吡格列酮预处理对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及线粒体ATP敏感性钾通道的影响

目的:观察吡格列酮(Pio)对在体大鼠心肌缺血/再灌注心肌细胞凋亡及线粒体ATP敏感性钾通道影响,探讨Pio对心肌缺血损伤保护作用及其机制. 方法: 24只SD大鼠随机分为假手术组(SO组),缺血/再灌注组(I/R组),Pio预处理组(Pio组)和线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂5-羟基葵酸(5-HD) Pio组(5-HD Pio组)4组. 各组于缺血/再灌注前24 h尾静脉注射相应溶媒及药物,5-HD Pio组注入5-HD 10 mg/kg 30 min后再给予Pio 3 mg/kg;Pio组只注入Pio 3 mg/kg;SO组不结扎前降支,4 h后取出心脏;余三组结扎前降支30 min,再灌注4 h后取出心脏. 用透射电镜观察心肌线粒体超微结构的改变;采用TUNEL法和免疫组化法检测缺血心肌细胞凋亡和Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白的表达以及RT-PCR法测Fas mRNA的表达. 又另取18只SD大鼠随机分成SO,I/R和Pio组,行心肌梗死范围的测定. 结果:①与I/R组相比,Pio组线粒体损伤程度明显减轻;②与I/R组(34.93±5.55)%相比,Pio组(20.24±3.93)%心肌梗死范围明显减少(P＜0.05);③与I/R组相比,Pio组能明显增加Bcl-2蛋白的阳性细胞指数(P＜0.05),降低心肌细胞凋亡率(P＜0.05)及Bax, Caspase-3蛋白的阳性细胞指数(P＜0.05),下调Fas mRNA的表达水平. I/R组与5-HD Pio组相比,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论:Pio预处理可通过保护心肌线粒体结构,减少心肌细胞凋亡及梗死范围,保护缺血心肌损伤作用可被线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂所对抗.     

格列吡嗪对糖尿病大鼠心肌ATP敏感性钾通道基因表达的影响

目的:观察磺脲类药物格列吡嗪对糖尿病大鼠心肌组织中ATP敏感性钾通道(KATP)基因表达的影响.方法:50只雌性大鼠随机分为正常饮食组(n=10)、高脂饮食组(高脂饲料6周,n=10)和高脂饮食 小剂量链脲佐菌素(STZ)组(糖尿病模型组,高脂饮食6周25 mg/kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素,n=30);尾静脉采血测定各组大鼠血糖、血TG、Tch和血清胰岛素,采用稳态模型(HOMA)评价胰岛素抵抗(IR).成模大鼠随机分为糖尿病组、糖尿病胰岛素治疗组和糖尿病格列吡嗪组(n=10),另设对照组10只(正常大鼠予等量生理盐水灌胃).RT-PCR检测KATP组成亚基SUR2和Kir6.2的表达.结果:STZ注射后3 d糖尿病模型组大鼠空腹血糖均≥16.67 mmol/L,糖尿病模型建立成功.糖尿病格列吡嗪治疗组KATP SUR2和Kir6.2的表达水平与糖尿病组、糖尿病胰岛素治疗组以及对照组相比无显著差异.结论:成功建立大鼠2型糖尿病模型,STZ诱导的实验性糖尿病不影响心肌KATP SUR2和Kir6.2的表达水平;治疗剂量的格列吡嗪对心肌KATP SUR2和Kir6.2的表达无影响.     

格列吡嗪对正常及糖尿病大鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道的影响

目的：探讨格列吡嗪（Glip）对正常及糖尿病大鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道（mito KATP）的影响．方法：取分离鉴定的Wister大鼠和2型糖尿病GK大鼠心肌组织线粒体悬浮液，加入到含有K^＋和KATP通道阻滞剂ATP的待测溶液中，再按如下分组进行药物干预，即空白对照组（Con组）、特异性mito KATP激活剂二氮嗪组（Dia组）、Dia＋Glip组（分别为5，50μmol／L Glip），即刻检测溶液在3min内光散射值的变化，以此作为反映线粒体体积变化的指标．结果：各组线粒体体积均随时间增大，Con组增加速度极慢，Dia组最快，而Dia＋Glip组则介于两者之间．不同浓度Glip均能使两种大鼠线粒体体积增加速度减慢（P〈0．01），高浓度作用更明显（P〈0．01）；相同浓度Glip对不同大鼠组的影响程度不同，对糖尿病GK大鼠的影响明显弱于正常大鼠（P〈0．01）．结论：Glip对正常及糖尿病大鼠心肌mito KATP均有关闭作用，但对糖尿病大鼠的作用明显较弱．相当于临床治疗中血药浓度峰值的Glip浓度（5μmol／L）虽可干扰正常大鼠心肌mito KATP的活性，但对糖尿病大鼠心肌mito KATP无显著影响．     

ATP敏感性钾通道开放剂心脏保护机制的研究进展

ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ）开放剂是的年来发现的具有明显心甩细胞保护作用的一类药物。其心肌细胞保护的机制尚未安全阐明，此对有关假说进行了综述。     

ATP敏感性钾通道与缺血性脑损伤

以往人们一直认为ＡＴＰ仅作为细胞内能量贮存的主要化合物而参与机体的能量供应 ,几乎未考虑到细胞内ＡＴＰ([ＡＴＰ]ｉ)可能是正常条件下许多细胞功能的信息调节剂。1983年 ,Ｎｏｍａ首先在心肌细胞膜上发现了一种受细胞内ＡＴＰ浓度调节而开放和关闭的钾通道 ,称为ＡＴＰ敏感性钾通道。以后先后在胰腺 β细胞、骨骼肌、平滑肌、中枢神经系统及周围神经均发现了类似的通道。ＫＡＴＰ通道可能参与细胞兴奋与细胞内代谢间的信息传递 ,并与激素分泌、血管扩张、骨骼肌细胞的兴奋性、神经细胞膜的超极化和神经递质的释放等功能有关。1　ＫＡＴ…     

线粒体ATP敏感性钾通道与心脏缺血预适应

关于心脏缺血预适应的研究较多，其机制尚不清楚，但ATP敏感性钾通道（KATP）的参与已被肯定。以往认为，心脏缺血预适应是细胞膜上钾通道开放诱导所产生，但近年来的多项研究表明是线粒体内膜ATP敏感性钾通道（mitoKATP)的作用。我们就缺血预适应目前研究现状、mitoKATP开放产生缺血预适应的证据、可能机制及mitoKATP的调节进行综述，以期找到理想的mitoKATP开放剂，通过药理干预达到类似缺血预适应的心脏保护作用。     

吡格列酮抑制体外高糖培养乳鼠心肌细胞炎症作用的研究

目的 探讨吡格列酮对高糖培养乳鼠心肌细胞炎症的抑制作用。方法 SD乳鼠原代心肌细胞培养至90%融合,换上无血清的DMEM培养基,并随机将细胞分为正常组、高糖模型组、吡格列酮低剂量组(10μmol/L)和高剂量组(20μmol/L),继续培养48h后,分别收集细胞培养液及心肌细胞,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、炎症因子IL-6、TNF-α的含量以及心肌细胞中蛋白P38MAPK的表达量和NF-κB的活性。结果 高糖下的细胞经吡格列酮药物处理后LDH、IL-6、TNF-α的含量、P38MAPK的表达量和NF-κB的活性均明显下降。结论 吡格列酮能抑制高糖培养下心肌细胞炎症作用。     

ATP敏感性钾通道开放剂Cromakalim心脏保护机制的初步探讨

本工作用大鼠离体灌流心脏缺血再灌注损伤模型观察了ＫＡＴＰ通道开放剂克罗卡林（Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ,ＣＲＫ）的心脏保护作用。结果表明,ＣＲＫ能明显减少缺血再灌注损伤心肌的ＬＤＨ及蛋白的漏出（Ｐ〈０．０１）,降低脂质过氧化产物ＭＤＡ的含量（Ｐ〈０．０１）,心肌组织及心肌线粒体钙含量也显降低（Ｐ〈０．０１）。ＣＲＫ明显抑制心肌线粒本的最大＾４５Ｃａ＾２＋摄取量及摄钙速率。ＣＲＫ的上述作用均能被ＫＡＴＰ     

吡格列酮与心血管疾病的研究进展

目前,心血管疾病已经成为严重危害人类健康的主要疾病。常见的心血管疾病有高血压、左心室肥厚、冠心病等。如何治疗这类疾病并取得满意的效果已经成为研究热点。近来研究发现,吡格列酮作为治疗糖尿病的新药[1,2],对心血管疾病有潜在的预防作用[3]。本文将重点讨论心血管疾病与吡格列酮的关系。     

线粒体ATP敏感性钾通道与心肌保护

线粒体ATP敏感性钾通道发现已10余年,因其特异开放剂和抑制剂的发现，使研究不断深入，其在抗心肌肥大和抗凋亡等心肌保护方面，尤其是预适应心肌保护作用日益突出,但其相关的信号通道及调控仍未完全清楚，本文就此展开综述。     

左旋精氨酸对大鼠心肌细胞ATP敏感性钾通道的影响

目的研究左旋精氨酸(L-Arg)对大鼠离体心肌细胞ATP敏感性钾通道(KATP)的影响。方法急性分离大鼠心肌细胞,设保持电位-40mV,指令电位-100～ 40mV,步阶脉冲20mV,波宽200ms,刺激间隔为6s。记录IKATP。结果观察正常生理条件下和给予不同浓度L-Arg后心肌细胞IKATP的变化,并分析L-Arg对KATP通道功能的影响。指令电位为-100mV,给予10,30,50mmol·L-1的L-Arg后,KATP的开放率分别为:(173±19)%,(190±18)%,(268±21)%,具有浓度依赖性增加趋势。后两者与对照组比较(P<0.05),r=0.958,与对照组比较(P<0.05);当L-Arg的浓度增加到100mmol·L-1时,KATP的开放率为(175±54)%。结论L-Arg在低浓度范围内(10～50mmol·L-1),可浓度依赖性的开放KATP通道;L-Arg浓度增加至100mmol·L-1时,则该作用不明显。     

NO与心肌细胞K_(ATP)关系的研究进展

机体内一氧化氮(NO)是左旋精氨酸(L-arginine)与氧气经一氧化氮合酶(NOS)作用而产生的一种活性气体,适当浓度的NO可通过NO-cGMP途径调控心肌细胞ATP敏感性钾通道(KATP)的功能,调节心肌细胞对组织缺血缺氧的耐受性,参与心肌细胞的自身保护机制。NO生成不足与高血压、动脉粥样硬化、心力衰竭、糖尿病、高脂血症等心血管疾病的发生有关;NO生成和释放增多也可直接参与多种疾病的发生和发展,即NO与心功能密切相关,对多种疾病有重要的病理生理作用和临床意义。     

组胺拮抗剂在小鼠ATP-敏感性钾离子通道上的影响

目的：观察比较3种组胺拮抗剂对缺血性心肌细胞的ATP-敏感性钾离子通道中的影响。方法：利用急性酶解法分离小鼠心室肌细胞。结果：pyrilamine、chlorpheniramine及diphenhydramine均可抑制ATP-敏感性钾离子通道的活性,抑制程度为pyrilamine > chlorpheniramine > diphenhydramine。组胺对KATP通道活性无影响。结论：第一代的组胺拮抗剂（pyrilamine 、 chlorpheniramine 及 diphenhydramine）对KATP通道活性有抑制作用,其抑制作用与膜上H1受体无关。     

ATP敏感性钾通道开放剂的脑保护作用研究

细胞上存在两种三磷酸腺苷敏感性钾(KATP)通道,一是位于细胞膜上的ATP敏感的钾通道;二是位于线粒体膜上的ATP敏感的钾通道。KATP通道广泛存在于各种脑区,若给予KATP开放剂则可以使其开放发挥对脑的保护作用。越来越多的研究表明,KATP通道在脑缺氧缺血等病理状态下被激活开放,使大量K+外流,细胞膜超极化,从而使Na+、Ca2+内流减少,避免或减轻钙超载、减少能耗、减轻兴奋性氨基酸及氧自由基释放,保护脑细胞。     

坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠相应脊髓背角神经元KATP通道表达的变化

目的 探讨脊髓背角神经元KATP通道(ATP-sensitive potassium channel)在慢性神经病理性疼痛所致机械痛觉超敏中的作用.方法 雄性SD大鼠(体重250～350 g),随机分为两组:坐骨神经慢性压迫性损伤组(chronic constriction injury,CCI组)6只,假手术组(sham组)6只.在术前1 d、术后1、5、10、14 d分别测量各组大鼠机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)的变化,于第14天行灌注固定,取腰段脊髓切片后行KATP通道的免疫组织化学染色,观察各组大鼠腰段脊髓背角神经元KATP通道免疫组织化学染色后积分光密度(IOD)值的变化.结果 坐骨神经慢性压迫性损伤模型大鼠自术后第5天起出现明显的机械性异常性疼痛,持续到术后14 d;而假手术组无明显痛觉过敏表现.术后14 d,坐骨神经慢性压迫性损伤模型组大鼠腰段脊髓背角神经元KATP通道IOD值与假手术组比较明显下降,差异有统计学意义.结论 KATP通道在脊髓背角神经元表达的改变可能与神经病理性疼痛所致机械痛觉超敏的发生机制相关,KATP通道可能成为治疗这类疼痛的靶点.     

K+通道开放剂对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察三磷酸腺苷敏感性K+通道开放剂(PCOs)Pinacidil 对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用.方法在改良Langendorff 模型上,20只SD大鼠随机分为两组,分别用St.Thomas 液(对照组)及经10 μmol/L Pinacidil 强化的St. Thomas液(Pinacidil组)两种停跳液进行低温缺血/再灌注大鼠离体心脏实验.离体心脏缺血90 min,再灌注15 min后观察缺血前、后心率(HR)、左室收缩最高压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、最大压力变化速率(±dp/dtmax)的变化,用RT-PCR方法检测心肌组织eNOS-mRNA和iNOS-mRNA的表达变化,通过凝胶图象分析系统对RT-PCR产物电泳条带进行密度分析.结果 Pinacidil组心功能指标明显好于对照组;eNOS明显升高(P＜0.01),iNOS下降(P＜0.05).结论 Pinacidil作为新的有效的停跳液成分可增强St. Thomas 液对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用.     

钾通道开放剂拮抗内皮素-1的缩血管作用

利用离体猪心冠状动脉环，研究了KATP开放剂吡那地尔（PIN）和克卡里木（CRO）对内皮素－1（ET－1）缩血管作用的影响。结果表明，PIN和CRO均使ET－1的量－效曲线右移，并降低最大反应。当ET－1（30nmol／L）达最大效应后，累加剂量的PIN和CRO产生剂量依赖性的抑制作用。结果提示，KATP开放剂对ET－1收缩冠状动脉的拮抗作用，可能是其抗心肌缺血的机制之一。     

ATP敏感性钾通道在大鼠心肌缺血预处理中的作用

目的：研究ＫＡＴＰ通道在离体大鼠心脏缺血预处理中的作用。方法：取雄性ＳＤ大鼠心脏行Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流。以３ｍ ｉｎ 全心缺血加５ｍ ｉｎ 复灌重复３次为预处理,灌流３０ ｍ ｉｎ 作为对照,同时灌以ＫＡＴＰ通道阻断剂优降糖（１０ μｍ ｏｌ／Ｌ）或开放剂吡那地尔（５０ μｍ ｏｌ／Ｌ）。然后以结扎左冠状动脉２０ ｍ ｉｎ,复灌６０ ｍ ｉｎ 作为缺血复灌,以心肌梗塞范围和心律失常评分作为指标,观察药物对预处理的心肌保护作用的影响。结果：优降糖可阻断缺血预处理的作用,而吡那地尔则不能模拟缺血预处理,但是在缺血期间吡那地尔对心肌有保护作用。结论：ＫＡＴＰ通道很可能参与了大鼠心肌缺血预处理的心肌保护机制,但不是触发因素     

ATP敏感性钾通道在人类妊娠不同状态的子宫平滑肌的表达

目的:探讨ATP敏感性钾通道(KATP )亚基在人类2种不同功能状态下(临产和未临产)子宫平滑肌中的表达情况。方法:实验分为足月临产组(TL组)和足月未临产组(TNL组),均12例。采用RT-PCR和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测了人类2种妊娠状态下子宫平滑肌KATP 3种亚基mRNA的表达,并用免疫组织化学法检测KATP 3种亚基蛋白表达情况。结果:Kir6.1、Kir6.2、SUR2B mRNA在临产和未临产子宫平滑肌上均有表达,TNL组SUR2B mRNA的含量高于TL组(P<0.05);3种亚基的受体蛋白在人未临产和临产的子宫平滑肌细胞胞质中都有表达。结论:KATP在子宫平滑肌上有表达;在人类的妊娠子宫平滑肌上可能是通过SUR2B水平的改变起到调节平滑肌收缩的作用。     

线粒体KATP通道开放剂对培养大鼠心肌细胞缺血/再灌注损伤心肌线粒体的保护作用

目的探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪预处理对大鼠心肌细胞线粒体功能保护作用。方法采用培养大鼠心肌细胞缺血/再灌注损伤模型,观察二氮嗪预处理对心肌细胞缺血/再灌注损伤损伤后细胞线粒体活性和线粒体膜电位影响。结果二氮嗪预处理大鼠后,对培养大鼠心肌细胞缺血/再灌注损伤有保护作用,能减少心肌细胞线粒体活性和线粒体膜电位的下降。结论线粒体ATP敏感性钾通道开放剂能产生预处理心肌细胞线粒体保护效应。