多指标层次分析法结合Box-Behnken响应面法优化连翘提取工艺

目的:运用层次分析法(AHP)建立一种中药多指标的综合评价方法,优选连翘最佳提取工艺.方法:采用UPLC法同时测定连翘酯苷A、连翘苷和金丝桃苷的含量,层次分析法(AHP)计算权重系数,以多指标综合评分为评价指标,以醇体积分数、料液比和提取时间为影响因素,通过Box-Behnken响应面法优选连翘最佳提取工艺.结果:连翘...     

正交试验法优选连翘叶中连翘酯苷A的提取工艺

目的建立连翘叶中连翘酯苷A的最佳提取工艺。方法以连翘酯苷A提取率为指标,采用高效液相色谱法检测,通过单因素、正交试验优化提取工艺参数。结果选用渗滤法,以50%乙醇浸泡24 h,以0.5 mL/min的速率渗滤,收集8倍量渗滤液,提取的效果最佳。结论渗滤法简单易行,提取率高,重现性好。     

HPLC法测定双黄连胶囊中连翘酯苷A及连翘苷的含量

目的:建立中成药双黄连胶囊中连翘酯苷A及连翘苷的含量测定方法.方法:采用Phenomenex-ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5 um)柱,以甲醇(含1%的四氢呋喃)-水(含0.01 mol·L-1磷酸二氢钾,PH 3.2)为流动相进行梯度洗脱,检测波长280 nm.结果:连翘酯苷A及连翘A的线性范围分别为7.8～139.5μg·ml-1和2.6～47.7μg·ml-1,其线性关系良好.连翘酯苷A平均回收率为100.3%,RSD为0.75%;连翘苷平均回收率为99.2%,RSD为1.03%.结论:该方法准确可靠,可用于本制剂的质量控制.     

太行山区不同产地连翘中连翘苷、连翘酯苷A的含量测定

目的：采用HPLC法测定太行山区不同产地、不同采集时间连翘中连翘苷及连翘酯苷A的含量。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,测定连翘苷以乙腈-水（25∶75）为流动相,等度洗脱;流速为1.0ml·min-1;检测波长为277nm。测定连翘酯苷A以乙腈-0.4％冰醋酸溶液（15∶85）为流动相,等度洗脱,流速为1.0ml·min-1;检测波长为330nm。结果：连翘苷和连翘酯苷A线性范围分别为0.206～2.060μg和0.120～1.200μg,平均回收率分别为99.52%（RSD=1.74%）和99.63%（RSD=1.21%）。结论：太行山区不同产地连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量差异较大,7月份采集连翘中连翘苷、连翘酯苷A含量最高。含量测定方法准确、快速,适用于连翘的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷含量

目的建立同时测定连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷含量的高效液相色谱法。方法采用AgilentZorbaxSB—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-0．1％磷酸溶液（32：68）为流动相,检测波长为227nm,流速为1．0mL／min,进样量为10txL,柱温为30℃。结果连翘酯苷A、连翘苷进样量分别在293．170～3664．624ng（r=0．999980）和333．760—4172．000ng（r=0．999991）范围内与相应峰面积皇良好线性关系,平均回收率分别为97．00％（RSD：1．88％）和99．97％（RSD=2．11％）。结论该法操作简便、结果准确、专属性强,可用于同时测定连翘叶中连翘酯苷A和连翘苷的含量。     

四季抗病毒合剂制备中连翘酯苷A和连翘酯苷B转移率的研究

目的建立连翘与四季抗病毒合剂中连翘酯苷A和连翘酯苷B的含量测定方法,阐明其在连翘药材至四季抗病毒合剂制剂间的转移率。方法采用超快速液相色谱(UFLC)法,选取3批连翘药材,每批对应5批制剂。结果 1 3批连翘药材中连翘酯苷A的含量分别为12.57,20.26和18.64mg·g~(-1),3批连翘药材中连翘酯苷B的含量依次分别为2.22,3.76和3.07mg·g~(-1);2每批连翘药材对应5批制剂中连翘酯苷A的平均含量分别为1 129.40,1 828.30和1 666.30μg·mL~(-1),每批连翘药材对应5批制剂中连翘酯苷B的平均含量依次分别为224.80,382.60和315.70μg·mL~(-1);3 15批制剂中连翘酯苷A和连翘酯苷B的转移率分别为74.86%和84.95%,RSD分别为0.88%和1.43%。结论该含量测定方法具有简便、稳定、可靠、准确等优点,可作为连翘与四季抗病毒合剂中连翘酯苷A和连翘酯苷B的定量方法;连翘酯苷A和连翘酯苷B的转移率高,表明制剂制备工艺有利于2种有效成分的溶出,为保证制剂疗效提供了理论依据。     

高效液相色谱法同时测定双黄连口服液中连翘酯苷A和连翘苷

目的:建立双黄连口服液中连翘酯苷A和连翘苷同时测定方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定连翘酯苷A和连翘苷的含量。结果:连翘酯苷A在1.0~20μg,连翘苷在0.8~1.6μg范围内的线性关系良好(n=5)。结论:所用方法简便可行,重复性好。     

正交试验法优选连翘酯苷硅胶柱层析提取工艺

目的:优化用硅胶柱层析提取连翘叶中连翘酯苷的最佳提取工艺。方法:采用L9(34)正交试验设计,考察上样量(A)、洗脱液流速(B)和柱床径高比(C)对连翘酯苷得率的影响,优选最佳提取工艺条件。结果:上样量、洗脱液流速和柱床径高比对连翘酯苷得率的影响大小依次为:C>A>B,最佳工艺为样品与硅胶用量比1∶20,洗脱液流速1.5BV/h,柱床径高比1∶10。结论:该制备工艺简便、稳定和可行。     

高效液相色谱法测定连翘中连翘酯苷的含量

目的　建立连翘中连翘酯苷的含量测定方法。方法　 HPL C法 ,采用 C1 8柱 ,乙腈 -水 -醋酸 (1 5∶ 85∶ 0 .2 )为流动相 ,检测波长为 332 nm,柱温室温 ,流速为 1 .0 m L· min-1 。结果　连翘酯苷在 0 .0 1 0～ 0 .81 0 g· L-1 范围内线性关系良好 (r =0 .9999) ,平均回收率为 1 0 0 .5 % ,RSD 1 .6 1 %。结论　该法简便快速 ,重现性好 ,适于连翘中连翘酯苷的定量分析     

连翘不同部位中连翘酯苷和连翘苷的含量分析

目的:考察连翘不同部位中连翘酯苷和连翘苷的含量。方法:采用 HPLC 法测定连翘根、树皮、枝、叶、花、果实、种子、果壳中连翘酯苷和连翘苷的含量,以 Diamonsil—C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相为水(A)-甲醇(B),梯度洗脱(0～14 min,34%B;14～15 min,34%B～43%B;15～23 min,43%B;23～24 min,43%B～45%B;24～34 min,45%B;34～36 min,45%B～80%B;36～40 min,80%B),流速为1 mL·min~(-1),检测波长270 nm。结果:连翘酯苷在连翘的树皮、叶、花、果实和种子中含量较高,在根、枝、果壳含量很低,连翘苷在连翘叶中的含量远高于其他部位。结论:连翘不同部位连翘甘和连翘酯苷的含量有较大差别,中药连翘应增加连翘酯苷作为标识性成分。     

HPLC法测定小儿肺热咳喘口服液中连翘苷和连翘酯苷A的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定小儿肺热咳喘口服液中连翘苷和连翘酯苷A的含量。方法采用Phe-nomen Luna C18(4.6 mm×250 mm5,μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃。结果连翘苷和连翘酯苷A与其相邻杂质峰能完全分离,连翘苷和连翘酯苷A进样量分别在0.030 3～0.545 4μgr,=0.999 5,0.019 8～0.356 4μgr,=0.999 6浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.35%,RSD=0.097%(n=6),99.48%,RSD=0.15%(n=6)。结论本法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。     

连翘中芦丁和连翘酯苷A的含量测定方法分析

目的：对连翘中芦丁和连翘酯苷A的含量测定方法进行分析探讨,为今后的研究工作提供可靠的参考依据。方法采取反相高效液相色谱法,选用ThermoODS C18色谱柱,流动相为甲醇-浓度为2 g/L冰醋酸（20：80）,波长为329 nm。结果芦丁与连翘酯苷A的进样量在0.0210~0.4219μg和0.0152~0.3058μg之间存在良好的线性关系,芦丁与连翘酯苷A的平均回收率为102.6%和103.4%。结论采取反相高效液相色谱法对连翘中芦丁与连翘酯苷A的含量进行测定时具有操作简单,结果准确可靠,稳定性与精密度良好等优势,值得关注并推广。     

HPLC法测定黄连上清片中连翘酯苷A的含量

目的 采用高效液相色谱法测定黄连上清片中连翘酯苷A的含量。方法 色谱柱：VP-ODSC₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.4%冰醋酸溶液（15:85）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长330 nm。结果 连翘酯苷A在10.24 ~81.92 µg·mL^-1范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8),精密度试验RSD为0.85%,重复性试验RSD为1.14%,平均回收率为97.91%,RSD为1.55%(n=6)。结论 该方法操作简单,精密度良好,结果准确可靠,适用于黄连上清片中连翘酯苷A的含量测定。     

HPLC法测定市售连翘中连翘酯苷的含量

建立了连翘中连翘酯苷的HPLC测定方法 ,采用TIANHEC18柱 (15 0mm× 4 6mm) ,流动相为乙腈—水—醋酸 (15∶85∶0 2 ) ,检测波长为 332nm ,流速为 1 0ml·min-1。连翘酯苷在 0 2 0 2～ 16 2 μg范围内线性关系良好 (r =0 9999) ,平均回收率为 10 0 5 0 % ,RSD =1 6 1%。并测定了陕西市场上连翘药材中连翘酯苷的含量 ,对其质量进行评价。     

Box-Behnken 效应面法优化金银花中绿原酸与木犀草苷闪式提取工艺研究

摘 要 目的：采用Box-Behnken 效应面法,优选闪式提取金银花中有效成分的工艺条件。方法: 采用闪式提取法,以乙醇浓度、料液比和提取时间为主要影响因素,以绿原酸和木犀草苷转移率的总评“归一值”为评价指标进行Box-Behnken试验设计,并用多元线性回归及二项式拟合,建立总评归一值与自变量之间的数学关系,用效应面法预测最佳工艺条件。结果: 采用闪式提取,乙醇浓度为66.92%,料液比为18.82,提取时间为1.20 min,提取次数为一次。以此工艺条件提取金银花中绿原酸的转移率为92.87%,木犀草苷的得率为87.55%。结论: 优选的提取工艺简单、经济实用,能为金银花药材中有效成分的快速提取及质量控制提供新思路。     

RP-HPLC法同时测定清化丸中连翘酯苷A与绿原酸含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定清化丸中连翘酯苷A和绿原酸含量的方法。方法:色谱柱为Shim-pack VP-ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸(14∶86);检测波长为330 nm;流速:1.0 ml/min。结果:连翘酯苷A在0.232~1.856μg(r=0.999 9)范围内、绿原酸在0.25~2.00μg(r=0.999 6)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为97.90%和98.89%;RSD分别为0.317%和0.685%(n=6)。结论:该方法简便,结果准确,重现性好,可作为该制剂的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定银翘解毒片中连翘酯苷A的含量

目的建立银翘解毒片中连翘酯苷A的含量测定的方法。方法采用高效液相色谱法;Diamonsi(l钻石)C18(5μm,250mm×4.6mm)色谱柱;流动相:乙腈-0.4%冰醋酸溶液(17︰83);流速1mL/min;检测波长330nm;进样量10μL,等梯度洗脱,对其进行含量测定。结果连翘酯苷A在10.5～60.3μg,范围内的线性关系良好(n=6)。结论该方法简便、准确,适用于银翘解毒片的质量控制。     

连翘酯苷冻干粉的遗传毒性试验

目的检测连翘酯苷冻干粉的遗传毒性,为临床前安全性评价提供依据。方法分别应用Ames试验、小鼠骨髓微核试验、体外培养CHO细胞染色体畸变试验、CHO细胞和正常人肝细胞Chang liver两个细胞株单细胞凝胶电泳法。结果Ames试验选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535为指示菌株,加和不加代谢活化系统(S9)时对鼠伤寒沙门氏菌均无致突变性。小鼠骨髓微核试验采用ICR小鼠,尾静脉注射给药,剂量分别为0.2、0.4和0.8g/kg,结果显示:雌性小鼠微核诱发率分别为1.50、2.67和6.75%,雄性小鼠微核诱发率分别为1.87、5.79和6.57%;其中雌性小鼠在0.8g/kg剂量下、雄性小鼠在0.4、0.8g/kg剂量下的微核诱发率与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。表明受试物连翘酯苷冻干粉在0.4、0.8g/kg剂量下对ICR小鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应。CHO细胞染色体畸变试验结果显示:受试物连翘酯苷冻干粉在受试剂量下作用24h,-S9的染色体畸变率分别为3%、7%和9%,与阴性对照组比较164.0和328.0μg/ml2个剂量组均显示差异有统计学意义(P<0.05);-S9作用48h的染色体畸变率分别为3%、5%和8%,与阴性对照组比较164.0和328.0μg/ml剂量组差异有统计学意义(P<0.05); S9的染色体畸变率分别为1%、1%和6%,各剂量组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。重复试验结果一致。以上结果说明连翘酯苷冻干粉在无代谢活化系统时,作用24h328μg/ml以上剂量对CHO细胞有致染色体畸变作用,作用48h164μg/ml以上剂量对CHO细胞具有致染色体畸变作用,在有S9代谢活化系统时,在受试剂量下对CHO细胞均无致染色体畸变作用。细胞彗星试验结果显示,在各试剂量的拖尾率和尾长与溶剂对照组相比较差异无统计学上意义,表明酯苷冻干粉在受试剂量下无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liverDNA的能力。结论连翘酯苷在体外培养CHO细胞染色体畸变试验和微核试验中,在较高剂量时呈阳性,无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liver DNA的能力。连翘酯苷冻干粉有一定的遗传毒性,分析连翘酯苷所致染色体畸变和微核的机制,可能不是通过损伤DNA机制诱导的,而是通过抑制DNA合成的、抑制拓扑异构酶、细胞毒性等非DNA损伤所致。     

门氏护胃方中连翘与其他药材配伍煎煮前后连翘酯苷A和连翘苷提取率变化的研究

目的:考察门氏护胃方中连翘单药及与其他药材配伍煎煮前后连翘酯苷A和连翘苷提取率的变化。方法:采用高效液相色谱法测定连翘单味药材(5 g×7付)、连翘(5 g×7付)与姜半夏配伍、门氏护胃方[包括连翘(5 g×7付)、姜半夏等6味药材]经水煎煮后药液中连翘酯苷A和连翘苷的提取量并计算提取率。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,检测波长为278 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L/min。结果:连翘酯苷A与连翘苷进样量线性范围分别为0.61～6.1、0.246～2.46μg(r=0.999 7、0.999 9),在精密度、稳定性(20 h内)和重复性试验中RSD均<2%(n=6),平均回收率为96.10%～99.37%(RSD≤2.36%,n=6);在连翘单味药材中,连翘酯苷A和连翘苷的提取率分别为96.90%、66.67%;在连翘-姜半夏配伍样品水煎液中,二者的提取率分别为101.61%、54.55%;在门氏护胃方样品水煎液中,二者的提取率分别为98.39%、84.85%。结论:连翘与姜半夏配伍后连翘酯苷A的提取率增加、连翘苷的提取率略有减少;连翘与门氏护胃方中其他药材配伍后,二者的提取率均略有增加。