雷公藤治疗类风湿关节炎细胞和分子生物学机制的研究与进展

雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)至今已40余年,其对RA具有显著疗效〔1〕。现认为〔2〕RA是易感机体由不明病因激活免疫系统后,在综合因素作用下,产生一种以破坏关节为主要特征的自身免疫性疾病,即便病因不复存在,但因分子模拟机制作用于自身抗原而发生的自身免疫反应性。研究表明〔3〕,雷公藤具有抗炎、免疫抑制及抗增殖等作用,从细胞基因水平更深入地揭示其治疗RA作用机制已成为雷公藤研究中较为活跃的领域,现将雷公藤治疗RA分子生物学机制研究与进展介绍如下。1对免疫活性细胞的影响1·1对T细胞影响1·1·1抑制激活T细胞双信号系统T细胞激活需要双信号系统的作用,而雷公藤对激活T细胞的双信号均具有不同程度抑制作用。雷公藤甲素(TP)在高剂量条件下可阻止树突状细胞(DC)发育,引起细胞死亡;对成熟DC,中剂量可诱导半数以上细胞发生凋亡〔4〕。雷公藤多苷能显著抑制DC表面HLA-DR和CD80表达,使T细胞不能活化,同时还能抑制DC内白细胞介素(IL)-12 P40分泌和mRNA转录,从而抑制Th1细胞分化〔5〕。1·1·2抑制T细胞活化、增殖与分化T细胞特异性识别抗原后,在黏附分子和细胞因子协同作用下活化、增殖、分化为效应T细...     

共刺激分子PD-1和Tim-3在HIV感染中的作用

PD-1和Tim-3是近期发现的T细胞表面的共刺激分子,分别与其配体PD-L和Galectin-9结合并传递抑制性的第二信号,在机体细胞免疫调节中发挥作用。研究发现共刺激分子PD-1、Tim-3以及它们的配体在HIV病毒感染中发挥非常重要的作用。本文主要介绍PD-1和Tim-3及其配体的结构与表达、PD-1和Tim-3与HIV感染及其表达水平与HIV感染病程进展的关系,探讨其在艾滋病病情发展中的作用机制和治疗方面的应用前景。     

共刺激分子—中药免疫调节作用及机理研究的新靶点

免疫活性细胞的活化是机体免疫系统产生免疫应答的重要环节.已有的研究表明:T细胞的活化必需双信号,即T细胞抗原识别受体(TCR)识别抗原递呈细胞(APC)表面的MHC-抗原肽复合物,产生第一信号;两者之间的其它分子相互作用提供第二信号--共刺激信号,如果仅有第一信号而缺乏共刺激信号,则导致T细胞反应无能,甚至发生程序性死亡.这些介导共刺激信号的分子被称为共刺激分子(Co-stimulatory molecule).     

慢性乙型肝炎中医证型与外周血T细胞共刺激分子关系的研究

由T细胞介导的细胞免疫反应在慢性乙型病毒性肝炎（chronic viral hepatitis B，CHB）的肝细胞损伤机制中起主导作用。其活化需要两个协同作用的信号，如缺乏共刺激分子提供的信号，T细胞便不能激活。CD80／CD28是主要共刺激分子。本研究通过检测不同中医辨证分型CHB患者的外周血T淋巴细胞CD80／CD28表达率，同时予以肝活检，观察组织炎症程度，探讨中医证型与组织炎症程度和CD80／CD28之间的相互关系，为中医证型在CHB发病中细胞免疫的作用提供实验依据。     

免疫共刺激分子与自身免疫性疾病的研究进展

正常机体的免疫系统具有区别"自己"和"非己"的能力,对非己抗原能够发生免疫应答,对自身抗原则是处于无应答或微弱应答状态,时刻处于"免疫激活-免疫耐受"的动态平衡状态。然而,如果正常的免疫耐受被打破,将"自己"识别成"非己",处于非正常免疫激活状态的T细胞就会持续迁延的对自身抗原产生异常的免疫应答,结果会导致自身免疫性疾病(ADS)的发生。因此,"无效"的免疫识别和免疫应答成为自身免疫性疾病的发病的主要致病机制。免疫共刺激分子(co-stimulatory molecule)作为连接抗原递呈细胞(APC)和免疫细胞(T细胞,B细胞)的重要纽带,有研究已经证实,正性免疫共刺激分子的高表达和负性免疫共刺激分子的低表达都会导致自身免疫耐受的缺陷,进而引发自身免疫性疾病。依据中医药"纠偏","扶正"的治疗特色。本文通过对4种典型性的自身免疫性疾病:系统性则是以红斑狼疮(SLE)和类风湿性关节炎(RA)为代表;器官特异性则是以多发性硬化症(MS)和Ⅰ型糖尿病(T1DM)发病机制进行探讨,依赖于这4种疾病发病过程中免疫共刺激分子对免疫识别与免疫应答的重要影响,并且依托于中医药对自身免疫平衡调节的作用,结合近十年来的相关文献,对免疫共刺激分子与自身免疫性疾病之间的关系进行论述,探寻不同的免疫共刺激分子在不同的自身免疫病中的共性,并初探中药以PD1-PDL1为药物靶点治疗自身免疫病的可行性。     

共刺激分子-中药免疫调节作用及机理研究的新靶点

免疫活性细胞的活化是机体免疫系统产生免疫应答的重要环节。已有的研究表明：T细胞的活化必需双信号，即T细胞抗原识别受体(TCR)识别抗原递呈细胞(APC)表面的MHC-抗原肽复合物，产生第一信号；两者之间的其它分子相互作用提供第二信号——共刺激信号，如果仅有第一信号而缺乏共刺激信号，则导致T细     

脊灸法治疗类风湿性关节炎50例临床观察

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以累及周围关节为主的多系统性炎症性的自身免疫性疾病[1],迄今尚无特效疗法。研究表明,IL-1在RA的骨侵蚀及软骨破坏中发挥重要作用[2],已证明IL-1与RA免疫炎症反应水平相一致,其水平升高与病情有关[3]。IL-15在自身免疫性疾病的发病过程中有重要影响[4],能促进T细胞向关节腔聚集并促进其活化,而且其活性与滑液中的TNF-a的浓度有关[5],IL-15还能促进B细胞分泌免疫球蛋白,特别是RF合成,RF是抗人和动物IgG分子Fc片段上抗原     

免疫调节和前炎性因子(TNF-α)在类风湿性关节炎中的作用与意义

TNF-α是一种主要的免疫调节和前炎性因子,因其在RA中的表现上调而被认为在其病理机制中发挥重要作用.在RA中TNF-α主要产生于RA滑膜中的滑膜巨噬细胞并刺激纤维母细胞增殖及淋巴细胞的活性.TNF-α生成的过程始于配体和细胞表面钟形(Toll)受体结合,刺激信号转导通路而激活NF-κB转录因子.被激活的NF-κB进入细胞核并诱导与炎症有关基因的转录,包括TNF的编码.TNF和其它炎性细胞因子的生成又募集其它炎性细胞依次释放细胞因子进而放大免疫反应.TNF是通过结合TNFR1和TNFR2受体而发挥作用的.许多实验及临床研究均证实阻滞TNF-α活性对治疗RA有效.TNF-α和IL-1抑制剂的临床应用很好的说明了细胞因子在RA中的作用.其作用机制在体内是复杂的,可能是抑制了其它前炎性细胞因子,减低滑膜细胞浸润,介入破骨细胞活化,阻止血管生成.TNF-α抑制剂可以减缓或阻止PA骨和软骨的进行性损害.这可能与其抑制破骨细胞的作用有关.Etanercept(可溶性TNF-α受体融化蛋白)、Infliximab(抗TNF-α嵌合型[人/鼠]单克隆抗体)和adalimumab(抗TNF-α人单克隆抗体)三种生物制剂是目前临床研究的热点.     

通痹灵总碱对T淋巴细胞活化CD71表达的影响

目的 :通痹灵总碱 (TBL)是从通痹灵中提取出来的总生物碱部位。本研究旨在探索TBL对T淋巴细胞活化CD71表达的影响 ,探讨通痹灵免疫调控作用的机理。方法 :对清洁级小鼠T淋巴细胞进行培养 ,体外加入通痹灵总碱 ,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞CD71的表达率。结果 :TBL(10 0 μg mL)对ConA或PDB激活的大鼠T淋巴细胞活化表达CD3+ CD71+ 抗原有明显的下调作用 (P <0 0 1) ,并且随着剂量的增加 ,其抑制作用加强 (P <0 0 1) ,呈明显的量效关系 ;对ConA活化组的作用要强于PDB。结论 :TBL对ConA和PDB诱导活化T细胞的CD71表达率均有明显的抑制作用 ,而且呈明显的量效关系。提示对TBL在T细胞活化信号传导过程有明显作用 ,在治疗RA的过程中可能可以通过影响上游T淋巴细胞的活化 ,调节其细胞免疫机制来达到治疗RA的目的。     

类风湿关节炎患者血清及关节滑液RANTES和MCP-1的表达水平及其临床意义

目的研究类风湿关节炎(RA)患者血清、关节滑液中调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平,探讨它们在RA病理过程中的作用。方法用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定38例类风湿关节炎患者血清及病变膝关节滑液中RANTES、MCP-1和C反应蛋白的水平,并与骨关节炎(OA组)和外伤截肢者(对照组)对照。结果RA患者血清及滑液中RANTES、MCP-1表达水平明显高于OA组及对照组,且滑液中的水平也显著高于血清水平。RANTES、MCP-1的表达与C反应蛋白的水平呈正相关。结论RA患者过度表达的RANTES、MCP-1参与了RA的炎症及关节病变的病理过程。     

血小板在类风湿关节炎发病中的作用

类风湿关节炎(RA)是以关节滑膜炎症为主要表现的慢性系统性自身免疫疾病。其具体发病机制尚不十分明确,一般认为是由抗原驱动、T细胞介导及遗传相关的自身免疫病。有越来越多的证据表明血小板在RA的发病过程中起着重要的作用。1 RA中血小板活化的依据Farr等观察到RA患者关节滑液中血小板计数明显升高,且与病情活动的各项指数呈正相关[1-2];姚茹冰等[3]检测RA患者的血小板参数,发现活动期RA患者的P lt和PCT明显高于临床缓解期及正常对照组,而临床缓解期患者的P lt和PCT与正常对照组无显著性差异。此外,多项研究通过测定RA患者血小板活化标记物(P选择素、PMPs等)水平,证实RA患者亦存在     

雷公藤多苷及其主要活性成分抑制类风湿性关节炎的作用机制研究进展

雷公藤多苷是从雷公藤Tripterygium wilfordii根部提取出的总苷,其现代制剂雷公藤多苷片在临床上对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）有确切疗效,雷公藤甲素和雷公藤红素是雷公藤多苷的主要活性成分。现代研究发现雷公藤多苷治疗RA的机制包括抑制血管生成、维持调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）和辅助性T细胞17(T helper type 17,Th17)之间的平衡、抑制基质金属蛋白酶表达和促进成纤维样滑膜细胞凋亡等。而其主要活性成分雷公藤甲素和雷公藤红素除了调节Treg和Th17细胞之间的平衡外,还可以通过调节细胞自噬、抑制多条炎症相关信号通路活化等多种途径发挥抑制RA的作用。首先回顾RA的发病机制,并重点对雷公藤多苷及其主要活性成分抑制RA的作用机制进行总结和阐述,以期为有关雷公藤多苷抗RA的研究提供参考。     

免疫调节和前炎性因子（TNF—α）在类风湿性关节炎中的作用与意义

TNF-α是一种主要的免疫调节和前炎性因子，因其在RA中的表现上调而被认为在其病理机制中发挥重要作用。在RA中TNF-α主要产生于RA滑膜中的滑膜巨噬细胞并刺激纤维母细胞增殖及淋巴细胞的活性。TNF-α生成的过程始于配体和细胞表面钟形(Toll)受体结合，刺激信号转导通路而激活NF—κB转录因子。被激活的NF—κB进入细胞核并诱导与炎症有关基因的转录，包括TNF的编码。TNF和其它炎性细胞因子的生成又募集其它炎性细胞依次释放细胞因子进而放大免疫反应。TNF是通过结合TNFR1和TNFR2受体而发挥作用的。许多实验及临床研究均证实阻滞TNF—α活性对治疗RA有效。TNF—α和IL-1抑制剂的临床应用很好的说明了细胞因子在RA中的作用。其作用机制在体内是复杂的，可能是抑制了其它前炎性细胞因子，减低滑膜细胞浸润，介入破骨细胞活化，阻止血管生成。TNF—α抑制剂可以减缓或阻止RA骨和软骨的进行性损害。这可能与其抑制破骨细胞的作用有关。Etanercept(可溶性TNF-α受体融化蛋白)、Inf1iximab(抗TNF—α嵌合型[人／鼠]单克隆抗体)和adalimumab(抗TNF—α人单克隆抗体)三种生物制剂是目前临床研究的热点。     

补肾生血法治疗慢性再生障碍性贫血的临床观察及其对IL-23的影响

正再生障碍性贫血(Aplastic anemia,AA)是由多种病理机制导致骨髓造血功能衰竭的疾病。中医因其以肾虚为本的虚损证候将AA命名为"髓劳病",慢性再障(CAA)为血液科中医药治疗优势病种。T细胞免疫异常在CAA发病中发挥了至关重要的作用,主要表现为T淋巴细胞及其亚群数量、分布异常及功能亢进引起细胞凋亡进而导致造血组织损伤。研究证实~([1])IL-23可刺激T细胞活化、维持和稳定其特征,IL-23     

类风湿性关节炎热证"药-证对应"机制的网络药理学研究

以热证类风湿性关节炎(RA)为切入点,通过构建、分析其对应的分子网络及药物靶标网络,初步探讨“药-证对应”的机制.综合运用定向文本挖掘、PubChem小分子化合物数据库检索、临床典型热证RA患者外周血CD4+T细胞基因组学检测以及Ingenuity Pathway Analysis(IPA)网络构建等研究方法.通过定向文本挖掘,筛选出治疗RA热证的常用中药:黄柏、知母、苍术及牛膝4味中药.通过检索PubChem数据库,找到RA热证的对证中药共有靶蛋白123个.通过基因芯片技术,得到RA热证与正常人比较的差异基因21个.通过IPA软件分别构建RA热证和对证中药靶蛋白的分子相互作用网络.两个网络共有4条相同的生物学通路:GM-CSF(粒细胞巨噬细胞刺激因子)信号通路,CTLA4(细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4)信号通路,T细胞受体信号通路及辅助T细胞中的CD28信号通路.这些细胞免疫反应相关的生物学通路,共同干预了细胞存活、细胞免疫及炎症反应等细胞生命活动.结果表明:RA热证的分子网络和对证中药靶点的分子网络所涉及的共同的生物学通路:GM-CSF信号通路,CTLA4信号通路,T细胞受体信号通路及辅助T细胞中的CD28信号通路可能就是对证中药治疗RA热证“药-证对应”的分子生物学机制之一,具体机制需要进一步验证.     

FcγRIIB下调在肾虚型类风湿关节炎B细胞活化中的作用

目的:通过对肾虚型类风湿关节炎患者B细胞活化情况与FcγRIIB表达分析,揭示FcγRIIB在肾虚型类风湿关节炎B细胞活化中的作用机制。方法:纳入RA患者共57例,记录一般情况、临床资料(疾病活动情况,自身抗体水平),收集外周血单核细胞(PBMC),Ig M刺激培养48 h后流式细胞法检测CD86与FcγRIIB表达情况。结果:肾虚型RA患者幼稚B细胞的CD86表达率明显较非肾虚型患者高,同时FcγRIIB的MFI较非肾虚型患者低;肾虚型RA患者记忆B细胞的FcγRIIB表达率明显较幼稚B细胞低,且肾虚型RA患者ACPA水平越高其记忆B细胞的FcγRIIB表达率越低。结论:肾虚型RA患者存在FcγRIIB水平的下调,其能够促进B细胞过度活化和自身抗体水平升高。     

雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL-2及IFN-γmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA的表达的影响.结果:TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL-2及IFN-γmRNA的表达.结论:TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一.     

黄芩苷对T淋巴细胞增殖与活化的影响

目的:研究黄芩苷对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制。方法:以刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PMA) 离子霉素(ionomycin,Ion)诱导小鼠淋巴细胞中T细胞增殖,用MTT法测定细胞增殖;利用ConA或PMA诱导T细胞激活,流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子与CD25分子表达情况。结果:在ConA或PMA Ion刺激48h后,小鼠淋巴细胞MTT吸光度显著高于对照组(P<0.01)。黄芩苷(10~40uM)显著降低了ConA或PMA Ion引起的MTT吸光度增加(P<0.01)。在ConA或PMA刺激18h后,小鼠T细胞CD69表达率显著提高(P<0.01),ConA或PMA刺激36小时后,T细胞CD25表达率显著提高(P<0.01),黄芩苷(10~40uM)能显著降低活化(P<0.01)。结论:黄芩苷可以显著抑制多克隆刺激剂ConA或佛波醇酯(PMA)介导的小鼠T细胞的活化和增殖。     

关节镜下滑膜切除术后外用中药治疗类风湿性关节炎

类风湿性关节炎(RA)是以滑膜组织增生,其发病机制中抗原特异性T细胞引起慢性滑膜炎起重要作用被广泛地接受.免疫抑制剂对RA的滑膜炎临床症状有效.提示T淋巴细胞与关节炎症状有关.尽管很多人热衷于T细胞抑制疗法,但是临床对比研究大多另人失望.后期侵蚀软骨、骨和韧带的侵入区称为"血管翳",最后导致关节的变形和强直.本研究针对RA早、中、后期,关节镜下滑膜切除术治疗RA不同时期疗效评价如下.     

自噬在类风湿关节炎中的作用及中药干预研究进展

类风湿关节炎(RA)目前临床上多使用糖皮质激素或免疫抑制剂进行治疗,但长期使用具有明显的毒副作用,且免疫抑制剂价格昂贵,一定程度限制其广泛的应用。中药治疗RA历史悠久,且毒副作用小,但其具体作用机制不甚明确。自噬的过程是细胞自身在受到外界的刺激,通过细胞内信号转导,触发的一系列细胞维持内环境稳定的一种主动的生物学过程,其异常参与多种疾病的发生。目前研究表明自噬异常与RA的发生发展过程关系密切,可以干预RA血管翳生成、滑膜炎症和骨破坏等关键病理环节,从而影响RA的进展和预后。近年来很多研究发现中药复方及其活性成分可以通过调节自噬过程,发挥治疗RA的作用。本文对中药调控自噬进而干预RA的相关文献进行调研,以期为中药治疗RA重要作用机制、新药开发及临床治疗提供新思路。