氧氟沙星人工抗原的合成与鉴定

目的:合成氧氟沙星人工抗原.方法:采用碳二亚胺法将氧氟沙星与牛血清白蛋白偶联合成完全抗原,采用混合酸酐法将氧氟沙星与卵清蛋白偶联合成应用于ELISA检测的包被抗原.结果与结论:经紫外光谱分析和动物免疫试验证明抗原合成成功.该人工抗原可用于氧氟沙星单克隆抗体的制备及其ELISA检测试剂盒的研制.     

合成肽抗原抗精子抗体ELISA试剂盒的研究

目的 :建立合成多肽抗原检测抗精子抗体 (As Ab)的酶联免疫吸附测定法 (EL ISA )。方法 :固相法合成特异性精子肽 ,包板制备检测 As Ab的 EL ISA试剂盒 ,并对该试剂盒进行方法考核。结果 :抗原包被浓度选择 0 .5 mg/ L ;检测 4 39份血清标本的 As Ab表明 ,不明原因不育患者组阳性率达 2 1.5 % ,未婚男女对照组阳性率仅为 1% ,两组对比差异有统计学意义 (P <0 .0 0 5 )。与德国 Gesellschaft试剂盒比较检测 2 6份血清标本 ,显示极好的一致性 (Kappa值 0 .77>0 .75 )。重复性试验显示其精密度较好 (CV<10 % ) ;37℃放置 8d,结果不受影响。结论 :结果表明该合成肽抗原检测抗精子抗体 EL ISA试剂盒特异性强 ,重复性好、稳定性高 ,操作简便     

巨细胞病毒抗原分支肽的合成与鉴定

目的: 探讨人巨细胞病毒(HCMV)抗原分支肽人工合成方法. 方法: 用固相合成方法分别合成HCMV抗原表位的线性多肽和分支多抗原肽,经HPLC进行纯化后质谱检验其分子质量,并用质控血清鉴定抗原活性. 结果: 合成的线性肽分子质量为793.87 ku,八分支肽的分子质量为7127.77 ku,均与其理论分子质量相符,分支肽经ELISA初步鉴定对质控血清具有较好的分辨效果. 结论: HCMV抗原分支肽的人工合成大大简化了以往HCMV抗原的制备方法,且制备成本低,无潜在生物危害.     

柴胡皂苷a人工抗原的合成及免疫原性鉴定

目的合成柴胡皂苷a(SSa)免疫抗原和包被抗原,为柴胡皂苷a单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立奠定基础。方法采用高碘酸钠氧化法分别合成柴胡皂苷a免疫抗原(SSa-BSA)和包被抗原(SSa-PLL);用紫外光谱和薄层色谱法鉴定人工抗原是否偶联成功,并免疫小鼠,通过ELISA方法测定血清中抗体效价,通过间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测抗体特异性。结果薄层色谱法检测结果显示柴胡皂苷a与BSA/PLL偶联成功。小鼠经SSa-BSA免疫后,体内可产生抗柴胡皂苷a抗体,效价1∶80 000以上。结论与其他人工抗原的鉴定方法相比,薄层色谱法具有独特的优势。成功合成的柴胡皂苷a人工抗原可用于下一步的单克隆抗体制备以及相应免疫方法的建立。     

黄芩苷人工抗原的合成与鉴定

目的人工合成黄芩苷(BAL)的完全抗原并进行鉴定。方法采用碳二亚胺两步法,将BAL分别与牛血清白蛋白(BSA)和多聚赖氨酸(PLL)相偶联。用紫外扫描的方法测定其偶联比,用动物免疫的方法测定其抗原性。结果 BAL-BSA的偶联比为6∶1,BAL-PLL的偶联比为7∶1,间接ELISA实验结果表明,6只BAL人工抗原免疫的小鼠均有特异性抗体产生,抗体效价为1∶3 000以上。间接竞争ELISA实验证实BAL可特异性地阻断上述反应的发生。结论该方法成功合成了BAL的人工抗原,并且在免疫小鼠的血清中产生了针对BAL的抗体。     

氟甲砜霉素人工抗原的合成与鉴定

目的:制备氟甲砜霉素(FF)的最佳人工抗原并鉴定.方法:采用琥珀酸酐将FF的羟基活化后制备出半抗原氟甲砜霉素半琥珀酸(FF-HS),并经质谱(MS)鉴定合成成功.采用碳二亚胺法将FF-HS与牛血清白蛋白(BSA)偶联,采用混合酸酐法将FF-HS与卵清白蛋白(OVA)偶联,采用羰基二咪唑法将FF直接与BSA偶联,制备了3种人工抗原(FF-HS-BSA、FF-HS-OVA和FF-BSA).采用紫外吸收光谱分析和动物免疫实验(3种偶联物选择前2种分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA实验)鉴定3种人工抗原.结果与结论:紫外吸收光谱分析初步证实3种人工抗原合成成功.在动物免疫实验中FF-HS-BSA与FF-HS-OVA得到了效价较高的特异性抗体,IC50分别为150、300ug/L.FF-BSA免疫原免疫效果不理想.     

黄曲霉毒素B1人工抗原及抗体的制备研究

Carboxymethyloxime of aflatoxin B1 (AFB1) was synthesized by refluxing AF B1 with carboxymethoxylamine hemihydrochloride for 4 hours in the presence of pyridine. AF B1-BSA (antigen) was made successfully by coupling AF B1-oxime with bovine serum albumin (BSA) in the presence of a water soluble carbodiimide. The rabbits were immunized with the artificial immunogen which had been purified by dialysis. The titers of antisera were determined by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) which was developed by ourselves. The highest titer was 1:100,000.     

pICln蛋白肽段血清抗体和单克隆抗体的制备

目的：探讨高质量蛋白抗体的制备，为蛋白质的研究提供有效的工具。 方法：用人绒毛膜促性腺激素（hCG）免疫BALB/c小鼠制备其单克隆抗体（Mb）；以pICln蛋白的18肽为抗原对兔进行免疫注射制备血清抗体，用ELISA分别检测抗hCG的单克隆抗体腹水和pICln蛋白的肽段血清抗体的效价及特异性。 结果：肽段血清抗体在12 800倍稀释时也呈阳性反应且高特异性。 结论：从制备方法的复杂程度、抗体的效价及特异性等方面看，肽段血清抗体的制备是一种方便有效地制备蛋白质研究用抗体的方法。     

肿瘤抗原与肽疫苗

自从 2 0 0多年前EdwardJenner发现良性的、自愈性的牛痘感染 ,可以保护个体对抗致命性的天花感染 ,这使得人们首次意识到自身的免疫系统对机体的保护作用[1 ] 。随后对抗麻疹、脊髓灰质炎等感染性疾病的疫苗获得了巨大的成功 ,使得免疫学家深受鼓舞 ,开始尝试用疫苗治疗肿瘤。 190 2年Leyden和Blumenthal首先进行了瘤苗主动特异性免疫治疗 ,标志着肿瘤免疫学的开端[2 ] 。但是 ,直到 2 0世纪 5 0年代Foley和Prehn等在同系小鼠的研究中发现了特异性肿瘤移植抗原 ,并发现这种抗原对宿主的保护作用 ,成为了肿瘤免疫的里程碑[3] 。1　肿瘤的…     

阿莫西林完全抗原的合成与鉴定

目的:制备阿莫西林完全抗原并鉴定.方法:采用碳二亚胺两步法将半抗原阿莫西林与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,采用混合酸酐法将阿莫西林与卵清蛋白偶联制备ELISA包被原.采用紫外光谱分析和动物免疫试验鉴定偶联产物.结果与结论:紫外光谱分析和动物免疫试验证实阿莫西林抗原合成成功,该抗原可用于阿莫西林ELISA检测试剂盒的研制.     

胃泌素释放肽前体及其单克隆抗体对肺癌细胞株增殖的影响

目的 探讨胃泌素释放肽前体(Pro-GRP)和Pro-GRP单克隆抗体(McAb)对人肺癌细胞株(A549)增殖的影响. 方法 将浓度为1×10-6-1×10-3mol/L的Pro-GRP和效价为1:80-1:10的Pro-GRP McAb及浓度为1×10-5 mol/L的Pro-GRP与效价为1:80-1:10的Pro-GRP McAb作用于人肺癌细胞株,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖水平. 结果 Pro-GRP在1×10-6-1×10-3 mol/L浓度范围内A549细胞密度逐渐增加;用效价为1:80-1:10的Pro-GRP McAb处理A549细胞密度逐渐减少,而且使预先用1×10-5mol/LPro-GRP处理过的A549细胞逐渐减少. 结论 Pro-GRP能促进人肺癌细胞株的增殖;Pro-GRP McAb可抑制人肺癌细胞株的增殖,且能阻断Pro-GRP对细胞的促增殖作用.     

抗人肺腺癌杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

用人肺腺癌细胞株AGZ—83a常规免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0融合,获得一稳定分泌抗人肺腺癌单克隆抗体（McAb）的杂交癌细胞林──—QMC－WL99。制备并纯化了小鼠腹水抗体,腹水效价为5.5X106,亚型鉴定为IgG1。免疫组化结果显示QMC－WL99单抗的特异性较高,与肺腺癌有较好选择反应性,与正常组织无交及反应。该单克隆抗体的亲和常数为7.25×1010M－1,液氮冻再后复苏,杂交瘤细胞株QMC－WL99分泌抗体的能力不受影响。     

肺癌相关蛋白N35的纯化及鉴定

目的利用免疫亲和层析技术用自行制备的抗人肺癌单克隆抗体N35纯化其相应的肺癌相关抗原N35蛋白并对其进行鉴定。方法培养P35杂交瘤细胞,收集培养上清,利用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化单抗N35;用纯化得到的单抗与溴化氰活化的Protein A-Sepharose CL-4B制备免疫亲和柱;再将肺腺癌GLC-82细胞的裂解液通过此免疫亲和柱,纯化肺癌相关抗原N35;最后,对纯化得到的N35蛋白进行Western blot鉴定。结果应用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化得到纯度较高的单抗N35蛋白;应用溴化氰活化的Protein A-SepharoseCL-4B免疫亲和层析法纯化得到相对分子质量80 000的肺癌相关蛋白N35。结论纯化得到的肺癌相关蛋白N35是一种新的肿瘤相关抗原,可为肺癌的生物治疗提供新的靶点。     

Macrophages in degradation of calcium phosphate compound artificial bone: Anin vitro study

Summary The isolated mice peritoneal macrophages in degradation of calcium phosphate compound artificial bone-collagen/hydroxylapatite (CHA), hydroxylapatite (HA), beta-tricalcium phosphate (TCP) ceramics, have been studied by use of both Ca⁺⁺, P concentration assay in cultured supernatant and scanning electron microscopy (SEM). The solubility of Ca^{+ +}, composition of materials increased more significantly when macrophages were inoculated than when macrophages were not seeded (P< 0.001), and it was shown that the ground materials were wrapped and phagocytized or resorbed extracellularly by macrophages under SEM, suggesting that macrophages could mediate the degradation of calcium phosphate compound artificial bone by phagocytizing and/or degrading extracellularly. This project was supported by The National Natural Science Fundation.     

肺癌相关抗原的血清学筛选与鉴定

目的:筛选和鉴定肺癌肿瘤相关抗原,为肺癌早期诊断提供血清学标志物,并为研制肺癌疫苗提供候选抗原.方法:5份异体肺癌患者血清采用重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)技术对肺癌cDNA表达文库筛选;对阳性克隆插入片段进行测序、生物信息学分析.结果:①筛选出70个阳性克隆,插入片段大小为300～2 800 bp.②测序:70个阳性克隆代表63个不同的基因.③生物信息学分析:1个基因与肺癌的发生、发展关系密切;34个基因报道与细胞的分化、代谢及信号转导等有关系,与其他肿瘤的发生、发展有关;26个基因的生理功能未见文献报道;2个插入片段未发现有同源基因,推测可能为新发现的基因.结论:使用SEREX技术成功鉴定了一组肺癌相关的肿瘤抗原.     

人工智能技术在肺部肿瘤中的研究现状和应用前景

肺癌是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,严重威胁人类健康,因此提高肺癌的诊疗效率至关重要。人工智能技术为肺癌的诊治带来了新思路,目前大量研究集中于肺部肿瘤的早期筛查、诊断、治疗和病程管理,以及研发基于深度学习的计算机辅助诊断系统,并取得了显著效果。本文系统阐述了人工智能技术在肺部肿瘤早期筛查、病理诊断、预后评估、手术导航和免疫治疗等方面的研究进展,相信人工智能技术必将为肺癌的诊治带来新的机遇,并将有助于提高肺癌患者的总生存率和生活质量。