HUMAN NEUTROPHIL SUPEROXIDE PRODUCTION

1. We investigated effects of theophylline (widely used for the treatment of asthma) and enprofylline (a new xanthine derivative with negligible adenosine antagonism) on O2- production by human neutrophils with n-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine (FMLP) stimulation. 2. Therapeutic concentrations of theophylline (1-100 mumol/L) enhanced O2- production, maximally by 43.1 +/- 24.4% at 30 mumol/L; the same concentrations of enprofylline inhibited O2- production. 3. When each agent was administered after pre-incubation with adenosine deaminase (ADA) (0.1 U/mL), O2- production was inhibited in a concentration-dependent manner in comparison with that under administration of ADA alone. 4. These results suggest that the difference of effects in the two xanthine derivatives at therapeutic concentrations might be due to the presence or absence of adenosine antagonism.     

EFFECT OF XANTHINE DERIVATIVES ON CHEMOTACTIC POLYPEPTIDE-INDUCED SUPEROXIDE AND ENZYME RELEASE FROM HUMAN POLYMORPHONUCLEAR LEUCOCYTES

1. We investigated the effects of new xanthine derivatives, 1-methyl-3-propyl xanthine (MPX) and 1,3-dipropyl xanthine (DPX), and several other xanthine derivatives on N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine-induced superoxide and lysozyme release from human polymorphonuclear leucocytes (PMN). 2. MPX and DPX at low concentrations (10^?8-10^?9 mol/L) inhibited superoxide release from PMN by a maximum of 31.2 ± 10.6% and 49.8 ± 10.4% (mean ± s.d.), respectively, and 10^?3 mol/L concentrations completely inhibited the release reactions (4.8 ± 1.2 and 7.6 ± 2.5% of control level). At 10^?5 mol/ L, however, the inhibition did not occur (99.9 ± 7.3 and 110.2 ± 15.8% of control level). When PMN was pre-incubated with adenosine deaminase (ADA, 0.1 U/mL), superoxide release from PMN was inhibited in a dose-dependent manner by MPX and DPX and the interruption of the inhibition at 10^?5 mol/L was not observed. 3. Lysozyme release from PMN was inhibited by MPX at low concentrations (10^?7-10^?6 mol/L) and high concentrations (10^?3 mol/L). However 10^?4 mol/L of MPX facilitated the release (23.7 ± 27.0%). When pretreated with ADA (0.1 U/mL), MPX suppressed lysozyme release in a dose-dependent manner and the facilitation of the release at 10^?4 mol/L was not observed. 4. When comparing effects of some other xanthine derivatives on superoxide release, the interruption of the inhibition of superoxide release at 10^?5 mol/L was commonly observed among xanthine derivatives with adenosine A₂ antagonism. 5. The results suggest that adenosine A₂ antagonism of xanthine derivatives may interfere with their anti-inflammatory effects at therapeutic concentrations (10^?5-10^?4 mol/L).     

鱼油多不饱和脂肪酸对人血小板、红细胞必需脂肪酸组成以及过氧化-抗氧化能力的影响

随着年龄增加,人血小板、红细胞膜脂质中 EPA、DHA 减少,而 AA 增加,同时 MDA 的生成增多,SOD 的活性降低。红细胞与 LDL 温育可增强此过程,但与 EPA 温育则可抑制 LDL 的作用。老年志愿者服用鱼油多不饱和脂肪酸4周,6g/d,见红细胞膜中 EPA、DHA 增加、AA 降低、MDA 的生成减少,SOD活性增加。提示血液份必需脂肪酸的组成对过氧化-抗氧化的平衡有重要影响,鱼油是潜在的抗衰老药物。     

丁基苯酞对低糖低氧引起神经细胞内钙升高的作用

目的:探讨抗脑缺血新药丁基苯酞(NBP) 对脑缺血过程中细胞内游离钙升高的影响及其作用机制。方法:采用低糖低氧损伤胎鼠或新生鼠神经细胞以模拟脑缺血,用Fura-2/AM 作荧光指示剂,观察手性丁基苯酞对神经细胞内游离钙升高的抑制作用,并用内钙释放剂thapsigargin,外源性谷氨酸,高K+ 及钙离子载体A23187 作工具药,对其作用环节进行分析。结果:d-,l-,dl-丁基苯酞能完全抑制低糖低氧造成的神经细胞内钙升高。手性NBP能降低thapsigargin 引起的内质网钙库释放,d-NBP 还对谷氨酸引起的内钙升高表现出抑制作用。结论:丁基苯酞抑制低糖低氧条件下神经细胞内钙升高的作用环节主要是抑制细胞内钙库的释放。     

银杏内酯B对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶和细胞内钙水平的影响

目的　观察银杏内酯B对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶及细胞内钙水平的影响。方法　反相高效液相色谱及Fura-2/AM荧光指示剂法。结果　银杏内酯B在0.1-10μmol·L^-1范围内,使花生四烯酸释放量降低10.9%-22.2%;0.1-50μmol·L^-1时,LTB₄和5-HETE生成量分别降低29.4%-88.6%和26.2%-89.3%;在0.1-100μmol·L^-1使PAF和fMLP刺激引起的细胞内游离钙浓度分别降低13.9%-51.4%和2.2%-36.6%。结论　银杏内酯B能抑制体外大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶的活性及细胞内游离钙浓度的升高。     

神经肽DGAVP和Org2766对神经细胞内游离Ca~(2+)的影响

运用Ca~(2+)指示剂Fura-2作为细胞内钙离子的荧光探针,利用AR—CM—MIC阳离子测定系统,检测了分离的神经细胞内游离钙及其变化,并观测了DGAVP和Org2766对蛋白质合成抑制剂茴香霉素(ANI)引起细胞内钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)变化的影响。结果表明茴香霉素可使[Ca~(2+)]_i显著升高,且有量效关系;DGAVP本身并不引起[Ca~(2+)]_i发生显著变化,但适当剂量的DGAVP可显著对抗一定剂量范围内ANI升高[Ca~(2+)]_i的作用,提示DGAVP对抗ANI的蛋白质合成抑制效应可能是通过拮抗ANI升高[Ca~(2+)]_i这一途径实现的,另一神经肽Org2766则可能不是通过这一机制发生作用。从细胞内Ca~(2+)的角度看,这两种肽的作用机理显然是不同的。     

神经肽DGAVP和Org2766对神经细胞内游离Ca2+的影响

运用Ca²⁺指示剂Fura-2作为细胞内钙离子的荧光探针,利用AR—CM—MIC阳离子测定系统,检测了分离的神经细胞内游离钙及其变化,并观测了DGAVP和Org2766对蛋白质合成抑制剂茴香霉素(ANI)引起细胞内钙离子浓度([Ca²⁺]_i)变化的影响。结果表明茴香霉素可使[Ca²⁺]_i显著升高,且有量效关系;DGAVP本身并不引起[Ca²⁺]_i发生显著变化,但适当剂量的DGAVP可显著对抗一定剂量范围内ANI升高[Ca²⁺]_i的作用,提示DGAVP对抗ANI的蛋白质合成抑制效应可能是通过拮抗ANI升高[Ca²⁺]_i这一途径实现的,另一神经肽Org2766则可能不是通过这一机制发生作用。从细胞内Ca²⁺的角度看,这两种肽的作用机理显然是不同的。     

迷迭香酸对大鼠中性粒细胞自由基生成和溶酶体酶释放的影响

目的:研究迷迭香酸对大鼠中性粒细胞自由基生成和溶酶体酶释放的影响。方法:利用紫外分光法、荧光分光法研究大鼠中性粒细胞自由基生成和溶酶体酶释放以及胞浆钙离子浓度。结果:迷迭香酸能抑制中性粒细胞超氧阴离子和过氧化氢以及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的产生,还能减少溶菌酶及β-葡萄糖醛酸苷酶的释放,而且,它对FMLP引起的中性粒细胞胞浆钙离子浓度的增加具有拮抗作用。结论:迷迭香酸抑制中性粒细胞呼吸爆发和脂质过氧化及通过降低细胞内钙离子浓度而抑制溶酶体酶的释放。     

酪氨酸相关肽的合成及抗孕酮生成活性

利用固相法合成了二十个含羟基氨基酸的小肽。其中，以０．５ｍｏｌ·Ｌ－１二甲二氯硅烷／１．５ｍｏｌ·Ｌ－１苯酚／ＤＣＭ＊为脱除Ｂｏｃ试剂，以ＴＦＭＳＡ为切除树脂试剂。经Ｃ－１８反相柱纯化后，全部产物均通过氨基酸分析要求。体外黄体细胞分泌孕酮实验表明有八个肽化物ＧｌｙＴｙｒＡｌａＬｙｓ，（ＳａｒＳｅｒ）２Ｌｙｓ及其申酯，ＴｙｒＬｙｓ，ＨｉｓＴｙｒ－ＮＨ２，ＴｈｒＰｒｏＴｙｒＬｙｓ－ＮＨ２，ＴｙｒＴｈｒＰｒｏＡｒｇＬｙｓ，ＡｓｐＨｉｓＰｒｏＴｈｒ－ＰｈｅＬｙｓ显示较强的抑制ｈＣＧ致孕酮分泌的活性，而且前三个肽还能显著抑制基础孕酮的分泌，相反，ＧｌｙＳｅｒＴｙｒ能刺激基础孕酮的分泌。目前尚未建立合理的结构一活性关系。     

过氧化氢诱导牛主动脉内皮细胞损伤和胞内Ca2+升高及钙拮抗剂的抑制作用

为探讨缺氧/缺血过程中自由基损伤与钙超载的关系,观察了过氧化氢(H₂O₂)诱导培养牛主动脉内皮细胞(BAEC)的损伤和胞内游离钙([Ca²⁺]i)的变化。结果表明,H₂O₂可剂量、时间依赖地诱导BAEC活性下降(MTT值下降),脂质过氧化产物丙二醛(MDA)生成显著增加,同时伴有[Ca²⁺]i迅速显著升高。钙拮抗剂硝苯地平可剂量依赖地抑制H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高;同时能显著升高BAEC的MTT值,降低MDA生成,有效对抗H₂O₂诱导的BAEC损伤。提示,H₂O₂诱导内皮损伤可能与升高[Ca²⁺]i有关,Ca²⁺超载可能是活性氧致损伤的途径之一。钙拮抗剂对活性氧损伤具有一定保护作用。     

AMG-1对突触体内游离钙水平及大鼠尾动脉收缩力的影响

观察了AMG-1对高钾所致大鼠脑突触体内游离钙浓度[Ca²⁺]i升高,及去甲肾上腺素引起的离体大鼠尾动脉环收缩力的影响。结果表明,AMG-110和100μmol·L^-1可对抗高钾(30mmol·L^-1)引起的[Ca²⁺]i升高,使分别降低19±11%及57±12%;在无钙Krebs-Hensleleit液中,AMG-1能抑制去甲肾上腺素引起大鼠尾动脉收缩力的作用。     

TMB-8对去甲肾上腺素和BHQ引起新生大鼠单个脑细胞内游离钙增高的影响

应用AR-CM-MIC阳离子测定系统,研究TMB-8对体外新生SD大鼠单个脑细胞内游离钙的抑制作用及其机制。结果表明,在无细胞外钙情况下,静息[Ca²⁺]i为79±13nmol·L^-1。TMB-810,30μmol·L^-1能明显降低静息[Ca²⁺]i。TMB-8100μmol·L^-1对高钾去极化引起的[Ca²⁺]i显著增高无明显影响。在细胞外钙为1.3mmol·L^-1时,去甲肾上腺素诱导的细胞内[Ca²⁺]i升高可部分被TMB-8抑制;TMB-8(30μmol·L^-1)对BHQ引起的[Ca²⁺]i的升高无明显抑制作用。而当细胞外液[Ca²⁺]i为0时,TMB-8几乎完全抑制了去甲肾上腺素和BHQ的作用。提示TMB-8降低脑细胞内游离钙的作用机制是通过促使细胞内钙进入肌浆网以抑制内钙的释放,并通过饱和肌浆网内Ca²⁺间接地阻滞细胞膜钙通道。     

淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对THP-1细胞分泌细胞因子的影响

目的：比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP-1细胞分泌4种细胞因子的影响。方法：放射免疫测定方法(RIA)。 结果：在LPS和PMA存在下, 淫羊藿苷及其肠菌代谢产物(宝藿苷I和淫羊藿苷元）对IL-6的产生有促进作用, 代谢物的作用更强, 对IL-8的产生有一定的抑制作用。当LPS和PMA不存在时,对IL-6的产生无明显影响, 而对IL-8的产生则有促进作用。 不论LPS和PMA存在与否,原苷对TNFα的产生有抑制作用, 原苷及其肠菌代谢产物对IL-1α的产生均有明显抑制作用。结论：在不同的实验条件下,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对各种炎症性细胞因子的产生均有特异的调节作用。     

环孢菌素A对三种淋巴因子生物活性及其基因表达的影响

环孢菌素A抑制了用ConA和PMA在体外诱导小鼠脾淋巴细胞分泌的白细胞介素2、白细胞介素3和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子,这种抑制作用与这些淋巴因子的信使核糖核酸的基因表述受到抑制有关。     

AMG－1对突触体内游离钙水平及大鼠尾动脉收缩力的影响

观察了ＡＭＧ－１对高钾所致大鼠脑突触体内游离钙浓度［Ｃａ２＋］ｉ升高，及去甲肾上腺素引起的离体大鼠尾动脉环收缩力的影响。结果表明，ＡＭＧ－１１０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１可对抗高钾（３０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，使分别降低１９±１１％及５７±１２％；在无钙Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｌｅｌｅｉｔ液中，ＡＭＧ－１能抑制去甲肾上腺素引起大鼠尾动脉收缩力的作用。     

灵芝多糖对混合淋巴细胞培养反应中白细胞介素2生成和T细胞亚类的影响(英文)

利用混合淋巴细胞培养反应研究了灵芝多糖的免疫作用机理。结果表明培养12h,灵芝多糖(25,50,100,200μg/ml)可促进白细胞介素2的分泌,且具有剂量依赖关系。培养4d后,可增加总的细胞回收量以及Lyt 2~+和L3T4~+细胞的回收量。灵芝多糖还明显增强细胞毒T细胞的功能,在浓度为200μg/ml时,其杀伤活性增加100％。     

EFFECT OF MAGNESIUM DEPLETION AND POTASSIUM DEPLETION AND CHLOROTHIAZIDE ON INTRACELLULAR pH IN THE RAT, STUDIED BY 31P NMR

1. Both dietary magnesium depletion and potassium depletion (confirmed by tissue analysis) were induced in rats which were then compared with rats treated with chlorothiazide (250 mg/kg diet) and rats on a control synthetic diet. 2. Brain and muscle intracellular pH was measured by using a surface coil and [31P]-NMR to measure the chemical shift of inorganic phosphate. pH was also measured in isolated perfused hearts from control and magnesium-deficient rats. Intracellular magnesium status was assessed by measuring the chemical shift of beta-ATP in brain. 3. There was no evidence for magnesium deficiency in the chlorothiazide-treated rats on tissue analysis or on chemical shift of beta-ATP in brain. Both magnesium and potassium deficiency, but not chlorothiazide treatment, were associated with an extracellular alkalosis. 4. Magnesium deficiency led to an intracellular alkalosis in brain, muscle and heart. Chlorothiazide treatment led to an alkalosis in brain. Potassium deficiency was associated with a normal intracellular pH in brain and muscle. 5. Magnesium depletion and chlorothiazide treatment produce intracellular alkalosis by unknown mechanism(s).     

PGE_2对离体培养人蜕膜组织的抑制作用

取早孕妇女的蜕膜组织进行离体培养,观察PGE_2对蜕膜细胞生长的影响:蜕膜细胞在不同浓度的PGE_2的影响下皆可发生退化变性,甚至坏死。其退化变性程度随剂量增加而加剧,而正常对照组的蜕膜细胞则生长良好,实验中也对比观察芫花萜和15-甲基-PGF_(2a)的作用。按作用强度比,其顺序为芫花萜>PGE_2>15-甲基-PGF_(2a)。说明PGE_2可以直接抑制蜕膜细胞使之退化变性。此抑制作用与子宫收缩或雌、孕激素的作用或代谢无关。     

力达霉素对人结肠癌HCT-8细胞侵袭调节基因表达的影响

目的研究抗肿瘤抗生素力达霉素对人结肠癌HCT-8细胞侵袭调节基因表达的影响。方法利用cDNA排列(cDNAarrays)、Northern杂交、RT-PCR技术。结果力达霉素可以促进TIMP-1的表达,抑制MMP-9的表达,cDNA排列、Northern杂交、RT-PCR检测得到了同样的结果。结论力达霉素可能通过抑制IV型胶原酶的产生,同时诱导金属蛋白酶抑制因子的产生,从而表现出抗侵袭活性。     

丁基苯酞对局部脑缺血大鼠神经元迟发性损伤及细胞内钙的影响

观察了丁基苯酞(NBP)对局部脑缺血迟发性脑梗塞和神经功能缺损的影响。结果表明,大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)后2h分别poNBP80,160和240mg·kg^-1,均能明显降低脑梗塞面积,抑制率分别为49.0%,69.5%及85.1%,并明显改善神经功能缺失。在MCAO前1h予防给NBP(160mg·kg^-1po),也可明显缩小脑梗塞面积和改善神经功能缺失;在MCAO前连续口服7d,NBP剂量为80mg·kg^-1·d^-1,对上述指标均有改善作用。NBP对高K⁺引起大鼠脑突触体内Ca²⁺含量升高无影响。以上结果提示NBP对迟发性神经元损伤有保护作用。