口腔非贵金属材料对L-929细胞毒性的研究

目的：评价5种口腔修复非贵金属材料的细胞毒性。方法：采用细胞培养法、MTY法和流式细胞仪检测细胞周期的方法,研究5种合金的细胞毒性。结果：MTT比色法结果揭示：纯钛、钛合金具有良好的生物相容性,而钴铬合金、镍铬合金、铜基合金抑制了细胞的生长 细胞周期所测各组细胞G2期比例与MTI结果相符。结论：不同金属合金的细胞毒性不同。     

壳聚糖生物流体敷料膜细胞毒性研究

壳聚糖为天然的海洋生物活性材料，具有良好的生物相容性，是一种应用前景十分看好的生物材料。近年来我们采用壳聚糖为主要原料研究的新型生物功能敷料（下称流体膜），不但具有较好的体外抗菌活性，而且又有止血、促上皮细胞生长及加速创面愈合等多种生物活性，为使临床应用更具安全性，特对其细胞毒性进行试验。     

硫芥对大鼠淋巴细胞毒性作用的研究

目的 探讨硫芥中毒对淋巴细胞的作用机制,为寻找硫芥中毒早期改变的敏感指标和提高中毒的防护水平奠定其础。方法 建立硫芥中毒淋巴细胞模型,分别用单细胞凝胶电泳法检测淋巴细胞DNA损伤;用镀铜镉还原法和一氧化氮合成酶试剂盒检测中毒后淋巴细胞培养上清液一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）的变化;用流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳支检测细胞凋亡。结果 硫芥中毒后4h淋巴细胞DNA明显损伤,72h最明显,5d开始恢复;中毒后NO、NOS的变化相似,4h明显升高,1d达到峰值并于3d开始恢复。NOS的抑制剂（L-NAME）可明显降低NO的含量,但对实验组NOS的活性无明显影响。流式细胞仪检测结果显示4h淋巴细胞凋亡明显,而1、3d几乎无凋亡产生。琼脂糖凝胶电泳结果表明4h出现典型的细胞凋亡的征象,而1、3d则表现为细胞死亡。结论（1）SCG法敏感、经济、简便、可用于硫芥中毒细胞毒性、中毒程度的评价,在早期诊断上有良好的应用前景;（2）中毒后因NOS的活性升高导致NO的升高而产生细胞毒作用可能是硫芥的中毒机制之一;（3）细胞凋亡参与了硫芥的中毒过程,亦可能是其中毒机制之一。     

壳聚糖修饰对细胞摄入和细胞毒性的影响

目的研究精氨酸或十六烷基修饰壳聚糖对其细胞摄入和细胞毒性的影响及作用机制。方法用α-32P-dATP标记质粒DNA,分别与十六烷基化壳聚糖和精氨酸修饰的壳聚糖通过复凝聚方法形成壳聚糖DNA纳米复合物。采用血管平滑肌A10细胞进行摄入测试,并用β液闪计数仪检测结果。用MTT方法对壳聚糖DNA纳米复合物的细胞毒性进行评价。结果经32P标记的DNA与不同修饰的壳聚糖复合所形成的纳米复合物粒径约为55·9~174·9nm,zeta电位约为1·8~10·8mV。细胞摄入实验显示通过精氨酸或十六烷基修饰的壳聚糖与DNA形成的纳米复合物更易于进入细胞。其中十六烷基化壳聚糖DNA纳米复合物(HCNC)在N/P为1∶1时细胞摄入量最高,精氨酸修饰的壳聚糖DNA纳米复合物(ACNC)细胞摄入次之,与未经修饰的壳聚糖DNA纳米复合物(UCNC)相比,差异具有显著性(HCNC、ACNC比UCNC高1·3倍,P<0·05)。细胞毒性实验显示,修饰后的壳聚糖纳米复合物的毒性远远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine2000。结论两种修饰对壳聚糖DNA纳米复合物的血管平滑肌细胞摄入有明显促进作用,其作用机制各不相同;同时其细胞毒性远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine2000。     

壳聚糖与神经干细胞生物相容性的研究

目的 探讨生物降解材料壳聚糖与神经干细胞的生物相容性。方法 取SD大鼠胚胎（孕14-16d)大脑皮层组织制成单细胞悬液在无血清培养液中进行培养，获得大量的神经干细胞，再将所获神经干细胞在不同条件下移植接种至壳聚糖膜上联合培养1周，在倒置显微镜下观察神经干细胞生长增殖情况及形态变化，并对其分别进行免疫组化染色，电镜观察，了解壳聚糖对神经干细胞生长，增殖，分化的影响。结果 在无血清联合培养条件下，神经干细胞仍然维持其原有的干细胞特性；在含血清的培养液中，神经干细胞能分化成多种形态的神经细胞，并且在壳聚糖膜上生长良好。结论 壳聚糖与神经干细胞具有良好的生物相容性。     

应用单细胞凝胶电泳技术检测K562细胞 DNA损伤的研究

目的用单细胞凝胶电泳技术来探讨一种能方便检测细胞DNA损伤的方法。方法在Singh等人的方法的基础上，加入过氧化氢作为DNA致突变剂来观察K562细胞的DNA损伤。结果在培养K562细胞的过程中，加入了下同浓度的过氧化氢，我们发现了DNA损伤与过氧化氢剂量之间存在着线性相关关系。结论这种在本实验室建立起来的用于检测细胞DNA损伤的方法易于操作，结果令人满意，并更具实用性。     

壳聚糖修饰单壁碳纳米管的制备与细胞毒性研究

目的:制备稳定的水溶性的壳聚糖/碳纳米管(CHI/SWCNT-COOHs)纳米材料,对其表征并检测纳米材料的细胞毒性.方法:市售单壁碳纳米管(Raw SWCNTs)以强酸处理,形成残缺的羧基化单壁碳纳米管(SWCNT-COOHs),然后,低分子壳聚糖(CHI)与SWCNT-COOHs反应制备壳聚糖/碳纳米管(CHI/S...     

番茄红素对CHL细胞DNA氧化损伤的影响

目的研究番茄红素对CHL细胞氧化损伤的影响。方法在CHL细胞培养液中分别加入0.5、1、5及10μmol/L番茄红素,给予H2O2作用30min,用单细胞凝胶电泳方法测定细胞DNA损伤情况。结果加入不同剂量番茄红素的CHL细胞经过24h培养后自发性DNA损伤(拖尾率和DNA迁移长度)与溶剂对照组相比没有明显差异。而加入0.5、1、5μmol/L番茄红素后H2O2诱导的CHL细胞DNA损伤率明显低于H2O2组(P<0.05);但10μmol/L番茄红素对H2O2诱导的DNA损伤的保护作用丧失。结论0.5、1、5μmol/L番茄红素对H2O2诱导的细胞DNA损伤有保护作用,10μmol/L番茄红素的抗氧化能力丧失。     

汽油与甲醇燃烧汽车尾气遗传毒性的对比研究

目的 比较汽油燃烧汽车尾气(简称汽油尾气)和甲醇燃烧汽车尾气(简称甲醇尾气)的遗传毒性。方法 采用MTT法测试受试物对A549细胞的毒性作用，选择无明显细胞毒性的浓度作为受试物的最高浓度，用A549细胞体外微核试验和单细胞凝胶电泳试验(彗星试验)对汽油尾气和甲醇尾气的遗传毒性进行比较研究。结果 受试物与靶细胞作用2h或24h，均以汽油尾气对A549细胞的毒性大于甲醇尾气。汽油尾气终浓度为O．025L／ml时即可诱导A549细胞微核增加，并呈现良好的剂量效应关系，而甲醇尾气在试验浓度下均不具有诱导A549细胞微核增加的作用。在单细胞凝胶电泳试验中，汽油尾气具有诱导A549细胞DNA损伤的作用，其拖尾率和DNA迁移长度均随浓度的增加而增加，而甲醇尾气不具有诱导A549细胞DNA损伤的作用。结论 汽油尾气可以诱导染色体和DNA损伤t具有明显的遗传毒性，而甲醇尾气在两个试验中均未检测出潜在的遗传毒性。     

LRP16影响Hela细胞对电离辐射的敏感性

目的探索LRP16的表达对Hela细胞的电离辐射敏感性是否产生影响。方法将真核表达质粒(pcDNA-3.1和pcDNA-3.1-LRP16)以及抑制LRP16表达的小干扰RNA:control siRNA、siRNA-374分别转染入Hela细胞内,并通过电离辐射处理,导致DNA损伤。采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测转染了质粒细胞的DNA损伤程度;CCK-8试剂盒检测细胞活力;流式细胞技术测定抑制LRP16的表达对Hela细胞凋亡率的影响。结果电离辐射后,与对照组相比,转染了LRP16的Hela细胞损伤修复能力增高(P<0.05),而且细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。抑制LRP16的表达后,Hela细胞的细胞活力比对照组明显降低(P<0.05)。结论 LRP16蛋白能够降低Hela细胞对电离辐射的敏感性。     

单细胞凝胶电泳技术在胚胎毒性实验中的应用

目的:探讨和分析单细胞凝胶电泳技术(SCGE)的影响因素和实验中应该注意的环节.方法:通过对实验方法和操作技术的总结,对Singh提出的碱性SCGE进行适当的补充.结果:完善了SCGE的操作,获得了典型的彗星图像.结论:在实验中避免非特异性因素的影响,注意实验操作细节,能够增加SCGE的特异性和敏感性.     

锰对小鼠淋巴细胞DNA损伤的研究

目的:研究不同剂量染锰小鼠淋巴细胞 DNA损伤的情况。 方法:随机分为正常对照组和 3个剂量组(低、中、高剂量组 ) ,给小鼠腹腔注射氯化锰 ,6周后采用单细胞凝胶电泳实验检测染锰小鼠外周血淋巴细胞 DNA链断裂情况 ,并进行对比分析。 结果:低、中、高剂量组小鼠淋巴细胞 DNA损伤率明显高于正常对照组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论:氯化锰可引起小鼠淋巴细胞 DNA的损伤     

培养人动脉平滑肌细胞诱发高密度脂蛋白的氧化修饰

目的：观察高密度脂蛋白（High density lipoprotein,HDL）经与培养人动脉平滑肌细胞（Smooth muscle cell,SMC）保温后发生氧化修饰。方法：HDL组分琼脂糖凝胶脂蛋白电泳，及其共轭二烯（Conjugated diene CD)、硫代巴比妥酸反应物质（Thiobarbituric acid reaction substance TBARS）及脂氢过氧化物（Lipid hydroperoxide LOOH）的测定。结果：HDL经过与人动脉SMC共培养后，与天然HDL（Native HDL N-HDL)比较，其电泳迁移率明显增加，其CD、TBARS及LOOH的含量均显著增加（P＜0．01）。结论：HDL经过与培养人动脉SMC37℃保温48h后可发生氧化修饰。     

单细胞凝胶电泳在真核微生物上的应用

目的：利用真核微生物作为单细胞凝胶电泳的生物材料，以建立一种筛选鉴别环境遗传毒物的新方法。方法：酿酒酵母和原生动物四膜虫经培养后，对比常规动物细胞实验方法进行单细胞凝胶电泳，并对实验条件进行改进。结果：与动物原代和传代细胞相比，四膜虫培养时间短，成本低廉，可实现无损前处理，四膜虫DNA解旋后电泳所需电压和电流都必须较低，即15V，180mA。对H2O2、K2Cr2O7，和丝裂霉素(MMC)3种DNA损伤剂的初步测试表明，它们可以引起四膜虫DNA不同程度的损伤．最低效应浓度分别为100、10、1μmol／L。酵母菌因DNA含量少，未见明显的彗星现象。结论：四膜虫单细胞凝胶电泳从方法上完全可以与动物原代细胞和传代细胞互相替代，但四膜虫单细胞凝胶电泳试验快速、经济、简便的优势，则是后二者所不及的。     

MTX致小鼠组织DNA损伤的研究

目的为进一步了解甲氨蝶呤(methotlexate,MTX)的作用机制,探测一次给药后不同时间点小鼠组织DNA损伤的修复情况。方法用单细胞凝胶电泳技术检测MTX腹腔注射染毒1、3、6、12、24h后对小鼠肝、脾、骨髓、胸腺、肾、睾丸、胃和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用。结果腹腔注射5mg／kg MTX可诱发小鼠脾细胞、骨髓细胞、胸腺细胞和外周血淋巴细胞的DNA单链断裂。结论MTX可致小鼠体内多脏器细胞的DNA单链断裂,不同细胞对MTX的易感性不同。     

硫芥中毒犬外周血IL-2、IL-6含量变化和淋巴细胞DNA损伤

目的 研究硫芥中毒犬外周血IL-2、IL-6变化和淋巴细胞DNA损伤的规律。方法 重庆家犬硫芥中毒(16mg/kg，sc)。中毒后不同时相点取血，分离血清和淋巴细胞。采用放射免疫方法测定血清中IL-2、IL-6含量，以单细胞凝胶电泳技术测淋巴细胞DNA损伤程度。结果 中毒后4h血清IL-2、IL-6含量开始下降，72h达最低值，120h开始恢复。单细胞电泳检测结果提示，硫芥导致明显的淋巴细胞彗星现象。受损细胞率、淋巴细胞DNA片段迁徙度于中毒4h即开始升高，24～72h持续升高。结论 硫芥中毒导致发生早且持续时间较长的犬外周血IL-2、IL-6含量下降和淋巴细胞DNA损伤。     

兔关节软骨细胞在几丁糖中培养的生物学特性

:【目的】观察关节软骨细胞在几丁糖凝胶中培养的生物学行为 ,以探讨几丁糖凝胶作为组织工程细胞支架的可行性。【方法】从幼龄兔关节表面削取薄层软骨 ,经酶消化获得大量的软骨细胞。原代培养后 ,按 10 6/mL细胞浓度接种于几丁糖凝胶 ,通过绘制生长曲线 ,组织化学检测 ,透射电镜观察 ,了解软骨细胞在几丁糖中生长特征。【结果】软骨细胞在几丁糖中保持圆形 ,甲苯胺蓝异染及Ⅱ型胶原免疫组化染色呈强阳性 ;细胞内富含高尔基体、粗面型内质网及大量的分泌泡。【结论】软骨细胞在几丁糖中保持圆形生长状态 ,几丁糖能促进软骨细胞分裂、增殖 ,提高其分泌基质的能力。几丁糖可作为可注射性软骨组织工程的载体材料     

高效液湘色谱检测高密度脂蛋白转运荷脂巨噬细胞内胆固醇的生物学活性

目的应用U937泡沫细胞模型建立一种新的检测高密度脂蛋白（HDL）外运细胞内胆固醇生物学活性的方法。方法将U937细胞与100μg／mL氧化低密度脂蛋白孵育36h后，分别用不同浓度高密度脂蛋白处理24h，应用高效液相色谱（HPLC）检测细胞内胆固醇和胆固醇酯含量。结果经氧化低密度脂蛋白处理后的U937细胞，HPLC检测细胞内总胆固醇增加，胆固醇酯含量大于胆固醇含量；经高密度脂蛋白处理后，细胞内胆固醇含量减少，不同厂家及不同批次的高密度脂蛋白外运胆固醇的生物学活性有所不同。结论经氧化低密度脂蛋白处理后的U937细胞可以作为检测高密度脂蛋白外运胆田醇生物学活性的方法。