手法治疗对异常应力下兔颈椎间盘组织中蛋白多糖的影响

目的 探讨手法治疗对异常应力环境下兔颈椎间盘(intervertebral disc,IVD)组织中蛋白多糖(proctologycan,PG)的影响,寻找预防和延缓椎间盘退变的方法.方法 将24只日本大耳兔随机分为正常组、模型治疗组和模型组.按要求处理两个月后,测出颈椎间盘C5/6椎间盘组织蛋白多糖主要组成糖氨多糖(glycosaminoglycan,GAG)的量.结果 正常组、模型治疗组中GAG含量明显高于模型组(P<0.05);而正常组与模型治疗组之间无显著性差异(P>0.05).结论 在椎间盘组织退变的早期,手法治疗可以抑制颈椎间盘组织GAG的含量降低,从而起到延缓椎间盘退变的作用.     

推拿对异常应力下兔颈椎间盘蛋白多糖变化的影响

为观察中医推拿手法对异常应力环境下兔颈椎间盘基质蛋白多糖变化的影响 ,将 32只家兔随机分为对照组、模型组和治疗组 ,后两组家兔每天 1次保持颈椎低头屈曲 4 5°位 5小时 ,治疗组分别于造模开始及造模 2个月后施以推拿手法。取C5～ 6椎间盘生化测定椎间盘的蛋白多糖总量、硫酸软骨素和硫酸角质素比值及透明质酸含量 ,比较各组间可能存在的差异。结果显示 ,对照组蛋白多糖总量和成分含量均无显著变化 ,模型组和治疗组蛋白多糖总量及硫酸软骨素和硫酸角质素比值明显下降 ,治疗组家兔颈椎间盘蛋白多糖含量明显高于模型组 ,但各成分含量无明显差异。表明推拿手法能够一定程度减少异常应力环境下颈椎间盘中蛋白多糖的丢失 ,其作用的机制可能与抑制蛋白多糖降解有关。     

艾灸对兔退变颈椎间盘蛋白多糖含量的影响

目的：观察艾灸对兔退变颈椎间盘蛋白多糖的影响,探讨艾灸防治颈椎间盘退变的作用及可能机制。方法：24只日本大耳白兔随机分为艾灸组、模型组和正常组,每组8只,采用颈屈曲位固定法制备兔颈椎间盘退变模型,造模后立即干预。艾灸组温和灸颈部夹脊穴,每穴15min,1次/d。造模3月后,各组取出退变椎间盘组织,测量其蛋白多糖含量。结果：模型组椎间盘蛋白多糖含量明显减少（P〈0.01）,艾灸组椎间盘蛋白多糖含量较模型组高（P〈0.01）,艾灸组和正常组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：艾灸可防止兔颈椎间盘蛋白多糖含量过度减少,对兔颈椎间盘退变有一定延缓作用。     

针刀干预对颈椎间盘退变兔整合素α5、β1表达的影响

目的观察针刀干预对颈椎间盘退变兔颈部肌肉形态学以及整合素α5、β1含量的影响,探讨针刀延缓颈椎间盘退变的机制。方法将24只新西兰家兔按随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组,每组8只,采用"低头位加风寒湿刺激"法建立异常应力诱导下的兔颈椎间盘退变模型,通过颈椎核磁共振(MRI)影像学验证造模是否成功。针刀组在造模结束1周后进行干预,干预在无菌状态下以针刀治疗四步曲为参考,每周1次,共治疗4周。空白组、模型组与针刀组采用相同固定方式固定。结束后采用HE染色法观察各组实验兔颈部肌肉组织形态学变化;Western Blot法和Real-time PCR法检测椎间盘髓核中整合素α5、β1含量的变化。结果颈椎MRI结果显示,空白组矢状面可见髓核呈高亮信号状态、椎间盘高度正常,横断面可见髓核内信号均匀且与纤维环边界清晰;与空白组相比,模型组椎间盘的高度出现轻度降低,矢状面可见部分椎间盘髓核颜色较暗,呈灰色,信号强度较空白组明显减低,与空白组椎间盘横断面所见的髓核均匀分布相比,模型组髓核内部结构明显分布不均,且纤维环和髓核之间界限模糊,难以分清。HE染色显示,空白组可见肌纤维结构清晰,呈长条状平行排...     

针刀疗法对兔退变颈椎间盘组织中p38MAPK蛋白与IL-1表达的影响

目的 观察针刀疗法对兔退变颈椎间盘组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)蛋白与白细胞介素-1(IL-1)表达的影响,探讨针刀治疗颈椎间盘退变的作用机制。方法 选用24只普通级的6月龄健康雄性新西兰大白兔,随机分为空白组、模型组与针刀组,每组8只。模型组与针刀组采用自制兔盒制作颈椎间盘退变模型。造模4周后,通过X线与MRI检查评价造模成功与否。造模结束后7 d,空白组与模型组不予任何干预措施;针刀组予以针刀干预,每周1次,共3次。干预结束后7 d,每组随机抽取2只行MRI检查,观察影像学变化。影像学检查结束后行空气栓塞法处死,立即取出椎间盘组织。HE染色观察其组织病理学变化,Western blot法检测p38MAPK的蛋白表达水平,免疫组织化学染色法检测IL-1的表达水平。结果 磁共振成像结果显示空白组见椎间盘高度正常,髓核呈亮白色,未见椎间隙变窄、椎间盘突出,纤维环边缘完整;模型组见椎间盘高度降低,髓核呈灰黑色,椎间隙变窄,C6/7椎间盘向后方突出,纤维环破裂;针刀组椎间盘高度正常,髓核呈灰色,未见椎间隙变窄,C6/7椎间盘向后方轻微突出,纤维环边缘尚完整。HE染色结果见空...     

颈椎间盘退变机理和预防的研究进展

颈椎间盘退变被认为是颈椎病发生发展的根本原因。椎间盘的主要成分是胶原、蛋白多糖和水。椎间盘退变后表现为椎间盘中Ⅰ型胶原增多，Ⅱ型胶原减少（尤以髓核中减少明显），总蛋白多糖含量下降，椎间盘含水量下降。椎间盘退变的机理十分复杂，其确切原因还不清楚。研究颈椎间盘退变机理对于在临床上指导颈椎病的治疗有重要意义。目前关于颈椎间盘退变机理以及预防和治疗颈椎间盘退变方面的报道很多，现将这方面的研究进展情况综述如下。     

无创兔颈椎间盘退变动物模型的实验研究

目的:设计一种无创颈椎间盘退变动物模型的制备方法并验证其可行性,为防治颈椎病研究提供动物模型和实验依据。方法:20只日本大耳白兔随机分为模型组和对照组,每组10只。模型组采用特制的固定布套将兔颈部固定于屈曲60°位,4h/d;对照组兔戴上布套,允许其颈椎自由活动。在造模后3月,每组10只大耳白兔,麻醉及处死后行:①X线观察放射影像学变化;②光镜、电镜下观察组织形态学变化。比较组间的差异性。结果:模型组颈椎间盘间隙稍狭窄、椎体边缘有骨质增生,出现软骨细胞变性、坏死,髓核皱缩,纤维环胶原纤维变性、排列紊乱等组织形态学改变;对照组颈椎间盘组织形态无明显变化。结论:本造模法符合人椎间盘退变的客观规律,操作简便易行,造模效果确切(较长时间处于异常应力环境下能使兔颈椎间盘组织形态、基质生化成分发生明显退行性改变),且对所观察椎间盘无直接干扰,有利于对椎间盘退变的防治进行深入研究。     

基因治疗兔颈椎间盘软骨终板钙化的实验研究

目的探讨基因治疗退变颈椎间盘软骨终板钙化的效果。方法选用25只4个月龄新西兰免,分为正常对照组、模型浅层组、模型深层组、基因浅层组、基因深层组,每组5只。除正常对照组外,余建立家兔颈椎动力平衡失调模型组,诱导颈椎间盘退变。术后7个月。基因组将带有转化生长因子β1(TGF-β1)基因的重组质粒DNA注入C2-3、C3-4、C4-5椎间盘中,每个椎间盘用量为20μL。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘(包括上、下部分椎体),在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚(P<0.01),而基因组软骨终板钙化明显抑制(P<0.05)。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

葛根提取物对大鼠退变颈椎间盘基质代谢的影响

目的:探讨以葛根素为主要有效成分的葛根提取物对大鼠退变颈椎间盘中基质金属蛋白酶-3(matrixmetalloproteinase-3,MMP-3)和转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的影响。方法:首先对葛根中葛根素的提取方法进行优化,确定最佳提取工艺。将大鼠随机分为假手术组,模型组,葛根提取物高、中、低剂量(5.6,2.8,1.4 g·kg-1.d-1)组,颈复康颗粒(0.7 g·kg-1.d-1)组,每组各28只。建立动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型,分别在ig 4,8周后,每组取6只标本采用HE染色观察退变椎间盘的特征,其余8只取标本检测退变椎间盘中MMP-3、TGF-β1的含量。结果:形态学观察可见,与模型组相比各药物干预组椎间盘形态结构较完整,纤维环排列比较规则,髓核比较饱满,终板内血管充血情况改善,血管芽多于模型组,并且8周组较4周组变化明显。模型组MMP-3含量明显升高,TGF-β1的含量显著降低,葛根提取物各剂量组与模型组比能显著降低MMP-3含量,增加TGF-β1的含量。并且随着治疗时间的延长,这一效应有增加的趋势。葛根提取物2.8,5.6 g·kg-1.d-1相比差异没有显著性。结论:葛根提取物可能从增加TGF-β1和降低MMP-3的角度,影响椎间盘细胞外基质合成和降解,进而延缓椎间盘退变。     

桂枝汤对退变颈椎间盘组织磷脂酶A_2的影响

目的 :观察桂枝汤对模型动物退变颈椎间盘组织磷脂酶A2 (PLA2 )活性的影响 ,借以探讨桂枝汤治疗颈椎病的抗炎作用机理。方法 :选用动力失衡性颈椎病动物模型 ,造模动物到期后取C4 5颈椎间盘 ,采用催化活性与微孔比色相结合的测定法测定PLA2 活性。结果 :模型组颈椎间盘PLA2 活性明显升高 ,正常组则很低 ,二者比较有显著差异 ;桂枝汤无论是对早期治疗批还是治疗批均有下调PLA2 的作用 ,以大剂量为优。芬必得同样表现出明显下调PLA2 活性的作用 ,与桂枝汤比较无显著差异。结论 :桂枝汤具有下调退变颈椎间盘中PLA2 活性的作用 ,从而减少多种炎症介质的合成 ,这可能是其治疗颈椎病的作用机制之一     

人工麝香对退变颈椎间盘中免疫球蛋白的含量影响

方法：实验选用15只新西兰兔,分为3组,每组5只,分别为颈椎间盘退变组、颈椎间盘退变加人工麝香饲养组和正常对照组。通过切除动物颈棘上及棘间韧带和分离颈椎旁两侧肌肉,造成颈椎力学上的失衡而诱导了兔的颈椎间盘退行性变化。在术后8月时,杀死动物．取动物颈椎间盘组织,用单向环状免疫扩散技术测定其中IgG及IgM含量。结果：退变颈椎间盘中IgG含量明显升高;人工麝香具有显著降低退变颈椎间盘中IgG的作用,IgM与颈椎间盘退变无关。     

芪麝颈康丸对颈椎间盘细胞凋亡的影响

目的探讨芪麝颈康丸抑制颈椎间盘退变的细胞分子机制.方法将48只大鼠分成四组,切除其中36只(A、B、C三组)颈后部浅、中层肌,造成颈椎间盘退变模型,D组为正常假手术组.分别给予芪麝颈康丸(A)、颈复康(B)等药物治疗,C、D组不给药.4月后将动物处死,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法观察大鼠颈椎间盘退变模型椎间盘组织中细胞凋亡的情况及芪麝颈康丸等对细胞凋亡的影响.同时观察各组椎间盘退变程度的变化.结果模型空白组(C)椎间盘退变明显,与A、D组比较,差异有显著意义(P＜0.05,P＜0.01).正常组D组椎间盘细胞凋亡指数低于其余各组,分别与A、B、C组比较差异有显著意义(P＜0.05);空白对照组C组细胞凋亡指数偏高,A组、B组细胞凋亡指数低于C组,但差异没有显著意义(P＜0.05).结论动物颈椎间盘退变与椎间盘细胞凋亡有关.A组细胞凋亡指数明显低于C组,差异虽无显著意义,却预示芪麝颈康丸有抑制椎间盘细胞凋亡的可能性.     

椎间盘丸对大鼠腰椎间盘退变模型椎间盘组织内TNF-α的影响

目的观察椎间盘丸对大鼠腰椎间盘退变模型椎间盘组织内TNF-α的影响,探讨椎间盘丸防治椎间盘退变的可能机理。方法从腹前路腰椎间盘纤维环穿刺建立大鼠腰椎间盘退变模型,术后4周验证造模成功后应用椎间盘丸灌胃治疗4周,观察A组(正常对照组)、B组(模型对照组)、C组为椎间盘丸组(治疗组)椎间盘组织形态学改变,并行免疫组化染色检测TNF-α的表达。结果 B组手术造模4周后椎间盘退变明显;手术造模8周后椎间盘组织内TNF-α的含量在B组表达最高,C组经椎间盘丸治疗4周后椎间盘组织内TNF-α的含量较B组明显减少,但仍高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹前路腰椎间盘纤维环穿刺可以建立大鼠腰椎间盘退变模型,椎间盘丸可以通过抑制椎间盘组织中肿瘤坏死因子α的合成或分泌,发挥抑制和延缓椎间盘的退变作用。     

葛根汤对退变颈椎间盘组织磷脂酶A2的影响

目的：观察葛根汤对模型动物退变颈椎间盘组织PLA2活性的影响，借以探讨葛根汤治疗颈椎病的抗炎作用机理。方法：选用动力失衡性颈椎病动物模型，造模动物到期后取C4-5颈椎间盘，采用催化活性与微孔比色相结合的测定法测定PLA2活性，结果：模型组颈椎间盘PLA2活性明显升高，正常组则很低，二者比较有显著差异。葛根汤无论是对早期治疗批还是治疗批均有下调PLA2的作用。以大剂量为优。结论：葛根汤具有下调退变颈椎间盘中PLA2活性的作用。从而可减少多种炎症介质的合成，这可能是其治疗颈椎病的作用机制之一。     

中西药与基因治疗家兔退变颈椎间盘对软骨终板钙化影响的研究

目的了解家兔颈椎软骨终板钙化与颈椎间盘退变的关系,探讨抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有无抑制作用。方法选用35只4月龄新西兰兔,建立家兔颈椎动力平衡失调模型,诱导颈椎间盘退变（正常对照组不作处理）。术后7个月,药物治疗组（浅层、全层）给予抗骨增生胶囊和葡立胶囊（剂量按体重折算）,灌胃2次／日,连用1个月,基因治疗组则将带有转化生长因子β1（TGF-β1）基因的重组质粒DNA注入C2-3、C4—5椎间盘中（每个椎间盘用量为20μl）。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘（包括上、下部分椎体）,在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚,有统计学差异,而抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用、基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显抑制作用（P〈0．05）。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响

目的:观察手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响。方法:建立兔颈椎间盘退变模型,25只成年新西兰家兔随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用光镜观察手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响。结果:与正常对照组比较,模型组颈椎间盘中软骨下骨内的血窦数目明显减少,髓核中活细胞数目减少、排列紊乱。手法治疗、预防组均能不同程度地延缓软骨下骨内血窦数目及髓核活细胞数目的减少,但不能完全逆转椎间盘的退行性改变,且手法早期干预效果优于晚期干预。结论:手法干预能不同程度地延缓椎间盘组织结构的退行性改变。     

无创兔颈椎间盘退变动物模型的建立及MRI观察

目的:设计一种新型用于颈椎间盘退变研究的动物模型。方法:30只日本大耳白兔随机分为实验组和对照组,每组各15只。实验组采用特制的固定套将兔颈部固定于屈曲60°位4h/天;对照组兔戴上布套,允许其颈椎自由活动。分别在造模开始后第4、6、8月,每组随机取5只大耳白兔处死后行MR I检查,比较各组间存在的差异性。结果:实验组出现颈椎间盘退变的典型征象:T2信号明显降低;对照组无特异性改变:仅有T2信号轻度改变。结论:本造模法符合人椎间盘退变的客观规律,操作简便易行,造模效果确切,而且对所观察椎间盘无直接干扰,有利于对椎间盘退变的防治进行深入研究。     

中药对退变颈椎间盘的作用机理研究概述

回顾近年来中药对退变颈椎间盘作用机理的研究所取得的进展，显示中药的作用主要为：改善椎间盘营养功能，调节椎间盘细胞外基质的结构和功能，抑制椎间盘炎性介质，以及调控椎间盘细胞因子等。这些研究为临床诊治提供了较有价值的参考依据。     

补肝健腰方对腰椎退变大鼠椎间盘组织AQP1表达的影响

目的:观察补肝健腰方对腰椎退变大鼠椎间盘组织水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法:将60只大鼠随机分成3组,造模组35只、假手术组15只、正常对照组10只。造模成功后分组,分别给予补肝健腰方、腰腿痛丸或生理盐水喂养。分别于术后20天、40天和60天收集造模节段椎间盘组织,RT-PCR检测AQP1在椎间盘组织中的表达,免疫组化试剂检测AQP1表达与分布。结果:各组AQP1表达比较,假手术组与正常对照组比较无差异(P0.05),模型组、腰腿痛丸组、补肝健腰方组与正常对照组比较均有差异(P0.05),在术后20天、40天、60天补肝健腰方组与腰腿痛丸组比较,差异均有显著性意义(P0.05),术后40天腰腿痛丸组、补肝健腰方组与同组术后20天比较,差异均有显著性意义(P0.05)。结论:大鼠腰椎间盘退变后,AQP1的表达明显下降。在补肝健腰方的干预下,退变椎间盘细胞AQP1的表达有明显上调,推测AQP1的表达增减在椎间盘退变过程中起着重要的作用,补肝健腰方对腰椎间盘退变有预防及治疗作用。     

颈椎间盘退变模型的研究进展

颈椎退行性变是指颈椎结构随着年龄的增长以及使用过度、修复能力降低等导致的衰变及机能的衰退。其病因及病理生理机制尚未完全明确,其中颈椎间盘的退变被认为是最主要的原因。由于其发病机制尚不完全明确,通过建立能模拟人颈椎间盘退变的动物模型将有助于深入研究颈椎间盘退变的发病机制、病理过程及治疗方法,为人颈椎间盘退变的早期治疗提供较好的参考依据。现就当前报道的关于颈椎间盘退变模型制备方法做一简要综述。