葫芦茶苷体内抗鸭乙型肝炎病毒及保肝作用研究＊

目的 考察葫芦茶苷对鸭乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)的体内抑制作用及其保肝作用。方法 以广西麻鸭为实验动物，建立感染鸭乙肝病毒的鸭乙肝动物模型，随机分为模型组、拉米夫定阳性对照组和葫芦茶苷低、中、高剂量组，每组10只，每日灌胃给药1次，连续给药14天，模型组每天灌服等体积的生理盐水。采用ELISA法检测鸭血清乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和鸭血清乙型肝炎E抗原(DHBeAg)的含量。采用实时荧光定量PCR法检测鸭血清鸭乙肝病毒DNA的含量。并检测鸭血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的变化，检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。苏木精-伊红染色法(HE)观察鸭肝组织病理学变化。结果 与模型组比较，葫芦茶苷各剂量组能显著降低血清DHBsAg和DHBeAg的滴度以及DHBV DNA的含量(P < 0.05或P < 0.01)。而且能降低鸭血清ALT、AST活性和MDA含量，增加肝组织SOD、GSH-PX活性和GSH含量。病理学检查结果提示葫芦茶苷能显著减轻肝细胞损伤程度。结论 葫芦茶苷对鸭乙型肝炎病毒具有体内抑制作用，对DHBV引起肝损伤具有保护作用。     

刺蒺藜总皂苷对雷公藤多苷诱导的急性肝损伤小鼠肝组织Caspase-3表达的影响

目的：探讨刺蒺藜总皂苷对急性药物性肝损伤的防治作用及其机理。方法：60只小鼠随机分为模型组,刺蒺藜总皂苷低、中、高剂量组,甘利欣对照纽和空白组,分别以相应剂量药物灌胃7d,然后以雷公藤多苷灌胃1次造模,观察小鼠血清AIJT、AST水平变化及肝组织Caspase-3表达情况。结果：刺蒺藜总皂苷可有效降低小鼠血清ATJT、AST水平,与模型组比较,有显著统计学意义（P〈0．05）,并使肝组织Caspase-3表达降低,尤以高、中剂量组效果最佳。结论：刺蒺藜总皂苷对雷公藤多苷诱导的急性肝损伤具有较好保护作用,其机理与降低Caspase-3表达、抑制肝细胞凋亡有关。     

黄芩苷对脑缺血大鼠的治疗作用及对Caspase-3的影响

[目的]通过TTC染色,动物神经行为学评分以及脑组织超微组织观察判断黄芩苷对局灶缺血性大鼠的治疗作用及对半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的影响。[方法]用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,通过TTC染色,神经功能检查法对脑缺血后动物进行行为测评,病理及超微组织观察作为药效评价辅助手段,应用原为杂交技术检测Caspase-3的表达变化,准确判断黄芩苷对局灶缺血性大鼠的治疗作用及其作用机制。[结果]黄芩苷可以减少脑缺血后脑梗死面积,减轻脑水肿,减少脑组织海马、皮层Caspase-3的表达。[结论]黄芩苷具有神经脑保护作用,调节Caspase-3表达可能是使其发挥作用的重要机制之一。     

五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝组织Fas、Fasl、Caspase-8蛋白表达的影响

[目的]研究五田保肝液对酒精性肝病大鼠肝细胞凋亡以及肝组织中Fas、Fasl、Caspase-8蛋白表达的影响。[方法]100只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组10只,阳性药对照组、模型组、五田保肝液低、中、高剂量组各18只。采用白酒灌胃的方法制备动物模型,造模12周乙醚麻醉后断头处死大鼠,取肝组织,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡指数,采用免疫组化法法检测肝组织Fas、Fasl、Caspase-8蛋白的表达。[结果]模型组凋亡指数高于其他各组,中药中、高剂量组和阳性药对照组凋亡指数低于模型组,中药低剂量组凋亡指数和模型组无显著性差异;各组Fas蛋白表达差异没有显著性。模型组Fasl、Caspase-8蛋白表达高于其它各组;五田保肝液中、高剂量和阳性药组大鼠肝组织Fasl、Caspase-8的表达较模型组降低,五田保肝液低剂量组Fasl的表达与模型组相比,虽然从数据趋势上有下降的趋势,但差异无统计学意义。五田保肝液低剂量组Caspase-8的表达和模型组差异无统计学意义。[结论]五田保肝液可能通过下调Fasl、Caspase-8的表达,减少酒精引起的大鼠肝细胞的凋亡,从而达到防治酒精性肝病的功效。     

保肝解毒颗粒对雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠肝组织病理形态学的影响

目的:观察保肝解毒颗粒对雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠肝组织病理形态学的影响。方法:60只小鼠随机分为6组,分别以相应剂量药物灌胃5天,再以雷公藤多苷灌胃造模,制备病理切片,光镜下观察,并对肝细胞变性情况进行半定量分析。结果:模型组肝细胞出现不同程度变性和凋亡细胞等病理改变,保肝解毒颗粒大、中剂量组脂肪变性较轻、肝窦稍有变窄。半定量分析结果表明,模型组肝细胞变性程度严重,与空白组比较有统计学差异(P<0.05);保肝解毒颗粒各剂量组肝细胞变性程度均有所改善,尤以大、中剂量组效果最佳,与模型组比较有统计学差异(P<0.05),与空白组比较则无统计学意义(P>0.05)。结论:保肝解毒颗粒具有良好的保肝作用。     

黄芩苷对大鼠肝损伤的保护作用

目的研究黄芩苷的保肝作用。方法大鼠灌胃给药,用CCl4、D-氨基半乳糖制作大鼠急性肝损伤模型,用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,ALT)、丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,AST)的活性;测定大鼠血清超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione perioxidase,GSH-Px)的活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果黄芩苷可显著降低因CCl4、D-氨基半乳糖所致急性肝损伤大鼠血清ALT,AST的升高;对急性肝损伤大鼠血清SOD,GSH-Px的活性有明显的升高作用及降低MDA的含量。结论黄芩苷对CCl4、D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤有保护作用。     

保肝Ⅰ号对急慢性肝损伤的保护作用

目的:探讨傣药保肝Ⅰ号(BGYH)对急慢性肝损伤的保护作用.方法:采用iv卡介苗(BCG,1.5 ×107个活菌数/只)+脂多糖(LPS,10μg/只)造成小鼠急性免疫性肝损伤模型,后连续ig保肝Ⅰ号低、中、高(5.1,10.2,20.4 g·kg -1)剂量12 d;采用iv刀豆蛋白(Con A,15 mg·kg-1)造成小鼠急性免疫性肝损伤模型,后连续ig保肝Ⅰ号低、中、高(5.1,10.2,20.4g· kg-1)剂量7d;采用sc CC14(40％)大豆油溶液建立大鼠慢性肝纤维化模型,后连续ig保肝Ⅰ号低、中、高(0.14,0.28,0.56g·kg-1)剂量8周.各组动物取血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活力,并取肝脏做病理切片,观察肝组织病变,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-o),白蛋白(Alb),测肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量.结果:在BCG+ LPS模型中,保肝Ⅰ号能显著降低ALT,AST活力和肝脏指数(HI);在ConA模型中,保肝Ⅰ号能显著降低AST,ALT,TNF-α的活力;在CC14复合因素诱导的大鼠慢性肝损伤模型中,保肝Ⅰ号能显著降低AST,ALT,升高Hyp,能显著升高Alb含量,且保肝Ⅰ号能减轻各模型动物肝脏病变.结论:保肝Ⅰ号对急慢性肝损伤具有较好的保护作用.     

金丝桃苷对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究金丝桃苷对乙醇致小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双脂组(5.625 mg/kg)和金丝桃苷(12.5、25、50 mg/kg)剂量组。每日灌胃给药1次,连续7 d。末次给药1 h后,除正常组外,分别灌胃给予50%乙醇14 ml/kg复制酒精性肝损伤模型。复制模型12 h后,处理动物,测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)以及甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)水平;测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量。苏木素-伊红(HE)染色,观察肝组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠清ALT,AST,GGT及TG水平显著升高,肝组织SOD活性及GSH含量显著降低,MDA含量显著升高,病理学结果显示模型组肝组织损伤明显。与模型组比较,金丝桃苷(25、50 mg/kg)剂量组均能降低血清中ALT、AST,GGT和TG水平以及肝组织中MDA含量,同时升高SOD活性和GSH含量;金丝桃苷(12.5 mg/kg)剂量组能降低血清中ALT、AST水平,升高SOD活性;金丝桃苷各剂量组(12.5、25、50 mg/kg)均能减轻肝损伤的病变程度。结论:金丝桃苷对乙醇所致的小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用和抑制脂质过氧化损伤有关。     

保肝益胃合剂对大鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的:观察保肝益胃合剂对大鼠急性肝损伤的保护作用。方法:分别用四氯化碳(CC14)2mL/kg,硫代乙酰胺(TAA)200mg/kg,腹腔注射(ip),建立大鼠急性肝损伤的模型;保肝益胃合剂,多烯磷脂酰胆碱胶囊(易善复),甘草酸二胺胶囊(甘立欣)灌胃治疗。测定保肝益胃合剂对肝损伤大鼠的血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性,同时观测肝脏组织的病理学变化以评价肝脏损伤程度和药物的保护作用及观察死亡率。结果:CC14建立大鼠急性肝损伤的模型实验:正常对照组无死亡,保肝益胃合剂组和保肝益胃合剂+易善复组死亡率较模型对照组明显降低;保肝益胃合剂组ALT、AST值显著低于模型对照组,分别与模型对照组比较有非常显著差别(P<0.01);保肝益胃合剂组大鼠肝细胞坏死评分值显著低于模型对照组,与之比较有显著性差别(P<0.05)。TAA建立大鼠急性肝损伤的模型实验:保肝益胃合剂组ALT、AST值低于模型对照组。结论:保肝益胃合剂对大鼠急性肝损伤有明显的保护作用。     

葫芦茶苷对大鼠肝星状细胞增殖和细胞外基质的影响及机制研究

目的 研究葫芦茶苷对大鼠肝星状细胞增殖和细胞外基质分泌的影响,并探讨其可能机制.方法 以大鼠肝星状细胞(HSC-T6)为体外细胞模型,采用CCK-8法检测葫芦茶苷对HSC-T6增殖的抑制作用,ELISA法测定细胞上清液中Hyp、HA和TIMP-1的含量,FQ-PCR检测Col I、TGF-β1、α-SMA、PDGF-B...     

Caspase-3抑制剂对蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的作用

目的探讨Caspase-3抑制剂在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用。方法颈内动脉穿刺制作大鼠蛛网膜下腔出血模型。将大鼠随机分成3组：实验组（38只）模型制作后腹腔注射Caspase-3抑制剂Z-VAD-FMK（10μmol/L,0.3 mL）;对照组（38只）注射等体积二甲基亚砜（DMSO）;正常组（16只）未进行任何处理。72 h记录死亡率、神经功能评分、脑水肿、血脑屏障通透性等脑损伤指标;TUNEL染色检测神经元细胞凋亡,免疫组化、Western Blot检测Caspase-3表达。结果 Caspase-3抑制剂可降低大鼠死亡率（4 7.4%vs2 8.9%,P〈0.0 5）,减轻脑水肿,保护血脑屏障,减少Caspase-3蛋白表达及神经元细胞凋亡（P〈0.05）,但对神经功能评分无明显影响（P〉0.05）。结论细胞凋亡在SAH后早期脑损伤中起重要作用,可减轻SAH后早期脑损伤。     

橄榄解酒饮对急性酒精性肝损伤大鼠、小鼠丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶的影响

目的:观察橄榄解酒饮对大鼠、小鼠急性酒精性肝损伤的防治效果,初步探讨其对血清及肝匀浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的影响.方法:采用白酒灌胃法造模,每天记录醉酒、醒酒时间,第3天检测血清ALT,第5天检测血清及肝匀浆ALT、AST,并与护肝胶囊对照.结果:橄榄解酒饮可显著降低大鼠、小鼠急性酒精性肝损伤模型醉酒率,提高醒/醉比;显著降低血清ALT、AST及肝匀浆ALT水平,与对照组比较差异有显著(P《0.05或P《0.01).结论:橄榄解酒饮具有良好的防醉解酒护肝作用.     

粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤大鼠血清NO和肝组织SOD、MDA的影响

目的：探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法：以化学方法提取总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物，通过一次性腹腔注射99．5％CCl4建立大鼠急性肝损伤的模型，检测药物对大鼠血清NO及肝组织中SOD、MDA的影响。结果：粗叶悬钩子根部总生物碱能明显降低大鼠血清中异常增高的NO及肝组织中MDA含量（P〈0．01），提高肝组织中SOD活性，减轻大鼠肝细胞坏死程度。总多糖、总黄酮对大鼠血清NO及肝组织中SOD、MDA有一定影响但没有统计学意义。结论：粗叶悬钩子根部总生物碱具有减轻CCl4所致肝细胞损伤的作用，其作用机理可能与减轻脂质过氧化反应有关。     

华蟾素注射液对小鼠肝癌组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响

目的:观察华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因(mRNA)及蛋白表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,华蟾素注射液低、高剂量组,顺铂(DDP)组。观察各组小鼠肿瘤生长情况变化。采用荧光定量RT-PCR方法和Western Blot检测方法检测各组H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响。结果:华蟾素低剂量组不能有效抑制肿瘤的生长,而华蟾素高剂量组、DDP组的抑瘤率分别为41.67%、52.78%,具有明显的抑制肿瘤生长作用(P<0.01)。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3表达无明显差异,而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3的mRNA的表达升高(P<0.05)及蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:华蟾素注射液具有抑制肝癌细胞生长的作用,其分子机制可能是上调肿瘤组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白的表达,从而促进肝癌肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠细胞因子及肝组织的影响

目的:从炎症因子角度探讨解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠免疫网络的细胞因子调节作用和对肝组织的影响。方法:取Wistar大鼠120只,取正常组20只,其余大鼠采用D-氨基半乳糖(D-Gal N)+脂多糖(LPS)联合制备大鼠急性肝衰竭模型,造模成功的大鼠分别分为模型组,解毒化瘀颗粒低、中、高剂量组(9.1,28.76,57.55 g·kg~(-1)),E5531组(内毒素拮抗剂,10 mg·kg~(-1)),每组20只,造模前5 d开始ig给药,正常组与模型组均给予等量蒸馏水,2次/天,造模后给药48 h后处死大鼠,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),IL~(-1)0水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理组织学改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6水平明显升高,IL~(-1)0水平明显降低(P0.05),模型组大鼠肝组织明显的炎性细胞浸润,病理损伤较为明显;与模型组比较,解毒化瘀颗粒低、中、高剂量组TNF-α,IL-6水平及显著降低,IL~(-1)0水平表达升高(P0.05),肝组织病理结果提示解毒化瘀颗粒低、中、高剂量组的肝组织损伤程度均较模型组减轻,有显著性差异(P0.05)。结论:解毒化瘀颗粒通过减少促炎因子的水平、抑制促炎因子表达,提高抗炎因子的水平及表达来改善患者全身炎症反应、保护肝细胞功能,解毒化瘀颗粒拮抗急性肝衰竭大鼠的作用机制之一。     

冠心合剂减少急性心肌梗死大鼠凋亡及对Bax、Bcl-2、p-BAD、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察不同剂量冠心合剂对大鼠急性心肌梗死凋亡及线粒体途径相关凋亡蛋白表达的影响。方法:取雄性SD大鼠80只,随机分为模型组、冠心合剂高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组。连续喂养大鼠7 d后,结扎冠状动脉前降支,造成急性心梗模型。造模手术后4.5 h留取心脏标本,检测梗死面积、细胞凋亡指数以及Bax、Bcl-2、p-BAD、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达量。结果:与模型组比较,冠心合剂组可明显减少心梗面积和心肌细胞凋亡,上调Bcl-2,p-BAD表达,减少Bax,Caspase-8和Caspase3蛋白表达。结论:冠心合剂抑制缺血导致的心肌梗死,减少心梗面积和心肌细胞凋亡,其机制与调节线粒体途径中相关凋亡蛋白的表达有关。     

头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠病理形态学及凋亡相关基因 Caspase-3的影响

目的 通过观察头穴丛刺对急性脑梗死大鼠病理形态学及凋亡相关基因caspase-3表达的影响,探讨该方法治疗脑梗死的作用机制.方法 将72只雄性Wister大鼠随机分为三组:假手术组(A)、模型组(B)、头穴丛刺组(C),每组24只.各组再按脑梗死后不同时间点分为6 h、24 h、3 d三个亚组,每组8只.采用线栓法制备急性脑梗死动物模型.观察头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠不同时间点缺血侧脑组织病理形态学及凋亡相关基因Caspase-3表达的变化.结果 脑梗死第3 d,B组大鼠梗死灶中心区坏死彻底,周围区神经细胞数目明显减少,脑组织水肿明显,可见神经毡疏松、淡染.与B组比较,C组大鼠梗死灶周边可见胶质细胞增生,脑组织水肿减轻;脑梗死后24 h至3 d,C组大鼠缺血侧皮层促凋亡基因Cmspase-3表达明显减少,与B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 头穴丛刺疗法能够改善脑梗死缺血半暗区神经细胞功能状态,促进神经胶质细胞的增生;并可通过抑制促凋亡基因Caspase-3的表达,而发挥一定的脑保护作用.     

小球藻提取物对大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 利用四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤模型,研究小球藻提取物对急性肝损伤的保护作用.方法利用四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤,测定大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,肝组织中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性,分析小球藻提取物对上述指标的影响.结果小球藻提取物显著降低大鼠血清中ALT,AST以及肝组织中MDA值并促进肝组织中GSH-Px活性及GSH含量的升高.结论小球藻提取物对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤具有明显的防治作用.     

山高粱水提物对大鼠急性肝损伤保护作用的研究

目的 :研究山高粱水提物对 CCl4 所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法 :给动物灌胃给药 ,用 CCl4 造大鼠急性肝损伤模型 ,用比色分析法测定大鼠血清天冬氨酸转氨酶 (aspartate transaminase,AL T)、丙氨酸转氨酶 (alaninetransaminase,AST)的活性 ;测定大鼠血清超氧化歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (glutathioneperioxidase,GSH- PX)的活性及丙二醛 (malondialdehyde,MDA)的含量。结果 :山高粱水提物显著降低因 CCl4 所致急性肝损伤大鼠血清 AL T的升高 ;对急性肝损伤大鼠血清 SOD,GSH- PX的活性有明显的升高作用及降低 MDA的含量 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :山高粱水提物对 CCl4 所致大鼠急性肝损伤有保护作用。     

愈肝片对实验性大鼠急慢性肝损伤的保护作用

目的：探讨愈肝片对大鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤和四氯化碳慢性肝损伤的保护作用。方法：分组造模给药后测定大鼠血清中AST、ALT、TP、ALB和出凝血时间的变化，取肝组织做病理学检测。结果：愈肝片能降低D-氨基半乳糖急性肝损伤大鼠血清AST、升高白蛋白ALB，改善出凝血时间，可明显减轻肝组织变性、坏死程度；并能降低四氯化碳慢性肝损伤大鼠血清AST、ALT，升高ALB、TP。结论：愈肝片对D氨基半乳糖和四氯化碳所致的急慢性肝损伤有保护作用。