青年大肠癌微卫星不稳定检测在筛查HNPCC中的应用

目的 检测青年(年龄≤40岁)大肠癌中微卫星不稳定发生率,探讨其在遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)筛查中的作用.方法 选取73例中国南方青年大肠癌患者,运用显微切割技术准确获取结直肠癌组织和对应的正常肠黏膜组织,对5个微卫星位点进行不稳定性检测.结果 41(56.16%)例为微卫星高度不稳定,21(28.77%)例为微卫星低度不稳定,11(15.07%)例为微卫星稳定,微卫星高度不稳定发生率随着患者年龄的降低而迅速增加.结论 青年大肠癌微卫星不稳定分析能预测DNA错配修复基因变异发生情况,从而有效地进行HNPCC患者及家系的初步筛查.     

MMP-7和TIMP-2表达在遗传性非息肉病性大肠癌侵袭转移中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和组织抑制因子-2(TIMP-2)表达与遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)侵袭转移的关系.方法 应用免疫组化染色法检测遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)肿瘤组织石蜡标本30例、正常大肠黏膜石蜡标本28例.观察其MMP-7和TIMP-2表达的差异;并结合临床病理资料综合分析.结果 MMP-7和TIMP-2的表达与HNPCC 的性别、肿瘤大小和部位无关,而与肿瘤侵犯深度和转移密切相关;两组中MMP-7、TIMP-2的表达率差异显著;且MMP-7与TIMP-2表达呈负相关.结论 MMP-7和TIMP-2在遗传性非息肉病性大肠癌组织中的表达明显高于正常大肠黏膜组织;并且MMP-7和TIMP-2的表达和肿瘤的侵袭有关.     

中原地区遗传性非息肉病性大肠癌表型特征的临床研究

目的探讨中原地区遗传性非息肉病性大肠癌(HNPCC)的表型特征,为制订适合我国国情的HNPCC遴选标准提供依据。方法对符合Am sterdam标准的8个家系37例患者的临床资料(A组),与随机抽调我院40例确切无家族史的大肠癌患者的临床资料(B组)进行对比分析。结果①发病年龄:A组平均46岁,B组62.6岁,平均提前16.6年;<50岁者:A组73%(27/37),B组30%(12/40),两组比较P<0.01;第1、2、3代平均发病年龄分别为69.2、46.9、34.6岁,逐代比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。②发病部位:右半结肠A组73.2%(30/41),B组39.0%(16/41),两组比较P<0.05。③同时、异时多发大肠癌:A组8.1%(3/37),B组2.5%(1/40)。④大肠外癌:A组17.1%(7/41),B组0,两组比较P<0.05。⑤合并腺瘤:A组0,B组22.5%(9/40),两组比较P<0.05。⑥组织学类型:低分化腺癌A组69.7%(23/33),B组40%(16/40),两组比较P<0.05。结论中原地区HNPCC有其独特的临床特征,国际遴选标准不能完全适用于中国人,制定适合我国国情的HNPCC遴选标准确有必要。     

遗传性非息肉病性大肠癌5家系分析

目的提高对遗传性非息肉病性大肠癌（ＨＮＰＣＣ）本质的认识,了解其家庭易感性及聚集倾向。方法对５例 ＨＮＰＣＣ家系进行回顾性分析。结果ＨＮＰＣＣ的主要特点是常染色体显性遗传,病灶好发于右半结肠,伴发大肠以外器 官恶性肿瘤,发病年龄轻。结论应对ＨＮＰＣＣ患者及其家族严密监测、随访,以便早期诊断,合理治疗,改善预后。     

遗传性非息肉病性大肠癌和家族性腺瘤性息肉病腺瘤的预防性干预治疗

目的 探索非甾体抗炎药（NSAID）消退遗传性非息肉病性大肠癌（HNPCC）和家族性腺瘤性息肉病（FAP）结直肠腺瘤的有效性和安全性。方法6例HNPCC患者,口服赛来昔布400mg／d。18例符合FAP临床诊断的患者按照随机数字表随机分为2组：赛来昔布400mg组（8例,口服赛来昔布400mg／d）,赛来昔布200mg组（10例,口服赛来昔布200mg,／d）,服药观察24个月。另外4例FAP患者不愿接受赛来昔布治疗,改服肠溶阿司匹林80mg／d（阿司匹林组）。FAP患者以息肉数目描述治疗效果,HNPCC患者按照息肉级别描述治疗后息肉的变化。由专人负责肠镜复查,第1年每3个月复查肠镜1次,第2年每6个月复查肠镜1次。结果两种剂量的赛来昔布均有消退FAP结肠腺瘤作用,服药9个月后400mg组腺瘤消退的比率为86．69％（280／323）,200mg组腺瘤消退比率为51．81％（129／249）,两组比率的差异有统计学意义。4例FAP患者服用80mg肠溶阿司匹林9个月后,37．89％（36／95）的腺瘤消退,5例HNPCC腺瘤患者治疗9个月后腺瘤消失。无论是FAP还是HNPCC结肠腺瘤,服用大剂量（400mg）药物,时间超过6个月时,14例患者中有7例发生不良反应;当减少药物剂量或换用阿司匹林后,不良反应均可逆转。赛来昔布200mg组,治疗期间无不良反应发生。结论NASID是FAP和HNPCC腺瘤干预性治疗的有效药物;赛来昔布400mg／d疗效好,但不良反应较大,国人可先以200mg／d长期治疗或400mg／d治疗6个月后以200mg／d维持;肠溶阿司匹林也有类似效果。     

遗传性非息肉病性结直肠癌患者hMLH1和hMSH2基因的突变规律

目的 探讨中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)患者hMLH1与hMSH2基因的突变特点.方法 对76个HNPCC家系先证者的DNA样本用PCR法扩增其hMLH1与hMSH2基因的35个外显子,再进行测序以确定突变类型.结果 (1)25个样本发现hMLH1或hMSH2基因突变,总突变率为33%(25/76);(2)检测到的22种突变中:hMLH1基因突变16个,hMSH2基因突变6个;(3)突变类型包括移码突变、无义突变、剪接区突变、错义突变,其中错义突变较多见(hMLH1基因错义突变11个、hMSH2基因5个).结论 中国人HNPCC家系hMLH1和hMSH2突变谱广泛,突变类型多样,hMLH1突变较hMSH2突变多见.     

hMSH2蛋白表达缺失在筛选遗传性非息肉病性大肠癌中的意义

目的　探讨hMSH2蛋白表达缺失在筛选遗传性非息肉病性大肠癌中的作用及其意义。方法　对收集的166例石蜡包埋的疑似遗传性非息肉病性大肠癌组织进行hMSH2蛋白免疫组化染色。结果　hMSH2蛋白表达阴性 ( 0分 ) 3 5例 ,占 2 1 1% ,阳性 ( 1～ 4分 ) 12 6例 ,占 75 9%。在右半、左半结肠和直肠表达缺失率分别为 3 3 3 % ( 15 / 45 ) ,15 4% ( 6/ 3 9)和 18 2 % ( 14 / 77)。右半结肠癌的表达缺失明显高于左半结肠癌 (P <0 0 5 )和直肠癌 (P <0 0 5 )。结论　hMSH2蛋白免疫组化染色做为一个简单易行的方法在今后检测和确定遗传性非息肉病性大肠癌中将发挥重要作用。     

遗传性非息肉病性结直肠癌患者的临床特点及hMSH2与hMLH1种系突变的筛查

目的　分析我国遗传性非息肉性结直肠癌 (HNPCC)患者的临床特点 ,报告hMSH2和hMLH1基因突变筛查结果。方法　共收集了 2 8个家系 ,其中 15个家系符合阿姆斯特丹Ⅰ标准 ,13个家系符合日本临床诊断标准。记录的数据包括患者性别 ,结直肠癌发生的部位 ,诊断年龄 ,是否具有同时和 /或异时结直肠癌及结肠外癌 ,肿瘤的组织病理特点等。通过PCR及变性高效液相色谱分析(DHPLC)筛查hMSH2和hMLH1基因的突变 ,然后对DHPLC图形异常的样本进行测序。结果　 12 6例患者共诊断 170例次恶性肿瘤 (2 3例患有多原发癌 )。 98例 (77 8% )的患者患有结直肠癌 ,且发病年龄早 (平均 4 5 9岁 ) ,右侧癌多见。共在 12个家系中发现 8种hMSH2或hMLH1基因序列改变 ,其中hMSH2基因的第 3个外显子的无义突变即G2 0 4X是发现的首例我国蒙古族家系错配修复 (MMR)基因突变。结论　HNPCC患者是恶性肿瘤 (尤其是结直肠癌 )的高发人群。DHPLC是一种非常有效的筛选hMSH2和hMLH1基因突变的方法。在我国hMLH1基因尤其是其前九个外显子的突变较hMSH2基因的突变更常见。     

遗传性非息肉病性结直肠癌中环氧合酶2的表达及与错配修复基因表达和微卫星不稳定的相关性

目的 探讨遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)腺瘤及癌组织中环氧合酶2(COX-2)的表达及其与错配修复(MMR)基因蛋白表达、微卫星不稳定(MSI)之间的关系.方法 来源于33个HNPCC家系的大肠腺瘤28例、大肠癌14例,随机留取经病理确诊的32例散发大肠腺瘤和24例散发大肠癌标本作为对照;采用免疫组织化学和PCR技术,检测腺瘤及癌组织中COX-2、MMR基因(hMLH1、hMSH2、hMSH6)蛋白表达及BAT-25、BAT-26、D2S123、D5S346、D17S250 5个微卫星位点的MSI状态.结果 COX-2在HNPCC腺瘤及癌组织中高表达率分别为53.6%(15/28)、42.9%(6/14),在散发大肠腺瘤和大肠癌中高表达率分别为62.5%(20/32)、91.7%(22/24),HNPCC癌组织中的COX-2表达明显低于散发大肠癌(P＜0.05).HNPCC大肠癌中MMR蛋白表达缺失率、高度微卫星不稳定(MSI-H)发生率[均为71.4%(10/14)]明显高于散发大肠癌[均为12.5%(3/24),均P＜0.05].10例MMR蛋白表达缺失的HNPCC大肠癌中,8例为COX-2低表达;4例MMR蛋白表达阳性的HNPCC大肠癌全部为COX-2高表达.在MMR表达缺失的HNPCC大肠癌、HNPCC腺瘤、散发大肠癌中COX-2的表达均显著少于MMR表达阳性者(均P＜0.05).MSI-H的HNPCC大肠癌、HNPCC大肠腺瘤、散发大肠癌中COX-2低表达率分别为80.0%(8/10)、66.7%(12/18)、66.7%(2/3);与微卫星稳定(MSS)组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 与散发性大肠癌相比,COX-2在HNPCC大肠癌组织中表达明显减少;COX-2在大肠腺瘤及癌组织中的表达率与MMR蛋白表达缺失和MSI-H呈明显的负相关;COX-2、MMR蛋白表达、MSI的检测对于进一步研究大肠肿瘤的发病途径及干预治疗具有重要意义.     

遗传性非息肉病性结直肠癌家系内在特性量化描述方法学的探讨

目的探讨描述遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）家系内在特性的量化方法学。方法将不同来源的符合Amsterdam标准（AC）Ⅰ或Ⅱ的HNPCC家系按照年龄和结直肠癌构成比分组,采用自定义的量化参数与家系内恶性肿瘤累及世代数、患者例数、家系类型等描述HNPCC临床表型。结果家系首发恶性肿瘤中位诊断年龄（FMA-DFMT）和家系首发结直肠癌（CRC）中位诊断年龄（FMA-DFCRC）均为非正态分布;在符合ACⅠ的HNPCC家系中,大部分家系的FMA-DFMT、FMA-DFCRC为35～50岁,分别占73．6％（39／53）、69．8％（37／53）,中位数分别为44．0岁和43．5岁;家系首发恶性肿瘤中CRC构成比（FPCRC-FMT）、家系结直肠癌患者构成比（FP．CRCP）小于0．6的家系分别占13．2％（7／53）、7．5％（4／53）;FMA-DFMT、FMA—DFCRC与患者例数、累及世代数、家系类型、FPCRC-FMT、FP-CRCP等参数之间均无相关性（均P〉0．05）。结论与传统方法相比较,应用量化参数能更准确地描述HNPCC家系的临床表型特点。     

Clinical features and hMSH2/hMLH1 germ-line mutations in Chinese patients with hereditary nonpolyposis colorectal cancer

Background At least five mismatch repair （MMR） genes, including hMSH2, hMLH1, hPMS, hPMS2, and hMSH6/GTBP, are associated with hereditary nonpolyposis colorectal cancer （HNPCC）. More than 90% of families with HNPCC harbor the hMSH2and hMLH1 gene mutations. We have analyzed the clinical features of HNPCC among Chinese patients and report the results of screening for mutations in the hMSH2 and hMLH1 genes.
Methods The data concerning gender, site of colorectal cancer （CRC）, age at diagnosis, history of synchronous and/or metachronous colorectal cancer, instance of extracolonic cancers, and histopathology of tumors for 126 patients from 28 independent families with HNPCC were collected. Fifteen of the families met the Amsterdam I criteria, and 13 met the Japanese clinical criteria for diagnosis. Genomic DNA was extracted from the peripheral lymphocytes. Polymerase chain reaction （PCR） and denaturing high-performance liquid chromatography （DHPLC） were used to screen the coding region of the hMSH2 and hMLH1 genes. Samples showing abnormal DHPLC profiles were sequenced.
Results One hundred and seventy malignant neoplasms were found in the 126 patients, of whom 23 had multiple cancers. Ninety-eight of the patients （77.8%） had colorectal cancers, with an average age at onset of 45.9 years and a right-sided predominance. Eight hMSH2 or hMLH1 gene sequence variations were found in 12 families, and a germ-line G204X nonsense mutation in the third exon of hMSH2 was found, representing the first mutation in an MMR gene ever found in people of Chinese Mongolian ethnicity.
Conclusions HNPCC is a typical autosomally dominant hereditary disease, characterized by early onset, a predominance of proximal colorectal cancer, and multiple synchronous and metachronous colorectal cancers. DHPLC is a powerful tool for detecting mutations in the hMSH2 and hMLH1 genes, Mutations in the first nine exons of the hMLH1 gene were more common in Chinese patients.     

可疑遗传性非息肉病性结直肠癌的hMLH1和hMSH2基因突变研究

目的比较分析符合国际诊断标准的遗传性非息肉病性结直肠癌（ＩＣＧＨＮＰＣＣ）家系和提出的可疑ＨＮＰＣＣ家系的分子特征的异同,建立可疑ＨＮＰＣＣ诊断标准并评价其应用价值。方法根据ＡｍｓｔｅｒｄａｍＨＮＰＣＣ诊断标准和作者提出的可疑ＨＮＰＣＣ诊断标准,分别收集得到２９个ＩＣＧ家系和３４个可疑家系。提取先证者的外周血基因组ＤＮＡ,应用ＰＣＲＳＳＣＰ和ＤＮＡ测序的方法进行ｈＭＬＨ１和ｈＭＳＨ２基因的突变筛选。结果２９个ＩＣＧ家系中有９个家系被检出含有ｈＭＬＨ１基因的种系突变,突变率为３１０％;３４个可疑家系中有１０个家系被检出含有ｈＭＬＨ１或ｈＭＳＨ２基因的突变,两个基因的突变率分别为２３５％和５９％。ＩＣＧ组和可疑组中两个基因总突变率之间差异无显著意义（Ｐ＞００５）。ｈＭＬＨ１基因同是两组家系中的主要相关基因。两组家系中,突变均较一致地分布于基因的后半部分,突变类型也极为相似,均以导致短缩蛋白的突变最为常见。结论ＩＣＧ组和可疑组在遗传背景上有着相似之处,对ＨＮＰＣＣ诊断标准有一定的临床应用价值,有助于ＨＮＰＣＣ家系的临床诊断。     

Clinical and genetic features of International Collaborative Group-hereditary nonpolyposis colorectal cancer families and suspected hereditary nonpolyposis colorectal cancer families

Background Hereditary nonpolyposis colorectal cancer (HNPPC) is one of the most common genetic syndrome related with mutation of human mismatch repair genes. This study was to evaluate the clinical significance of suspected hereditary nonpolyposis colorectal cancer (sHNPCC) criteria I and the clinical and genetic features of International Collaborative Group-HNPCC (ICG-HNPCC) and sHNPCC families.
Methods Twenty-nine ICG-HNPCC families fulfilling the Amsterdam criteria and 34 sHNPCC families fulfilling the sHNPCC criteria I were collected. PCR-SSCP and DNA sequencing analysis were employed to screen the germline mutations of the hMLH1 and hMSH2 genes in these families.
Results The ICG group had more colorectal cancer (CRC) patients per family than did the suspected group (P<0.05). No statistical difference was observed in Lynch classification and familial tumor spectrum. In both groups of families, colorectal cancer was the most frequent malignancy, and carcinomas of the stomach, pancreas and uterus were the three most common extracolonic malignancies. Mutation screening showed that ICG-HNPCC and sHNPCC families had a similar mutation rate (31.0% vs 29.4%, P>0.05), mutation type, and mutation distribution. Comparison of the families with and without mutation showed no significant difference in CRC patients per family, Lynch classification, and tumor spectrum.
Conclusions ICG-HNPCC and sHNPCC families that have similar clinical manifestations and genetic basis indicate a similar nature for cancer development. The application of sHNPCC criteria I will facilitate clinical diagnosis and treatment of small families.
     

中国人遗传性非息肉病性结直肠癌相关肿瘤谱及累计发病风险

目的:探讨中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)相关肿瘤谱和累计发病风险,为制定HNPCC诊治方案提供依据.方法:随访31个HNPCC家系中167例肿瘤患者,以Kaplan-Meier生存曲线法估计各种肿瘤发生比例和累计发病风险.结果:167例HNPCC相关肿瘤患者的首发肿瘤中,结直肠癌135例(80.8%),胃癌10例(6.0%),子宫内膜癌8例(4.8%),卵巢癌3例(1.8%),膀胱癌、乳腺癌、肺癌和脑胶质瘤各2例(分别占1.2%),肝癌、胰腺癌和胆囊癌各1例(分别占0.6%).70岁时,大肠癌发生累计发病风险为93.3%,肠外肿瘤发生累计发病风险为56.1%.结论:中国人HNPCC肿瘤谱中,胃癌发生率较高;40～60岁大肠癌发生风险最大,50岁后肠外肿瘤发生风险明显增加.     

遗传性非息肉病性大肠癌临床表型分析

目的 探讨我国遗传性非息肉病性大肠癌（HNPCC）患者的临床表型,为临床辨认HNPCC家系提供依据。方法 选择符合阿姆期特丹Ⅱ和日本的HNPCC标准的34个HNPCC家系为研究对象。研究发病的一般规律：（1）确诊时的年龄和性别;（2）绘出家系图;（3）肿瘤发生的部位（包括肠外癌）;（4）同时多原发结肠癌;（5）异时多原发结肠癌;（6）临床表现。结果 （1）34个家系中,18岁以上的家族成员共612人,确诊HNPCC的患者140例,女性47例,男性93例。（2）34个家系均为常染色体显性遗传。（3）确诊时的中位年龄为45．3岁,50岁以前发病者占62．1％,60岁以前发病者占87．1％;（4）154个原发癌灶中,肠外癌灶31个（20．1％）,其中胃癌占肠外癌的41．9％（13／31）,大肠癌灶123个（79．9％）。116例大肠癌患者中,右半结肠癌占66．4％（77／116）,左半结肠癌占33．6％（39／116）。（5）同时多原发癌5例,其中2例为3次多原发癌,3例为2次多原发癌;异时多原发癌6例（含肠外癌）。结论 本组HNPCC的临床特点为（1）发病年龄比西方患者更年轻;（2）右半结肠癌的比例高;（3）大肠癌的垂直传递特征突出;（4）肠外癌以胃癌比例较大;（5）同时原发癌和异时原发癌较多。     

遗传性非息肉病性结直肠癌8个家系临床及病理分析

目的分析遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）家系临床及病理特点。方法收集符合Amsterdam标准Ⅱ的8例HNPCC家系资料,绘制家系图谱。结果HNPCC发病率为1.59%,8个HNPCC家系总发病人数为31例,其中结直肠癌患者为25例,肠外相关肿瘤6例,8例先证者中6例为女性,2例为男性,4例发病年龄小于40岁,发病部位位于右半结肠为2例,左半结肠3例,直肠3例,组织学分型以中至低分化腺癌为主;均未出现淋巴结及远处转移;8例先证者错配修复（MMR）蛋白表达异常的为5例。结论HNPCC先证者发病年龄轻,组织学分型较好,家系成员发病率高,对其家族成员进行定期检查和及时治疗将能有效地预防其发生并降低死亡率;MMR基因突变检测对提高HNPCC的诊断起重要作用。     

无hMLH1/hMSH2生殖系突变的遗传性非息肉病性结直肠癌3家系报道

目的:考察遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系hMLH1/hMSH2生殖系突变的情况.方法:选择13个符合Amsterdam标准的HNPCC家系中的先证者,利用DNA 测序检测hMLH1/hMSH2基因突变情况.对其中不携带hMLH1/hMSH2生殖系突变的HNPCC 家系,利用免疫组化检测hMLH1/hMSH2基因表达、PCR-SSCP检测先证者肿瘤组织的微卫星不稳定性(MSI).结果:13个HNPCC家系的先证者中有3例检测不到hMLH1/hMSH2的生殖系突变.3例无hMLH1/hMSH2突变的先证者中,肿瘤组织的微卫星不稳定检测均为MSI-H,免疫组化检测hMLH1/hMSH2基因表达正常.结论:3个严格符合Amsterdam标准的HNPCC家系中未发现hMLH1/hMSH2基因系突变,提示可能存在其他基因突变导致该3个家系HNPCC肿瘤发生.