rhBMP_2不同动物异位诱导成骨及其小鼠体内诱导成骨的剂量依赖性

目的对大肠杆菌表达的hBMP2在小鼠体内进行剂量依赖性研究,并观察其在大鼠和家兔体内异位诱导成骨情况,为临床应用提供参考。方法大鼠、家兔股部肌袋植入rhBMP21.5和3.0mg,植入后1、2、4周取材观察成骨情况;小鼠股部肌袋植入100~1000μg的rhBMP2,植入后1、2、3周取材,行组织学检查,成骨量分析,碱性磷酸酶和钙含量测定。结果大鼠植入1.5mgrhBMP2植入2周、家兔3.0mgrhBMP2植入4周表现为高效成骨活性。rhBMP2小鼠体内诱导成骨实验表现为成骨量,碱性磷酸酶活性和钙含量显著的剂量依赖性。结论原核表达的hBMP在小鼠、大鼠和家兔体内有高效的诱导成骨活性,小鼠体内实验rhBMP2表现为明显的剂量依赖性。     

印度草药方NR/CAL/06的甲醇提取物对卵巢切除大鼠的抗骨质疏松作用

目的：证实印度草药方NR/CAL/06的甲醇提取物对卵巢切除大鼠的抗骨质疏松作用。方法：雌性Sprague-Drawley大鼠在无菌状态下行双侧卵巢切除术后被分为5组（n=10）。检测NR/CAL/06的甲醇提取物（200和400mg/kg口服）的抗骨质疏松作用并以雷洛昔芬（5.4mg/kg口服）作为标准对照药,治疗时间为90d。实验前后测量各组大鼠的体质量、卵巢质量、骨质量、骨矿物质含量、骨强度,血清及尿液中的钙、磷含量及血清碱性磷酸酶含量。电镜下观察大鼠股骨外径、长度及厚度。结果：双侧卵巢切除术后,大鼠骨质量、骨矿物质含量及骨强度均有下降;电镜观察到卵巢切除大鼠股骨骨质疏松、多孔、破碎,且骨长度及厚度均有所下降。与假手术组相比,卵巢切除大鼠的血清钙、磷及碱性磷酸酶含量均有所升高,体质量及脂肪含量升高,子宫质量降低。NR/CAL/06的甲醇提取物（200和400mg/kg口服）治疗90d能够剂量依赖性地改变大鼠因卵巢切除所引起的上述各项指标变化,并将骨质量、骨矿物质含量、骨强度,血清钙、磷及碱性磷酸酶含量,体质量及脂肪含量恢复至正常水平。此外,经NR/CAL/06的甲醇提取物（200和400mg/kg口服）治疗的大鼠与卵巢切除模型组大鼠相比,电镜下股骨骨质孔形成减少,骨密度增加。结论：本实验的结果证实了NR/CAL/06的甲醇提取物具有很好的抗骨质疏松作用,可用于骨质疏松症的治疗。     

生物钙抗去势雌鼠失骨作用的研究

本文用生物钙对去势雌鼠失骨的防治作用进行了研究。４月龄Ｗｉｓｔａｒ雌鼠３０只，随机分为假手术对照组（对照组）、双侧卵巢切除组（切除组）及双侧卵巢切除后补充生物钙组（补钙组），补钙剂量为每只鼠每天５０ｍｇ／ｋｇ，经口灌胃。９０天后处死动物，分别检查血钙、血磷、血清碱性磷酸酶，右侧胫骨病理组织学，左侧胫骨形态计量学，以及股骨湿重、干重、灰重和骨钙、磷元素Ｘ线能谱分析。结果显示：与对照组比较，切除组大鼠骨小梁变细小，骨小梁体积下降，宽度降低，成骨细胞指数和破骨细胞指数均增加，骨重下降，骨钙、磷含量减少，呈典型的骨质疏松症病理学改变；补钙组动物血清钙及骨钙、磷含量明显升高，骨小梁体积及骨小梁平均宽度明显高于切除组动物，说明生物钙在防治去势大鼠骨质丢失方面有一定作用。作者认为，补钙后防治骨质疏松症的主要机理在于纠正去势后的负钙平衡，抑制过高的骨转换，特别是抑制破骨细胞的活性。     

脱矿骨的制备及其骨诱导活性的实验研究

目的研究运用超声与盐酸结合的方法制备脱矿骨的脱矿效果及骨诱导活性。方法采用超声条件下酒精脱脂、盐酸脱矿、冻干辐照的方法,制备人类脱矿皮质骨,检测其pH值、钙含量,并比较超声波对脱矿速度的影响。腹腔注射地塞米松造成大鼠的免疫抑制,将所制备脱矿骨异位植入大鼠的股部肌袋,术后不同时间取材,行组织学观察及碱性磷酸酶活性测定以观察脱矿骨的骨诱导活性。结果超声波条件下脱矿速度明显加快;脱矿骨异位植入后4周开始形成软骨细胞与软骨基质,5、6周形成较多的软骨组织,表现出良好的骨诱导活性。结论本研究所制备的脱矿骨具有良好的骨诱导成骨活性,是良好的骨移植材料。     

去卵巢大鼠血清酶和骨元素镁的关系

目的　研究去卵巢后大鼠血清酶和骨元素的变化。方法　 15只 60周龄。术前取血 ,测定血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和骨特异性碱性磷酸酶的活性作为术前组。手术摘除两侧卵巢 ,饲养 6个月后 ,取血清测定上述三种酶活性作为术后组。大鼠处死 ,取髂骨作为实验组。另取 15个 60周龄大鼠 15只 ,处死 ,取髂骨作为对照组 ,用中子活化方法测定 ,骨钙、镁、钠、锰、锶和钾元素的含量。结果　术前血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和骨特异性碱性磷酸酶的活性分别为 ( 2 1.2 3± 7.11)U/L、( 19.3 2± 4.78)U/L和 ( 15 .0 8± 3 .5 4)U/L ,术后血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和骨特异性碱性磷酸酶的活性分别为 ( 15 .3 9± 5 .80 )U/L、( 12 .92± 2 .41)U/L和 ( 5 .5 6± 1.0 8)U/L ,摘除卵巢后上述各项生化指标均显著降低 (P <0 .0 0 1)。大鼠切除卵巢后实验组髂骨镁元素含量为 ( 4.3 2± 0 .2 0 )mg/g ,对照组髂骨元素含量为 ( 5 .12± 0 .15 )mg/ g。实验组髂骨镁元素含量显著低于对照组 (P <0 .0 1)。钙、钠、锰、锶和钾元素含量两组比较无显著差别。结论　大鼠去卵巢 6个月后血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、骨特异性碱性磷酸酶和髂骨的镁元素均显著降低     

他克莫司诱导的骨髓间充质干细胞成骨细胞分化和体内骨形成

目的研究免疫抑制剂他克莫司（FKS06）对大鼠骨髓来源的间充质干细胞（MSC）的成骨细胞分化诱导,及对MSCs结合多孔β三磷酸钙（β—TCP）的体内成骨作用。方法原代MSCs按实验目的随机分组。对照组生长培养液中加入L-抗坏血酸-2-磷酸（AsAp）和β-甘油磷酸（β—GP）;FKS06处理组在对照组基础上加入50nmol／LFK506。实验分成体外体内两部分相继进行。体外实验细胞分别于培养第4、8、12、16天时行碱性磷酸酶（APase）活性,钙含量,扫描电镜和骨钙素mRNA Northern印迹分析;体内实验将细胞载人多孔β—TCP立方块形成MSCs／β-TCP复合物,继续成骨诱导培养2周后植入大鼠背部皮下,4周和8周后取出复合物作组织学检查。结果FKS06处理组碱性磷酸酶活性、钙含量、骨钙素mRNA均明显高于对照组（均P〈0．05）;体内成骨情况亦明显优于对照组。结论免疫抑制剂FKS06能显著促进大鼠骨髓来源间充质干细胞（MSCs）的体外成骨细胞分化和动物体内继续成骨的作用,并提示FKS06可作为一种新型成骨生长因子,在临床有潜在的应用价值。     

复合rhBMP2的异种骨的研制及成骨活性

目的：研制新型具有诱导成骨活性的异种骨植骨材料。方法：在重组合异种骨（RBX）基础上,以基因重组人BMP2（rhBMP2）取代从牛皮质骨中提取的牛BMP,与去抗原牛松质骨载体（BCB）复合,制成复合rhBMP2的异种骨（rhBMP2/BCB）,并采用小鼠股部肌袋模型,通过组织学、骨计量学方法检测rhBMP2/BCB的诱导成骨活性。结果：实验组（rhBMP2/BCB组）术后7d在小鼠肌袋可诱导软骨生成,14d形成纺织骨,21d改建成板状骨并形成大量骨髓;对照组（BCB组）于术后各时间点均未见有软骨成骨形成。实验组的碱性磷酸酶活性和钙含量均高于对照组,有非常显性差异（P＜0．01）。结论：rhBMP2/BCB具有较好的骨诱导能力,是一种较理想的植骨材料。     

正常饮食中短期补充钙剂对双侧卵巢切除大鼠骨质量及骨代谢的影响

取24只SD大鼠，分A组：假手术组8只；B组：双侧卵巢切除组8只；C组：双侧卵巢切除 补钙组8只。实验前各组间体重差异无显著性。利用灌胃法对C组大鼠每天补L-苏糖酸钙1次，剂量为1．18mg元素钙／kg体重。5周后结束实验，眼角静脉取血作碱性磷酸酶、血钙和血磷等生化指标测定；取肝、肾、心脏等组织保存于甲醛中用于病理分析；取第2腰椎、右股骨，用于骨密度、骨矿含量和生物力学、骨干重灰重等测量。     

依替膦酸钠治疗切除卵巢大鼠骨质疏松疗效观察

目的:制备大鼠骨质疏松模型,皮下注射依替膦酸钠,观察其对骨质疏松的疗效。方法:将4月龄w istar雌性大鼠61只随机分为6组:卵巢切除组(O组)、假手术组(S组)、雌二醇阳性对照组(E组)、药物注射低剂量组(L组)、中剂量组(M组)、高剂量组(H组),给药12周。测定动物子宫重量,血清钙、磷、ALP含量,骨重及骨钙、磷含量和骨形态计量等指标。结果:O组子宫重量、骨钙、磷含量及骨小梁体积和宽度均显著低于S和E组,骨干重和灰重下降;OB I升高、OC I显著增加,破骨显著大于成骨;OS、MAR及血清ALP活性等均显著增加。提示卵巢切除后由于骨再建平衡破坏,骨转换加速,骨量明显丢失。依替膦酸钠各剂量组对子宫均无影响,其余指标与S、E组接近。结论:皮下注射国产依替膦酸钠能有效防治切除卵巢大鼠骨质疏松,对子宫无刺激作用。     

活性维生素D对去势大鼠骨转化的影响

用骨形态计量学等方法探讨活性维生素D对骨转化的影响,以及预防绝经后骨质疏松的可能性及机理.选用4月龄SD大鼠,随机分为双卵巢切除组,假手术对照组,双卵巢切出后给予罗钙全治疗组(剂量0.0208ug/100g,灌胃,间天1次,共10周).结果:卵巢切除10周后,骨小梁体积、骨小梁宽度、肱骨重量及肱骨钙、磷含量明显较对照组低;成骨细胞指数,破骨细胞指数较对照组高.表明高转化骨质疏松的动物模型成立.活性维生素D治疗组骨小梁体积、肱骨干重、灰重、肱骨钙、磷含量较卵巢切除组高,与对照组无差别,成骨细胞指数较对照组高,破骨细胞指数较卵巢切除组低.表明活性维生素D具有预防绝经后骨质疏松的作用,其主要机理可能是抑制骨的吸收,骨的形成相对增加而起作用.     

透明质酸钠复合rhBMP-2促进骨质疏松症种植体骨结合的实验研究

目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对于骨质疏松症种植体骨结合的影响?方法:构建骨质疏松症大鼠模型,随机分为对照组?模型组和实验组,于胫骨内植入种植体?实验组种植体周围植入透明质酸钠复合rhBMP-2,对照组及模型组植入同等体积的透明质酸钠?术后4周和8周,通过X线?组织学切片及扫描电镜分析技术,观察各组胫骨内种植体骨结合的情况?结果:实验组种植体周围新生骨组织包绕,骨质致密,结构优良,未见明显骨吸收现象,骨结合良好?对照组种植体周围同样新生骨形成,部分区域见炎症反应,少量结缔组织长入种植体周围?模型组种植体周围骨组织形成较少,种植体脱落,未形成骨结合,种植体窝内炎症反应明显,周围结缔组织增生,部分区域出现骨质断裂?结论:rhBMP-2能够显著促进骨质疏松症大鼠胫骨内种植体周围新骨形成,加快成骨速度,促进骨质矿化,形成良好的骨结合?     

何首乌水提液对去卵巢大鼠骨组织的动态影响

目的：观察何首乌水提液对去卵巢大鼠骨组织的动态影响。方法：把64只6月龄SD雌性大鼠随机分为4组，即假手术组、卵巢切除组、何首乌组、尼尔雌醇（E2）组，每组16只。各组大鼠分别于开始给药后第15日、第30日将各组的半数动物处死，测定骨羟脯氨酸（HOP）、骨钙、骨磷、血清及骨碱性磷酸酶（ALP）、血清及骨抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）并做了骨组织的病理HE染色。结果：在两个阶段的治疗中，何首乌组与卵巢切除组比较，骨有机质和骨矿物质均有显著性升高；骨组织病理形态改善；TRAP活性变化没有出现明显改变（P〉0．05），而ALP活性出现明显的变化。骨组织ALP比血清ALP的统计学差异更大，并且以上指标在第二阶段较第一阶段的统计学差异更为显著。结论：何首乌水提液可能主要通过增强ALP活性，抑制骨胶原、骨钙、骨磷的丢失，从而抑制去卵巢大鼠的骨质疏松。     

黄瓜籽复合物对去势大鼠骨质疏松症的影响

目的 研究黄瓜籽复合物对骨质疏松症大鼠的防治作用.方法 将24只雌性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(OVX组)、雌二醇(E2)组(EV组)、黄瓜籽复合物组(QCL组).双侧卵巢切除术建立骨质疏松症模型.术后灌胃给药12周后,用全自动生化仪测血清钙(S-Ca)、血清磷(S-P)水平;ELISA法检测E2、碱性...     

β-蜕皮甾酮对激素性骨质疏松大鼠血清骨代谢指标及骨密度的影响

目的：观察β-蜕皮甾酮（β-Ecd）对糖皮质激素性骨质疏松大鼠血清骨代谢指标及骨密度（BMD）的影响。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为5组：对照组、泼尼松龙（Pred）组、Pred+β-Ecd（5 mg/kg）组、Pred+β-Ecd（10 mg/kg）组、Pred+阿仑膦酸（ALN）（3 mg/kg）组,每组6只。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清钙、磷浓度、抗酒石酸磷酸酶（TRAP）和碱性磷酸酶（ALP）活性。应用Micro-CT测定各组大鼠第5 腰椎骨结构和BMD。结果：血清骨代谢指标检测结果显示,与对照组比较Pred组血清钙、磷水平显著升高,血清ALP活性和TRAP活性升高。与Pred组比,Pred+ALN组和Pred+β-Ecd（10 mg/kg）组血清钙、磷水平降低,血清ALP活性和TRAP活性降低。而Pred+β-Ecd（5 mg/kg）组血清ALP活性和TRAP水平降低,而对钙、磷水平无明显影响。骨结构和BMD Micro-CT检测结果显示,在所有Pred处理的大鼠中均观察到不同程度的骨丢失。在Pred组中第5腰椎的BMD值明显低于对照组。Micro-CT评估显示Pred组骨表面积和组织体积的比值（BS/TV）较对照组降低。三维模型分析显示,Pred组骨小梁数量（Tb.N）、骨体积分数（BV/TV）均明显低于对照组,并且骨小梁分离度（Tb.Sp）明显增加,但骨小梁厚度（Tb.Th）和结构模型指数（SMI）未表现出显著差异。与Pred组比,Pred+ALN组和Pred+β-Ecd（10 mg/kg）组BMD、BS/TV、BV/TV和Tb.N水平显著增加,而Tb.Sp和SMI降低。与Pred组相比,Pred+β-Ecd（5 mg/kg）组中BMD、BS/TV、BV/TV和Tb.N水平显著增高,而Tb.Th和Tb.Sp水平降低。结论：β-Ecd可能通过抑制骨丢失、改善骨代谢的作用机制,治疗糖皮质激素性骨质疏松症。     

国产羟乙膦酸钠抗去势大鼠骨质疏松实验研究

目的:探讨国产羟乙膦酸钠对去势大鼠骨质疏松的疗效。方法:将4月龄wistar雌性大鼠55只随机分为6组:卵巢切除(OVX)组、假手术(SHAM)组、雌二醇阳性对照(E)组、羟乙膦酸钠灌服低剂量(IGL)组、中剂量(IGM)组、高剂量(IGH)组,共给药12周。主要测定动物骨重及钙、磷含量和骨形态计量等。结果:去势大鼠骨干重、灰重及钙、磷含量显著降低,骨小梁体积及宽度明显减小,破骨细胞及成骨细胞活性均增加,但破骨显著大于成骨,羟乙膦酸钠各剂量组均恢复至接近正常水平。结论:国产羟乙膦酸钠能有效防治去势大鼠骨质疏松,并对子宫无副作用。     

补肾中药与阿法骨化醇联合应用对卵巢摘除大鼠原发性骨质疏松的防治作用

 目的 研究补肾中药与阿法骨化醇联合应用对卵巢去势（ovariectomy,OVX）大鼠原发性骨质疏松的防治作用。方法 手术摘除6月龄雌性大鼠双侧卵巢,随机分成4组：OVX组（ovariectomy,OVX）、OVX给予补肾中药组（OVX administrated with Bushen Chinese drugs,OVX+TCM）、OVX给予补肾中药和阿法骨化醇组（OVX administrated with Bushen Chinese drugs and alfacalciferol,OVX+TCM+VD）和OVX给予尼尔雌醇组（OVX administrated with nilestriol,OVX+CEE₃）,另设假手术对照组（SHAM）。术后35 d起给予药物至13周后处死取血、子宫、腰椎、股骨等标本,并测定比较各组以下变化：取子宫称重,计算子宫重/体重、子宫内膜厚度;放免法血测血清雌二醇（E₂）应用固体物理密度仪自动测量左股骨和腰椎L₂的骨密度;应用图像分析仪IPP计量软件分析椎体骨的组织病理形态计量;以万能材料测试仪检测右股骨与腰椎L₃的骨生物力学性能的指标;自动生化仪检测血清碱性磷酸酶（ALP）;酶免法检测尿吡啶酚（Pyd）,测尿肌酐（Cr）,计算Pyd/Cr作为骨代谢生化标志物,综合判断骨质疏松情况。结果 OVX大鼠双侧卵巢摘除完全,雌激素缺乏诱发骨质疏松指标明显;联合给药组骨量明显增加,骨结构明显改善,抗骨折性能明显提高,骨形成和骨吸收生化标志物降低;其防治骨质疏松的作用优于单用补肾中药组,并与尼尔雌醇组相仿。结论 补肾中药与阿法骨化醇联合应用对卵巢去势大鼠原发性骨质疏松有明显防治作用,避免了雌激素引起的子宫内膜增生等毒副作用。     

神经生长因子协同重组人骨形态发生蛋白-2诱导成骨的研究

目的在重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)异位成骨过程中,局部应用神经生长因子(NGF),探讨NGF对BMP诱导成骨的作用。方法ICR小鼠36只,随机分为实验组和对照组,于右侧股后部肌间隙内植入rhBMP-2胶原复合物。术后第3天开始,连续7d,在实验组和对照组rhBMP-2植入部位,分别注射NGF和磷酸盐缓冲液(PBS)。术后第10、20和30天取材,进行放射学、生化和组织学检测。结果两组均于术后第10天有新骨形成,但实验组新骨生成量明显大于对照组;术后第10和第20天,实验组局部组织碱性磷酸酶活性明显高于对照组;术后各时间段实验组局部组织钙和磷含量均明显高于对照组;术后第30天,实验组骨组织胶原纤维排列明显较对照组规则。结论NGF具有协同rhBMP-2诱导成骨的作用。     

Ursolic Acid Prevents Retinoic Acid-Induced Bone Loss in Rats

Objective: To examine the effects of ursolic acid(UA) on mitigating retinoic acid(RA)-induced osteoporosis in rats. Methods: Fifty female Sprague-Dawley rats were randomly divided into the control group(n=10) and the osteoporosis group(n=40). The 40 osteoporosis rats were induced by 75 mg/(kg·d) RA once daily for 2 weeks, and then were randomly assigned to vehicle control(model), low-, middle-, and high-dose UA [(UA-L, UA-M, UA-H; 30, 60, 120 mg/(kg·d), respectively] groups(10 rats each). UA were administered once daily to the rats from the 3 rd weeks for up to 4 weeks by gavage. Bone turnover markers [serum alkaline phosphatase(ALP), osteocalcin(OCN), urine deoxypyridinoline(DPD)] and other parameters, including serum calcium(S-Ca), serum phosphorus(S-P), urine calcium(U-Ca), urine phosphorus(U-P), and bone mineral density(BMD) of the femur, 4 th lumbar vertebra and tibia, bone biomechanical properties and trabecular microarchitecture, were measured. Results: The osteoporosis in rats was successfully induced by RA. Compared with the model group, UA-M and UA-H significantly reversed the RA-induced changes in S-P, U-Ca, U-P, ALP, OCN and urine DPD ratio and markedly enhanced the BMD of right femur, 4 th lumbar vertebra and tibia(P0.05 or P0.01). Further, biomechanical test and microcomputed tomography evaluation also showed that UA-H drastically improved biomechanical properties and trabecular microarchitecture(P0.05 or P0.01). Conclusion: UA could promote bone formation, increase osteoblastic activity and reduce osteoclastic activity in rats, indicating that UA might be a potential therapeutic of RA-induced acute osteoporosis.