日本血吸虫病患者的特异性IgE抗体的测定

本文用ELISA法检测日本血吸虫病患者的特异性IgE抗体。50例急性、14例慢性患者血清均为阳性;40例晚期血吸虫病患者特异性IgE抗体的阳性率仅27.5％;77例健康献血员的假阳性率为1.2％。提示检测特异性IgE抗体有较高的敏感性和特异性。16例经吡喹酮治疗后3个月,12例粪检阴性者中7例IgE抗体转为阴性,4例粪检仍阳性者IgE抗体均为阳性:该16例的IgG抗体均为阳性。     

血吸虫病病人血清内IgE含量及其特异IgE抗体的定量测定

应用放射免疫吸附试验(RIST)定量测定了156例大部份为巴西流行区的曼氏血吸虫病病人的血清IgE浓度,77.5%(121例)的病人IgE量均有增加,21.8%(34例)的病人IgE浓度超过5,000免疫单位毫升。与Ito等(1972)报道在17例粪检阳性的日本血吸虫病病人中IgE浓度达70～5,000毫微克/毫升以及Kojima等(1972)在测定的60例日本血吸虫病成年病人中,80%的病人IgE量达150～16,000免疫单位毫升的试验     

曼氏血吸虫病人和无感染者血清免疫球蛋白浓度的比教

作者分别对有曼氏血吸虫病流行的圣卢西亚岛(发病率为30%)粪检曼氏血吸虫卵阳性的195人和无血吸虫病的圣文森特岛粪检阴性的139人进行免疫球蛋白的测定。两地均有一部分儿童感染钩虫、蛔虫和旋毛虫。试验分为5～9岁、10～14岁及成人3个年龄组。血清标本采用Melpar,法,在24孔的定量免疫扩散板上,用毛细微量滴管于每孔中加入3微升经0.145M氯化钠双倍稀释的试验血清,在5%醋酸内浸一会后测定IgG、IgM、IgA和IgD值,采用放射免疫分析法测定IgE值。同时,以同法测定了克利夫兰无曼氏血吸虫和其它肠道寄生虫感染的18名10～14岁儿童的血清标本。     

曼氏血吸虫或埃及血吸虫单感染与混合感染患者的IgG、IgE循环免疫复合物、血清总IgE及寄生虫相关IgE治疗后的变化

血清取自11例曼氏血吸虫单感染、10例埃及血吸虫单感染及37例曼氏、埃及血吸虫混合感染患者。所有患者均经metriphonate或羟氨喹治疗。对21例单感染患者中的12例于治疗后1～4月进行随访。 IgG循环免疫复合物(IgG-CIC)用2.5%PEG沉淀及~(125)碘标记的A蛋白孵育方法测定;IgE循环免疫复合物(IgE-CIC)用略加改良的Meretey氏等(1979)方法测定;血清总IgE用纸放射免疫吸附试验测定;对曼氏血吸虫、埃及血吸虫抗原的IgE抗体(血吸虫相     

McAb-RIHA检测日本血吸虫循环抗原

目的观察单克隆抗体反向间接红细胞凝集试验(McAb-RIHA)检测血吸虫循环抗原的敏感性和特异性。方法采用McAb-RIHA双盲法测定正常人与各种类型血吸虫病人血清,同时进行交叉反应与重复性试验。结果McAb-RIHA检测正常人血清,假阳性率为2.17%;对急性、慢性及晚期血吸虫病人阳性率分别为99.39%、84.00%、28.57%,与粪检阳性病人阳性符合率为84.00%。急性血吸虫病人体内循环抗原含量高于慢性血吸虫病人及晚期血吸虫病人,反应滴度的平均几何均数为慢性血吸虫病人的13.3倍,晚期血吸虫病人的36.4倍;而不同感染度的慢性血吸虫病人体内循环抗原的滴度与粪虫卵数无明显关系。结论McAb-RIHA检测日本血吸虫循环抗原有较好的敏感性和特异性     

日本血吸虫、班氏丝虫和钩虫感染者IgE的升高及血吸虫病治疗后IgE的变化

作者用放射性的单放射弥散一步法测定寄生虫感染者的IgE,发现感染日本血吸虫及钩虫的血清IgE水平均高。血吸虫病人的平均值为1,080毫微克/毫升,钩虫感染者为680毫微克/毫升,对照者的平均值为298毫微克/毫升。同时发现班氏丝虫感染者在血片中找到微丝蚴或皮试阳性者的血清IgE水平亦升高。血吸虫病人经过锑剂治疗后4     

日本血吸虫患者血清IgE值

在日本血吸虫病流行区山梨县的3个地区对39例居民用放射免疫方法进行血清IgE的测定,同时还进行汞碘醛浓集法粪便检查3次,酸溶性蛋白抗原皮内试验及鲜卵抗原环卵沉淀试验。39例中有19例粪便中查见虫卵,20例为他们的家族。5倒粪检、皮     

血浆IgE水平和埃及血吸虫感染

已经证明日本血吸虫感染引起人和黑猩猩IgE水平的增高。作者在冈比亚埃及血吸虫病的高流行区所进行的免疫球蛋白水平的研究进一步提供了血吸虫感染影响IgE水平的证据。相隔8个月的时间,从同一人群采集标本2次。用Billewicz等描述的放射琼脂扩散法,使用Rowe等提供的绵羊抗IgE和标准参考血清68/341测定IgE值。用过滤法检查尿中虫卵。75名年龄在30岁以上,尿液检查始终虫卵阳性或阴性的埃及血吸虫病感染者所获的结果如下:虫卵阳性的19人,IgE水平平均为4,300国际单位/毫升(IgE的平均对数值为3.63标准差0.42);虫卵阴性的56     

鄱阳湖区血吸虫病人免疫状态研究Ι血吸虫病人特异性同种型抗体特征分析

目的了解鄱阳湖区血吸虫病人特异性同种型抗体反应水平及特征。方法以可溶性虫卵抗原(SEA)和成虫抗原(AWA)为检测抗原,采用间接ELISA法检测血吸虫病流行区及非流行区人群血清中8种特异性同种型抗体(IgG、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgE、IgM、IgA)水平。结果血吸虫病流行区粪检阳性人群特异性同种型抗体水平显著高于流行区粪检阴性人群和非流行区人群(P均<0.001),流行区粪检阴性人群除SEA和AWA特异性IgG2、IgG4和抗AWA IgE抗体外,其他同种型抗体水平均显著高于非流行区人群(P均<0.05)。流行区粪检阳性人群中,儿童SEA、AWA特异性IgM和SEA IgG1水平显著高于成人,AWA特异性IgG水平则显著低于成人(F=6.136,P=0.014);男性除AWA特异性IgG(F=4.677,P=0.032)和IgG1(F=5.55,P=0.020)显著高于女性外,其他抗体同种型之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗3个月后,SEA抗原特异性IgG1、IgG3、IgG4抗体水平显著下降(P<0.001,P=0.029,P=0.044);治疗12个月后,除SEA特异性IgE、IgM和AWA IgG4、IgM外,其他抗体均显著低于治疗前水平(P均<0.05)。结论血吸虫病流行区粪检阳性人群血吸虫特异性同种型抗体水平显著高于流行区粪检阴性人群和非流行区人群,治疗12个月后,大部分同种型抗体水平显著下降;流行区粪检阴性人群血吸虫特异性抗体水平高于非流行区人群。抗体诊断试剂盒研制应注意阴性参考血清的选择。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血吸虫病患者的IgM及IgE抗体

最近证明在ELISA试验中联合使用血吸虫尾蚴和成虫抗原可以从血清学上区别急性或慢性血吸虫病患者。急性感染患者血清中对尾蚴抗原的IgG抗体多于成虫抗原,而在慢性感染患者则相反。IgM抗体的产生是宿主对许多急性感染反应的特征,蠕虫感染免疫反应的特征是IgE抗体的产生,因之作者探索ELISA试验对检测确诊为急性或慢性血吸虫病患者的特异性IgM及IgE抗体的用途,并对这些抗体水平和尾蚴/成虫     

赞比亚日本移民的血吸虫感染:人造湖可能成为感染来源

用微量ELISA对82名在赞比亚居住超过6个月的日本人进行血吸虫病的血清学检查,查到12名阳性病人。对这些阳性患者作进一步的实验室和临床检查,同时寻找可能的感染源。 12名血清学阳性病人的微量ELISA抗体滴度0.439—2.159;其中8人血清总IgE升高,嗜酸粒细胞均升高。粪检发现一人有曼氏血吸虫虫卵;尿检发现另一名有埃及血吸     

快速诊断家畜日本血吸虫病免疫层析试纸条的研制与初步应用

目的开发研制敏感、简便、快速、经济的日本血吸虫病诊断试纸条。方法利用双抗原夹心法,以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)为检测抗原,以胶体金标记SEA为探针,采用自行设计的免疫层析试纸条装置,检测家畜血清中血吸虫特异性IgG抗体,并用ELISA方法进行比较。结果用该试纸条检测107份人工感染血吸虫病羊血清,其检出率为91.6%;检测80份健康绵羊血清,阴性符合率为87.5%;检测20份粪检阳性水牛血清及15份粪检阴性血清,其阳性符合率为100.0%,阴性符合率为86.7%;检测24份肝片形吸虫病羊血清,交叉反应率为12.5%,与锥虫病牛血清未见交叉反应;与ELISA检测结果比较,两种方法具有良好的一致性。结论应用试纸条诊断家畜日本血吸虫病敏感性高、特异性强,且操作简便、快速,不需特殊仪器设备,适合于基层使用。     

一种人体IgE应答的日本血吸虫21.7kDa靶抗原的分子鉴定

疫苗开发仍然是控制血吸虫病的一项长期而重要的目标,已在不同动物模型和人体对保护性免疫应答识别的抗原鉴定方面进行了大量的研究。在自然接触疫水的人群中所作的一项纵向研究表明,抗可溶性成虫抗原(SWAP)的IgE滴度升高是与患者经吡喹酮治愈后对再感染的抵抗力相关。本文在鉴定具有潜力的抗人体日本血吸虫病的候选疫苗时,从176名受试者中选择了15名IgE/SWAP高应答者。在抗SWAP的IgE印迹试验中,这些受试者血清可识别多种抗原,包括22kDa范围的一种免疫显性双重带。当克隆这些抗原时,用混合的IgE抗血清筛选了一个日本血吸虫成虫cDNA文库λ-ZAP,从中鉴定出9个cDNA克隆。本研究报道了经     

McAb-Dot-ELISA检测牛日本血吸虫病血清循环抗原

目的 应用McAb-Dot-ELISA检测牛日本血吸虫病血清循环抗原并观察其与现场粪孵结果的符合情况。方法 用辣根过氧化物酶标记日本血吸虫单抗SSJ14；应用McAb-Dot-ELISA检测现场和实验室感染牛日本血吸虫血清循环抗原。结果 检验酶标单抗的特异性和敏感性显示该株单抗有较高的特异性和敏感性，用实验室感染血吸虫病的阳性牛血清及阴性血清检测有100％的符合率，检测现场采集血清的循环抗原的结果和粪孵结果对比，总符合率达到82．91％。结论 SSJ14单抗和由此研制的McAb-Dot-ELISA方法能应用于牛日本血吸虫病血清循环抗原的检测。     

用抗原序列标签法识别编码曼氏血吸虫抗原的基因

本文描述了一种用抗原序列标签(AST)识别编码曼氏血吸虫抗原基因的方法。 经临床及粪便检查从慢性血吸虫病病人中挑选出粪检曼氏血吸虫虫卵阳性的患者,收集治疗前的血清。经ELISA分析,从中选出17名含有抗曼氏血吸虫成虫抗原或虫卵抗原的高水平IgM患者的血清,混和后用亲和层析法纯化获得抗曼氏血吸虫成虫的免疫球蛋白,用于筛选曼氏血吸虫成虫λZAP cD-     

曼氏血吸虫诊断抗原(Sm31/32):在苏丹的血清流行病学研究

用曼氏血吸虫成虫抗原(Sm31/32),在苏丹一个曼氏血吸虫病(无埃及血吸虫病)流行村进行血清流行病学研究并与粪检作了比较。     

基于2-DE和蛋白质组技术筛选的日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶的表达及其诊断应用

目的扩增并表达日本血吸虫鸟氨酸氨基转移酶（SjOAT）,评价其在日本血吸虫病免疫诊断中的应用价值。方法构建pET28a／sjOAT质粒,转化至E．coli BL21,IPTG诱导表达;应用Ni^2＋亲和层析法纯化OAT;SDS-PAGE和Western blot分析、鉴定表达产物;应用ELISA法检测待检患者血清,比较SjOAT与日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）对血吸虫和其它寄生虫感染的检测结果。结果成功克隆表达了SjOAT,Western blot检测结果表明rSjOAT能被血吸虫病患者血清识别;以rSjOAT—ELISA和町SEA—ELISA分别检测急／慢性血吸虫病患者和其它寄生虫感染者血清的结果经校正χ^2检验,差异无统计学意义（P〉0．05）;对于正常对照者血清和疫区粪检阴性者血清,两种检测方法的特异性比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论rSjOAT在体外获得表达,用于诊断人血吸虫病具有高度敏感性和特异性。     

日本血吸虫特异性IgE相关抗原编码基因的克隆和鉴定

目的　从日本血吸虫成虫cDNA文库中筛选并克隆日本血吸虫特异性IgE相关抗原编码基因。　方法　用ABC ELISA法从日本血吸虫病流行区筛选出高水平抗血吸虫成虫抗原IgE抗体的个体 15人 ,采集血清并混合。混合血清经Protein G柱吸收后 ,用于日本血吸虫成虫cDNA文库的免疫学筛选。PCR扩增阳性克隆插入cDNA片段。序列分析后 ,于该序列第一开读框两端设计引物并分别引入EcoRⅠ和NotⅠ位点 ,PCR扩增并纯化目的基因片段后克隆入质粒载体pGME T ,再亚克隆入表达载体pGEX 6p 1。经IPTG诱导表达 ,对表达产物进行SDS PAGE和Westernblotting鉴定。　结果　阳性克隆插入片段约 12 0 0bp ,第一开读框长 5 0 7bp ,编码 16 9个氨基酸 ,理论分子量为 19 3kDa。DNA序列分析显示 ,与已知序列同源性小于 4 0 %。重组质粒pGEX 6p 1/Sj4 3B能高效表达融合蛋白 ,且能被日本血吸虫特异性IgE抗体识别。　结论　成功构建的重组质粒pGEX 6p 1/Sj4 3B ,Sj4 3B可编码日本血吸虫特异性IgE抗体相关抗原     

单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原的研究.Ⅰ.

将血吸虫肠相关阴极抗原的单克隆抗体3D8A联结过氧化物酶后用于直接法Dot-ELISA检测急性、慢性与晚期血吸虫病人血清中循环抗原,阳性率分别为90.6、83.2及30.7％。正常人血清及非寄生虫感染病人血清均未见阳性反应。EPG>100组血清阳性率及抗原水平高于EPG<100。慢性血吸虫病人经吡喹酮治疗后一年,粪检阴性者大部分血清抗原转为阴性;粪检阳性者血清检查仍为阳性。结果表明,肠相关阴极抗原单克隆抗体3D8A能用于Dot-ELISA检测各期病人血清中循环抗原,并能反映病人感染度与药物治疗效果。     

用抗日本血吸虫虫卵单克隆抗体NP28-5B检测循环抗原的研究

本研究使用杂交瘤技术制备鼠抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)单克隆抗体NP28-5B,其同型鉴定为IgGl,针对的靶抗原分子量为140kD。将酶标记单抗NP28-5B进行Dot-ELISA直接法检测急性患者血清100份和慢性血吸虫病患者血清200份中循环抗原,阳性率分别为96％和98％,检测正常人血清200份,仅3例假阳性(1.5％)。用双盲法检测血吸虫病流行区江西矶山岛居民血清339份,其中粪检阳性血清114份,阳性率为89.47％,粪检阴性血清225份,阳性率为69.33％,研究证明NP28-5B具有高度诊断潜能。