冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制

目的探讨冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL-60细胞，MTr法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，瑞氏染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。应用PCR．ELISA及RT—PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化。结果冬凌草甲素可显著的抑制HL-60细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，并呈现出明显的量-与时-效关系。冬凌草甲素作用48—60h后在瑞氏染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征，同时端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低。结论冬凌草甲素能抑制HL-60细胞的生长及诱导细胞发生凋亡：降低端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

C57BL6小鼠呼吸系统组织学特征研究

目的获取正常C57BL6小鼠的呼吸系统组织学图谱资料,并与人体呼吸系统的组织学特征进行比较。方法选取从南京大学模式动物研究所购得的C57BL／6J小鼠20只,在SPF级环境中用全价营养鼠饲料饲养,饲养到6周龄时将其处死。在1h内对处死的小鼠进行组织解剖,取出呼吸系统器官和组织,于10％中性缓冲福尔马林固定;常规病理制片,HE染色;显微镜观察,照相机摄影,图像采集,用计算机对图像进行标注。结果对小鼠呼吸系统进行详细、系统的组织学观察,并发现人体与小鼠在呼吸系统的差异主要存在于气管腺,小鼠气管腺分3种：浆液腺、粘液腺及混合腺,主要分布于粘膜固有层;人的气管腺主要为混合腺,分布于粘膜下层。结论正常C57BL6小鼠的呼吸系统组织学图谱已基本建立,为利用该品系小鼠建立呼吸系统疾病遗传工程小鼠模型奠定了基础。     

非酒精性脂肪肝C57BL/6小鼠模型的建立

 BACKGROUND: The establishment of a safe, reliable and easily repeatable mouse model of nonalcoholic fatty liver disease is the prerequisite for the study of the diagnosis and treatment of the disease.     

C57BL/6小鼠皮肤毛囊发育的实验研究

目的探讨胎鼠,乳鼠和成鼠毛囊发育的规律。方法石蜡和冰冻超薄切片,采用HE染色,AP活性染色,油红O染色,凋亡细胞鉴定等方法观察不同时期C57BL/6小鼠毛囊的发育情况。结果胚胎发育第15.5d(E15.5)开始出现毛囊,至E18.5胎鼠背部皮肤逐渐增厚,毛囊逐渐增多。乳鼠出生第1d毛囊大部分处于第4阶段之前,毛囊数量继续增加,至出生第4d皮肤基底层未见新生的毛囊,此时毛囊数量维持不变,出生第9d毛囊达到第8阶段。成鼠脱毛后第9d约有95%的毛囊进入生长Ⅳ期,第17d约有63.3%的毛囊进入退化期,第22d约有85%的毛囊处于退化期。结论小鼠毛囊的早期发育起始于E15.5,从E17.5到出生后3d毛囊数量呈快速增加趋势,因此,这一时期可以用于探讨毛囊再生机制等相关研究。     

C57/BL6小鼠小脑发生发育及衰老的形态学变化

目的:观察C57/BL6小鼠小脑发生发育及衰老的形态学变化规律.方法:应用石蜡连续切片、H-E染色结合体视学方法对胚龄(E)10、12、14、16、18、20 d和生后(P)1、3、7、14、21、28 d的仔鼠及生后2、3、6、15个月(M)的C57/BL6小鼠小脑的形态学变化进行系统观察和定量分析.结果:E12 d小脑原基出现.E16 d小脑半球、蚓部及皮质的外颗粒层出现.E18 d分子层的原基出现,小脑表面出现沟回结构.P1 d皮质分为外颗粒层、分子层、浦肯野细胞层和内颗粒层4层.P7 d皮、髓质分界清楚.P21d外颗粒层消失,皮质分为分子层、浦肯野细胞层和颗粒层3层.体视学分析显示,3个月之前,小脑总体积、皮质和髓质的体积、皮质各层（分子层、浦肯野细胞层和内颗粒细胞层/颗粒细胞层）的体积均逐渐增加,以P3～14 d增长最快;3个月之后趋稳定.E18 d～P14 d,外颗粒层体积先增大后减小,P21 d完全消失.结论:E12 d～P21 d是小鼠小脑发生发育的关键时期,细胞经历了增殖、分化和迁移,外颗粒层可能参与分子层和内颗粒层的形成.     

冬凌草甲素对人肺癌NCI-H460细胞侵袭和迁移的影响

 目的：研究冬凌草甲素对人肺癌NCI-H460细胞侵袭和迁移的影响。方法：将NCI-H460细胞分为高剂量（HD）组、中剂量（MD）组、低剂量（LD）组和对照（N）组,前3组（实验组）加入不同浓度的冬凌草甲素,N组不加冬凌草甲素,观察细胞生长情况;用MTT法测定细胞增殖;比较细胞侵袭能力和迁移能力;Western blotting检测细胞MMP-2和MMP-9表达。结果：实验组细胞数量低于对照组,细胞增殖受抑制,HD组抑制率为48.94%,MD组为36.17%,LD组为19.15%;实验组穿透滤膜细胞数明显减少,HD组为26.67±5.16,MD组为36.17±5.08,LD组为44.33±5.50;实验组的迁移速率及迁移细胞数均降低;实验组的MMP-2和MMP-9表达水平明显低于N组（P<0.01）。结论：冬凌草甲素能抑制NCI-H460肺癌细胞的侵袭和迁移,其作用与下调MMP-2和MMP-9表达有关。     

C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生物学特性及饲养层制备

背景：昆明小鼠胚胎成纤维细胞是目前最常用的饲养层细胞,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层的研究鲜有报道。目的：体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,制备饲养层,力求扩大小鼠胚胎成纤维细胞的来源。方法：用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性,研究其生长规律,并制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,检测干细胞在所制备饲养层上的生长状态。结果与结论：不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生长状态好,获得的成纤维细胞数量多,增殖活跃。在细胞冻存后1,2周、1,3,6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞在第2-5代增殖旺盛,第6代以后细胞增殖出现明显下降。种植到培养皿上的C57BL/6小鼠饲养层细胞在种植后3 d内活力高,种植4 d以后细胞活力急剧下降。所以C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞来源的饲养层的最佳使用时间为灭活后3 d内,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞饲养层和昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层一样,能很好地支持胚胎干细胞及诱导多能干细胞生长。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

C57BL/6小鼠不同组织器官中NKT细胞的比较

目的比较C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞的含量、亚型和功能的特点。方法分离正常C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,利用细胞表面分子染色的方法,观察不同组织器官中CD3+NK1.1+NKT细胞及其亚型的含量;淋巴细胞经过PMA和离子霉素刺激后,应用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞仪观察NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17的产生情况。结果肝脏中NKT细胞的含量为(25.2±12)%,显著高于肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结。肝脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞以CD4+细胞亚群为主,而肺脏中NKT细胞以CD4-CD8-亚群为主,同时肠系膜淋巴结的NKT细胞中存在CD4+CD8+亚群。不同组织器官中NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17产生的能力有差别。结论 C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的NKT细胞在含量、表型和功能方面可能存在明显的差异。     

汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性抗原的检测

目的通过检测汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性病毒抗原,以建立汉坦病毒感染动物的评价体系。方法将汉坦病毒陈株按照原病毒液、10-1、10-2三个滴度经肌肉注射感染C57BL/6小鼠,在感染后的第3、6、9、12、15天,分别取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织研磨后制成病毒悬液,以ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原。结果 C57BL/6小鼠感染汉坦病毒后短期内在其肝脏和脾脏可以检测到特异性抗原,随着时间的延长,这些抗原逐步消失。结论上述结果为建立汉坦病毒感染动物的评价体系提供了一种参考。     

冬凌草甲素增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用

目的：研究具有诱导肿瘤细胞凋亡活性的冬凌草甲素，促进巨噬细胞对因凋亡的肿瘤细胞的吞噬作用。 方法： DNA凝胶电泳检测UV照射（2.4 J/cm2, 4 min）的人组织淋巴瘤U937细胞凋亡；Giemsa染色，Hoechst 33258染色，镜下检测计数吞噬作用。 结果： UV照射（2.4 J/cm2, 4 min）诱导U937细胞发生凋亡，琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带。2.7 μmol·L^-1的冬凌草甲素具有增强U937分化的巨噬细胞对UV照射诱导凋亡的U937细胞的吞噬作用，并呈时间剂量依赖性，但对非特异性荧光颗粒的吞噬效果较弱。加入抗TNFα和抗IL-1β的抗体，培养12 h, 吞噬增强作用明显受抑制。冬凌草甲素在人外周血来源的巨噬细胞吞噬凋亡的U937细胞过程中同样发挥增强吞噬的效果。 结论： 冬凌草甲素可特异地增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用，其吞噬机制是通过诱导巨噬细胞TNFα和IL-1β的释放。     

Delayed toxicity of cyclophosphamide on the bladder of DBA/2 and C57BL/6 female mouse

The present study describes the delayed development of a severe bladder pathology in a susceptible strain of mice (DBA/2) but not in a resistant strain (C57BL/6) when both were treated with a single 300 mg/kg dose of cyclophosphamide (CY). Inbred DBA/2 and C57BL/6 female mice were injected with CY, and the effect of the drug on the bladder was assessed during 100 days by light microscopy using different staining procedures, and after 30 days by conventional electron microscopy. Early CY toxicity caused a typical haemorrhagic cystitis in both strains that was completely repaired in about 7-10 days. After 30 days of CY injection ulcerous and non-ulcerous forms of chronic cystitis appeared in 86% of DBA/2 mice but only in 4% of C57BL/6 mice. Delayed cystitis was characterized by infiltration and transepithelial passage into the lumen of inflammatory cells and by frequent exfoliation of the urothelium. Mast cells appeared in the connective and muscular layers of the bladder at a much higher number in DBA/2 mice than in C57BL/6 mice or untreated controls. Electron microscopy disclosed the absence of the typical discoidal vesicles normally present in the cytoplasm of surface cells. Instead, numerous abnormal vesicles containing one or several dark granules were observed in the cytoplasm of cells from all the epithelial layers. Delayed cystitis still persisted in DBA/2 mice 100 days after treatment. These results indicate that delayed toxicity of CY in female DBA/2 mice causes a bladder pathology that is not observed in C57BL/6 mice. This pathology resembles interstitial cystitis in humans and could perhaps be used as an animal model for studies on the disease.     

Quantitation of the cancer process in C57BL/6J, B6C3F1 and C3H/HeJ mice

This study examines growth alterations in liver foci and tumor development as a basis for the different susceptibility in hepatocarcinogenesis found among different strains of mice. Male C57, B6C3F1, and C3H mice treated with a single dose (1 mg/kg) of N,N-diethylnitrosamine (DEN) at 15 days of age and followed up to 12 months displayed a strain-dependent (C3H > B6C3F1 > C57) increase in incidence, number, volume fraction, and size of foci and macroscopic lesions (masses). DEN-treated mice exhibited a time-dependent increase in foci size but not in foci number. Phenobarbital (PB) treatment (500 ppm) in the drinking water starting 2 weeks after DEN-initiation did not affect the incidence or number of masses and foci. In all 3 strains, the bromodeoxyuridine labeling index in foci correlated with foci growth, supporting the major role of cell proliferation in foci growth. Measurements of apoptosis by morphological criteria with H&E staining suggest that intrafocal apoptosis may be a late event preventing foci growth and possibly also promoting focal cell selection, whereas extrafocal apoptosis may facilitate clonal growth by removing adjacent normal cells. The onset of conversion of foci to masses also correlated with strain susceptibility to hepatocarcinogenesis.     

免疫重建小鼠抗红白血病的作用研究

目的:观察在免疫重建过程中应用白血病瘤苗对C57BL/6小鼠一般状况、抵御FBL-3细胞攻击及小鼠保护性免疫功能的作用.方法:用同系小鼠脾脏淋巴细胞对照射后的免疫缺陷鼠进行免疫重建,同时用灭活FBL-3细胞皮下注射免疫C57BL/6小鼠,7天后用FBL-3细胞皮下攻击小鼠,观察小鼠的一般状况、成瘤率、瘤块生长情况;通过ELISA法测定外周血IFN-γ含量,以评估细胞免疫作用的强弱;通过病理切片了解瘤块中心及周围细胞浸润情况.结果:免疫重建 瘤苗可以有效提高单纯应用瘤苗所产生的保护性免疫功能,IFN-γ含量明显升高;用FBL-3细胞攻击,成瘤小鼠瘤块生长缓慢,瘤周单个核细胞浸润明显,瘤块内肿瘤细胞坏死明显,生存期明显延长.结论:在免疫重建的同时应用瘤苗,可以加强瘤苗的保护性免疫作用,为临床应用瘤苗治疗时机提供实验依据.     

A multimodal, multidimensional atlas of the C57BL/6J mouse brain

Strains of mice, through breeding or the disruption of normal genetic pathways, are widely used to model human diseases. Atlases are an invaluable aid in understanding the impact of such manipulations by providing a standard for comparison. We have developed a digital atlas of the adult C57BL/6J mouse brain as a comprehensive framework for storing and accessing the myriad types of information about the mouse brain. Our implementation was constructed using several different imaging techniques: magnetic resonance microscopy, blockface imaging, classical histology and immunohistochemistry. Along with raw and annotated images, it contains database management systems and a set of tools for comparing information from different techniques. The framework allows facile correlation of results from different animals, investigators or laboratories by establishing a canonical representation of the mouse brain and providing the tools for the insertion of independent data into the same space as the atlas. This tool will aid in managing the increasingly complex and voluminous amounts of information about the mammalian brain. It provides a framework that encompasses genetic information in the context of anatomical imaging and holds tremendous promise for producing new insights into the relationship between genotype and phenotype. We describe a suite of tools that enables the independent entry of other types of data, facile retrieval of information and straightforward display of images. Thus, the atlas becomes a framework for managing complex genetic and epigenetic information about the mouse brain. The atlas and associated tools may be accessed at http://www.loni.ucla.edu/MAP.     

复方紫杉醇注射液对 C57BL/6小鼠Lewis肺癌的作用研究

目的:研究复方紫杉醇注射液对C57BL/6小鼠Lewis肺癌的作用及其机制。方法:60只C57BL/6小鼠按体重随机分为5组,每组12只,移植皮下接种Lewis细胞。在接种后24小时,对照组给予生理盐水;实验组分别给予紫杉醇注射液大、小两种剂量,复方紫杉醇注射液大、小两种剂量,各组均腹腔注射,连续5天。停药后第6天脱颈处死动物,计算抑瘤率;用HE染色光镜观察细胞形态学的变化;用流式细胞仪(FCM)检测研究复方紫杉醇注射液诱导肿瘤细胞凋亡以及对肿瘤细胞周期的影响。结果:复方紫杉醇注射液大、小剂量组对荷瘤鼠Lewis肺癌有明显的抑制作用,且各剂量组均可诱导Lewis细胞凋亡,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);而对细胞周期的影响不太明显。结论:复方紫杉醇注射液对移植于C57BL/6小鼠的Lewis肺癌具有明显的抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

吡柔比星与羟基喜树碱膀胱灌注预防表浅性膀胱癌术后复发的疗效对比

目的：对比分析吡柔比星（ THP)与羟基喜树碱（ HCPT)膀胱灌注预防表浅性膀胱癌术后复发的效果。方法选择2010年12月—2011年12月蚌埠医学院第一附属医院收治的80例表浅性膀胱癌术后患者,按数字表法随机分为两组,各40例,分别采用THP （ THP组)和HCPT（ HCPT组)予以膀胱灌注治疗。观察并比较两组治疗后3、6、12、24个月膀胱癌的复发情况以及不良反应发生情况。结果所有患者均随访24个月。 THP组复发率15．0%（6/40),HCPT组复发率17．5%（7/40),差异无统计学意义（χ2=0．092, P>0．05)。 THP组不良反应发生率27．5%（11/40),HCPT组不良反应发生率17．5%（7/40),两组差异无统计学意义（χ2=1．147, P>0．05)。结论 THP与HCPT膀胱灌注用于预防表浅性膀胱癌术后复发的疗效相似且不良反应较轻,耐受性好,均可作为一线药物用于临床膀胱灌注治疗。     

牛MBP诱导BALB/c和C57BL/6小鼠实验性变态性脑脊髓炎样反应的研究

为了进一步研究实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型,采用从新鲜牛脊髓中提取的MBP免疫诱导非敏感品系BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠,通过对实验动物的症状、中枢神经系统的病理改变及细胞因子水平变化的检测,较成功地建立了C57BL/6、BALB/c小鼠的EAE模型,实验方法稳定可靠。     

白细胞介素10信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr~-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性影响的比较

目的：体外比较白细胞介素10（IL-10）信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性的影响。方法：分别分离C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞进行培养；用不同浓度IL-10（0.01、0.1、1和10ng/ml）进行刺激,用MTT法测定比较两种品系小鼠腹腔巨噬细胞的增殖反应能力；Real time PCR分别测定其产生前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF、TNF-α的量；用100ng/mlIL-10分别刺激两种品系小鼠腹腔巨噬细胞10分钟,免疫印迹法比较两种细胞中JAK1、TYK2、STAT3及磷酸化水平。结果：C57BL/6小鼠巨噬细胞数及其产生的前炎性细胞因子量随IL-10刺激浓度的增加而递减；MRL/lpr-小鼠巨噬细胞数及其前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF的量随IL-10刺激浓度的增加而递增,但巨噬细胞产生TNF-α的量随IL-10刺激浓度的增加而递减；MRL/lpr-小鼠细胞内信号转导分子的磷酸化水平低于C57BL/6。结论：MRL/lpr-小鼠的细胞免疫和炎症反应不能被IL-10抑制,可能是由于其信号转导过程中的缺陷所致。     

Genetic analysis of the endogenous C3H murine leukemia virus genome: evidence for one locus unlinked to the endogenous murine leukemia virus genome of C57BL/6 mice.

The genetics of expression of the endogenous C3H AKR-type murine leukemia virus (MuLV) was followed serologically in crosses with C57BL/6 and NIH Swiss mice. The serologically defined phenotypes in backcrosses with NIH Swiss mice were shown to correlate with the segregation of proviral DNA. The segregation patterns in backcrosses of NIH Swiss and C57BL/6 mice are most consistent with a single AKR-type MuLV genome in C3H mice. Linkage analysis of this locus shows no linkage with the genes for esterases 1 or 3, glucose-6-phosphate dehydrogenase, the β-hemoglobin chain, H-2, or the agouti color locus. In NIH × (C57BL/6 × C3H) mice the linkage of the C3H-MuLV locus with the single C57BL/6-MuLV locus was evaluated. The results demonstrate that the MuLV gene of C3H is not linked to the C57BL/6-MuLV gene.