血管内皮生长因子与血小板反应蛋白在肾间质纤维化中的表达研究

目的探讨肾病患者血管内皮生长因子（VEGF）与血小板反应蛋白（TSP）在肾间质纤维化中的阳性表达情况及其与CD34、CD40的相关性。方法选取本院2011年5月至2013年5月收治的不同类型肾病患者96例为研究对象,根据患者肾脏受损程度将其分为轻度损伤组38例,中度损伤组32例和重度损伤组26例,并选取30例健康体检者为对照组,分别应用免疫组化法对各组患者的VEGF、TSP、CD34、CD40阳性表达情况进行分析。结果 VEGF表达位置主要集中在足突细胞浆及肾小管上皮细胞中,TSP主要在肾小管上皮细胞浆中表达,在正常组织细胞中无阳性表达,CD34及CD40主要在肾小管周围毛细血管内皮细胞中表达。随着患者病情增加,TSP、CD40阳性表达率显著增加,而VEGF、CD34则显著减少,差异均有统计学意义（P〈0.05）。经单因素分析显示,TSP、CD40分别与肾间质纤维程度呈正相关,而VEGF、CD34与肾间质纤维化程度呈负相关。结论 TSP在肾质区及肾小管上皮细胞中表达的增强及VEGF在足细胞及肾小管上皮细胞中表达的减弱可能是引起肾间质纤维化发生及发展的重要因素。     

血管内皮生长因子在肾疾病中的表达及意义

血管内皮生长因子(VEGF)是一种促进血管内皮生长及渗透的因子,具有增加血管通透性、促进内皮细胞增殖及血管维持功能。检测VEGF的表达,对探讨肾脏疾病的发病机制、观察病情进展、指导临床治疗及判断预后有重要意义。     

丹参对大鼠肾问质纤维化肾组织TSP-1、VEGF及TGF-β1表达的影响

目的观察丹参提取液对肾纤维化模型大鼠肾组织血小板反应蛋白1（TSP-1）、血管内皮生长因子（VEGF）及转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法用单侧输尿管结扎方法复制大鼠肾纤维化模型,同时给予丹参提取液灌胃预防,并设立空白对照组、模型对照组,分别于造模2周后取大鼠肾脏组织,分别采用Masson染色观察各组大鼠肾组织病理变化,并采用免疫组织化学方法测定肾间质TSP-1、VEGF、TGF-β1的表达。结果丹参组VEGF表达明显增加,而TSP-1和TGF-β1的表达量明显低于模型组（P〈0．05）;丹参组和空白组比较,二者对TSP-1、TGF-β1及VEGF表达的影响无显著差异（P〉0．05）。结论丹参提取液可能通过调控TSP-1、TGF-β1及VEGF的表达,从而干预肾纤维化的发生。     

血浆凝血酶敏感蛋白-1在肾间质纤维化中的表达

目的：观察不同时间点血浆凝血酶敏感蛋白-1（TSP-1）在蛋白超负荷肾病大鼠中的表达,分析其与肾小管间质纤维化的关系。方法：45只雄性SD大鼠右肾切除后,随机分成牛血清蛋白（BSA）组和对照组,BSA组大鼠予以腹腔注射牛血清白蛋白,对照组注射生理盐水。分别在第1,5,9周末,检测血常规及生化指标,各时相尿蛋白定量;肾组织行光镜、免疫荧光及电镜检查。采用免疫印迹法检测血浆TSP-1蛋白表达。分析血浆TSP-1表达与肾小管间质病理损害积分之间的相关性。结果：BSA组大鼠24 h尿蛋白定量和肾功能均较对照组有明显差异;肾小管间质病理积分和肾小球硬化指数明显增高;IgG荧光强度明显高于对照组;与对照组比较,BSA组大鼠血浆TSP-1蛋白均明显增高。BSA组血浆TSP-1的蛋白表达水平与肾小管间质病理积分呈正相关（r=0.836,P<0.01）。结论：血浆TSP-1与肾间质纤维化呈正相关,血浆TSP-1可能是临床判断肾间质纤维化程度的重要指标。     

血管内皮生长因子及其受体蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）及其受体蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义.方法：采用免疫组化法对60例乳腺癌、12例良性乳腺病变组织中VEGF及其受体FLT-1的表达进行检测,探讨其与微血管密度（MVD）、PCNA蛋白及临床病理因素之间的相关性.结果：乳腺癌和良性乳腺组织中VEGF评分分别为8（6～9）分和3（2.25～4.00）分,乳腺癌中表达水平明显升高（P=0.000）;乳腺癌组织中血管内皮细胞FLT-1表达阳性率为58.3%,高于良性乳腺组织（25%）（P=0.035）,一些乳腺癌细胞也有不同程度FLT-1表达.乳腺癌组织中VEGF与FLT-1表达相关（r=0.311,P=0.016）,两者都与MVD相关（r=0.371,P=0.004;r=0.313,P=0.015）;乳腺癌组织中VEGF表达与PCNA相关（r=0.353,P=0.006）.乳腺癌组织中VEGF、FLT-1表达与患者年龄、肿块大小、淋巴结转移状况、肿瘤分期、雌、孕激素受体状况之间无明显相关性.结论：乳腺癌组织中VEGF、FLT-1蛋白表达水平升高,且与MVD相关,提示它们在乳腺癌血管生成中起重要作用,乳腺癌组织中VEGF表达与PCNA相关,提示高表达VEGF的肿瘤细胞增殖性较强.另外,发现一些乳腺癌细胞也有不同程度FLT-1表达,提示VEGF、FLT-1在乳腺癌生长中起自分泌调节作用.     

血管内皮生长因子在肾病中的意义

血管内皮生长因子(VEGF)是内皮细胞的增殖存活因子,能保护内皮组织、刺激血管生成。VEGF能在肾脏中表达,并且在肾脏正常生理功能和病理过程中均起重要作用,适当调节内皮生长因子在肾小球的表达可能是今后治疗肾小球疾病的一种方法。     

肝细胞生长因子在大鼠肾间质纤维化中作用机制的研究

目的：通过观察大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)后，肝细胞生长因子(HGF)的表达及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)之间的动态变化关系，以探讨HGF在肾间质纤维化中的作用机制。方法：将36只雄性SD大鼠中的18只行左侧输尿管结扎术，另外18只行假手术。于术后第3、7、14天分别处死各组中的6只大鼠，用免疫组化方法测定HGF、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及纤维粘连蛋白(FN)的表达，并行苏木精-伊红(H—E)和Masson染色，动态观察肾的病理学改变。结果：在肾间质纤维化早期，肾HGF表达明显增加而TGF-β1表达却明显下降；在肾间质纤维化晚期，肾HGF表达明显下降而TGF-β1表达却明显上升，同时α-SMA和FN的表达明显增强，肾的病理改变明显，而且HGF表达与TGF-β1、α-SMA及FN表达呈明显负相关。结论：HGF可能是肾间质纤维化进程中重要的调节因子，它与TGF-β1相互作用，共同调节肾间质纤维化的发生和发展。     

宫颈鳞癌组织中血管内皮生长因子受体-2、血小板反应蛋白-1及微血管密度检测

新生血管为肿瘤组织供应氧和营养物质,与肿瘤的生长转移密切相关.血管内皮生长因子(vas-cular endothelial growth factor,VEGF)和血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)分别是目前已知的作用较强的诱导和抑制血管生成的因子,而血管内皮生长因子受体-2(kinase insert domain containing receptor-2,KDR)是VEGF发挥主要功能的受体[1].作者采用免疫组化SP法检测宫颈鳞癌组织中KDR与TSP-1蛋白的表达以及微血管密度(MVD),探讨KDR、TSP-1与宫颈鳞癌发生发展及血管生成的关系.     

上皮间质转化和内皮间质转化在肾纤维化中的研究进展

上皮间质转化（EMT）和内皮间质转化（EndMT）参与各种纤维化疾病的发病机制,EMT和EndMT已经成为器官纤维化研究的一个重点课题。EMT和EndMT在肾的纤维化过程中起到至关重要的作用。越来越多细胞内外分子可控制EMT和EndMT的表达,尤其是microRNA（miRNA）在EMT和EndMT中的调控作用,已被确定可利用于开发治疗纤维化。本文综述了EMT和EndMT在肾纤维化中的研究进展,了解EMT和EndMT参与肾病纤维化过程的机制,这将会给人类肾纤维化疾病的治疗提供一种新的靶点和方法。     

血管内皮生长因子和bcl-2在肾母细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨细胞凋亡抑制基因B-淋巴瘤细胞-2(B-cell lymphoma/leuke mia-2,bcl-2)血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾母细胞瘤中的表达及其相互关系.方法:用免疫组织化学和原位杂交方法研究bcl-2和VEGF蛋白及mRNA在17例肾母细胞瘤和7例瘤旁正常肾组织的表达.结果:bcl-2蛋白在肾母细胞瘤组织中的表达(82.4%)高于瘤旁正常肾组织(28.5%);VEGF蛋白在肾母细胞瘤组织中的表达(58.8%)高于瘤旁正常肾组织(14.3%);bel-2 mRNA和VEGF mRNA在肾母细胞瘤的表达率分别为88.2%和82.4%;bcl-2和VEGF的表达之间存在正相关关系(r,=0.633,P＜0.01).结论:bcl-2和VEGF在小儿肾母细胞瘤发生发展中起重要作用.     

实验性肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的观察

目的观察单侧输尿管结扎（UUO）大鼠肾小管上皮细胞凋亡。方法采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测肾小管细胞凋亡,结果应用图像分析系统进行半定量分析。结果与假手术组相比,模型组检测到较多的凋亡细胞（P〈0.01）。随着时间延长,肾小管凋亡细胞逐渐增多,有显著差异（P〈0.01）。结论肾小管上皮细胞凋亡参与了肾间质纤维化的发生发展。     

整合素连接激酶在人肾间质纤维化组织中的表达及意义

目的探讨在慢性肾脏病患者肾间质中ILK的表达和其在肾间质纤维化发生、发展中的意义.方法选择各型慢性肾脏病患者49例,按肾间质病理损伤程度对肾组织标本进行分组:正常对照组4例,轻度损伤组17例,中度损伤组16例,重度损伤组12例.用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测肾间质的ILK、TGFβ1、E-cadherin和FN表达面积,并将ILK表达水平与患者血清肌酐(SCr)进行比较.结果肾小管上皮细胞是间质中ILK的主要来源,ILK表达量与肾小管间质病变程度呈正相关(P<0.01).此外,ILK与TGFβ1和FN的表达量呈正相关(P均<0.01),而与E-cadherin的表达量呈负相关(P<0.01);ILK还与患者SCr升高水平呈正相关(P<0.01). 结论随着慢性肾小管间质病变程度加重,ILK的表达显著增加,因此它在肾间质纤维化形成中起重要作用.ILK作为TGFβ1的下游因子, 可能通过促进肾小管上皮细胞的转分化(EMT)和细胞外基质(ECM), 如FN等的合成增加,参与肾间质纤维化的发生.     

缺氧诱导因子-1α在实验性大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的：观察单侧输尿管梗阻（ulilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠模型。肾组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达,探讨HIF-1α表达水平与肾小管间质纤维化的关系。方法：40只雌性SD大鼠随机分为2组,假手术组,UUO组（每组20只）。制备UUO大鼠模型,术后第7天、第14天处死大鼠,肾组织行HE和Masson染色,免疫组织化学和实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测HIF-1α,Ⅰ型胶原（collagenⅠ,ColⅠ）及α-平滑肌肌动蛋白（α—smooth muscle actin,α—SMA）在肾组织中的表达。结果：假手术组与UUO组各时间点肾小管间质纤维化评分比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。术后HIF-lαmRNA水平随梗阻时间延长而递增。UU0组HIF-1α蛋白表达量随着肾间质损害加重而增加,HIF-1α蛋白主要分布在肾小管,其中以近曲小管表达最明显。HIF—1α表达水平与肾小管间质纤维化评分,α-SMA和ColⅠ的表达水平均存在正相关（R值分别为0．71,0．68,0．82,P均〈0．05）。结论：HIF-1α在肾小管上皮细胞内高表达可能参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质损伤及MCP-1、ICAM-1的干预效应研究

[目的]观察水蛭素对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。[方法]健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只和造模组96只。造模组再分为模型组24只、水蛭素高剂量组24只、水蛭素低剂量组24只、贝那普利组24只。各组于术后第3、7、14天分批随机处死。取梗阻侧肾组织行逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）分子技术,检测梗阻侧肾组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的分子表达变化。[结果]苏木精-伊红（HE）染色显示,与模型组相比：各用药组肾间质损伤及纤维化程度均有不同程度改善。RT-PCR显示,与模型组相比：水蛭素高剂量组各时间点及水蛭素低剂量组第7、14天ICAM-1相对表达量均明显降低（P<0.05）;水蛭素高剂量组第7、14天MCP-1表达显著降低（P<0.01）;水蛭素高剂量组第3天及水蛭素低剂量组各时间点MCP-1表达量明显降低（P<0.05）。Western Blot显示,与模型组相比：水蛭素高剂量组第7天ICAM-1蛋白表达量显著减少（P<0.01）;水蛭素高剂量组第3、14天及水蛭素低剂量组第14天各时间点ICAM-1蛋白表达均明显降低（P<0.05）;水蛭素高剂量组第14天MCP-1蛋白表达显著降低（P<0.01）;水蛭素高剂量组第3、7天MCP-1蛋白表达明显降低（P<0.05）。[结论]水蛭素能不同程度地改善UUO大鼠肾间质损伤程度,延缓间质纤维化进展,其机制可能与水蛭素干预了UUO大鼠肾间质MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白质的表达有关。     

VEGF的表达以及血管生成在子宫腺肌病中的意义

目的　通过检测子宫腺肌病在位内膜、异位内膜及异位内膜周围肌层平滑肌组织中VEGF的表达及MVD值 ,探讨血管生成在子宫腺肌病发病机制中的作用。方法　应用免疫组织化学法 (SABC法 )检测 5 6例腺肌病子宫及 2 6例正常子宫中VEGF的表达和MVD值。结果　VEGF在腺肌病组在位内膜和对照组正常内膜中的阳性表达率分别为 5 2 5 %和 46 2 % (P >0 0 5 )。在腺肌病组异位内膜中VEGF的阳性表达率为 75 0 % ,均明显高于在位内膜和对照组正常内膜 (P <0 0 5 )。在异位内膜周围肌层中的阳性表达率为 69 6% ,明显高于对照组子宫肌层 38 5 % (P <0 0 5 )。MVD与VEGF在异位内膜及异位内膜周围肌层中的表达水平呈明显正相关 (P <0 0 1 )。结论　VEGF的表达增强以及与MVD的正相关性提示血管生成在子宫腺肌病的发生发展中发挥作用。     

人肾微血管内皮细胞转分化在移植肾间质纤维化形成中的作用

目的:探讨人肾微血管内皮细胞-间充质细胞转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)在移植肾间质纤维化形成中的意义及相关机制?方法:通过对南京医科大学第一附属医院25例慢性移植肾失功能(chronic allograft dysfunction,CAD)患者和25例正常人血生化指标进行分析,对移植肾组织标本和正常肾组织标本进行糖原(PAS)和马松三色(Masson)染色检查分析,观察两组肾功能?肾小管萎缩?肾小球塌陷及肾间质纤维化程度的差异?用免疫组织化学和间接免疫荧光双重染色方法检测两组肾组织标本中血管内皮细胞标志物CD34和肌成纤维细胞标志物α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)以及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达和分布特点?进一步以原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为体外研究对象,以TGF-β1(5 ng/ml)作用0~72 h,采用免疫印迹方法观察细胞中CD34和α-SMA的表达变化?结果:与正常人相比,CAD患者血清肌酐水平明显升高,PAS和Masson三色染色结果显示CAD患者移植肾组织中出现明显肾小管萎缩?肾小球塌陷及肾间质纤维化改变;半定量统计分析结果表明两者间存在统计学差异(P < 0.01)?免疫组织化学及间接免疫荧光染色结果表明,与正常组相比,CAD组中CD34阳性表达率降低而α-SMA及TGF-β1阳性表达率显著升高,CAD组中部分肾小球和间质微血管内皮细胞呈CD34和α-SMA双重染色阳性?体外研究显示,TGF-β1作用于HUVECs细胞后,随着时间延长,CD34表达逐渐降低而α-SMA表达逐渐增多,与对照组相比,具有统计学差异(P < 0.01)?结论:人肾微血管内皮细胞可能在TGF-β1介导下通过发生EndMT现象进而在移植肾间质纤维化形成中起重要作用?     

依那普利对大鼠肾间质纤维化中肾小管上皮细胞凋亡的作用

目的：观察依那普利对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨依那普利抗肾间质纤维化的 作用机制。方法：将24只SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)和依那普利治疗组(n=8)。对模型组和依 那普利治疗组大鼠行左侧输尿管结扎术,建立单侧输尿管梗阻(unilateral urethral obstruction,UUO)模型。术后14 d处 死大鼠,留取梗阻侧肾组织分别进行HE和Masson染色,观察各组大鼠肾组织病理改变,用脱氧核糖核苷酸末端转移 酶介导的缺口末端标记法[terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated (dUTP) nick end-labeling,TUNEL]染色检查肾小 管上皮细胞凋亡,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测Fas相关死亡结构域(Fas-associated death domain,FADD)、凋亡蛋 白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,APAF-1)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的 蛋白表达。结果：HE染色、Masson染色显示模型组肾间质损伤指数、肾间质纤维化指数均较假手术组明显增高(均 P<0.05),依那普利治疗组肾间质损伤指数、肾间质纤维化指数均较模型组明显降低(均P<0.05)。TUNEL染色显示模 型组肾小管上皮细胞凋亡计数较假手术组明显增多(P<0.05),依那普利治疗组肾小管上皮细胞凋亡数较模型组明显减 少(P<0.05)。免疫组织化学及蛋白质印迹法显示模型组肾组织FADD,APAF-1和CHOP的蛋白表达均较假手术组明显 增多(均P<0.05),依那普利治疗组肾组织FADD,APAF-1和CHOP的蛋白表达均较模型组明显降低(均P<0.05)。结论： 依那普利可通过抑制UUO大鼠的肾小管上皮细胞凋亡而起到抑制肾间质纤维化的作用。     

肺纤方对肺间质纤维化大鼠VEGF及VEGFR1、VEGFR2基因表达的影响

目的 探讨肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠血管新生的影响.方法 将大鼠分为假手术组、模型组、泼尼松组、氯沙坦组、肺纤方大剂量组、肺纤方中剂量组、肺纤方小剂量组7组,除假手术组外,其余6组采用气管插管灌注博莱霉素3 mg/kg进行大鼠肺间质纤维化造模;造模第2天各组予以相应药物灌胃干预.于第14天及第28天分2批进行取材,HE染色观察肺泡炎程度、MAS-SON染色观察肺纤维化程度,RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)l、VEGFR2mRNA表达.结果 肺纤方大中剂量均能抑制肺泡炎和纤维化程度、下调VEGF及VEGFR1、VEGFR2mRNA表达水平(P＜0.05).肺纤方中剂量作用更显著.结论 肺纤方通过下调VEGF及VEGFR1、VEGFR2基因表达水平,抑制血管新生,发挥抗肺纤维化作用.