种子细胞及支架材料在组织工程角膜构建中的应用

背景：在眼科角膜移植在组织工程中有很好的应用前景,但理想的支架材料一直制约组织工程角膜发展。目的：分析各种子细胞、支架材料的应用,总结近年来组织工程角膜构建所取得的进展。方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库（CNKI：2000/2010-10）和 PubMed数据库（2000/2010-10）,检索词分别为＂组织工程,角膜移植＂和＂tissue engineering,corneal transplantation＂。经计算机初检得到 223 篇文献,纳入与组织工程角膜研究进展、应用和体外构建的相关实验研究和综述,排除重复研究类文献,对 33 篇汇总分析。从种子细胞、支架材料、器官构建、临床应用等方面进行总结,对组织工程角膜的研究进展和未来发展进行探讨。结果与结论：结果表明,种子细胞和支架材料仍为组织工程研究的重点,由于眼免疫赦免现象和角膜的无血管特性,组织工程角膜移植将优于其他器官和组织的移植,成为能大量构建且易于移植的组织工程器官。目前,组织工程角膜构建已获得初步成功,但各类支架材料均存在一定缺点,寻找理想的支架材料是下一步的研究方向。     

组织工程角膜基质的构建

学术背景:角膜供体来源的匮乏及高危角膜移植术后的高排斥率限制了角膜移植的临床应用。构建具有良好生物学活性且能满足一定生理功能要求的组织工程角膜是近年来眼科的研究热点,而角膜基质组织的构建则是利用组织工程技术构建角膜的主要任务、难点和关键所在。目的:总结构建组织工程化角膜基质种子细胞及支架材料的研究进展。检索策略:应用计算机检索Pubmed数据库1980-01/2007-06的相关文献,检索词"cornealstroma;tissueengineering",限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库1997-01/2007-06期间的相关文章,检索词"组织工程;角膜基质",限定文章语言种类为中文。共检索到59篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与构建组织工程角膜基质密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。文献评价:文献的来源主要是构建组织工程角膜基质的实验。所选用的30篇文献中,5篇为综述,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:①国内角膜盲患者众多,临床上对供体角膜的需求越发迫切。构建具有良好生物学活性且能满足一定生理功能要求的组织工程角膜具有重大的探索价值与临床实际应用意义。②自体或异体角膜基质细胞不仅是最早采用的而且是应用最为广泛的种子细胞。皮肤成纤维细胞应用于构建组织工程角膜基质的文献已见诸于报道。③作为支架材料,胶原、明胶及壳聚糖均有报道用于构建组织工程角膜基质。研究表明人工合成可降解高分子材料聚羟基乙酸材料与角膜基质细胞有较好的亲和力。④随着干细胞研究、材料科学及生物工程学等多学科的发展,组织工程角膜基质的构建越来越凸现其优越性,但它仍然面临许多挑战,比如:如何定向诱导多能干细胞分化为角膜基质细胞;角膜基质支架材料如何改良以保证良好的透明性;支架材料的生物学特性及理化性质需进一步研究。结论:组织工程角膜基质是构建组织工程角膜的重要基础,也预示着临床应用组织工程技术治疗角膜盲时代的到来。它将为解决异体角膜来源匮乏、高危角膜移植成功率低等临床问题提供新的思路。     

组织工程化肌腱在肌腱修复过程中的作用

目的:综述肌腱组织工程在肌腱修复过程中的应用进展.方法:应用计算机检索1993-01/2009-10 PubMed数据库及维普数据库有关肌腱组织工程研究进展、肌腱支架材料生物力学分析、生物材料在肌腱组织工程中应用及组织工程技术在修复肌腱缺损临床应用方面的相关文献,英文检索词为"tendon transplantation,tissue engineering,biologicalmaterial,cell stent",中文检索词为"肌腱移植,组织工程,生物材料,细胞支架".检索文献量总计132篇. 结果:目前组织工程化肌腱的研究已经取得了显著的成果,但要真正应用于临床,大批量生产,仍存在一些问题.诸如最适的种子细胞来源、理想的支架材料、最佳的培养条件以及植入体内的检测方法等,在组织工程真正成为一种治疗肌腱缺损和功能重建的选择之前,这些问题都是有待进一步研究和解决的.结论:要真正实现体外预制有生命的种植体完全替代人体组织、器官功能,尚面临着许多挑战.     

组织工程角膜内皮载体材料的研究进展

学术背景:前房注射法移植角膜内皮细胞遭到失败,而采用载体法移植角膜内皮获得成功,提示了载体在组织工程角膜内皮体外构建与移植中的重要性.以各种材料为载体进行角膜内皮细胞体外培养与移植的实验研究广泛开展,获得了初步成功.但材料的免疫相容性、降解/溶解特性、亲细胞性、术后排斥反应、移植疾病传播等难题限制了角膜内皮体外构建与移植的发展,至今无法应用于临床实践.所以,寻找一种理想的载体材料一直是组织工程角膜内皮研究领域的重要课题和研究热点.目的:分析组织工程角膜内皮各种载体材料的优缺点,探索该领域还存在的难题和进一步发展方向. 检索策略:应用计算机检索MEDLINE数据库和中国期刊全文数据库1973-01/2007-12的有关文献,检索词为"角膜内皮,组织工程,载体,材料,角膜移植,角膜构建",限定文章语言分别为英语和中文.共检索到986篇相关文献,其中中文文献645篇,英文文献341篇.根据本文文题和研究目的对文献进行筛选.纳入标准:①选取针对性强,相关度高的文献;②对同一领域的文献选择近期发表或权威杂志的文献;排除重复研究和Meta分析类文章.最后35篇论文被选用.文献评价:选用35篇文献,其中3篇为综述,其余均为临床与实验研究.资料综合:早期开始使用的材料主要有:异体角膜片、明胶薄膜、胶原凝胶、聚羟基乙酸和聚乳酸羟基乙酸、水凝胶膜等,而角膜基质/后弹力膜、羊膜基底膜、角膜基质片、复合生物膜是目前的研究热点.组织工程角膜内皮材料投入临床实践目前还存在许多难题.结论:组织工程角膜内皮载体材料各有优缺点,改善材料的亲细胞性、免疫原性和降解/溶解特性是今后的发展方向,并且应该加强对材料的人体效应和远期影响的研究.     

体外构建工程化心肌组织的研究与应用

背景:"工程化心肌组织"是应用组织工程的方法,构建出具有天然心肌组织特征的心肌,将它移植到体内,最终修复或完全替代病损组织。但以往研究获得的工程化心肌组织存在较多的缺陷,仍不能满足实际需要。目的:总结体外构建工程化心肌组织方法的研究进展。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:2000/2010)和Medline(2000/2010)数据库,检索词分别为"心肌,组织工程,心肌构建物"和"Myocardial Constructionmaterials,Tissue Engineering,Myocardial"。从种子细胞、支架材料、体外培养环境和生物反应体系、工程化心肌组织的再血管化、移植实验5方面进行总结,对不同的种子细胞及生物支架材料和体外培养的环境、移植工程化组织的再血管化等方面进行了介绍。共检索到150篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入30篇文章。结果与结论:适合心肌细胞生存和心肌细胞形成的新型生物活性支架,理想的种子细胞、体外培养环境与生物反应体系、移植工程化组织的再血管化,动物移植实验等方面都是组织工程化心肌组织再造的关键所在。构建的组织工程化心肌组织应同时具备良好的收缩功能、稳定的电生理特性、力学强度和柔韧性、无免疫原性及自身能血管化或在移植后能迅速血管化的条件,但未来还需进一步研究。     

组织工程气管的构成和构建方法

背景:当气管切除长度超过6 cm,因吻合口张力大易产生吻合口瘘,这时需要进行气管重建,但无论是同种异体移植,自体组织移植和人工替代物等方法效果均不理想.组织工程学是近年来的研究热点,气管组织工程学虽然起步较晚,但已经取得一些重要成果,显示出良好的前景.目的:从支架材料、种子细胞、生长因子、立体结构重建、以及临床应用等方面,全面了解组织工程气管的构成和构建方法.方法:以"气管移植(tracheal transplantation),组织工程气管(tissue-engineered trachea)"为检索词,应用计算机检索维普数据库,Pubmed数据库,Elsevier数据库2000/2009有关文章.纳入与组织工程气管的构成和构建方法密切相关的文献,排除重复性研究.结果与结论:共检索到279篇文献,排除无关重复的文献,保留30篇文献进行综述.目前组织工程气管应用的支架材料主要为合成材料,纳米材料被认为是最具潜能的;种子细胞来源有软骨细胞和气管上皮细胞.旋转生物反应器可作为体外构建组织工程化气管软骨的可行的培养方法,生长因子的应用可诱导、加快和增强软骨形成.组织工程气管由于供体组织少,不易发生排斥反应,具有良好的应用前景.但还存在组织工程化气管的质地和延展性、管腔内壁上皮化和组织工程化气管的血管化等问题有待进一步解决.     

组织工程技术在下尿路修复重建中的应用

背景:下尿路损伤、炎症、肿瘤以及先天性畸形等原因常可造成下尿路组织的严重缺损.传统手术对于下尿路修复重建存在诸多弊端.组织工程利用脱细胞基质与复合种子细胞的生物支架构建组织器官,为下尿路的临床修复与重建开辟了新的治疗思路.目的:就组织工程技术在男性下尿路修复重建中成熟技术做简单概述,并指出现阶段组织工程在临床应用之不足.方法:以"tissue engineering,urethra engineering,bladder;urethra,testicle"为英文检索词;以"组织工程;尿道重建;膀胱;尿道;睾丸"为中文检索词.应用计算机检索1994-01/2009-06 PubMed数据库和CNKI数据库相关文章,检索到文献72篇,排除重复性研究,最终纳入29篇文献进行分析.结果与结论:目前用膀胱替代材料重建膀胱的实验主要有两种模型,即脱细胞基质支架模型和复合种子细胞的生物支架模型.脱细胞基质支架材料主要有膀胱细胞外基质、尿道细胞外基质、小肠黏膜下基质等.复合种子细胞的生物支架则是将种子细胞接种与相应的支架上,经过相应的处理再回植入体内.这两种模型目前正处于实验与临床研究中.组织工程化尿道方面的应用技术与组织工程化膀胱类似.睾丸组织工程研究目前还处于萌芽阶段.目前组织工程"替代品"还无法与正常的组织器官相媲美,还有一定的缺陷.     

组织工程皮肤支架材料和种子细胞的研究进展

目的:综述近年来国内外组织工程皮肤种子细胞和支架材料方面的研究进展,介绍了用静电纺丝法制备新型三维纳米纤维支架材料的研究进展及其在组织工程皮肤中的应用前景.资料来源:检索人为第一作者,检索文献时限为1992/2009.检索数据库为CNKI数字图书馆全文数据库,Sciericedirect数据库,I.S.I数据库.中文检索关键词为"组织工程皮肤,创伤修复,种子细胞,支架,静电纺丝".英文检索关键词为"tissue-engineering,skin,wound healing,seed cell,scaffold,electrospunning".资料选择:近年来对皮肤组织工程的研究起着重大影响,以及开启和引领新的方向的重要研究成果.结局评价指标:①与组织工程材料治疗皮肤损伤相关的文章.②与组织工程种子细胞和支架材料相关的文章.③与静电纺丝相关的文章.结果:利用皮肤干细胞的增殖分化特性制备人工皮肤是目前重要的研究方向,较受关注的研究有表皮干细胞、骨髓间充质干细胞、毛囊干细胞和脂肪干细胞等.对于组织工程来说,如何制备出满足应用的细胞对支架的力学性能、物理结构及生物相容性等方面的要求无疑又是一个至关重要的难题.支架材料主要可分为微米级多孔支架材料与纳米纤维支架材料.静电纺丝法是近年来兴起的一种能快速、简便制备纳米纤维支架材料的方法,利用电纺技术制备的支架材料孔隙率高,孔道连通性好,有利于维持创面血运和氧气交换,可有效防止创面水分和蛋白质的流失.结论:组织工程皮肤研究是再生医学的重要组成部分,种子细胞和支架材料基材是其最核心的问题.随着生命科学、纳米技术和计算机技术的不断发展和相互融合,对种子细胞之间相互影响、相互调节机制的研究,以及支架材料的构建和性能研究取得了很大进展.     

组织工程化软骨修复关节软骨缺损

背景:目前治疗软骨缺损的方法均有明显缺陷,组织工程软骨修复关节软骨缺损为微创治疗软骨缺损提供了新方法.目的:总结组织工程软骨应用于修复关节软骨缺损的新进展.方法:由第一作者用计算机检索万方数据库(2000/2010)和PubMed 数据库(2000/2010),检索词分别为"软骨缺损,组织工程软骨"和"articular cartilage defects,tissue-engineered cartilage ",语言分别设定为中文和英文.从组织工程软骨及其新进展2 方面进行总结,对组织工程软骨的发展及构建等方面进行介绍.共检索到666 篇文献,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入23 篇文章.结果与结论:近年来随着细胞支架材料的不断发展和组织构建技术的日趋成熟,结合活性细胞和支架的组织工程软骨为微创修复关节软骨缺损提供了良好的治疗手段及方法,组织工程软骨修复软骨缺损是完全可行的,C-GP 凝胶与种子细胞相容性好,可做为组织工程软骨的理想支架,但细胞支架的制备及选择仍然是组织工程软骨的热点和难点.     

组织工程化肌腱在肌腱修复过程中的作用

目的：综述肌腱组织工程在肌腱修复过程中的应用进展。方法：应用计算机检索1993-01/2009-10PubMed数据库及维普数据库有关肌腱组织工程研究进展、肌腱支架材料生物力学分析、生物材料在肌腱组织工程中应用及组织工程技术在修复肌腱缺损临床应用方面的相关文献,英文检索词为＂tendontransplantation,tissue engineering,biologicalmaterial,cellstent＂,中文检索词为＂肌腱移植,组织工程,生物材料,细胞支架＂。检索文献量总计132篇。结果：目前组织工程化肌腱的研究已经取得了显著的成果,但要真正应用于临床,大批量生产,仍存在一些问题。诸如最适的种子细胞来源、理想的支架材料、最佳的培养条件以及植入体内的检测方法等,在组织工程真正成为一种治疗肌腱缺损和功能重建的选择之前,这些问题都是有待进一步研究和解决的。结论：要真正实现体外预制有生命的种植体完全替代人体组织、器官功能,尚面临着许多挑战。     

组织工程角膜内皮层移植的研究与应用

背景：组织工程角膜内皮可以克服角膜内皮移植的短缺并能够改善角膜内皮细胞的质量,其应用前景十分广阔。因此,寻找一种理想的重建角膜内皮方法是组织工程角膜研究领域的重要课题和研究热点。目的：总结并讨论组织工程角膜内皮重建的研究进展。方法：应用计算机检索PubMed数据库（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed）相关文章,检索时间为2000至2012年,检索词为＂corneal endothelial cell,transplantation,tissue engineering＂,并限定文章语言种类为英语,然后再从中筛选出与主题相关的部分文献。结果与结论：初检得到163篇文章,按主题相关性对文献进一步筛选,最终纳入44篇文章。目前构建单层角膜内皮层的研究较多,也取得了巨大的成绩,但是仍没有一种材料或重建方式可以完全符合临床应用的组织工程的人角膜内皮。每一种材料和方法都各有优缺点,克服这些缺点以及观察在体内的长期影响是今后的发展方向。     

组织工程角膜上皮移植治疗免角膜碱烧伤:形态学观察

背景:采用健康角膜缘干细胞体外培养形成组织工程化角膜上皮,移植于碱烧伤后角膜创面可促进创面的修复愈合.目的:观察组织工程角膜上皮移植治疗角膜碱烧伤的疗效和时机.设计、时间及地点:对比观察动物实验,于2007-07/2008-06在解放军总医院第一附属医院实验动物科完成.材料:新西兰雌性大白兔21只,体质量2.0～2.5 kg,随机分为对照组和移植组,其中对照组8只16眼,移植组13只再分为:早期移植组,1 d移植组2只4眼、3 d移植组3只6眼、6 d移植组3只6眼、9 d移植组2只4眼;中期移植组,14 d移植组3只6眼.方法:取21只兔上方健康角膜缘组织体外培养制备组织工程角膜上皮.21只兔双眼采用1 mol/L氢氧化钠制作改良角膜碱烧伤模型,移植组在碱烧伤后早期1,3,6,9 d和中期14 d行自体或同种异体组织工程角膜上皮移植,对照组烧伤后持续观察4周.主要观察指标:移植组及对照组烧伤后4周内眼表和组织病理学变化.结果:角膜碱烧伤后1周开始出现角膜上皮的大片脱落,2周角膜上皮大片脱落或溃疡发生率达72%,持续至4周,移植组在4周时发生率仅为25%,大多获得完整的角膜上皮;烧伤后早期移植组角膜基质深层炎性细胞浸润和新生血管生长较对照组明显受到抑制,而中期移植组角膜基质层较对照组并无明显差异;4周内异体组织工程角膜上皮移植的免疫排斥反应并不大于自体移植.结论:自体或同种异体组织工程角膜上皮移植可尽快恢复眼表完整性,且烧伤后早期移植效果明显优于中期移植.     

人工角膜材料分类及材料表面改性和生物相容性的研究

背景:角膜病和白内障是引起眼盲的主要原因,可以通过角膜移植的方法治愈,人工角膜的出现,使角膜移植摆脱了供体缺乏和移植成功率低的问题,为角膜盲的患者带来新的希望。目的:利用CNKI数据库文献检索和深度分析功能,对人工角膜材料学研究及人工角膜材料分类和设计的文献资料趋势进行多层次探讨分析。设计:文献计量学分析。资料提取:以电子检索方式对CNKI数据库2002-01/2011-12有关人工角膜材料学研究的文献进行分析,采用检索词为"人工角膜(Artificial cornea);生物材料(Biomaterials);生物相容性(Biocompatibility);水凝胶(Hydrogel);羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)等",对检索的相关文献运用数据库中自带的分析功能和Excel软件绘制图表的功能进行分析,通过文字和图表的形式将统计和计量数据分析,描述其分布特征。入选标准:纳入标准:①与人工角膜材料相关的基础研究论文。②与人工角膜材料临床应用相关的论文。③与人工角膜材料分类相关的研究论文。④与人工角膜材料设计相关的研究论文。排除标准:①与文章目的无关的文献。②重复研究的文献。③刊社信息。④未发表的文章。⑤需电话追踪和手工检索逐一分析的文章。⑥年鉴。主要数据判定指标:以CNKI数据库学术期刊文献出版时间、文献数量、学科类别、研究机构、来源期刊、文献被引频次、文献下载频次、关联文献、作者分布、基金资助情况和主要关键词进行相关分析。并对CNKI数据库中博士学位论文、优秀硕士学位论文、重要会议论文和专利技术进行分析。结果:在CNKI数据库学术期刊收录2002/2011的文献中,共检索到48篇与人工角膜材料学研究相关的文献。文献数量产出趋于平稳,最多的时间在2005年共9篇;《中国组织工程研究与临床康复》杂志发表文献量较多为9篇,占全部文献的18.8%;人工角膜材料学研究基金资助以国家自然科学基金项目为主;人工角膜材料学研究主要以水凝胶、羟基磷灰石为主,突出材料表面改性和生物相容性的研究。结论:通过文献计量学方法对CNKI数据库关于人工角膜材料的文献进行分析,可为中国从事人工角膜材料学基础研究和临床实施的医务工作者进一步确定科研思路提供有价值的参考。     

带蒂结膜瓣自体角膜缘干细胞移植术治疗翼状胬肉210例效果观察及护理

目的:探讨带蒂结膜瓣自体角膜缘干细胞移植术治疗翼状胬肉的效果及护理方法。方法:对210例翼状胬肉患者行带蒂结膜瓣自体角膜缘干细胞移植术,并对其实施完善、周密的护理。结果:本组患者植片愈合好,角膜创面光滑透明,无角膜新生血管形成,术后6个月内无复发及其它并发症,1年后复发者4例。结论:对翼状胬肉患者行带蒂结膜瓣自体角膜缘干细胞移植术,并给予术前安全管理、协助完善术前检查、充分的心理护理、术后细致的眼部护理、详尽的出院指导,可促进患者康复,取得满意效果。     

组织工程化人工角膜的临床应用：距离还有多远？

背景：人工角膜是取代混浊角膜组织而用异质成形材料制成的一种特殊屈光装置,通过手术植入患眼,以取得一定视力.目的：介绍近年来人工角膜研究进展.方法：由第一作者用计算机检索万方医学网和Medline database数据库,检索词分别为“人工角膜、角膜移植、生物相容性、组织工程”和“keratoprosthesis,corneal transplantation,biocompatibility,tissue engineering”,对人工角膜移植的动物实验、临床进展、植入方式及生物相容性、并发症等方面进行探讨.结果与结论：共检索到204篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入50篇文章.人工角膜的研制在近年来有了较大的进步,非组织工程化人工角膜在材料选择,处理和设计方式上有所创新,同时具有活性的组织工程化人工角膜的出现为人工角膜的研制开辟了一条新途径.     

免疫抑制剂用于角膜移植排斥反应的临床应用评价

背景:角膜移植免疫排斥反应是一个复杂的反应过程,一般包括宿主对异体组织抗原的致敏和宿主对异体组织抗原的反应两方面。角膜移植失败的主要原因是免疫排斥反应,有效地防治角膜移植术后免疫排斥反应的发生是眼科治疗中亟待解决的实际问题.目的:文章就目前有关免疫抑制剂在角膜移植免疫排斥反应中的应用作一数据分析。方法:通过计算机检索Scopus数据库中2002/2011有关免疫抑制剂在角膜移植免疫排斥反应中的应用的文献,检索词为"角膜移植(keratoplasty/corneal transplantation);免疫排斥反应(immunological rejection);免疫抑制剂(immunosuppressant);环孢素A(cyclosporine A,CsA);他克莫司(tacrolimus)或FK506;雷帕霉素(rapamycin,RAPA)",共检索文献192篇。结果与结论:免疫排斥反应的发生是多因素参与的复杂过程,尤其高度血管化的角膜、感染性角膜溃疡、重复移植等高危角膜病变,术后出现排斥反应的概率明显增加,排斥反应发生的时间也相对较早,而且时间跨度较长。角膜移植排斥反应是一个复杂的过程,其预防及治疗已取得了多方面的进展,但排斥反应仍是角膜移植失败的首要原因,所以,专家们在不断尝试应用新的药物和治疗措施改善角膜移植的存活率,其最终目标是使受体在保持正常免疫应答能力的情况下,诱导产生/建立供体特异性免疫耐受。免疫抑制剂在角膜移植排斥反应中的应用不可或缺。     

承德市5所医院不同科室医务人员对角膜移植与角膜捐献知识的问卷调查

背景:中国角膜供体匮乏的原因是国民的捐献观念落后,还是对角膜移植缺乏了解尚缺乏相关调查.目的:了解医务人员角膜移植认知度与角膜捐献意识现状.方法:以调查问卷形式对承德市5所医院不同科室820名医务人员进行问卷调查.包括医生、护士、医技人员及管理人员.问卷内容包括一般情况和对角膜移植认知情况及角膜捐献意愿.结果与结论:发放820份调查问卷,有效答卷805份.眼科医务工作人员回答正确率及愿意捐献角膜人数明显高于其他科室医务人员.提示需要通过各种各样的措施对医务人员进行角膜移植及捐献知识的培训,促使他们不断了解和认识角膜移植及捐献,从而加入到宣传角膜移植及角膜捐献队伍中来.     

大鼠穿透性角膜移植模型建立过程中的技术特征

背景大鼠角膜的主要组织相容性抗原的表达与人类角膜相似.早期实验证实大鼠作为穿透性角膜移植具有较好的重复性和可靠性,且移植手术难度比小鼠低.目的建立大鼠穿透性角膜移植模型,分析模型制作中并发症出现的原因及相应对策,探讨提高大鼠角膜移植模型成功率的方法.设计随机对照实验.单位华中科技大学同济医学院协和医院眼科.材料实验于2004-03/05在华中科技大学同济医学院协和医院眼科完成.选取远交系两月龄Wistar雌性大鼠76只,随机分为实验组和对照组,38只/组,无眼部疾病,清洁级,体质量180～200 g,右眼作为受体;SD雌性大鼠38只,双眼作为供体.全部动物均由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供.方法采用中心穿透性原位角膜移植术,均选择Wistar大鼠右眼建立模型.术前10min用美多丽滴眼两次,将右眼瞳孔充分扩大,达到4.0mm.按体质量3.0 mL/kg水合氯醛腹腔注射全麻,体积分数0.1地卡因滴眼液术前5 min点眼两次.大鼠头部常规消毒,保持鼠眼处于水平位置,保持大鼠呼吸道通畅.用有齿眼科镊夹持大鼠术眼后部,固定术眼使其处于半脱位状态.以3.5 mm直径环钻钻取SD大鼠双眼角膜作为植片,内皮面向上放入培养皿中,用质量浓度20g/L甲基纤维素覆盖备用.以3.0 mm直径环钻钻取Wistar大鼠右眼角膜作为植孔,立即将植片用10-0尼龙线间断缝合于Wistar大鼠右眼植孔,实验组角膜移植缝合8针,对照组角膜移植缝合6针.术后滴氧氟沙星眼药水,胶带粘贴术眼.观察角膜排斥反应,以混浊、水肿及新生血管3项指标进行评分,3项评分之和为当日排斥反应指数.当日排斥反应指数≥5或角膜浑浊达到3级时,视为排斥反应发生.运用x2和Fisher确切概率法进行统计学检验.主要观察指标①两组大鼠角膜移植后并发症发生比较.②角膜植片存活时间及角膜排斥反应.结果作为受体的76只Wistar大鼠中途脱落5只,其中实验组术后意外死亡1只,对照组术后意外死亡2只,互相撕咬伤及术眼角膜2只,淘汰后均及时补充,进入结果分析数量保持76只.①角膜移植后并发症发生比较实验组虹膜前粘连且瞳孔不圆、伤口闭合欠佳且前房不形成数量明显低于对照组(4,14只,P=0.007;2,9只,P=0.047).②角膜植片存活时间及角膜排斥反应实验组和对照组角膜植片存活时间基本接近[(8.9±2.3),(8.6±2.3)d,P＞0.05];角膜移植术后16 d,两组全部发生排斥反应,排斥反应发生率100%.结论在保留缝线、不加干预的情况下,大鼠角膜移植与人类角膜移植急性排斥反应相似.实验结果说明,大鼠3.5 mm植片对3.0mm植孔的角膜移植缝合8针,可以减低大鼠角膜移植的并发症,使其成为理想的角膜移植动物模型.熟练的显微操作技术,良好的手术器械,以及充分散大的瞳孔可以最大程度地减少大鼠术后并发症的发生.