铁棒锤化学成分研究

铁棒锤(Aconitum szechenyianum Gay)又名铁牛七、黑草乌。用于消炎止痛、祛风除湿,治疗风湿性关节炎及疮痈肿毒等。与铁棒锤同名的植物有雪上一枝蒿(A.pendulumBush)、伏毛铁棒锤(A.flavum Hand-Maii),此二者成分已有报道,前者主要含乌头碱,     

HPLC法测定藏药榜那中乌头碱的含量

目的:建立测定榜那药材中乌头碱含量的方法,确定其限量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为YMC triart C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.25 mol/L乙酸铵溶液(加入15 mmol/L十二烷基硫酸钠,再以浓氨水调pH为9.5)=48∶52(V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为230 nm,柱温为35℃。结果:乌头碱的质量浓度在2.10¹ 051.00μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2%;高、中、低量度的平均加样回收率分别为99.2%、99.1%和99.1%,RSD分别为0.9%、1.0%和0.3%(n均为3)。结论:该方法简便、灵敏、重复性好,适用于榜那药材的质量控制。     

铁棒锤中3种双酯生物碱的含量测定

目的为铁棒锤的合理使用及质量控制提供依据。方法色谱柱:Diamonsil C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:以乙腈-四氢呋喃(25∶15)为流动相A,以0.1mol·L~(-1)醋酸铵溶液(每1 000mL加冰乙酸0.5mL)为流动相B,梯度洗脱;流速:1.0mL·min~(-1);检测波长:235nm。结果在此色谱条件下,3种双酯型生物碱可以完全分离,乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的线性范围分别为:0.13~1.33μg(r=0.999 0),0.34~3.41μg(r=0.998 2)和0.34~3.41μg(r=0.998 1),回收率分别为97.0%(RSD=1.290%),97.0%(RSD=1.174%)和96.3%(RSD=1.521%)。结论该方法操作简便,结果准确可靠,重复性好,能用于铁棒锤中3种双酯型生物碱的含量测定。甘肃产铁棒锤中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的平均含量分别为0.183%,0.012%和0.055%,酯碱含量高,临床使用时应减少用量或炮制后使用。     

HPLC-ELSD测定工布乌头中的塔拉萨敏

目的采用HPLC-ELSD法测定工布乌头中塔拉萨敏的含量。方法采用WelchromTM色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.1%三乙胺水溶液(60:40)为流动相,流速1.0 m.lmin-1,柱温35℃,用蒸发光检测器检测,漂移管温度40℃。结果线性范围为0.504~15.11μg(r=0.99985),平均回收率为98.86%,RSD=1.05%。结论所建方法简便、准确、重复性好,可作为工布乌头药材质量控制的方法;工布乌头中不含乌头碱。     

铁棒锤的显微鉴别

目的　为铁棒锤的开发利用提供显微鉴定依据。方法　采用形态、性状与显微鉴别。结果　对铁棒锤性状、显微进行了全面系统的研究。结论　铁棒锤块根横切面上后生皮层微木栓化与内皮层凯氏点加厚明显 ;粉末中具盔帽状淀粉粒 ,后生皮层细胞垂周壁波状加厚 ,可作为显微鉴别铁棒锤的依据。     

回药伏毛铁棒锤的生药学研究

目的:对回药伏毛铁棒锤进行生药学研究.方法:性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别及薄层色谱鉴别.结果:详细描述了伏毛铁棒锤的生药学特征.结论:为伏毛铁棒锤的鉴别、质量标准制定及深入开发奠定了科研基础.     

HPLC测定制川乌中的乌头碱、次乌头碱和新乌头碱

目的 建立RP-HPLC测定制川乌中乌头碱、次乌头碱和新乌头碱含量的方法.方法 采用Zorbax Eclipse XDB-C8色谱柱(200 mm ×4.6 mm,5 μm);以20 mmol·L-1三乙胺溶液(磷酸调pH3)-甲醇(95:5)为流动相梯度洗脱;检测波长235nm;柱温30 ℃;流速1.0 mL·min-1.结果 三种生物碱得到有效分离,回归方程分别为:Y乌头碱=1.257×104X+0.222(r=0.9999)、Y次乌头碱=1.302×104X+0.293(r=0.9997)、Y新乌头碱=1.295×104X-0.119(r=0.9999);线性范围为:0.5～20.0μg·mL-1;平均加样回收率分别为98.42%、97.51%、98.33%;RSD分别为1.05%、1.07%、1.05%(n=6).结论 所建方法对制川乌中生物碱的含量控制具参考意义.     

反相高效液相色谱法同时测定乌头不同部位中新乌头碱和乌头碱含量

目的建立RP-HPLC同时测定中药乌头不同部位中新乌头碱和乌头碱的含量。方法采用Kromasil C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以40 mmol乙酸铵缓冲液-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长230 nm,柱温30℃。结果新乌头碱、乌头碱分别在2.61～15.66μg、0.26～1.56μg呈良好的线性关系,加样回收率分别为100.4%（RSD=1.2%）,98.9%（RSD=0.71%）。结论该方法简便、准确,分离效果好,可用于附子中酯型生物碱的定量分析。     

高效液相色谱法测定草乌叶中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱

目的 建立以高效液相色谱法同时测定蒙药草鸟叶中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的方法.方法 Extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3 mol/L三乙胺(65:35),体积流量为0.8 mL/min,检测波长为235 nm,柱温为35℃.结果 经过方法学考察,本测定方法具有一定的专属性、准确性、重现性和可行性,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱分别在1～5、0.35～1.75、0.5～2.5 μg呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.43%、98.98%、98.82%,RSD分别为1.38%、0.89%、1.03%.结论 本方法简便、准确、分离效果好、线性范围宽、灵敏度高,可用于本品的质量控制.     

HPLC法测定两种乌头药材中生物碱的含量

高效液相色谱法测定湖北两种乌头药材中乌头碱、次乌头碱、中乌头碱的含量。采用SpherisorbODS柱，以甲醇-水-氯仿-三乙胺（60：40：2：0．1）为流动相，联苯为内标。     

回药铁棒锤的研究进展

回药铁棒锤为毛茛科乌头属植物伏毛铁棒锤的干燥块根。其主要药效成分为二萜生物碱类,具有显著的抗炎镇痛作用,但具有一定的毒副作用。通过整理国内外近30年关于铁棒锤化学成分、药理作用及炮制方法的文献资料,为宁夏民间药铁棒锤的深入研究提供参考。     

高效液相色谱法测定家兔血浆中的乌头碱浓度

目的建立家兔血浆中乌头碱浓度的高效液相色谱（HPLC）测定方法。方法采用Symmetry shield RP18（5μm,4.6×250mm）色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸（68∶32）为流动相,流速为0.8mL.min-1,检测波长为235nm。结果乌头碱在0.05～8μg.mL-1范围内成良好的线性关系（r2=0.999）。样品的回收率在95%～108%,日内和日间RSD均小于5%。结论本方法准确、灵敏、简便,适用于家兔血浆中乌头碱含量的测定分析。     

仙茅与民族药铁棒锤的形态组织学鉴别

目的探讨仙茅与铁棒锤的形态组织学比较。方法运用性状和显微鉴别法对仙茅和铁棒锤进行鉴别。结果二者外形有相似之处,但断面形态、横切面组织构造及粉末显微鉴别有明显差异。结论仙茅与铁棒锤来源和功能完全不同,不可混用。     

反相高效液相色谱法测定参附注射液及市售黑附片中乌头碱的含量

目的　测定参附注射液及市售黑附片中乌头碱的含量。方法　用RP HPLC ,流动相为乙腈 醋酸铵缓冲液 (pH10 5 ) ,紫外检测波长 2 3 0nm ,流速 0 8ml·min-1。结果　对照品的线性范围 1 3 9～ 2 2 2 4 μg(r =0 9997) ;市售黑附片中的乌头碱比参附注射液中的高 3倍。结论　方法简便、快速、准确、重现性好 ,可以作为样品的检验方法     

中药制剂中乌头碱含量的测定及其临床应用

目的：建立乌头碱中毒的临床和法医学检验的检测方法。方法：结合乌头碱中毒的临床症状，采用高效液相色谱法检测中毒者所服药品中乌头碱含量，计算出病人服用的乌头碱量是否达到中毒量和致死量，从而为临床诊断乌头碱中毒提供检测方法和量化依据。结果：测定的线性范围为1．8－7．3μg，回收率和RSD为97．87％，1．85％。结论：本方法简便、快速、准确，可为乌头碱药酒中毒的临床诊断和法医鉴定提供检测依据。     

铁棒锤转录组分析及乌头碱生物合成相关基因的挖掘

铁棒锤Aconitum pendulum为常用藏药,乌头碱类化合物是其主要活性成分,具有较高的药用价值.为研究铁棒锤乌头碱类生物合成途径,首次采用Illumina HiSeqTM2000高通量测序技术对铁棒锤转录组进行分析,分别构建其根、叶和花转录组数据库.Trinitydenovo组装得到47264条unigenes...     

高效液相色谱法测定嘎日迪五味丸中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱含量

目的建立测定嘎日迪五味丸中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Symmetry C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-氯仿-冰醋酸-三乙胺(50∶50∶2∶1∶0.6),柱温为25℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm。结果乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的质量浓度均在9.0～45.0μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,回归方程分别为A1=2.125×106C+1.252×104,A2=2.143×106C+1.422×104,A3=1.968×106C-2.152×104,相关系数r分别为0.999 6,0.999 8,0.999 8,平均回收率分别为100.40%,99.61%,100.15%,RSD分别为0.72%,0.86%,0.89%。结论所用方法简便、快速、准确,适用于嘎日迪五味丸中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定中药附子中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的含量

目的:探讨中药附子中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的高效液相色谱测定方法.方法:采用HypersilC18(4.6mm×250mm,5.0μm),以甲醇:0.05%磷酸溶液(三乙胺溶液调节pH值6.2)=60:40,检测波长为252nm,柱温为35℃,流速为0.8mL/min.结果:乌头碱回归方程为Y=1.285×103+0.324×102(r=0.9997),在0.261~1.559μg范围内呈较好的线性关系;中乌头碱回归方程为Y=3.354×103+0.015×102(r=0.9996),在0.526~2.031μg范围内线性关系良好;次乌头碱线性回归方程为Y=1.329×103-0.426×102(r=0.9999),在0.152~1.352μg范围内线性关系良好.结论:高效液相色谱法对中药附子中3种有效成分进行测定,方法简单易行,重现性好,精密度高,可作为附子质量控制的方法.     

双向发酵对川乌指纹图谱及乌头碱类成分含量的影响

目的:观察川乌被19种药用真菌发酵后,乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量的变化及高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的差异。方法:将川乌作为"药性基质",在一定的条件控制下,应用双向发酵技术,使其被槐耳、灵芝、红栓等19种药用真菌发酵,产生药材的"药性菌质",并采用反相高效液相色谱法对"药性菌质"和生药材中所含的乌头碱、新乌头碱和次乌头碱进行含量测定,比较其含量的变化及指纹图谱的差异。结果:在一定的时间范围内,大多数的菌株在川乌基质上的适应性良好,菌丝体生长旺盛,如代号A、C、D、E、F、M、Q、V、SW、い等真菌。发酵之后的川乌中乌头碱、新乌头碱及次乌头碱含量与生药材比较多数有明显的降低。结论:双向发酵后多数"药性菌质"中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱含量明显降低了,提示双向发酵是生物技术在中医药领域中应用的有益尝试。