p53基因突变及p53,APC基因缺失与胃癌关系的研究

为明确ｐ５３基因突变，缺失，ＡＰＣ基因缺失在胃癌发病机制中的作用，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对抑癌基因ｐ５３第４，５，６，７，８外显子，第６内含子在８７例胃癌及癌前病变中的突变规律以及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对ｐ５３基因第４外显子，第６内含子，ＡＰＣ基因在２５对胃癌及癌旁组织的杂合缺失规律进行了探讨，结果发同，ｐ５３突变率在肠化，不典型增生，胃癌分别为３７．５％（３／８），４２．１％（８／１９），５３．     

锤头状核酶对肝癌突变基因p53的抑制作用

目的 探讨p53核酶对肝癌细胞突变型抑癌基因p53的抑制作用。方法 应用计算机设计并合成针对突变型p53(249位密码子AGG→AGT)的锤头状核酶RZ，构建其体外转录和真核表达载体，检测核酶对突变型p53(mtp53)的体外切割作用，并在Lipofect AMINE^TM2000的介导下转染肝癌细胞MHCC97，应用逆转录聚合酶联反应(RT—PCR)检测核酶对肝癌细胞突变型p53的抑制作用。结果 测序证实核酶基因被正确克隆人体外转录载体pBSKU6和真核载体pEGFPC1中。体外切割效率为42％，而野生型p53(wtp53)没有被切割。在Lipofect AMINETM2000的介导下成功转染肝癌细胞MHCC97，RT—PCR检测证实突变型p53的mRNA水平明显下降，细胞内的切割效率为69％。结论 p53核酶可成功抑制肝癌细胞中突变型p53的表达，为肝癌的基因治疗提供了一个新的选择。     

p53基因突变与大肠癌预后的关系

抑癌基因p53是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因，p53基因与人类50％的肿瘤有关。大肠癌是人类常见的恶性肿瘤之一，而p53基因与大肠癌发生密切相关。     

大肠癌中p53基因突变与HPV研究进展

ｐ５３基因和人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）是目前肿瘤病因学领域研究的热点。本文对大肠癌中ｐ５３基因突变和ＨＰＶ的感染情况进行了综述，探讨了这两种因素的单独作用及协同作用在大肠癌癌变过程中可能所起的作用，它的阐明为进一步理解和探寻大肠癌的发病机制提供了新的线索，对大肠癌的防治将起到一定的指导作用。     

肿瘤抑癌基因p53与原发性肝癌

１９８８年,Ｂｅｎ－Ｄａｖｉｄ［１］在小鼠Ｆｒｉｅｎｄ病毒感染的红细胞中发现了Ｐ５３基因的频发失活,提出了Ｐ５３是一个肿瘤抑制基因、研究发现,将人野生型Ｐ５３基因转染到体外培养的肿瘤细胞中,可抑制肿瘤细胞生长。野生型Ｐ５３基因在正常细胞分裂过程中可能并无作用,但在细胞损伤后修复及不可修复细胞的清除过程中却必不可少。１　ｐ５３因异常与肿瘤的发生 ｐ５３基因是许多恶性肿瘤十分常见的共同基因损伤靶位,它的结构改变与表达异常可能是这些肿瘤发生的中心环节。点突变是ｐ５３基因异常表现的主要形式之一。大多数结…     

p53基因与胃癌

ｐ５３基因与胃肠道肿瘤关系密切，是肿瘤研究的热点之一。本文就ｐ５３基因的结构与功能，胃癌ｐ５３基因的结构改变，以及野生型ｐ５３基因对胃癌的基因治疗前景进行综述。     

慢性淋巴细胞白血病患者外周血p53基因突变观察

目的观察慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血中p53基因突变情况,并探讨其临床意义。方法采用PCR联合测序技术检测80例CLL患者及10例健康体检者外周血中的p53基因,CLL患者中25例应用FC方案(氟达拉滨25 mg/m2,环磷酰胺250 mg/m2,第1～3天静滴)化疗,28 d为1个疗程,治疗2～6个疗程。结果 80例CLL患者中12例(15.0%)检测到p53基因突变,其中错义突变11例、无义突变1例,未检测到插入和缺失;突变位点均发生在外显子(exon)5～9,其中发生在exon 5 2例、exon 6 3例、exon 7 1例、exon 8 5例、exon 9 1例,exon2～4、exon 10、exon 11未检测到突变。健康体检者中均未检测到p53基因突变。二者p53基因突变率比较,P<0.05。p53基因突变与Binet分期、p53基因缺失、IgVH突变有关(P均<0.05)。80例CLL患者中25例化疗后CR5例、PR 11例,总反应率(OR)为64.0%;p53基因突变者OR为14.3%,低于p53基因无突变者的83.3%(P<0.05)。结论 CLL患者外周血中存在p53基因突变,其可作为预后判定的指标。     

肝细胞肝癌P53基因突变与病理分期的关系

肝细胞肝癌 (HCC)是一种常见的恶性肿瘤 ,其发生与肝炎病毒 (HBV)慢性感染及黄曲霉素有关 ,其中 HBV感染为重要因素 ,但仅 2 0 %～ 2 5 %的HBV携带者最终发展为 HCC,迄今尚缺乏实验证据阐明上述因子在细胞或分子水平上导致肝细胞癌变的过程。本研究采用银染 PCR- SSCP方法检测     

抑癌基因PTEN及p53在肝细胞肝癌中表达的免疫组化研究

为探讨肝细胞肝癌组织中抑癌基因PTEN及p53蛋白的表达情况及临床病理意义。应用免疫组织化学技术检测了41例肝细胞肝癌及其相应的癌旁组织中PTEN和p53蛋白的表达情况。41例癌旁组织PTEN全部阳性表达,肝细胞肝癌组织中PTEN阳性表达率39％,阳性信号显示于胞浆中。p53阳性表达率51％,PTEN蛋白在肝细胞肝癌组织中的阳性表达与组织分化程度明显相关,高分化癌的阳性率为73％,低分化癌阳性率27％。肝细胞肝癌细胞中存在较高比例的PTEN蛋白阴性表达,说明在肝细胞肝癌的发生发展中PTEN基因失活起着重要作用,它的阳性表达可能有一定的预后意义。     

肝细胞癌中p53基因突变的检测及新DNA片段的发现

目的：检测原代肝癌组织以及肝癌细胞系中ｐ５３的突变位点和频率,了解ｐ５３突变与肝癌发病和治疗的关系。方法：设计了３对引物,采用ＰＣＲ技术扩增ｐ５３的５－８外显子,然后进行ＤＮＡ测序鉴定,共测定了两个肝癌细胞系（ＢＥＬ－７４０２和２．２．１５）以及两例原代肝癌组织,其中５和６外显子用一对引物串联扩增出来,上游引物序列为５′－ＧＧＡＡＴＴＣＣＴＣＴＴＣＣＴＧＣＡＧ－３′,下游为：５′－ＧＧＡＡＴＴＣＡ     

p53蛋白的功能和失活

ｐ５３基因作为肿瘤抑制基因已受到了广泛的重视。野生型ｐ５３蛋白具有控制细胞增殖，抑制细胞转化，阻止致癌过程的重要功能。ｐ５３基因的突变和缺失是导致ｐ５３蛋白功能失活的常见原因；此外，本文还综述了ｐ５３蛋白功能失活的其他机制。     

顺铂诱导的人NCI-H460细胞获得性耐药与p53基因突变的关系

目的　探讨p53基因突变与肺癌化疗后获得性耐药的关系。方法　采用顺铂(DDP)大剂量(50μmol/L)间歇诱导法,体外诱导具有野生型p53基因的人大细胞肺癌NCIH460细胞株,建立多药耐药细胞系H460/DDP;用免疫细胞化学法检测P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、肺相关蛋白(LRP)、拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)、谷胱甘肽转移酶π(GSTπ)及P53蛋白的表达状况;用荧光免疫法测定P53蛋白磷酸化状态;对p53cDNA全长进行扩增及测序,用含野生型p53基因的质粒pShuttleCMVwtp53cDNA转染耐药细胞,测定转染细胞的药物敏感性。结果　新建立的人大细胞肺癌多药耐药株H460/DDP,对DDP及卡铂的耐药指数分别为1021和998,对氟尿嘧啶、多柔比星、表柔比星、甲氨蝶呤、依托泊苷及异长春新碱等有不同程度的交叉耐药。多药耐药株H460/DDP细胞的P53蛋白滞留于细胞浆,在DDP刺激下不能发生磷酸化;LRP表达明显增加(P<005);但其他耐药相关蛋白水平与DDP诱导前相比差异无统计学意义(P>005);耐药株细胞p53基因第277位点后插入一个“t”;耐药株转染pShuttleCMVwtp53cDNA后,其耐药性可发生部分(532%)逆转。结论　铂类化疗药物诱导的NCIH460细胞p53基因突变与其对化疗药物耐药性的产生有密切关系,p53基因替代疗法可能是克服这类获得性耐药的一个有效方     

人动脉粥样硬化斑块p53基因突变的初步报告

从甲醛固定的成人动脉粥样硬化斑块组织中提取DNA,用PCR扩增p53基因片段,将扩增的p53基因片段亚克隆至SK载体内,对扩增后的片段进行核苷酸序列分析。结果发现,动脉粥样硬化斑块中p53基因内第8外显子第272位密码子的T变为C。免疫组化分析观察到斑块内有p53基因突变蛋白的表达。提示p53基因突变可能与动脉粥样硬化的细胞增殖异常有关。     

p53与人类肺癌研究进展

ｐ５３基因是一种多功能的抑癌基因,近年来研究表明ｐ５３基因在人类支气管肺癌的发生、发展、转移、转归演化过程中发挥了重要角色。ｐ５３与肺癌关系的分子生物学和肿瘤发生学的深入研究为肺癌的基因诊断、基因治疗提供了科学依据,因而具有重大的临床应用价值。     

微囊藻毒素LR促肝癌过程中对p53基因突变与表达的影响

目前所检测到的微囊藻毒素(microcystin,MC)异构体将近80种[1]。其中,微囊藻毒素LR (MCLR)因其毒性大、分布广,已成为目前研究热点,但对其致毒机制,尤其致肝肿瘤机制尚不清楚。我们根据二阶段致癌理论建立MCLR中期动物模型,并分析与细胞周期密切相关的基因p53、p21waf1基因在MCLR促肝癌过程的变化,为更深入了解MCLR的促癌机制提供帮助。     

p53基因与脑缺血

在缺血性脑损伤过程中，存在凋讯和坏死两种不同的细胞死亡机制。而ｐ５３及其下游靶基因在细胞死亡特别是诱导凋亡中发挥重要作用，ｐ５３基因是多种病理情况细胞信号传导的关键调控点，与其靶基因相互作用共同完成细胞适应反应。     

痰标本检测p53基因突变及其在肺癌早期临床诊断中的意义

目的　评价痰标本检测p53基因点突变方法及其作为肺癌早期临床诊断监测指标的真实性和可靠性。方法　用聚合酶链反应（PCR）-单链多肽性（SSCP）-银染法检测54例原发性肺癌患者和114例良性肺疾病患者痰标本中p53基因第5～8外显子的点突变,同时进行痰涂片细胞学检查。结果　p53突变在肺癌组检出率为55.56%(30/54),非肺癌组检出率为1.75%(2/114),P<0.001。痰标本检测p53基因突变作为肺癌临床诊断监测指标的灵敏性为55.56%,特异性为98.25%,阳性似然比为31.75。肺癌组p53阳性检出率（55.56%）与痰涂片瘤细胞阳性检出率（35.19%）比较,差异有显著性（P＜0.05）,关联性有极显著意义（P＜0.01）。肺癌组p53检出率与性别、吸烟指数、病理分型、疾病分期均无明显关系,但与年龄有密切关系,高龄患者（≥60岁）检出率高（P=0.02）。结论　PCR-SSCP-银染法检测痰标本p53突变可以在可疑肺癌患者（如吸烟并慢性肺疾患者）中作为一项随访监测指标,并将有助于肺癌的早期临床诊断。     

肺癌患者肺组织和痰标本p53基因突变检测及其临床意义

目的　探讨肺癌患者支气管肺活检组织和痰标本中p5 3基因突变检测在肺癌诊断中意义。方法　应用聚合酶链反应 (PCR) 单链多肽性 (SSCP) 银染法检测 12 0例肺癌和 40例良性肺疾病支气管肺活检组织和痰标本p5 3基因第 5～ 8外显子突变情况。结果　 60例肺癌患者癌组织、癌旁组织和对侧支气管组织p5 3基因突变检出率分别为 60 % (3 6/ 60 )、17% (10 / 60 )和 5 % (3 / 60 ) ,三组间比较差异有显著性 (P <0 .0 0 5 )。 2 0例良性肺疾病支气管肺组织p5 3基因突变检出率为 5 %。故活检组织p5 3基因突变检出肺癌的敏感性为 60 % ,特异性为 95 % ;另外 60例肺癌痰标本p5 3基因突变检出的敏感性为 43 % (2 6/ 60 ) ,特异性为 10 0 %。肺癌痰标本p5 3基因突变联合细胞学检测使肺癌的诊断率从单纯细胞学的 48% (2 9/ 60 )提高到 68% (41/ 60 )。结论　痰标本p5 3基因检测联合细胞学检查可提高肺癌的诊断率