生长因子在慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑中的作用

目的　观察转化生长因子 (TGF) β1、表皮生长因子 (EGF)及碱性成纤维生长因子(bFGF)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)大鼠模型肺内表达与分布的变化 ,探讨其与气道重塑的关系及药物干预的影响。方法　两次气管内注入脂多糖及熏香烟法建立大鼠COPD模型 (B组 )。C组于制作模型后雾化吸入肝素溶液。D组于制作模型后静脉注射 2次TGF β1单抗。用图像分析系统检测支气管平滑肌及胶原厚度 ,用免疫组化及原位杂交法检测各生长因子蛋白和基因表达的相对含量。结果　与A组 (对照组 )相比 ,B组大鼠支气管平滑肌及胶原纤维显著增厚 (P <0 0 1) ,三种生长因子在支气管黏膜上皮、肺小动脉内皮和肺泡巨噬细胞的表达显著增强 (P <0 0 0 1～ 0 0 5 )。D组TGF β1较B组显著减少 (P <0 0 1) ,C组各生长因子有减少趋势。支气管上皮细胞三种生长因子与平滑肌厚度、TGF β1与胶原厚度、肺小动脉内皮细胞TGF β1及bFGF与平滑肌厚度之间均呈正相关 (P <0 0 5～0 0 1)。结论　TGF β1、EGF及bFGF在气道重塑和肺小动脉重建中可能起重要作用。     

氨茶碱对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型转化生长因子β1和胶原的干预作用

目的 观察慢性阻塞性肺疾病( COPD)大鼠模型支气管肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的变化以及氨茶碱药物干预的影响。方法 将35只雄性Wistar大鼠分3组;正常对照组（A组,10只）、COPD模型组（B组,15只）、氨茶碱治疗组（C组,10只）。气管内注入脂多糖(LPS)及每天烟熏法制作...     

碱性成纤维细胞生长因子在COPD大鼠模型气道重塑中的作用

目的通过构建慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在COPD气道重塑的作用和可能机制。方法2005年7月至8月,于广西医科大学动物实验中心,将40只8周龄、雄性、平均体重为(220±15)g的Wistar大鼠随机分为COPD组(A组)、COPD bFGF组(B组)、COPD anti-bF-GF组(C组)和对照组(D组),每组10只。A、B、C3组COPD模型制备:经气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟,复制成。A组为COPD对照组;B组:每周1次经尾静脉内注入0·1μgbFGF;C组:每周1次经尾静脉内注入0·1μganti-bFGF;D组:舱外饲养4周。4周后对各组大鼠气道进行病理学评分;检测并比较各组支气管平滑肌指数(平滑肌厚度/气道内径)及胶原指数(胶原厚度/气道内径);用免疫组化法观察bFGF在支气管肺内表达。结果与D组相比,A组、B组、C组大鼠的小气道都存在不同程度病理改变,差异均有显著性意义。与A组比较,B组肺组织病理评分显著增高、平均肺泡面积显著扩大、支气管平滑肌指数和胶原指数显著增高、bFGF吸光值均显著增高,而C组肺组织病理评分显著降低、平均肺泡面积显著缩小、支气管平滑肌指数和胶原指数显著降低、bF-GF吸光值均显著减少。结论bFGF参与了大鼠COPD模型气道炎症和气道重塑过程,而anti-bFGF可以抑制这一过程。     

细胞外基质重塑在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型气流阻塞中的作用

目的　制备大鼠慢性阻塞性肺疾病 (COPD)模型 ,探讨气道细胞外基质 (ECM)重塑的病理特点及其在气流阻塞中的作用 ,以及不同干预因素的影响。方法　熏香烟加气管注入小量内毒素法建立大鼠COPD模型 ,观察气道重塑的病理特点 ,测定肺功能及血气、气道各层横截面积 ,支气管肺组织匀浆羟脯氨酸 (Hy)含量 ;粘膜下成纤维细胞 (Fb)、淋巴细胞及肺泡巨噬细胞计数 ;放射免疫法测定血清中透明质酸、层粘连素含量。观察蛋白激酶C抑制剂H7、氧自由基清除剂N 乙酰半胱氨酸(NAC)和转化生长因子 (TGF) β单抗干预对大鼠模型气道重塑的影响。 结果　所建模型的病理及病理生理学改变基本符合人类COPD特点 ,I型胶原为主的ECM气道壁过度沉积 ;小支气管上皮层、平滑肌层截面积 (各为 2 1114 μm2 、16 0 6 1μm2 )与对照组 (各为 130 5 6 μm2 及 6 6 92 μm2 )比较 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 0 1)。NAC组、H7组及TCF β单抗组上皮层截面积分别为 12 70 1μm2 、11836 μm2 及112 4 4 μm2 ;平滑肌层截面积分别为 70 5 1μm2 、6 4 2 6 μm2 及 6 4 2 0 μm2 ,与模型组比较差异有显著性(P均 <0 0 0 1)。模型组粘膜下Fb数为 13.6± 4 .2 ,对照组为 6 .8± 1.4 ,且功能活跃 ,淋巴细胞及肺泡巨噬细胞数亦显著增高。NAC组及TGF      

基质金属蛋白酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病模型气道细胞外基质重塑中的作用

目的 研究基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制剂（TIMP－1）在大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型气道和肺组织中的表达及其在细胞外基质重塑中的作用。方法 采用熏香烟加气管注内毒素法,建立大鼠COPD模型,观察其气道重塑的病理改变、肺功能及血气变化;用生化法测定支气管肺组织羟脯氨酸含量;用免疫组化法观察MMP－9、MMP－2及TIMP－1的蛋白定位及表达;用逆转录－聚合酶链反应法测定MMP－9、MMP－2及TIMP－1mRNA表达;用SDS－PAGE明胶酶谱学测定支气管肺组织MMPs酶活性。结果 用熏香烟加气管注内毒素法建立的大鼠COPD模型,其病理形态学改变、肺功能及血气变化均与人类COPD的改变相似。COPD模型组支气管肺组织羟脯胺酸含理、支气管黏膜下成纤维细胞、淋巴细胞数和肺泡巨噬细胞数及以I型胶原为主的细胞外基质含量显著高于健康对照组（P值均＜0.001)。COPD模型组MMP－9、MMP－2及TIMP－1在气道上皮、成纤维细胞、肺泡巨噬细胞、血管内皮细胞及部分肺泡壁细胞表达均明显增强,支气管肺组织MMP－9、MMP－2及TIMP－1 mRNA表达亦显著增强,72000MMP－2及92000 MMP-9酶活性亦显著增高。结论 MMPs表达增强提示细胞外基质降解增加,支气管肺结构破坏增加。TIMP－1在抑制MMPs活性的同时,促进成纤维细胞增生及胶原等合成增多,是导致细胞外基质修复和重塑的重要机制之一。     

不同药物对慢性阻塞性肺疾病气道重塑患者血清VEGF、NGF、b—FGF的影响

目的探讨不同药物对慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道重塑患者血清血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）、碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF）的影响。方法将120例COPD气道重塑患者随机均分为4组,对照组采用常规综合治疗,A组加用万托林吸人治疗,B组加用普米克都保吸入治疗,C组加用沙美特罗／丙酸氟替卡松（舒利迭）吸入治疗,均连续治疗3个月。检测各组治疗前后血清VEGF、NGF及b-FGF变化。结果疗程结束后,与对照组比较,A、B、C组VEGF、NGF、b—FGF均明显下降（P〈0．05）;与A、B组比较,c组下降显著（P〈0．05）。结论万托林、普米克都保、舒利迭均可改善COPD患者的气道重塑作用,调节其VEGF、NGF及b-FGF;以舒利迭的效果较好。     

氨茶碱对支气管哮喘气道重塑大鼠肺组织MMP-9及其基因表达的调节

目的 观察氨茶碱对支气管哮喘气道重塑大鼠气道形态学和转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其基因表达的调节作用.方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组(35 mg/kg),每组8只,除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠哮喘模型,治疗组、模型组从第1次哮喘激发开始(第15天)分别给予氨茶碱、生理盐水1次/d灌胃给药,用药4 w后处死大鼠,取肺组织HE染色,彩色图像分析仪测量支气管壁面积、支气管平滑肌面积,采用免疫组化法测定TGF-β1含量,ELISA法测定肺组织MMP-9含量,RT-PCR法测定MMP-9 mRNA含量.结果 与正常组比较,模型组大鼠支气管壁面积、平滑肌面积、肺组织MMP-9含量及MMP-9 mRNA含量明显增加(P＜0.01);与模型组相比,治疗组大鼠支气管壁面积、平滑肌面积、肺组织TGF-β1、MMP-9、MMP-9 mRNA含量均显著降低(P＜0.01).结论 氨茶碱可通过下调哮喘气道重塑大鼠肺组织MMP-9 mRNA表达、抑制MMP-9合成、抑制TGF-β1产生从而抑制支气管哮喘大鼠气道重塑.     

四种多肽生长因子对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3M生长的影响

目的 观察多肽生长因子中的转化生长因子β1（TGF－β1）、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维生长因子（bFGF）、角化生长因子（KGF）对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC－3M生长的影响。方法 体外培养前列腺癌细胞系PC－3M,分别加入TGF－β1、EGF、bFGF、KGF,每种生长因子采用1、5、10、50ng/ml4种浓度,采用Brdu掺入法测定细胞生长水平。结果 培养72h后,对照组PC－3M细胞的吸光度[A,旧称光密度（OD）]值为0．759,4种生长因子在不同浓度时对PC－3M细胞的生长皆有抑制作用,而且随浓度的增加抑制作用逐渐增强。4种因子在50ng/ml时,A值分别为0．400（TGF－β1）、0455（EGF）、0．532（bFGF)、0．491（KGF）,与对照组比较,差异均具有显著性。另外,当1ng/ml EGF分别与0．5ng/ml或5ng/ml TGF-β1同时加入培养基时,A值分别为0．522和0．299。结论 在体外培养条件下,TGF－β1、EGF、bFGF及KGF均依浓度效应关系抑制PC－3M细胞的生长,TGF－β1与EGF对PC－3M细胞生长的抑制作用不存在交互作用。     

Smad3和TGFβ1在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织的表达

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以不完全可逆气流受限为特征的疾病,慢性炎症导致气道重塑是气流受限的病理基础.Smads蛋白属于细胞内核信号转导子,可转导转化生长因子（TGFβ1）家族成员信号,而TGFβ1是COPD发病中的关键性前炎因子,其多种功能的发挥均依赖Smads蛋白的信号转导及调控.本研究旨在观察COPD大鼠肺组织Smad3和TGFβ1表达,并探讨其二者间的关系.     

碱性成纤维细胞生长因子与支气管哮喘

碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，b-FGF）是一种肝素黏合多肽，具有促进细胞增殖、分化和黏附作用等多种细胞生物学活性。近年来研究表明b-FGF与支气管哮喘（简称哮喘）气道重塑的关系密切。目前，哮喘的发病机制仍不是很清楚，治疗方法也在探索中，b-FGF的研究有可能为研究哮喘发病机制及治疗提供新的亮点。     

碱性成纤维细胞生长因子在慢性支气管炎、肺气肿大鼠模型血管重塑中的作用

目的 通过构建慢性支气管炎、肺气肿大鼠模型,探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)在慢性支气管炎、肺气肿血管重塑中的可能作用.方法 将8周龄、雄性、体质量(220±15)g Wistar大鼠40只随机分为慢性支气管炎、肺气肿组(A组)、bFGF干预组(B组)、anti-bFGF干预组(C组)和对照组(D组),每组10只.A组:经血管内注入脂多糖和反复烟熏复制成慢性支气管炎、肺气肿模型;B组:每周一次经尾静脉内注入0.1 pg bFGF,其他制备方法同慢性支气管炎、肺气肿组;C组;每周一次经尾静脉内注入0.1μg anti-bFGF,其他制备方法同慢性支气管炎、肺气肿组;D组:舱外饲养4周.4周后处死动物,取肺组织切片后苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色,在光学显微镜下对各组小血管及肺泡组织进行病理学评分和比较;检测并比较各组肺小动脉平滑肌指数及胶原指数;测定并比较各组支气管平滑肌bFGF的相对含量.结果 A组肺组织病理评分、肺小动脉平滑肌指数、胶原指数和bFGF吸光值分别为362±31、0.5125±0.0256、25.79±0.8854和38.14±1.012.B组分别为453±24、0.6536±0.0356、35.13±0.7687和63.33±2.048,与A组比较均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05).C组分别为306±28、0.4171±0.0133、18.53±0.6321和26.38±1.102,与A组比较均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 bFGF参与了大鼠慢性支气管炎、肺气肿模型血管重塑过程,而anti-bFGF可以抑制这一过程.     

慢性气道炎症大鼠肺血管结构和生长因子变化的实验研究

目的探讨慢性气道炎症与肺血管重建的相关关系以及慢性气道炎症对斑管内皮生长因子（VEGF）及内皮素-1（ET-1）的影响。方法复制慢性支气管炎和肺气肿动物模型。用图像分析仪观察支气管肺组织和肺血管结构病理变化情况。酶联免疫法检测血清VEGF。放射免疫法测定血浆ET-1水平。结果模型组大鼠发生明显的慢性气道炎症和肺气肿改变。细小支气管中膜肌层增厚，但肺血管结构与对照组比较无明显改变．血清VEGF和血浆ET-书平与对照组比较亦无显著性差异（P〉0．05）。结论 慢性气道炎症对大鼠肺血管重建和、VEGF和ET-1无明显直接影响。但慢性气道炎症的持续发展是慢性阻塞性肺疾病（COPD）产生低氧的主要病理基础，因此对COPD的防治重点之一应放在气道炎症的防治。     

氨溴索对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑的干预研究

目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型肺内表达与气道重塑的关系以及氨溴索的干预作用.方法 气管内注入脂多糖以及熏香烟法建立大鼠COPD模型,干预组于模型建立后腹腔注射氨溴索溶液.观察病理特点,测定血气以及支气管肺组织匀浆羟脯氨酸含量,检测支气管管壁厚度和内周长,用原位杂交法检测TGF-β1基因表达的相对含量.结果 与对照组比较,模型组支气管肺组织羟脯氨酸含量显著增高(P<0.01).支气管管壁厚度显著增加(P<0.01),TGF-β1在支气管肺组织的表达增强(P<0.01),且TGF-β1基因表达的相对含量与支气管管壁厚度以及肺组织羟脯氨酸含量呈显著正相关(r=0.949,P<0.01;r=0.932,P<0.01).与模型组比较,氨溴索干预组支气管肺组织羟脯氨酸含量、支气管管壁厚度、TGF-β1在支气管肺组织的表达强度有减少趋势.结论 TGF-β1在气道重塑中起重要作用.应用氨溴索可以明显抑制COPD气道炎症及其气道重塑.     

慢性支气管炎与肺气肿大鼠气道炎症与重塑的实验研究

目的　观察慢性支气管炎 (简称慢支 )和肺气肿大鼠模型气道炎症及重塑的发病特点以及红霉素药物干预的影响。方法　将 4 3只雄性Wistar大鼠分 8组 ;正常对照组 (A组 ,5只 )、生理盐水对照组 (P组 ,5只 )、慢支组 (L组 ,6只 )、慢支 +肺气肿组 (S组 ,6只 )、低剂量红霉素治疗组 (E1组 ,5只 )、高剂量红霉素治疗组 (E2 组 ,6只 )、低剂量红霉素预防治疗组 (E10 组 ,5只 )、低剂量红霉素预防治疗组 (E2 0 组 ,5只 )。用气管内注入脂多糖 (LPS)及每天烟熏的混合刺激方法制作慢支与肺气肿动物模型 ,4周后收集支气管肺泡灌洗液 (BALF)进行细胞学计数和分类检查 ,对大鼠肺脏进行病理学检查 ,检测各组细小支气管平滑肌和胶原层厚度 ,并用免疫组化法观察转化生长因子 β1(TGF β1)在支气管肺内的表达 ,用放射免疫法检测血清和BALF中Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、透明质酸 (HA)的变化。结果　 (1)S组BALF中中性粒细胞分类计数为 [(17 1± 10 8)× 10 5/ml],A组为 [(0 9± 0 7)×10 5/ml],两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;(2 )病理积分 :S组为 (32 9± 114 )分 ,A组为 (6 7± 2 5 )分 ;S组细小支气管平滑肌及胶原层厚度为 (9 6± 2 6 ) % ,A组为 (6 1± 1 8) % ,两组比较差异有显著性(P分别为 <0 0 1、<0 0 5 ) ;     

白介素17在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达及与气道炎症及重塑的关系

目的 探讨白介素17(IL-17)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症及重塑中的作用.方法 采用被动吸烟80 d来制备大鼠COPD模型.支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数和百分比;采用半定量图像分析法测量小气道管壁和平滑肌层厚度;免疫组织化学法检测肺组织IL-17的表达;酶联免疫吸附试验法检...     

斯钙素-1在慢性阻塞性肺疾病平滑肌增殖中的作用研究

目的探讨斯钙素-1(Stanniocalcin-1, STC1)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)平滑肌增殖的影响及STC1在COPD气道重塑中的作用。 方法采用臭氧暴露法构建COPD小鼠模型,选取BALB/c雌性小鼠24只,将小鼠随机分为4组：1周空气对照组(简称1周空气组)、1周臭氧暴露组(简称1周臭氧组)、3周空气对照组(简称3周空气组)、3周臭氧暴露组(简称3周臭氧组),每组6只。HE染色观察肺部炎症、肺泡间距及基底膜厚度。采用免疫组织化学法(简称免疫组化)检测小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)及STC1表达。采用2%及10%胎牛血清刺激人原代平滑肌细胞增殖,外源加入重组STC1(rhSTC1)处理平滑肌细胞,EdU染色检测平滑肌细胞增殖。 结果臭氧暴露诱导小鼠肺部炎症、肺气肿及气道重塑发生(肺组织基底膜增厚及平滑肌细胞标志物α-SMA表达增加)。STC1主要表达在支气管上皮顶端膜,且在COPD小鼠中表达升高(P<0.05),但随着臭氧暴露3周,肺组织STC1较α-SMA表达下降(P<0.05)。外源加入rhSTC1抑制了平滑肌细胞增殖(P<0.01)。 结论支气管上皮表达的STC1能够抑制平滑肌细胞增殖,外源给予足量的STC1可能延缓COPD气道重塑的发生。