基于生物抑菌活性的金银花颗粒效价测定方法

摘 要 目的： 探讨符合中医药特点的中药固体制剂质量控制与评价的化学 生物联合评价模式。方法: 以金银花颗粒为模型药,采用菌敏试验（最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定）考察金银花提取液对4种标准菌株（金黄色葡萄球菌、变形链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）的抑菌性。建立敏感菌抑菌圈直径与不同浓度金银花提取液之间的相关曲线,计算不同厂家金银花颗粒的生物效价,并将测定结果与HPLC法测定（以绿原酸计）的结果相比较。结果: 抑菌实验表明,金银花对金黄色葡萄球菌、变形链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌敏感,其中金黄色葡萄球菌的抑菌圈边缘清晰、敏感度较高。当金银花的质量浓度在0.0142～0.0680 g·ml^-1范围内时,对数浓度与反应效应呈线性关系,且相关性好（ｒ＝0.990 9）。结论:以生物活性为导向的效价评价方法有望成为评价中药固体制剂有效成分含量的手段之一,可配合传统检验方法对中药材及其制剂进行质量监控。     

淫羊藿不同提取物的体外抑菌实验研究

摘 要 目的：考察淫羊藿不同提取物的体外抑菌作用。方法: 采用倍比稀释法考察淫羊藿不同提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用,测定抑菌圈大小、最小抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果: 淫羊藿提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和枯草芽孢氏菌均呈现不同程度的抑菌能力,水提物的抑菌能力强于醇提物（P<0.05或P<0.01）;水提物经过不同温度热处理后对各菌株的抑菌能力无显著差异（P>0.05）,醇提物经高温处理后抑菌能力呈下降趋势,温度越高抑菌能力越弱（P<0.05）。淫羊藿水提物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的MIC和MBC相同,分别为7.81,1.95,31.25 mg·mL^-1,白色念珠菌的MIC和MBC分别为15.63,31.25 mg·mL^-1;淫羊藿醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的MIC和MBC相同,分别为15.63,3.91,62.5,62.5  mg·mL^-1。结论:淫羊藿提取物具有明显的抑菌效果,其中水提物优于醇提物。淫羊藿不同化学成分的极性会对抑菌效果产生影响。     

咽炎灵分散片中药材提取工艺考察

摘 要 目的：优选咽炎灵分散片中药材的最佳提取工艺。方法: 以提取液中没食子酸的含量和总固体得率的综合评分为指标,采用正交设计试验考察液料比、提取时间和提取次数三因素对咽炎灵分散片中药材提取率的影响。结果: 最佳提取工艺条件为: 料液比1∶10（g·mL^-1）、提取时间1 h,提取次数3次。 结论:在最佳提取工艺条件下,咽炎灵分散片中药材中没食子酸的提取率为0.058%,总固体得率为21.4%,优选的工艺稳定可行,可为咽炎灵分散片的生产提供参考。     

一种蒺藜甾体皂苷对人工诱导耐药的红色毛癣菌体外抗菌活性研究

目的 研究蒺藜的甾体皂苷成分TTS-12对于耐药皮肤癣菌的抗真菌作用。方法 用含体外浓度递增法对真菌进行培养,分别诱导红色毛癣菌对氟康唑和酮康唑的耐药性,用微量液基稀释法评价菌株的耐药性、稳定性及对TTS-12的敏感度。结果 经过诱导后,耐氟康唑菌株对氟康唑的最小抑菌浓度(MIC)＞128 μg·mL^-1,耐酮康唑菌株对酮康唑的最小抑菌浓度＞64 μg·mL^-1,且传代三次后耐药性相对稳定,TTS-12对氟康唑耐药菌株的最小抑菌浓度范围在4～16 μg·mL^-1,对酮康唑耐药菌株的最小抑菌浓度范围在4～8 μg·mL^-1。结论 经过浓度递增方式的培养能够成功诱导红色毛癣菌耐氟康唑和酮康唑的菌株,并且TTS-12对两种耐药菌株有良好的生长抑制作用。     

3种常用藏药的体外抑菌活性研究

目的 测定藏药七十味珍珠丸、八味秦皮丸、仁青常觉的体外抑菌活性。方法 用肉汤稀释法和牛津杯法研究体外抑菌活性,根据最小抑菌浓度(MIC)及抑菌圈大小判断3种藏药的抑菌活性。结果 七十味珍珠丸的抑菌作用由强到弱为金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>铜绿假单胞菌>乙型副伤寒沙门菌>白色念珠菌>大肠埃希氏菌;八味秦皮丸的抑菌作用由强到弱依次为金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>铜绿假单胞菌>乙型副伤寒沙门菌>大肠埃希氏菌>白色念珠菌;仁青常觉的抑菌作用由强到弱依次为金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>铜绿假单胞菌>白色念珠菌>乙型副伤寒沙门菌>大肠埃希氏菌。结论 3种藏药对6种试验菌株的生长均具有不同程度的抑制作用,普遍对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌具有较强的抑制作用,其中八味秦皮丸对大肠埃希菌的生长具有显著的抑制作用,仁青常觉对白色念珠菌的生长抑制作用强于七十味珍珠丸和八味秦皮丸。     

番石榴叶提取物对常见细菌的体外抗菌作用

目的观察番石榴叶提取物对常见细菌的抗菌作用。方法应用琼脂打孔扩散实验和试管稀释法，分别测定番石榴叶提取物对11种常见细菌的抑菌效果， 对3种常见细菌的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC），并与鱼腥草注射液进行抑菌效果比较。结果1 g·mL^-1番石榴叶提取液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、脑膜炎双球菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌的抑菌活性较强，抑菌圈＞15.5 mm;对枯草芽孢杆菌痢疾杆菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、变形杆菌及乙型链球菌有一定的抑菌作用， 抑菌圈＞11.0 mm。氯仿、正丁醇、乙酸乙酯、甲醇等4种溶剂萃取番石榴叶的提取液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白念珠菌的MIC分别为0.125～0.250，0.125～0.25，0.0625～0.25，0.25～0.5 g·mL^-1，MBC分别为0.062 5～0.125，0.062 5～0.125，0.031 25～0.125，0.125～0.25 g·mL^-1。相同浓度的番石榴叶提取物比鱼腥草注射液抑菌效果强。结论番石榴叶的提取液具有较强的广谱抗菌作用。     

氟康唑滴眼液抑菌剂浓度筛选和抑菌效力研究

摘 要 目的：探讨氟康唑滴眼液中抑菌剂的合理添加剂量。方法: 按照中国药典2015年版抑菌剂效力检查法,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,对分别含4个不同浓度抑菌剂（5%,1%,0.3%,0.1%苯扎氯铵）的氟康唑滴眼液进行抑菌剂效力测定。结果: 含5%,1%,0.3%苯扎氯铵的氟康唑滴眼液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉5种试验菌的抑菌效力均符合规定,0.1%苯扎氯铵对铜绿假单胞菌抑菌效力不符合规定,0.3%为苯扎氯铵的最低抑菌浓度。结论: 确定苯扎氯铵的最佳抑菌浓度为1%。     

夹竹桃花脂溶性成分提取工艺优化及其生物活性分析

目的 研究夹竹桃花脂溶性成分的提取工艺、组成成分及生物活性。方法 利用Box-Behnken响应面法优化提取工艺，GC-MS分析组成成分，滤纸片扩散法和二倍连续梯度稀释法分析抑菌活性，并测定抗氧化活性。结果 最佳提取工艺为索氏提取4 h，连续提取4次，料液比1∶ 15，得率9.16%，比优化前提高了13.09%。脂溶性成分含有烷烃类、醛类和酯类等30种化合物，具有还原能力和清除DPPH自由基、羟自由基、超氧自由基的能力，对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度分别为1.22，1.72，0.75，1.96 g·L^–1，最小杀菌浓度分别为2.34，2.84，1.88，3.32 g·L^–1。结论 脂溶性成分最佳提取工艺得率为9.16%，以烷烃类、醛类、酯类为主，具有一定的抗氧化和抑菌活性，可为夹竹桃资源的开发利用提供参考。     

阴炎净凝胶对大鼠细菌性阴道炎的药效学研究

摘 要 目的： 观察阴炎净凝胶的抑菌、抗炎和止痒作用。方法: 采用倍比稀释法测定本品的体外抑菌效果;采用大鼠造模法观察本品对细菌性阴道炎的治疗作用;采用豚鼠止痒实验观察本品的止痒作用。结果: 阴炎净凝胶对金黄色葡萄球菌的MIC为47.39 mg·mL^-1;对大肠埃希菌的MIC为189.59 mg·mL^-1;对细菌性阴道炎具有明显的治疗作用;对磷酸组织胺所致豚鼠具有明显止痒作用。结论: 阴炎净凝胶具有抑菌、消炎和止痒作用。     

顶空进样气相色谱法；有机溶剂残留；蚕砂提取物

摘 要 目的：建立测定蚕砂提取物中有机溶剂残留量的气相色谱法。方法: 采用顶空进样气相色谱法,色谱柱：DB-5MS石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;载气：氮气;流速：0.6 ml·min^-1;进样口温度：200℃;检测器类型及温度：氢焰离子化检测器(FID),250℃;柱升温程序：40℃保持10 min,然后以5 ℃·min^-1的速度升至200℃,保持5 min;顶空条件：平衡温度： 95℃;平衡时间：30 min;传输管温度：110℃;进样环温度：125℃。结果: 丙酮,2,3-二甲基戊烷,3-甲基己烷,正庚烷,2,2-二甲基己烷,对二甲苯,间二甲苯,邻二甲苯,2,4,6-三甲基吡啶的线性范围分别为：101~3 034 μg·mL^-1,100~2 995 μg·mL^-1, 107~3 197 μg·mL^-1,101~3 019 μg·mL^-1,99~2 962 μg·mL^-1,45~1 358 μg·mL^-1,44~1 325 μg·mL^-1, 47~1 411 μg·mL^-1 和104~3 130 μg·mL^-1,r值均在0.992以上,回收率符合要求,空白溶剂对样品的测定没有影响,8批样品检验均符合限度要求。结论:顶空进样气相色谱法测定蚕砂提取物中有机溶剂,方法简单,结果准确。     

电感耦合等离子体原子发射光谱法测定艾司奥美拉唑镁中镁的含量

摘 要 目的：建立艾司奥美拉唑镁中镁含量的测定方法。 方法: 采用电感耦合等离子体原子发射光谱法测定艾司奥美拉唑镁中的镁含量。结果: 镁在10.0~80.0 μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.999 8）,平均回收率为99.55%（RSD=1.35%,n=9）,检出限为0.000 75 μg·mL^-1,定量限为0.002 5 μg·mL^-1。结论:该法准确、灵敏、重复性好,可用于艾司奥美拉唑镁中镁含量的测定。     

姜黄胶囊中姜黄素在大鼠体内药动学和组织分布

摘 要 目的：研究姜黄胶囊中姜黄素在大鼠体内药物动力学和组织分布特点。方法: SD大鼠灌胃5 g·kg^-1姜黄胶囊后,采集血浆样品及肝脏、肾脏、胃、小肠等脏器,用HPLC测定各样品中姜黄素含量。结果:血浆中姜黄素在0.1~10μg·mL^-1范围内线性关系良好,姜黄素t1/2为（25.13±5.63） h,tmax为0.50 h,Cmax为（0.44±0.01）μg·mL^-1,AUC0-t为（2.11±0.04）μg·mL^-1·h;同时在胃肠道、肝脏等脏器中均能检测到姜黄素分布。结论:姜黄胶囊能使姜黄素快速吸收,并广泛分布于大鼠各个组织中,为该药临床用药提供依据。     

液相色谱-串联质谱法同时测定对乙酰氨基酚及其相关代谢产物

摘 要 目的：建立一种检测小鼠血浆中对乙酰氨基酚（APAP）及其5个代谢产物的液相色谱 串联质谱（LC-MS/MS）方法,将之应用于对乙酰氨基酚的代谢研究。方法: 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以对氨基苯甲酸（PABA）为内标,采用LC-MS/MS法,C18色谱柱,流动相为甲醇 5 mmol·L^-1乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）（55∶45）,流速为0.5 ml·min^-1,柱温为25℃,采用电喷雾离子化（ESI）,正离子多反应监测（MRM）检测方式进行定量分析：APAP,[M-H]^-,m/z 152.0→110.0;APAP cys,[M-H]^-,m/z 271.2→140.1;APAP glut,[M-H]^-,m/z 457.0→328.0;APAP NAC,[M-H]^-,m/z 313.4→208.0;APAP sulf,[M-H]^-,m/z 232.4→152.1;APAP-gluc,[M-H]^-,m/z 328.2→152.1;IS,[M-H]^-,m/z 138.2→120.0。结果: 在0.2~10 μg·mL^-1（APAP）、1.0~20 μg·mL^-1（APAP-gluc）、1.0~20 μg·mL^-1（APAP sulf）、1.0~20 μg·mL^-1（APAP glut）、0.4~15 μg·mL^-1（APAP NAC）和0.2~10 μg·mL^-1（APAP cys）范围内线性良好(r≥0.990 0)。各测定物的日内精确度均在85%~115%间,精密度均小于15%,加样回收率均在85%~115%之间,RSD均低于15%。结论:该方法快速、灵敏、准确,适用于小鼠血浆中对乙酰氨基酚及其5个代谢产物的定量测定。     

双波长HPLC法同时测定复方肤清洗剂中3种指标性成分含量

摘 要 目的：建立双波长HPLC法同时测定复方肤清洗剂中绿原酸、咖啡酸、芍药苷3种指标性成分含量的方法。方法: 采用Inertsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,柱温40℃,以乙腈-0.02%磷酸水溶液（17∶83）为流动相,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长分别为323 nm、230 nm。结果:绿原酸、咖啡酸和芍药苷分别在7.50~120.00 μg·mL^-1,2.50~40.00 μg·mL^-1,14.06~225.00 μg·mL^-1范围内线性关系良好,r分别为0.999 9,0.999 8,0.999 7;平均加样回收率分别为98.55%,94.52%,99.18%,RSD分别为1.66%,0.98%,0.65%（n=6）。结论:该方法简便快捷、结果准确、专属性强,可用于复方肤清洗剂的质量分析与控制。     

LC-MS/MS法测定人血浆中拉莫三嗪浓度的不确定度评定

摘 要 目的：评定液质联用法(LC MS/MS)测定人血浆中拉莫三嗪(LTG)浓度的不确定度。方法: 分析LC-MS/MS法测定人血浆中LTG浓度过程中的不确定度来源,计算其大小并进行合成。结果: 人血浆中LTG低浓度(0.050 4 μg· mL^-1)和高浓度(1.27 μg· mL^-1)的扩展不确定度分别为0.005 18 μg· mL^-1和0.066 4 μg· mL^-1 (P = 95%,k = 2)。结论:LC-MS/MS法测定人血浆中LTG浓度的不确定度在低浓度时主要由蛋白沉淀回收率、基质效应和生物样品配制引入,在高浓度时主要由基质效应、生物样品配制和重复性引入。     

复方明矾混悬液的体外抑菌实验

目的 观察复方明矾混悬液的体外抑菌作用. 方法 以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为受试菌, 磺胺嘧啶银为对照药, 采用二倍肉汤稀释法, 观察比较它们的最小抑菌浓度. 结果 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌对复方明矾混悬液均敏感, 对3种致病菌的最小抑菌浓度（MIC）均为2.3×10-3 g&#8226;mL^-1. 结论 复方明矾混悬液具有较明显的体外抑菌作用.     

复方氟康唑凝胶的制备与质量控制

摘 要 目的：制备复方氟康唑凝胶并建立质量控制方法。方法: 以氟康唑配伍黄芩苷制成凝胶,采用HPLC法测定凝胶中氟康唑及黄芩苷的含量,并考查凝胶的刺激性、体外释放度和稳定性。结果: 氟康唑及黄芩苷分别在12.5~150.0 μg·mL^-1、25.0~175.0 μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.45%（RSD=0.40%,n=9）、99.31%（RSD=0.31%,n= 9）。复方氟康唑凝胶的体外释放符合一级释放方程,氟康唑与黄芩苷在12 h的累积释放度分别为87.6%和80.03%。凝胶稳定性好,无刺激性。结论:复方氟康唑凝胶处方及制备工艺合理,质量稳定可控。     

HPLC法同时测定复合维生素B片中5种维生素的含量

摘 要 目的：应用HPLC技术,建立同时测定复合维生素B片中维生素B1（硫胺素）、维生素B2（核黄素）、维生素B3（烟酰胺）、维生素B5（泛酸）和维生素B6（吡多辛）含量的方法。方法: 采用Alltima C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）,以50 mmol·L^-1磷酸二氢铵溶液（磷酸调至pH 3.0） 乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 ml·min^-1,维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B6的检测波长为275 nm,维生素B5的检测波长为210 nm,柱温30℃,进样量为5 μl。结果:维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5和维生素B6的线性范围分别为39.48～197.40μg·mL^-1、40.16～200.80 μg·mL^-1、39.36～196.80 μg·mL^-1、38.80～194.00 μg·mL^-1、41.76～208.80 μg·mL^-1,r均≥0.999 9。其平均回收率分别为98.70%,99.91%,99.04%,99.63%,98.75%,RSD分别为0.40%,0.27%,0.40%,0.92%,0.39%（n=9）。结论:该方法准确、简便、快速,可作为复合维生素B片中维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5和维生素B6同时测定的方法。     

HPLC法同时测定肝炎康复丸中6种成分的含量

摘 要 目的：建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定肝炎康复丸中6种主要成分[(R,S) 告依春、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、木犀草苷、对羟基苯乙酮、滨蒿内酯]的含量。方法: 色谱柱为Agilent TC C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈 0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为0.9 ml·min^-1,检测波长分别为245 nm[检测(R,S) 告依春]、270 nm（检测丹酚酸B和丹参酮ⅡA）、348 nm（检测木犀草苷）、278 nm（检测对羟基苯乙酮和滨蒿内酯）,柱温为25℃,进样量为10 μl。 结果:(R,S) 告依春、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、木犀草苷、对羟基苯乙酮、滨蒿内酯的线性范围分别为1.99～49.75 μg·mL^-1 (r=0.999 9)、18.66～466.50 μg·mL^-1 (r=0.999 4)、2.25～56.25 μg·mL^-1 (r=0.999 8) 、2.62～65.50 μg·mL^-1 (r=0.999 8)、2.48～62.00 μg·mL^-1(r=0.999 2) 和2.55～63.75 μg·mL^-1 (r=0.999 6),平均加样回收率分别为98.42%、99.56%、97.96%、96.84%、98.10%和97.82%,RSD分别为0.83%、1.04%、1.53%、0.78%、1.44%和1.34%(n=6) 。 结论:本方法简便、准确、重复性好,可为肝炎康复丸多指标定量质量评价提供依据。     

SPE-HPLC法测定三层共挤输液袋中抗氧剂在氧氟沙星氯化钠注射液中的迁移量

摘 要 目的：建立固相萃取 高效液相色谱（SPE HPLC）测定三层共挤输液用袋中抗氧剂在氧氟沙星氯化钠注射液中的迁移量的方法。方法: 采用固相萃取 高效液相色谱法(SPE HPLC),先将抗氧剂富集在HLB(hydrophilic l;pophilicbalance)固相萃取小柱上,洗脱后,在Waters Symmetry shield RP C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱上分离,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为276 nm,柱温为35℃,进样量为20 μl。结果: 抗氧剂1010、1076、168的在4.95～98.98 μg·mL^-1（r=1.000 0）、4.92～98.41 μg·mL^-1（r=0.999 9）及5.00～99.96 μg·mL^-1（r=1.000 0）浓度范围内具有良好线性关系。检出限分别为0.003、0.005和0.006 μg·mL^-1。平均回收率分别为94.7%、91.2%和92.0%,RSD分别为4.3%、3.7%和4.9%（n=9）。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于该药与包装的相容性评价。