非小细胞肺癌患者癌组织RAR-β基因甲基化的检测及其临床意义

目的 研究非小细胞肺癌患者癌组织RAR-β基因甲基化及其临床意义.方法 选择80例非小细胞肺癌患者,用甲基化特异性PCR(MSP)检测肺癌组织和癌旁正常组织RAR-β基因甲基化.结果 肺癌组织RAR-β基因甲基化率(57.5%)高于癌旁组织甲基化率(17.5%),差异有统计学意义(P<0.01);临床分期0~Ⅰ期与Ⅱ~...     

85例非小细胞肺癌中p53基因异常的预后价值

目的：探讨ｐ５３蛋白表达和基因突变在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的预后价值。方法：利用免疫组化方法检测８５例ＮＳＣＬＣ的ｐ５３蛋白表达，聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测３１例肺腺癌ｐ５３基因５、６、７、８外显子突变，研究结果进行单因素生存分析。结果：本组ＮＳＣＬＣ病人的平均年龄为５５．６±８．４岁（中位数５５岁），随访时间的中位数为４７个月，３年、５年总体生存率分别为６６％和６１％。ｐ５３蛋白表达与预后无关（χ２＝１．００，Ｐ＝０．８），而ｐ５３基因突变组病人的生存率显著低于无ｐ５３基因突变组（χ２＝４．８１，Ｐ＝０．０３）。同时，ｐ５３蛋白表达与ＰＣＲ－ＳＣＰ检测的ｐ５３基因突变的一致率仅为５２％。结论：在ＮＳＣＬＣ中ｐ５３蛋白表达和基因突变可能有不同的预后意义，ｐ５３基因突变可作为肺腺癌的辅助预后指标。     

非小细胞肺癌中TMS1基因甲基化检测

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中TMS1(taget of methylation-induced silencing)基因启动子区域的甲基化及TMS1蛋白表达状况,并研究其临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应和免疫组化的方法检测50例肺癌组织和50例对应癌旁组织中TMS1基因启动子区域甲基化的发生率及TMS1蛋白的表达情况。结果50例NSCLC肿瘤组织中有20例检测到了TMS1基因启动子的甲基化,检出率为40%,相应的癌旁正常组织没有检测到其甲基化(P<0.05)。TMS1蛋白在72%(36/50)的肺癌组织中表达下降,相应的癌旁正常组织均完全表达,没有1例表达下降(P<0.05)。TMS1基因甲基化与TMS1蛋白表达之间有着密切的关系(P<0.05)。结论TMS1基因启动子区域的甲基化是NSCLC的一个常见事件,并且与TMS1蛋白表达下降相关,在NSCLC的发生过程中起着重要的作用。     

纤支镜检查联合BALF细胞p53突变的检测对肺癌的诊断价值

目的探讨纤支镜检查联合支气管肺泡灌洗液中细胞p53突变检测对肺癌的诊断价值。方法对可疑肺癌患者行纤支镜检查,并以聚合酶链反应一单链构象多态性（PCR—SSCP）分析法检测BALF细胞p53的第5、6、7、8外显子突变情况。结果在最终确诊的68例肺癌患者中,纤支镜检查诊断肺癌49例,p53突变检测发现37例,纤支镜检查与检测BALF中细胞p53突变联合的方法共同检出61例肺癌患者,阳性率高达89．7％,较单独纤支镜检查差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论PCR—SSCP法检测BALF中p53突变可弥补纤支镜检查的不足,有助提高肺癌的诊断率。     

支气管肺泡灌洗液MGMT基因甲基化检测在非小细胞肺癌诊断中的价值

目的 探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)中MGMT基因启动子甲基化水平对于非小细胞肺癌的诊断价值。方法 选取完成胸部手术患者98例为研究对象,经病理确诊非小细胞肺癌患者63例组成试验组,经病理确认为良性病变患者35例为对照组,分别获取试验组及对照组成员血清标本、BALF标本及活组织标本,对不同类型标本中MGMT基因启动子甲基化水平做检测。结果 非小细胞肺癌患者肺癌组织中、BALF中、血清中MGMT基因甲基化发生率分别为58.7%、52.4%和27%;肺癌组织的MGMT基因甲基化率与BALF 中MGMT基因的甲基化率有较好的一致性,其与血清标本中MGMT基因的甲基化一致性较差,其判断肿瘤良恶性的敏感度低于BALF标本;35例肺良性病变对照组的肺组织标本、BALF及血清标本,均未检测到MGMT基因甲基化表达,其甲基化率为0。结论 BALF中MGMT基因甲基化检测在非小细胞肺癌的筛查诊断中具有一定的临床应用价值。     

非小细胞肺癌与p53基因序列分析

目的：研究非小细胞肺癌与ｐ５３基因突变的关系。方法：采用聚合酶链式瓜和ＤＮＡ双链直接测序方法对３７例非小细胞肺癌组织标本进行ｐ５３基因外显子５,６,７,８序列分析。结果：１５例突变,总突变率为４０．５４％。分别为２３７,２４３位密码子突变各１例,２８５位密码子突变２例,２７３位密码子突变的７例,另有４例标本同时存在第２５２和２５４位两个密码子突变为ＴＴＣ,这种突变方式尚未见报道。存在突变的１５例患     

p16基因甲基化在非小细胞肺癌的表达研究

目的：探讨p16基因甲基化在人非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法：应用甲基化特异性PCR法（MS-PCR）检测45例非小细胞肺癌组织,21例肺良性疾病组织中p16基因甲基化的表达情况。结果：肺良性疾病中p16基因甲基化阳性率为14．3％,低于癌组织中的57．8％,差异有统计学意义（P=0．001）;p16基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性（P〈0．05）。结论：p16基因甲基化的表达情况与非小细胞肺癌的发生、发展有关。     

p16基因甲基化在非小细胞肺癌发病中的研究

目的研究p16基因甲基化在非小细胞肺癌（NSCLC）发病过程中的作用及其影响因素,为探索肺癌发病机制提供依据。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）技术检测47例NSCLC患者肺癌组织和47例对应癌旁组织中DNA的p16基因甲基化状况,同时收集吸烟等环境暴露资料。结果肺癌组织中p16基因甲基化率44．7％,高于癌旁组织的17％（P〈0．01）,p16基因甲基化好发于鳞癌（P〈0．05）,在鳞癌中肺癌组织p16基因甲基化率明显高于癌旁组织,差异有显著性（P〈0．01）,且p16甲基化和吸烟在鳞癌中高度相关（P〈0．01）。结论p16基因甲基化可能参与鳞癌的形成,且与吸烟高度相关。     

p53在非小细胞肺癌中表达的研究现状

p53基因是人类肿瘤中突变率最高的抑癌基因。通过对p53基因的结构、生物学活性及其相关因子在非小细胞肺癌中表达和p53的多种功能的研究,如调节转录、稳定基因组、抑制细胞周期进展、促进凋亡、抑制血管形成等,表明p53对基因治疗有很大的帮助。这种治疗是从肿瘤发病机制的角度进行的,为肿瘤治疗提供了一种全新的方式,因而在肿瘤的防治中有重大意义。     

非小细胞肺癌组织中RASSF_(1A)和p16基因启动子甲基化研究

目的:研究肺癌新型侯选抑癌基因Ras相关结构域家族基因1A(RASSF1A)和p16基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的甲基化情况,揭示两基因表达失活的机制,为NSCLC的基因诊断和治疗寻找新途径。方法:用甲基化特异性PCR(MSP)方法对96例NSCLC患者癌组织及相应的远癌正常肺组织中RASSF1A和p16基因启动子甲基化状态进行检测。结果:(1)96例NSCLC组织RASSF1A甲基化率48.96%,p16基因34.38%,96例远癌正常肺组织均未发现此两基因甲基化。(2)RASSF1A甲基化率鳞癌组(64.29%)高于腺癌组(37.04%,P<0.05);p16基因甲基化率50岁以上组(44.93%)高于50岁以下组(7.41%,P<0.05),鳞癌(61.90%)高于腺癌(12.96%,P<0.05),有淋巴结转移组(46.67%)高于无淋巴结转移组(13.89%,P<0.05)。(3)RASSF1A与p16基因启动子CPG岛甲基化呈正相关(r=0.256,P<0.05)。结论:RASSF1A和p16在NSCLC尤其是鳞癌中频繁甲基化,可能是两基因表达失活的主要原因。     

外周血血浆中p16基因异常甲基化对非小细胞肺癌患者的检测意义

目的 了解非小细胞肺癌患者外周血血浆中p16基因异常甲基化发生情况及其在非小细胞肺癌临床辅助诊断中的应用价值.方法 选取72例肺部手术患者的血浆和组织标本,其中49例为非小细胞肺癌,23例为良性肺部疾病,采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSPCR）方法 检测了p16基因启动子的异常甲基化情况.结果 在非小细胞肺癌患者的血浆和肿瘤组织中,p16基因甲基化检出率分别为55.1%和63.3%;非小细胞肺癌患者血清、肿瘤组织中p16基因的甲基化异常事件与肿瘤分期、分型无明显相关性.在23例良性肺部疾病,其血浆和手术切除标本均未检测出p16基因启动子的异常甲基化存在.结论 检测非小细胞肺癌患者血浆中p16基因异常甲基化情况有可能成为有价值的非小细胞肺癌临床辅助诊断手段.     

p73、p63和p53基因在人非小细胞肺癌组织中的表达

目的：探讨p73、p63和p53在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达及与预后的关系。方法：免疫组化法测定93例NSCLCp73、p63和p53的表达并对其与年龄、性别、吸烟、病理类型、组织分化等因素进行统计学分析。结果：p53、p63和p73在正常肺组织表达阳性率分别为25％、25％和12．5％，在NSCLC的表达阳性率分别为65．6％、54．8％和71％，差异有显著性（P〈0．05）。p53表达阳性率与淋巴结转移相关（P〈0．05）；p63表达阳性率与肺癌的组织类型和淋巴结转移有关（P〈0．05）；肺鳞癌组织p63随分化程度降低表达增强（P〈0．05）。结论：p53、p63和p73均参与了NSCLC的发展、浸润和转移，可作为了解NSCLC的生物学行为和判断预后的指标。     

FHIT和p53基因在非小细胞肺癌中的表达

目的研究脆性组氨酸三联体(FHIT)基因与p53基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其作用.方法病理确诊的NSCLC标本113例,免疫组化法检测FHIT和p53基因的蛋白表达,以癌旁正常组织作为对照.结果113例NSCLC中,66例(58%)FHIT蛋白表达降低,35例(31%)p53蛋白表达增多,均以鳞癌和吸烟患者多见(P＜0.01).结论FHIT基因缺失与p53基因异常,可能在NSCLC的发生和发展中起重要作用.     

FHIT和p53基因在非小细胞肺癌中的表达

目的研究脆性组氨酸三联体（FHIT）基因与p53基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其作用。方法病理确诊的NSCLC标本113例,免疫组化法检测FHIT和p53基因的蛋白表达,以癌旁正常组织作为对照。结果113例NSCLC中,66例（58％）FHIT蛋白表达降低,35例（31％）p53蛋白表达增多,均以鳞癌和吸烟患者多见（P〈0．01）。结论FHIT基因缺失与p53基因异常,可能在NSCLC的发生和发展中起重要作用。     

非小细胞肺癌患者血清p16基因启动子甲基化分析

目的：分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中p16基因启动子区域甲基化状况及其临床意义。方法：运用甲基化特异性PCR技术，检测65例NSCLC患者血清p16基因启动子区域甲基化情况，并分析与临床病理资料的关系。结果：NSCLC患者血清p16基因甲基化检出率为43．1％(28／65)，而正常对照组和良性肺部疾病组未检出；p16基因甲基化检出率与NSCLC病理类型、分期及转移状态无明显关系。结论：p16基因启动子区域甲基化是NSCLC早期辅助诊断的分子标记物之一。     

非小细胞肺癌患者外周血及组织中p53基因突变的研究

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中p53 基因突变检测的可行性及其临床意义.方法 应用PCR-SSCP分析技术,检测69例原发性NSCLC 患者血浆(手术前、后)及对应新鲜肺肿瘤组织中p53基因5～8外显子的突变情况,以15例肺良性病变组织及血浆、5例健康献血员血浆作对照.并同时对相应的组织病理切片进行p53蛋白的免疫组化染色检测.结果 NSCLC患者血浆(术前)和对应肿瘤组织中p53基因突变率分别为38%(26/69例)、54%(37/69例),其共同检出率达54%(20/37例);而对照组肺良性病变及健康人血浆中均未检出该基因突变.术后血浆中p53突变率明显低于术前,仅7例(10%)检测到p53突变,包括Ⅲ期3例,Ⅳ期4例, 多为有远处转移的患者.免疫组化染色p53蛋白表达阳性率为64%(44/69例), PCR-SSCP分析与免疫组化染色两种方法检测符合率为81%(56/69例).NSCLC患者血浆(术前)中p53基因突变在不同临床分期及有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P<0.05).肿瘤组织中该基因的突变及表达在有无淋巴结转移患者间差异有统计学意义(P<0.05),而在不同病理分型、分化程度及临床分期间差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 p53基因突变在NSCLC患者血浆与原发肿瘤组织中有较高的一致性和检出率,且其改变与NSCLC临床分期和转移相关;监测肺癌患者手术前、后血浆中p53突变具有一定意义,通过检测外周血中p53基因的改变可能对肺癌的诊断、预后判断及术后追踪具有一定价值.     

非小细胞肺癌的早期诊断——CT与p53、p16、DNA对比研究

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)的CT征象与p53、p16基因蛋白异常表达及癌细胞核DNA含量之间的关系.方法应用免疫组化SABC法对52例经手术病理证实的NSCLC石蜡包埋标本,检测p53、p16基因蛋白表达;在此基础上,应用流式细胞术(FCM)测定了其中39例细胞核DNA含量并与相应的CT征象对照,分析P53、p16基因蛋白表达及DNA含量(DNA指数,DI)与CT表现之间的内在联系.结果①正常肺组织、癌旁肺组织和肺癌组织中,p53基因蛋白阳性表达率逐渐增高,p16基因蛋白阳性表达率逐渐降低.随着肿瘤分化程度的降低,p53基因蛋白阳性表达率逐渐增高,p16基因蛋白阳性表达率逐渐降低(P＜0.05).TNM分期中,I、Ⅱ期NSCLCp53基因蛋白阳性表达率低于Ⅲ期和Ⅳ期;而p16蛋白阳性表达率明显高于Ⅲ期和Ⅳ期(P＜0.05).②NSCLC的DI值明显高于癌旁肺组织和正常肺组织;NSCLC的细胞分化程度越差,TNM分期越高,异倍体率(AT%)越高,SPF值也越大.③CT显示NSCLC最大直径＞3cm及有淋巴结肿大组p53基因蛋白阳性表达率、p16基因蛋白阴性表达及DI值、SPF值均高于直径≤3cm组及无淋巴结肿大组;肿块轮廓出现深分叶征、棘状突起征,边缘出现短毛刺征组p53基因蛋白阳性表达率高,p16基因蛋白阳性表达率低,同时具有较高的DI.结论CT征象与p53、p16、DNA等分子生物学指标对比观察,有助于提高肺癌的早期诊断水平,指导临床制定合理的综合治疗方案.     

p16基因甲基化检测指导非小细胞肺癌放疗靶区设计的初步探讨

目的探讨利用肺癌组织、癌旁组织p16基因甲基化的差异来指导精确放疗的临床价值。方法选取33例肺部疾病住院病人手术切除的肺组织标本,其中29例为肺癌,4例为良性肺部疾病。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSPCR)法检测其p16基因甲基化状态。结果29例肺癌组织标本中12例(41.4%)在p16基因启动子区域呈现异常甲基化,近癌旁组织、远癌旁组织标本中均未检测出甲基化存在。4例良性肺部疾病中肺脓肿1例,肺炎性假瘤3例,手术切除标本中均未检测出甲基化存在。结论MSPCR技术对肺癌病人标本中的异常甲基化检测具有特异性,可进一步应用于肺癌生物靶区设计的探讨。     

非小细胞肺癌组织中p16与p53等的表达及其相关性研究

目的:探讨在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中p16、p53、Ki-67的表达及其相关性。方法:采用免疫组化S P法检测p16、p53、Ki-67在45例NSCLC组织中的表达情况。结果:45例NSCLC标本中p16阳性表达为17例(37.78%),p53阳性表达为25例(55.56%),Ki-67阳性表达为34例(75.56%)。各种蛋白阳性表达率与淋巴结转移有关(P<0.01),与年龄、性别、组织类型、分化程度无显著相关性(P>0.05)。p16和p53、Ki-67的表达呈负相关。结论:p16、p53及Ki67对于判断NSCLC患者预后具有重要意义。     

支气管肺泡灌洗液端粒酶与P53基因检测在肺癌诊断中的应用

目的研究支气管肺泡灌洗液（BALF）中端粒酶活性、P53基因变异对肺癌的诊断价值。方法收集86例肺癌患者与82例肺良性疾病患者的BALF,采用端粒酶重复序列扩增法（TRAP）和PCR—SSCP法进行端粒酶和P53基因检测,同时经纤维支气管镜（纤支镜）进行活检和刷检。结果①实验组患者BALF端粒酶活性、P53基因突变率分别为82．56％和32．56％,均高于对照组的4．48％和0（P〈0．01）;②不同组织学类型肺癌患者BALF端粒酶活性阳性表达率和P53基因突变率之间差异均无统计学意义（P〉0．05）;③中央型肺癌患者BALF端粒酶活性和P53基因变异联合检测阳性率为94．34％,常规纤支镜检查阳性率为86．79％,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。周围型肺癌患者BALF端粒酶活性和P53基因变异联合检测阳性率75．76％,高于常规纤支镜检查阳性率45．45％（P〈0．05）。结论①肺癌患者BALF端粒酶活性与P53基因变异均高于肺良性疾病患者;②端粒酶活性阳性表达率、P53基因突变率与肺癌的病理类型无关;③BALF端粒酶活性和P53基因变异联合检测对周围型肺癌的诊断有一定的实用价值。