浅蓝菌素诱发人结肠癌细胞凋亡的实验研究

目的　探讨脂肪酸合酶抑制剂———浅蓝菌素能否阻遏人结肠癌细胞增殖与诱发凋亡。方法　采用人结肠癌细胞系LoVo ,应用细胞形态学观察 ,噻唑蓝法 (MTT法 ) ,片断DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪等方法进行检测和观察。结果　LoVo细胞在浅蓝菌素作用下 ,细胞增殖被阻遏 ,并呈现剂量效应关系 ,浅蓝菌素浓度 10 -9～ 10 -5mol/L增殖抑制率由 ( 2 1.0± 15 .9) %到 ( 96 .3± 2 7) %(P <0 .0 5或 0 .0 1)。同时诱发细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质凝聚、边集或断裂。细胞DNA裂解片段呈典型的“阶梯状”排列的条带 ,流式细胞仪显示“凋亡”峰 ,细胞周期分析浅蓝菌素能阻滞肿瘤细胞从S期进入G2 M期 ,并诱导其细胞凋亡。浅蓝菌素对人成纤维细胞增殖无明显影响。结论　脂肪酸合酶抑制剂可能通过抑制LoVo细胞内源性脂肪酸合成 ,诱发细胞凋亡来阻遏LoVo细胞的增殖     

全反式维甲酸对人结肠癌LoVo细胞化疗药物敏感性及Survivin基因表达的影响

Objective To study the effects of all-trans-retinoic acid (ATRA) on chemotherapeutics sensibility and expression of Survivin in human LoVo colon cancer cell line, and to provide a theoretical basis for clinical application of ATRA.Methods Flow cytometer (FCM) was used to detect the cell cycle of LoVo colon cancer cell line after treated with various dose of ATRA (10-5 mol/L, 10-6 mol/L and 10-7 mol/L)for 24 h, 48 h, 72 h, 5 d, 9 d and 15 d respectively.The cells were divided into ATRA group (10-6 mol/L)and control group (cultured in routine medium RPMI1640).Meanwhile, each group were divided into subgroups respectively treated with 0 g/L, 2 g/L, 4 g/L and 6 g/L 5-fluorouracil(5-FU) , or with 0 mg/L, 200 mg/L, 400 mg/L and 600 mg/L mitomycin (MMC).MTT assay was used to detect the viability of cells so as to analyze the change in chemotherapeutics sensibility.Drug interactions were analyzed according to the interaction effects.Staining with acridine orange (AO) and ethidium bromide (EB) was used to study the apoptosis in control group(RPMI1640) , ATRA group (10-6 mol/L), 5-FU group (4 g/L), MMC group (400 mg/L), ATRA (10-6 mol/L) + 5-FU (4 g/L) group and ATRA (10-6 mol/L) + MMC (400 mg/L) group.The expression of Survivin in the LoVo cell line was investigated by immunofluorescence technique.Results Compared with the control group, the percentage of cell in Go-G1 phase increased after interference with various doses of ATRA for 24 hours, peaked at 48 h, and gradually decreased afterwards, while the percentage of cells in stages S and G2-M decreased, reach the trough at 48 h, and then increased gradually.Effects of 10-6 mol/L ATRA were most significant at all time spots.Compared with control group, 10-6 mol/L ATRA reduced cell survival rate (P＜0.05),and the survival rates in control subgroups treated with various doses of 5-FU were significantly higher than those in ATRA group (all P＜0.05).In MMC-treated control group, cell survival rate with 200 mg/L MMC was lower than that in ATRA group (0.72±0.02 vs 1.03±0.13, P＜0.05) , while treatment with 400 mg/L or 600 mg/L MMC did not result in lower cell survival compared with the ATRA group (0.52±0.05 vs 0.39±0.02, 0.36±0.02 vs 0.36±0.01, all P>0.05).Positive interactions of 10-6 mol/L ATRA with 5-FU (2 g/L, 4 g/L, 6 g/L) or MMC (200 mg/L, 400 mg/L) were found.Under fluorescence microscope, cells in ATRA + 5-FU group and ATRA + MMC group showed significantly small size, pyknosis and chromatin condensation and formation of apoptotic bodies when compared with control group, ATRA group, 5-FU group and MMC group.Expression of Survivin was inhibited after 10-6 mol/L ATRA treatment for 48 h compared with control group (33.33% vs 27.96% , P＜0.05).Conclusion ATRA enhances the chemosensibility of LoVo colon cancer cell line to 5-FU and MMC,and induces cell apoptosis, potentially through inhibition of Survivin gene expression.     

全反式维甲酸对不同增殖潜能的结肠癌细胞株HIF-1α表达的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对不同增殖结肠癌细胞系的生长抑制作用,以及对低氧诱导因子(HIF-1α)表达的抑制作用。方法:采用体外培养属于结肠癌DukesC期的HCT-8细胞和LOVO细胞,不同浓度的全反式维甲酸(ATRA)干预。利用MTT观察ATRA对结肠癌细胞系的生长,采用半定量RT-PCR和Western印迹检测ATRA干预后在低氧状态下结肠癌细胞中HIF-1α的表达。结果:全反式维甲酸(ATRA)对结肠癌细胞的增殖有抑制作用,对不同增殖能力的结肠癌细胞HIF-1α的表达量有抑制作用。结论:全反式维甲酸可以抑制结肠癌细胞的增殖,对结肠癌细胞HIF-1α的表达有明显的抑制作用。     

miR-340靶向Lgr5基因抑制结肠癌细胞增殖及β-catenin通路的研究

目的 研究miR-340靶向富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(Lgr5)基因抑制结肠癌细胞增殖及β-连环蛋白(β-catenin)通路的作用.方法 培养人结肠癌细胞株HT29、SW480、LoVo及正常肠上皮细胞HIEC,检测miR-340的表达水平;将SW480细胞分为miR-NC 组(转染miR-NC mimi...     

三氧化二砷诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡的细胞生物学研究

目的：观察三氧化二砷（As2O3)对结肠癌LoVo细胞体外生长的影响,方法：选用不同剂量As2O3处理LoVo细胞后,通过光镜,电镜,MTT法,AO／EB荧光染色法和流式细胞术研究AsO3对LoVo细胞生长的影响,结果：As2O3具有抑制Lo-Vo细胞生长和其凋亡的作用,这种作用主要在低浓度（0．5－2．0μmol/L)产生,而在高浓度（5．0－10．0μmol/L)可引起细胞死亡,结论：As2O3有明显抑制LoVo细胞生长的作用,并诱导细胞凋亡,其作用机制尚不清楚。     

5HRE和CEAp联合调控的TSST-1激活淋巴细胞特异杀伤CEA阳性肿瘤细胞

目的:研究5拷贝缺氧反应元件(5HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合调控的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)在缺氧环境下激活淋巴细胞对CEA阳性的结肠癌细胞株LoVo的杀伤作用。方法:用5HRE和CEAp构成基因表达调控元件,构建出以该元件调控跨膜型超抗原TSST-1-linker-CD80TM(TC)基因靶向表达的真核表达载体。用该载体转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LoVo及CEA阴性的人宫颈癌细胞株HeLa,利用G418筛选稳定转染的细胞。用RT-PCR检测TC融合基因的表达。分离健康人外周血淋巴细胞(PBL),用稳定转染TC的细胞裂解物进行PBL刺激实验;将PBL与稳定转染的细胞共培养,行淋巴细胞杀伤实验;MTT法检测TSST-1促PBL增殖和PBL对稳定转染细胞的杀伤效应。结果:成功筛选出稳定转染目的基因的单克隆LoVo细胞和HeLa细胞。RT-PCR证实单克隆LoVo细胞中TC在mRNA水平的表达,且缺氧环境中的表达量更高;单克隆HeLa细胞在常氧和缺氧条件下均无TC的表达。MTT法检测发现,缺氧环境下单克隆LoVo细胞表达的TSST-1能有效激活人PBL增殖,PBL剂量依赖性的抑制表达TSST-1的LoVo细胞的生长(P0.05);但HeLa细胞和野生型LoVo细胞不能刺激PBL增殖,PBL对其也无抑制作用。结论:5HRE和CEAp双重调控的超抗原TSST-1在体外缺氧环境下可激活人PBL特异杀伤CEA阳性肿瘤细胞。     

唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原在结直肠癌细胞系LoVo、HT29中的表达及其与转移潜能的相关性

目的　探讨唾液酸化的路易斯寡糖 X (SLeX)抗原的表达与结直肠癌转移潜能的相关性。方法　采用原位分子杂交技术 ,检测结直肠癌细胞表面SLeX抗原合成酶———α1,3岩藻糖转移酶 (α1,3Fuc T)在高、低转移性结直肠癌细胞系LoVo、HT2 9细胞内的mRNA水平的表达 ,并应用免疫组化LSAB法、流式细胞仪 ,从定性、定量两个方面直接检测SLeX抗原在LoVo、HT2 9细胞内蛋白水平的表达。结果　高转移能力的LoVo细胞SLeX抗原呈高水平表达 ( 32 .8± 10 .9,P <0 .0 5 ) ,SLeX抗原合成酶α1,3Fuc TmRNA也呈高水平表达 ( 2 1.2± 7.7,P <0 .0 5 ) ;低转移能力的HT2 9细胞低水平表达SLeX抗原 ( 2 1.9± 8.8) ,并低水平表达SLeX抗原合成酶α1,3Fuc TmRNA( 10 .8± 5 .2 )。结论　SLeX抗原表达与结直肠癌细胞转移潜能密切相关     

全反式维甲酸对人卵巢癌细胞cyclinD1和CDK4表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸 (ATRA)对人卵巢癌细胞增殖抑制作用及其与细胞周期调控因子cyclinD1和CDK4之间的关系。方法　选用人卵巢癌细胞株COC1进行体外培养 ,以不同浓度的ATRA处理COC1细胞 ,甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测细胞增殖抑制情况 ;流式细胞仪进行细胞周期时相分析 ;免疫细胞化学法测定细胞内cyclinD1和CDK4的表达。结果　A TRA浓度为 (10 -7～ 10 -5)mol/L时 ,均可明显抑制COC1细胞的增殖 (P <0 0 1) ,并具有时间 剂量依赖性。ATRA处理COC1细胞后G0 /G1期细胞增加 ,从 31 34%上升至 5 3 95 % ,S期细胞减少 ,从 5 8 5 0 %下降至 35 4 0 %。结果显示ATRA作用后 ,COC1细胞cyclinD1和CDK4蛋白表达减弱 ,且与细胞增殖指数 (PI)呈现负相关。结论　ATRA对人卵巢癌细胞株COC1具有明显的增殖抑制作用 ,可能是通过使细胞周期调控因子cyclinD1和CDK4蛋白表达减弱 ,将细胞阻滞于G0 /G1期实现的     

hp450RAI质粒转染对HL—60细胞功能及IFN—α表达的影响

目的探讨细胞内一种细胞色素 P45 0 (hp45 0 RAI,也称 CYP2 6 )表达、视黄酸 (RA)代谢与细胞增殖功能的相互关系。方法采用脂质体介导的质粒转染、流式细胞仪分析、逆转录 - PCR及高效液相色谱 (HPL C)分析等实验技术方法做有关分析研究。结果 12 .5× 10 - 7m ol/ L 全反式 RA(ATRA)处理 HL- 6 0细胞 3d未诱导明显的 hp45 0 RAI表达 ,脂质体介导的质粒转染可使 HL- 6 0细胞稳定表达 hp45 0 RAI;2单纯 hp45 0 RAI转染未对 HL- 6 0细胞 ATRA代谢及 ATRA诱导的 HL- 6 0细胞增殖抑制产生显著影响 ,而联合应用 P45 0酶抑制剂 Ketoconazole或 IFN- α则使 HL- 6 0细胞 ATRA代谢减慢 ,ATRA增殖抑制作用增强。结论 RA敏感 HL- 6 0细胞中影响 RA代谢的主要细胞色素 P45 0可能并非 hp45 0 RAI,P45 0酶抑制剂或IFN- α能协同 ATRA抑制细胞增殖 ,后者可能与 HL- 6 0细胞 ATRA代谢减慢及 IFN- α表达增强有关。     

23-羟基白桦酸诱导LoVo细胞凋亡与细胞内活性氧的关系

目的： 研究23-羟基白桦酸诱导人结肠癌细胞株LoVo细胞凋亡过程中活性氧（ROS）的变化及其作用机制。方法：光学显微镜法观察23-羟基白桦酸作用LoVo细胞后细胞形态学改变，并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞内ROS水平。结果：分别以浓度为25、50、100、200 μmol/L 23-羟基白桦酸作用LoVo细胞48h后，在光学显微镜下观察到明显的凋亡细胞形态学改变；经流式细胞仪检测，细胞凋亡率分别为(7.17±2.31)%、(15.60±4.02)%、(32.47±5.25)%及(52.71±5.93)%，呈现一定的浓度依赖性关系。23-羟基白桦酸可使 LoVo 细胞内ROS的水平明显高于空白对照组。细胞内ROS含量（MFI，平均荧光强度）分别为2.83±0.80、5.97±1.72、12.53±2.57及16.73±4.58。其中，浓度为100和200 μmol/L 23-羟基白桦酸的作用较明显，与对照组(2.13±0.32)比有显著差异（P<0.05）。结论：23-羟基白桦酸具有明显的诱导LoVo细胞凋亡作用，其作用机制可能与23-羟基白桦酸引起细胞内ROS水平增加有关。     

芸香苷逆转人大肠癌LoVo/5-氟尿嘧啶细胞耐药性及其机制

目的 探讨芸香苷（RT）对大肠癌耐药株LoVo/5-氟尿嘧啶（5-FU）细胞耐药性的影响及其机制。方法 采用浓度梯度递增法建立耐药株LoVo/5-FU细胞;用不同剂量的RT和（或）5-FU处理48 h后,采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,RT-PCR法检测P-糖蛋白（P-gp）和多药耐药相关蛋白1（MRP1）的mRNA表达水平,Western blotting法检测P-gp、MRP1、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、Akt、Survivin、细胞周期蛋白A（cyclin A）和细胞周期素依赖性蛋白激酶2（CDK2）的蛋白表达水平。结果 LoVo/5-FU细胞中P-gp、MRP1和Survivin蛋白表达水平均显著高于LoVo细胞;5-FU和RT对LoVo/-FU细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为21.77 mg/L和98.43 mg/L;在10 mg/L RT作用下,5-FU对LoVo/5-FU细胞的IC₅₀ 降至10.64 mg/L,逆转倍数为2.05;RT可协同增强5-FU引起的LoVo/5-FU细胞凋亡和S期阻滞,抑制P-gp和MRP1基因表达以及Akt磷酸化,下调Survivin、cyclin A和CDK2蛋白水平。结论 RT可通过抑制Akt信号通路以及耐药相关蛋白的表达反转LoVo/5-FU细胞对5-FU的耐药性。     

丙泊酚对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的:研究丙泊酚对结直肠癌细胞活力、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:10、25、50和100μmol/L的丙泊酚处理Lo Vo细胞72 h,或以100μmol/L的丙泊酚处理细胞12、24、48和72 h,CCK-8实验检测细胞活力;Transwell小室检测经100μmol/L丙泊酚处理72 h的细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率;Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、Notch1和发状分裂相关增强子1(Hes1)的蛋白表达。结果:丙泊酚可抑制结直肠癌细胞活力;丙泊酚组细胞侵袭能力、S期细胞及MMP-2、MMP-9、Notch1和Hes1蛋白表达均显著低于对照组,而细胞凋亡率、G0/G1期细胞及cleaved caspase-3的蛋白水平均显著高于对照组(P0.01)。结论:丙泊酚可抑制结直肠癌Lo Vo细胞生长及侵袭能力,阻滞细胞周期,并诱导细胞凋亡,其机制与下调Notch1信号通路有关。     

肝细胞生长因子激活胶原降解途径逆转心肌纤维化

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下新生大鼠心肌成纤维细胞胶原合成降解平衡的影响.方法 差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CF),并用细胞免疫组织化学进行鉴定.实验分为正常对照组(C组)、Ang II 10-6mol/L组(A组)、HGF 10μg,L+AngⅡ10-6 mol/L组(H1组)、HGF 100μg/L+AngⅡ 10-6 mol/L组(H2组).作用48 h后采用羟脯氨酸法测胶原蛋白含量,RT-PCR法测Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋ca酶抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达;Westernblotting 4col Ⅰ蛋白水平的表达.用Ⅰ型胶原酶活性检测试剂盒测MMP-1的活性.结果 作用48 h后,A组、H1组胶原蛋白含量较C组增加[(39.08±2.71)mg/L比(37.45±4.22)mg/L比(23.73±1.62)ms/L,均P＜0.05],H2组胶原蛋白含量(26.03±3.04)mg/L则低于A组、Hl组(P＜0.05),与C组差异无统计学意义.在mRNA水平上ColⅠ、col Ⅲ、TIMP-1的表达A组＞H1组＞H2组＞C组(均P＜0.05),而MMP-1 mRNA表达A组＜H1组＜H2组＜C组(均P＜0.05).Col Ⅰ蛋白水平A组＞H1组＞H2组＞C组(89.90±14.29比68.21±11.43比36.08±8.8比30.14±7.36,均P＜0.05).A组、H1组MMP-1 mRNA表达量及活性水平较C组明显降低(均P＜0.05),H2组则基本恢复到C组水平.结论 HGF主要通过激活胶原降解途径,重调MMP-1.TIMP-1平衡,逆转心肌纤维化.     

前列地尔辅助常规治疗冠心病不稳定型心绞痛的效果及对患者凝血功能的影响

目的 观察前列地尔辅助常规治疗冠心病不稳定型心绞痛 (UAP) 患者的临床效果及其对患者血管内皮损伤和凝血功能的影响。方法 选择我院2018年1月~4月收治的62例UAP患者,按照随机数字法分为研究组各对照组,各31例。对照组予以常规治疗,研究组在对照组的基础上联合前列地尔治疗。比较两组患者血浆ET、Hcy、纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体、血清基质金属蛋白酶（MMP-2）、肿瘤坏死因子（TNF-ɑ）、白细胞介素（IL-6、IL-8）及高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平。结果 治疗后,研究组血浆ET、Hcy以及血清MMP-9水平分别为（80.41±8.49）pg/ml、（13.91±1.58）μmol/L、（183.61±18.58）ng/ml,均低于对照组的（96.68±9.74）pg/ml、（16.26±1.74）μmol/L、（224.13±21.94）ng/ml,差异有统计学意义（P＜0.05）;研究组FIB和D-二聚体水平分别为（2.91±0.23）g/L、（0.36±0.08）mg/L,均低于对照组的（3.67±0.32）g/L、（0.63±0.09）mg/L,差异有统计学意义（P＜0.05）;研究组血清hs-CRP、TNF-ɑ、IL-6、IL-8水平分别为（2.58±0.31）mg/L、（2.46±0.17）μg/L、（76.21±7.49）ng/L、（16.21±1.69）ng/L,均低于对照组的（3.72±0.25）mg/L、（3.15±0.18）μg/L、（87.31±8.49）ng/L、（18.51±1.23）ng/L,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 UAP患者采用前列地尔辅助常规治疗可有效降低血管内皮损伤,缓解炎症反应,降低血液黏度,改善患者预后。     

褪黑激素对17—β—雌二醇诱致的大鼠垂体催乳素瘤细胞增殖的抑制作用

观察不同浓度的褪黑激素 (Melatonin ,MLT)对原代培养的大鼠垂体催乳素瘤细胞增殖的影响。用 80～10 0g体重的雄性Sprague Dawley(SD)大鼠 ,皮下埋置雌二醇诱致垂体催乳素瘤 (prolactinoma)形成后 ,取出瘤体 ,经消化、过滤、离心 ,用SFFD培养基重悬细胞 ,得细胞悬液 ,浓度为 0 75× 10 6/mL ,转入 2 4孔培养板中并加入相应剂量的MLT使其终浓度 (mol/L)分别为 10 -5、10 -7、10 -9、10 -11和 10 -13 ,另设空白对照组 ,于 37℃、5 %CO2 条件下培养 1h ,再在每孔中加入 2 μCi [3H] TdR继续孵育 2 4h后测counts/min值。结果显示 ,在对照组和各剂量 (mol/L)MLT用药组 10 -5,10 -7,10 -9,10 -11和 10 -13 的 [3H]-TdR掺入率分别为 2 0 38 75± 186 84,142 1 75±6 4 49,12 38 2 5± 6 1 72 ,92 4 0 0± 6 4 44 ,10 33 2 5± 12 7 2 2和 110 3 2 5± 15 1 5 3counts/min。表明 10 -5～10 -13mol/L的MLT能有效抑制 [3H] TdR在原代培养的垂体催乳素瘤细胞中的掺入 ,P <0 0 0 1。其中 ,以 10 -9mol/L的MLT的抑制作用最强 ,达 5 4 6 8%。提示在培养条件下 ,10 -5～ 10 -13 mol/LMLT能有效地抑制E2 诱导的垂体催乳素瘤细胞的增殖。     

半边莲生物碱抑制内皮素-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖

目的：探讨半边莲生物碱(LCLA)对内皮素-1（ET-1）诱导人脐动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制效应及其作用机制。 方法： 采用细胞计数、［3H］-TdR掺入、流式细胞术、免疫细胞化学染色及Fura-3/AM 荧光探针标记方法检测VSMC增殖；并用台盼蓝拒染、乳酸脱氢酶（LDH）检测方法观察LCLA对VSMC的毒性反应。 结果： LCLA(100、200和400 mg/L)、BQ-123(10-6mol/L)、ST(10-7mol/L)均抑制ET-1所诱导的VSMC增殖（均P＜0.05）：明显降低VSMC的细胞数目、［3H］-TdR掺入量、S期和G2/M期的数目百分比，增加G0/G1期的数目百分比；减弱细胞内增殖细胞核抗原（PCNA）的表达强度和Ca2+荧光强度；LCLA的抑制作用存在明显的剂量依赖关系，但对VSMC存活率和LDH释放量均没有影响。 结论： LCLA浓度依赖性地抑制ET-1所诱导的人脐动脉VSMC增殖，其机制与降低VSMC内Ca2+含量有关。     

Retinoic acid modulates IL-5 receptor expression and selectively inhibits eosinophil-basophil differentiation of hemopoietic progenitor cells

BACKGROUND: IL-5 plays a central role in eosinophil and basophil differentiation, exerting its effects through the IL-5 receptor (IL-5Ralpha). Currently, little is known concerning regulation of IL-5Ralpha expression in the context of commitment of hemopoietic progenitor cells to the eosinophil and basophil lineages. OBJECTIVE: Because all-trans retinoic acid (ATRA) is known to modulate some aspects of hemopoietic differentiation, we examined the effects of ATRA on eosinophil-basophil differentiation and IL-5Ralpha expression. METHODS: Progenitor cells were obtained from bone marrow aspirates and cord blood samples. Enriched populations of CD34(+) cells were isolated by means of positive immunomagnetic selection with MACS beads. RESULTS: In semisolid methylcellulose cultures of normal human bone marrow, ATRA (10(-6) mol/L) selectively suppressed eosinophil-basophil colony-forming units but had no effect on granulocyte-macrophage colony-forming units. Similarly, ATRA (10(-6) mol/L) inhibited eosinophil-basophil differentiation of cord blood CD34(+) cells in liquid culture, whereas neutrophil differentiation proceeded without impediment. Most importantly, these effects of ATRA (10(-8) to 10(-6) mol/L) on CD34(+) cells were associated with a dose-dependent inhibition of IL-5Ralpha but no change in GM-CSF receptor expression, as detected with flow cytometry. CONCLUSIONS: These findings indicate that retinoids can differentially regulate expression of IL-5Ralpha, but not GM-CSF receptor, and that these effects have functional consequences in vitro on eosinophil and basophil differentiation.     

Effect of endotoxin on the celluar activity and secretion of endothelin-1 in cultured human umbilical vein endothelial cells

Effect of endotoxin on the celluar activity and secretion of endothelin-1 in cultured human umbilical vein endothelial cells     

Ang-(1-7)与Mas结合促进NIT细胞分泌胰岛素

目的体外研究Ang-(1-7)对NIT细胞胰岛素分泌的影响及其潜在机制。方法将NIT细胞在不同浓度Ang-(1-7)(10-8～10-3mol/L)培养24 h,ELISA法检测NIT细胞对葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能。用RT-PCR法,从NIT细胞中扩增Mas、GLUT-2和TGF-β1基因的全长cDNA序列。将NIT细胞在10-5mol/L Ang-(1-7)条件下培养48 h,QRT-PCR方法检测NIT细胞Mas、GLUT-2及TGF-β1的mRNA表达,Western印迹方法测定NIT细胞Mas、GLUT-2及TGF-β1的蛋白表达。结果 NIT细胞系随着细胞外Ang-(1-7)浓度(10-8～10-3mol/L)的增加胰岛素分泌增加,10-5mol/L Ang-(1-7)组胰岛素分泌量为(8.86±0.53)mIU/L,显著高于对照组(8.06±0.39)mIU/L(P<0.05)。与对照组相比,经10-5mol/L Ang-(1-7)预处理的NIT细胞Mas及GLUT-2的mRNA和蛋白表达上调(P<0.05);相反,经10-5mol/L Ang-(1-7)预处理的NIT细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论Ang-(1-7)与Mas结合能够促进NIT细胞分泌胰岛素,这可能与提高NIT细胞摄取葡萄糖的能力、抑制纤维化进程等相关。     

绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用研究

目的：体外观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用,初步探讨EGCG治疗酒精性痴呆(alcohol-associated dementia,AAD)的可行性。方法：以SH-SY5Y神经元细胞为实验对象,酒精组给予100 mol/L酒精37℃培养24 h, EGCG+酒精组在其培养液中同时加入不同浓度的EGCG(1~100μmol/L)及100 mol/L酒精,37℃培养24 h;另设相同浓度的EGCG对照组(EGCG组)及空白对照组(对照组)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,以Annexin-V APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡及光镜下观察细胞形态。结果：MTT结果证实EGCG(25~100μmol/L)作用24 h后可明显促进SH-SY5Y细胞存活,并呈浓度依赖关系(P<0.001)。流式检测及细胞形态观察结果证实酒精组细胞凋亡率(21.82%±1.27%),明显高于对照组(4.90%±0.80%)(P<0.001)及EGCG组(7.82%±0.68%)(P<0.001);EGCG(100μmol/L)+酒精组细胞凋亡率(10.81%±0.31%),明显低于酒精组(P<0.001)。结论：EGCG可抑制酒精诱导SH-SY5Y细胞凋亡发生并促进细胞存活,提示EGCG对于AAD治疗具有潜在价值。