miR-182-5p和Bcl-2在复发性流产患者胎盘绒毛组织中的表达水平及临床意义

目的 检测微小RNA-182-5p(miR-182-5p)和Bcl-2在复发性流产(RSA)患者胎盘绒毛组织中的表达水平及临床意义。方法 选择2017年6月—2018年12月天津医科大学中新生态城医院收治的55例RSA患者为研究组,自愿要求终止妊娠的50例正常早孕流产者为对照组。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察胎盘绒毛组织的结构和形态,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-182-5p水平,采用免疫组化法检测Bax和Bcl-2水平,分析miR-182-5p、Bax及Bcl-2表达的相关性。结果 研究组孕妇胎盘绒毛形态不一,排列不规则,易见局部脱落,外层合体滋养层细胞数量明显减少,滋养层基底膜厚薄不均,萎缩融合,内层滋养层细胞数量增多,发生异常增生,排列紊乱,可见明显的绒毛间质水肿,绒毛内血管未发育完全,血细胞数量少,可见少量炎症细胞。对照组miR-182-5p、Bax及Bcl-2表达水平分别为(12.26±3.07)、(16.47±5.37)及(57.36±16.27),研究组miR-182-5p、Bax及Bcl-2表达水平分别为(14.38±4.41)、(52.16±...     

早期自然流产妇女肿瘤坏死因子受体1的表达

目的 探讨自然流产妇女蜕膜组织肿瘤坏死因子受体1和血清中可溶性受体表达情况及其意义.方法 采用激光共聚焦显微镜检测技术,检测30例早期自然流产患者和30例同期正常妊娠要求人工流产者蜕膜组织肿瘤坏死因子受体1的表达含量;采用酶联免疫吸附试验测定两组血清可溶性受体的表达水平.结果 早期自然流产患者蜕膜间质细胞肿瘤坏死因子受体1表达高于正常妊娠人工流产者,腺体上皮细胞肿瘤坏死因子受体1表达低于正常妊娠人工流产者(t值分别为2.442和-2.130,均P＜0.05).早期自然流产患者血清可溶性受体的表达水平显著高于正常妊娠人工流产者(t=-2.033,P＜0.05).结论 早期自然流产妇女蜕膜基质细胞肿瘤坏死因子受体1的表达明显增高,腺体上皮细胞的表达明显降低.这种改变可能与不明原因早期自然流产有关.血清可溶性受体水平的升高可能对自然流产的发生起重要作用.     

滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系

目的:探讨滋养层细胞凋亡与稽留流产的关系。方法:对30例正常早孕吸宫流产病例和35例稽留流产病例的绒毛滋养层细胞进行凋亡研究。常规光镜观察细胞形态学变化;免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原PCNA、抑凋亡基因Survivin和促凋亡基因P53在细胞中的表达。结果:稽留流产组绒毛形态学结构均出现不同程度的退行性改变,绒毛细胞滋养层细胞中PCNA表达较正常早孕组明显减少,差异具有非常显著性意义(P<0.01),合体滋养层细胞PCNA少量表达;稽留流产组绒毛滋养层细胞Survivin低于正常早孕组,而P53则高于正常早孕组,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:滋养层细胞凋亡的增加可能是稽留流产发生的一个重要病理过程,其机制可能与PCNA、Survivin和P53基因的表达异常有关。     

早期自然流产绒毛糖原表达的研究

目的探讨早期自然流产绒毛糖原的表达。方法以孕39~50 d早期人工流产绒毛10例作为对照组,孕40~77 d早期自然流产绒毛30例作为研究组,采用过碘酸Shiff反应(PAS)法和阿利坚蓝染色检测中性糖原和酸性多糖的表达,进行图像分析,并做统计学处理,同时观察绒毛的形态学变化。结果研究组绒毛合体滋养层和细胞滋养层细胞内中性糖原减少(P<0. 05),酸性多糖增加(P<0. 05),酸性多糖分为高、中、低表达组,高表达组早期自然流产绒毛糖原表达高于对照组(P <0. 05),且伴有滋养层细胞形态异常,其余两组比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论早期自然流产绒毛细胞中中性糖原降低,说明胎盘糖原储存异常,胚胎发育过程中所必需的能量供应不足;酸性多糖的增高说明存在在糖原代谢异常伴有糖原的累积,酸性多糖高表达组伴有滋养层细胞形态学改变也佐证了这一点。     

TNFR1基因多态性与早期自然流产的相关性

目的探讨肿瘤坏死因子受体1基因启动子区-383A/C和第1外显子 36A/G的多态性与不明原因早期自然流产的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测256例不明原因早期自然流产患者和138例对照组肿瘤坏死因子受体1基因-383和 36位点多态性,比较两组基因型和等位基因的分布频率。结果肿瘤坏死因子受体1基因启动子区-383位点的CC、AC和AA基因型在不明原因早期自然流产组中分别为4.69%、13.28%、82.03%,在对照组中分别为2.90%、8.70%、88.41%,两组基因型分布的频率无显著性差异(χ2=2.75,P>0.05);肿瘤坏死因子受体1基因第1外显子 36位点的GG、AG和AA基因型在不明原因早期自然流产组中分别为2.75%、12.84%、84.41%,在对照组中分别为1.56%、20.13%、78.13%,两组基因型分布频率比较亦无明显差异(χ2=2.63,P>0.05)。结论肿瘤坏死因子受体1基因-383和 36位点多态性分布与不明原因早期自然流产的发病无明显相关性。     

血清甲胎蛋白、人绒毛膜促性腺激素及组织中血管生成素水平与孕早期复发流产关系

目的：探讨血清甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)及血管生成素(Ang)水平与孕早期复发流产的关系。方法：选取2019年5月-2020年5月于本院行流产清宫术女性112例临床资料,将正常妊娠行人工流产60例为对照组,自然流产≥2次52例为流产组,采用全自动电化学发光分析仪检测两组血清AFP、HCG水平,免疫组化SP法检测绒毛及蜕膜组织中Ang-1和Ang-2表达水平。结果：流产组血清AFP(3.15±0.24 ng/ml)和HCG(78.16±3.67 IU/L)水平均低于对照组(8.35±1.62 ng/ml、89.74±4.58 IU/L),利用Pearson相关性分析发现,两组血清AFP与HCG均呈正相关(均P<0.05);通过病理学切片分析,Ang-1和Ang-2在两组绒毛组织的滋养层细胞、间质细胞的胞浆内以及蜕膜组织腺上皮细胞及基质胞胞浆内均有表达,但在绒毛组织中流产组高于对照组、蜕膜组织中流产组低于对照组(均P<0.05)。结论：在复发性流产女性孕早期血清AFP和HCG水平均发生异常降低且二者呈正相关,绒毛蜕膜组织中Ang-1和Ang-2过度表达。提...     

凋亡抑制基因Twist、Livin与稽留流产的关系探讨

目的:探讨凋亡抑制基因Twist及Livin在稽留流产绒毛滋养细胞中的表达及其关系.方法:采用免疫组织化学SP法分别检测40例稽留流产患者(实验组)和30例正常早孕女性(对照组)绒毛滋养细胞中Twist、Livin表达.结果:Twist和Livin在两组滋养层细胞中均有表达,其中Twist表达部位以合体滋养层细胞为主,Livin表达部位以细胞滋养层细胞为主;Twist和Livin在实验组阳性表达率明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:Twist、Livin的低表达诱导的滋养层细胞凋亡的增加可能参与了稽留流产的发生.     

p-ERK在早孕绒毛组织中的表达及意义

目的:研究人早孕绒毛组织中磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)的表达水平,探讨流产及其有关生殖过程发生的分子机制。方法:采用免疫组织化学、图像分析方法检测30例正常早孕绒毛组织(正常早孕组)和30例自然流产的早孕绒毛组织(自然流产组)中p-ERK的表达水平。结果:人早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞均有p-ERK的表达,自然流产组中p-ERK蛋白表达面积及强度均明显低于正常早孕组,两者差异有显著性意义(P<0.05)。结论:ERK/MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)通路可能是人早孕绒毛滋养细胞增殖、分化及侵入过程中的主要信号转导途径之一。     

米非司酮配伍米索前列醇对母胎界面孕酮诱导阻断因子及孕酮受体表达的影响

目的 研究米非司酮配伍米索前列醇对母胎界面孕酮诱导阻断因子（PIBF）及孕酮受体（PR）表达的影响. 方法 应用免疫组织化学染色法检测米非司酮药物流产成功（药流成功组,n =30）、失败（药流失败组,n=30）及正常早孕负压吸宫流产（手术组,n=30）绒毛及蜕膜组织中PIBF及PR的表达情况. 结果 PIBF表达于绒毛合体滋养层细胞、细胞滋养层细胞和蜕膜细胞胞质,PR表达于蜕膜组织细胞核.与手术组相比,药物流产的两组绒毛滋养层细胞中PIBF的表达差异无统计学意义,而在蜕膜细胞中,药物流产的两组PIBF、PR的表达明显下降,差异有统计学意义,且药流成功组PIBF及PR的表达低于药流失败组,差异有统计学意义. 结论 米非司酮配伍米索前列醇终止早期妊娠可能与PIBF及PR的表达降低有关,其成功率与PIBF、PR表达降低程度相关.     

HIF-1α和VEGF在稽留流产患者血清和绒毛中的表达研究

目的:探讨稽留流产患者缺氧诱导因子(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在其血清和绒毛中的表达情况并进行二者相关性研究。方法:采用ELISA试验和SP法分别测定66例稽留流产患者(流产组)与54例正常早孕孕妇(对照组)血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达水平,并将稽留流产组按有无明确原因分为有因组和无因组;同时根据胚胎死亡后稽留宫内时间分为>4周组、2~4周组和<2周组分析相关性。结果:流产组血清HIF-1α和VEGF的水平分别为(317.3±116.8)ng/L和(34.2±4.9)ng/L,对照组分别为(416.8±121.1)ng/L和(51.4±55.2)ng/L,两组差异有统计学意义(P<0.05);流产组患者绒毛中HIF-1α和VEGF的表达量分别为(3.1±2.2)ng/L和(3.7±2.1)ng/L,对照组分别为6.1±4.2和6.9±3.4,两组差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清VEGF和HIF-1α的表达成呈正相关(P<0.05),两组绒毛中VEGF与HIF-1α表达呈正相关(P<0.05);但稽留宫内时间<2周组、2~4周组和>4周组血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HIF-1α和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是导致稽留流产的重要原因之一。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘黏附分子的表达与意义

目的 观察妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)的表达,探讨它们与妊娠期高血压疾病的关系及意义.方法 收集妊娠期高血压疾病患者52例(疾病组),其中妊娠期高血压11例、轻度子痫前期18例和重度子痫前期23例;正常孕妇26例作为对照组.采用HE染色和免疫组化SP法对胎盘组织进行检测并用图像分析测量软件观察、分析ICAM-1、VCAM-1阳性表达情况.结果 疾病组胎盘绒毛毛细血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1阳性表达率[78.85%(41/52)和75.00%(39/52)]均明显高于对照组[26.92%(7/26)和23.08%(6/26)](P<0.01);重度子痫前期患者[100.00%(23/23)和100.00%(23,23)]明显高于轻度子痫前期患者[77.78%(14/18)和72.22%(13/18)]和妊娠期高血压患者[36.36%(4/11)和27.27%(3/11)](P<0.05或<0.01),轻度子痫前期患者明显高于妊娠期高血压患者(P<0.05).疾病组胎盘绒毛合体滋养细胞ICAM-1和VCAM-1的阳性表达率[38.46%(20/52)和44.23%(23/52)]明显低于对照组[100.00%(26/26)和96.15%(25/26)](P<0.01);重度子痫前期患者[8.70%(2/23)和13.04%(3/23)]明显低于轻度子痫前期患者[44.44%(8/18)和50.00%(9/18)]和妊娠期高血压患者[90.91%(10/11)和100.00%(11/11)](P<0.05或<0.01),轻度子痫前期患者明显低于妊娠期高血压患者(P<0.05).结论 胎盘绒毛毛细血管内皮细胞及绒毛合体滋养细胞ICAM-1、VCAM-1的异常表达参与了妊娠期高血压疾病血管内皮损伤的病理生理过程.     

胎儿生长受限胎盘组织中细胞凋亡与增殖

目的:通过对胎儿生长受限患者的胎盘组织细胞凋亡和增殖指数的测定,从细胞增殖与凋亡的角度阐述导致胎儿生长受限发生、发展的病理机制。方法:研究对象来自于2007年2月~2009年2月在该院分娩的胎儿生长受限患者31例(FGR组)和正常足月分娩30例(对照组)的胎盘组织。应用TUNEL法及SP法定量测定各种细胞的凋亡指数及增殖指数。结果:两组胎盘各细胞成分均有凋亡发生,细胞凋亡在两组中均以蜕膜细胞和合体滋养细胞为主。胎儿生长受限组〔合体滋养细胞凋亡指数(36.4±9.2)%,蜕膜细胞凋亡指数(40.2±7.5)%〕与对照组相比〔合体滋养细胞凋亡指数(23.3±5.0)%,蜕膜细胞凋亡指数(28.4±8.2)%〕凋亡明显增多,差异有统计学意义(P0.01)。在胎儿生长受限组细胞滋养细胞内有一定量的增殖细胞核抗原表达〔细胞滋养细胞增殖指数(25.1±5.9)%〕,和对照组相比〔细胞滋养细胞增殖指数(17.2±5.8)%〕细胞增殖明显,差异有统计学意义(P0.01)。结论:在胎儿生长受限及正常晚孕的胎盘中均存在凋亡现象。胎儿生长受限患者胎盘中合体滋养细胞及蜕膜细胞凋亡较正常晚孕明显增多,且细胞滋养细胞表现为明显增生,这可能是引起FGR发生、发展的重要病理过程。     

血管内皮细胞生长因子及血管生成素Ⅰ和Ⅱ在药物流产宫腔残留蜕膜组织中的表达

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素I（Ang—Ⅰ）和Ang-Ⅱ在药物流产异常子宫出血者子宫内膜组织中的表达,探讨其与异常子宫出血的关系。方法20例药物流产后异常子宫出血者官腔刮出物行病理学检查,另外选取20例药物流产后无异常出血者的宫腔排出物及20例早孕人工流产者的官腔刮出物做对照,应用免疫组织化学方法检测3组子宫内膜组织中VEGF、Ang—Ⅰ、Ang-Ⅱ的阳性表达率和表达强度的差异。结果Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ蛋白在药物流产后的子宫内膜组织的腺上皮及内膜基质细胞和血管壁中均有表达,以在腺体表达为主;异常出血组VEGF、Ang—Ⅰ和Ang-Ⅱ的表达强度较药物流产无异常出血组增高,差异有统计学意义,与早孕手术流产组比较,差异无统计学意义。结论药物流产后绒毛和蜕膜的残留可能是导致患者出血时间延长和出血量多的主要原因;药物流产后异常子宫出血者子宫内膜中Ang的表达增强,可能引起血管生成的异常,从而使绒毛和蜕膜不容易脱落或子宫内膜的修复受影响,导致出血时间延长。     

早期流产者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及其意义

目的:了解MMP-9和TIMP-3在早孕、先兆流产和药物流产绒毛及蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法:选取90例早孕妇女作为研究对象,其中行负压吸宫术者30例为对照组,行药物流产术者30例为药物流产组;自愿行吸宫术的先兆流产妇女30例为先兆流产组,均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测MMP-9和TIMP-3在不同早孕流产绒毛和蜕膜组织中的表达。结果:MMP-9和TIMP-3在3组绒毛的合体滋养细胞、细胞滋养细胞、毛细血管内皮细胞的胞浆,蜕膜的蜕膜细胞、腺上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆呈不同程度的阳性染色。通过定量分析,药物流产组绒毛和蜕膜MMP-9的表达高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05);3组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。绒毛和蜕膜中MMP-9/TIMP-3药物流产组高于先兆流产组,先兆流产组高于对照组(P<0.05)。结论:MMP-9表达水平的升高在流产发生过程中具有重要作用,MMP-9和TIMP-3的平衡对维持正常妊娠起重要作用。     

稽留流产绒毛中线粒体膜电位和活性氧的变化

目的:通过对稽留流产患者绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential MMP)、活性氧物质(reactive oxygen species ROS)的测定,探讨MMP、ROS与稽留流产的关系。方法:稽留流产患者20例作为研究组,正常早孕要求流产妇女20例作为对照组。研究组20例胚胎稽留宫内时间<4周。应用荧光分光光度计和流式细胞仪检测研究组及对照组绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位(MMP)、活性氧物质(ROS)的水平。结果:与正常早孕妇女相比较,稽留流产患者绒毛滋养叶细胞中MMP水平显著降低(P<0.05),ROS水平显著增高(P<0.05)。结论:绒毛滋养叶细胞中线粒体膜电位下降、活性氧物质增多可能是稽留流产发生的信号。     

单核细胞趋化蛋白-1在胎儿生长受限患者胎盘的表达及其意义

目的通过检测胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)患者胎盘、外周血中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达水平,探讨MCP-1在FGR中的作用及可能机制。方法选择50例FGR患者为FGR组,正常晚期妊娠分娩孕妇50例为正常对照组,以酶联免疫吸附法检测两组孕妇胎盘、外周血MCP-1水平,并对胎盘组织切片进行病理形态学分析。结果 FGR组胎盘光镜下见不同程度的绒毛发育不良,合体结节增多,绒毛炎,其发生率高于正常对照组[64.0%(32/50)vs12.0%(6/50),P0.05],其中合并绒毛炎的发生率31%(10/32);FGR组中胎盘病理异常组的胎盘MCP-1浓度高于正常对照组,差异有统计学意义[胎盘MCP-1:(136.97±10.24)vs(129.76±5.67)ng/m L,P0.05],其中合并绒毛炎胎盘中MCP-1浓度高于正常对照组[(149.76±8.67)vs(129.76±5.67)ng/m L,P0.05];而FGR组中胎盘病例异常组与正常对照组外周血MCP-1浓度比较差异无统计学意义[血清MCP-1(137.14±9.73)vs(140.16±10.34)ng/m L,P0.05]。结论 MCP-1参与了FGR的发生,其作用机制可能通过过度炎症反应,导致胎盘灌注不足。     

lncRNA ANRIL和VEGF在原因不明复发性流产绒毛中表达

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)细胞周期激酶抑制因子4基因座中反义非编码RNA(ANRIL)和血管内皮生长因子(VEGF)在原因不明复发性流产(URSA)患者绒毛中的表达。方法:选取2017年8月-2019年6月在本院就诊的URSA患者62例(观察组),同期行人工流产术的正常早孕者62例(对照组)。观察组行清宫手术、对照组行人工流产术时采集新鲜胎盘绒毛组织,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测绒毛组织中lncRNA ANRIL、VEGF mRNA表达水平;Pearson法分析URSA患者绒毛组织中lncRNA ANRIL和VEGF mRNA表达水平的相关性;采用多因素logistic回归分析影响URSA发生的因素。结果:观察组绒毛组织中lncRNA ANRIL(0.74±0.20)、VEGF mRNA(0.30±0.09)表达水平均低于对照组(1.00±0.25、1.00±0.18)(P<0.05),lncRNA ANRIL与VEGF mRNA表达水平呈显著正相关(r=0.484,P<0.05),lncRNA ANRIL、VEGF mRNA表达水平均为影响URSA发生的保护因素(P<0.05)。结论:URSA患者绒毛组织中lncRNA ANRIL和VEGF表达水平均显著下调且密切相关,可能共同影响疾病发生。     

特发性胎儿生长受限患者胎盘组织中XIAP和Bax的意义

目的:探讨特发性胎儿生长受限(IFGR)胎盘组织中XIAP、Bax的表达及意义。方法:选取我院2010年7月～2011年4月剖宫产分娩的IFGR孕妇30例作为实验组,同期因社会因素剖宫产分娩的正常足月孕妇30例作为对照组。用免疫组化法检测胎盘组织XIAP、Bax的表达水平。结果:①XIAP在胎盘合体滋养细胞中的表达,实验组(114.562±5.167)低于对照组(144.430±7.311),差异有统计学意义(P<0.05)。②Bax在胎盘合体滋养细胞中的表达,实验组(146.513±10.611)高于对照组(113.673±9.631),差异有统计学意义(P<0.05);③实验组胎盘组织中XIAP与Bax的表达呈负相关(r=-0.761,P<0.05);对照组胎盘组织中XIAP与Bax的表达无相关性(r=0.034,P>0.05)。结论:胎盘组织中XIAP表达降低、Bax表达增加促使了胎盘滋养细胞的过度凋亡,可能是IFGR发病机制中的重要环节之一。     

子宫自然杀伤细胞与人类早期自然流产患者蜕膜血管生成

目的探讨子宫自然杀伤（uterinenaturalkiller，uNK）细胞在人类早期自然流产患者蜕膜血管生成中的作用。方法2007年8月至2007年10月在本院采用免疫组化SP法检测35例（病例组）早期自然流产患者蜕膜子宫自然杀伤细胞、微血管密度（microvesseldensity，MVD）及血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的表达，并以同期45例正常早孕妇女（对照组）进行比较。结果早期自然流产蜕膜组织中，子宫自然杀伤细胞（CD64＋）及血管内皮生长因子在蜕膜间质中的阳性表达率明显降低，蜕膜微血管数量明显减少，并出现狭窄、闭锁，甚至断裂，血管内皮细胞肿胀，排列紊乱等微血管异常。结论血管内皮生长因子可能通过影响蜕膜血管生成，参与早期自然流产的发生。