耳聋左慈丸治疗老年性耳聋临床研究

目的：观察耳聋左慈丸治疗老年性耳聋的临床疗效。方法：将老年性耳聋患者 60 例随机分为 2 组,对照组 30 例采用单纯声治疗,研究组 30 例在对照组的基础上加用耳聋左慈丸治疗。2 组疗程均为 3 个月,观察比较 2 组临床疗效、治疗后耳聋分级情况、血清炎症指标肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-1β （IL-1β）、白细胞介素-6 （IL-6） 水平变化。结果：总有效率研究组为 86.67%,对照组为 60.00%,2 组比较,差异有统计学意义 （P＜0.05）。治疗后,无耳聋患者研究组占比36.67%,对照组占比 16.67%,2 组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗前,2 组患者 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后,研究组患者 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平均明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：耳聋左慈丸治疗老年性耳聋疗效显著,可减轻患者耳鸣症状,恢复听力,改善血清炎症因子水平。     

耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4表达的影响

目的观察耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠耳蜗组织水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,探讨其作用机制。方法除正常组对照组外,其他小鼠采用腹腔注射氢化可的松方法复制肾虚小鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、中药组,每组16只。中药组予耳聋左慈丸水煎液灌胃,模型组和正常对照组予生理盐水灌胃,共22 d。运用耳蜗铺片技术观察小鼠耳蜗内、外毛细胞与支持细胞的形态学变化;采用免疫组化法、Western blot检测耳蜗组织AQP4蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠耳蜗内、外毛细胞和支持细胞缺失或散乱;与模型组比较,中药组耳蜗内、外毛细胞和支持细胞排列较整齐,边界尚清楚;小鼠耳蜗组织AQP4蛋白表达结果显示,与模型组比较,中药组AQP4蛋白表达增强(P0.01),中药组与正常对照组AQP4蛋白表达无显著差异。结论耳聋左慈丸可能通过上调耳蜗组织AQP4蛋白表达,达到治疗肾虚小鼠耳聋的作用。     

耳聋左慈丸研究进展

耳聋左慈丸是中医治疗耳鸣、耳聋的经典名方,收录于2010年版《中国药典》。临床常用于治疗各种原因引起的耳鸣耳聋。该文通过查阅文献,系统论述耳聋左慈丸文献记载、临床观察、质量评价及其药理研究机制,从中发现耳聋左慈丸研究中存在的问题,为系统研究其作用机制及适应症提供依据和思路。     

耳聋左慈丸对大鼠年龄相关性听力减退的干预作用及对耳蜗组织SOD、MDA水平的影响

目的：探讨耳聋左慈丸对年龄相关性听力减退模型大鼠听力阈值及耳蜗组织中SOD、MDA表达水平的影响。方法：将2～3月龄Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组,模型组,耳聋左慈丸低、中及高剂量组。比较观察五组大鼠的听力阈值水平、病理改变及血清中的SOD、MDA含量。结果：各组大鼠的听力阈值水平、病理改变及血清中的SOD、MDA的组间差异均存在统计学意义（P<0.01）。结论：耳聋左慈丸能够减轻老年性聋模型大鼠耳蜗组织病理损害,改善氧化应激水平。     

耳聋左慈丸中熊果酸的薄层扫描法测定

目的建立耳聋左慈丸的质量控制方法.方法用薄层扫描法对耳聋左慈丸中有效成分熊果酸进行含量测定,采用硅胶G板,以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲酸(20:5:8:0.1)为展开剂,用10%硫酸乙醇溶液显色,选用单波长直线扫描法,检测波长为540 nm.结果本品中熊果酸含量在0.17～0.24 mg/g范围内可得到良好的线性关系,r=0.998,平均加样回收率为97.1%,RSD=1.7%.结论本法简便、快速、准确,适用于该品的质量监控.     

高效液相色谱法测定耳聋左慈丸中芍药苷的含量

目的　建立用高效液相色谱法测定耳聋左慈丸中芍药苷含量的方法。方法　采用C18柱 ,流动相为乙腈 水 (30∶70 ) ,流速为 1.0mL/min ,检测波长为 2 30nm。结果　芍药苷线性范围 2 0 12 0 μg /mL ,相关系数r =0 .9994 ,平均加样回收率为 99.79% ,相对标准偏差RSD为 1.5 2 % (n =6 )。结论　本法操作简便 ,准确 ,重复性好 ,可作为该制剂的定量分析方法     

HPLC-ELSD法测定耳聋左慈丸中熊果酸的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定耳聋左慈丸中熊果酸的含量。方法色谱柱VP-ODSC18;以甲醇-0.5%醋酸(90∶10)为流动相;流速:0.8mL/min。结果熊果酸在63～630μg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.11%(RSD=1.14%)。结论本法简便、准确、重现性好,可用于该制剂的含量测定。     

耳聋左慈丸“药对”拆方拮抗庆大霉素所致耳蜗毛细胞损伤的研究

目的观察耳聋左慈丸及其药对拆方对庆大霉素（GM）耳毒性模型的作用。方法出生2～3天小鼠的耳蜗螺旋器培养24h后,加入GM或同时加入GM和中药及其拆方的水提醇沉液处理。毛细胞经TRITC-phalloidin染色后在荧光显微镜下观察并进行全耳蜗毛细胞计数,计数结果输入全耳蜗毛细胞定量分析软件,获得全耳蜗毛细胞损失率。结果GM可造成耳蜗内、外毛细胞的缺失,且呈剂量依赖和时间依赖（P〈0．01）;耳聋左慈丸全方可降低0．5mMGM造成的耳蜗内毛细胞（IHC）和外毛细胞（OHC）的损失率;耳聋左慈丸拆方补肾药对、养肝药对、利水药对和健脾药对均可降低0．5mM GM造成的耳蜗OHC的损失率（P〈0．05,P〈0．01）,养肝药对和利水药对可降低IHC的损失率（P〈0．05）。结论耳聋左慈丸方中按照中医理论拆方配伍的药对（补肾药对、养肝药对、利水药对和健脾药对）对GM所致的OHC或IHC损伤有拮抗作用。     

耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6表达影响随机平行对照研究

[目的]耳聋左慈丸干预老年肾虚耳聋小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6。[方法]选SD大鼠60只,按随机数字表法随机分为3组,空白组,模型组、中药组,20只/组。腹腔注射氢化可的松造模,空白组、模型组:造模后5d给予生理盐水灌胃0.5 m L/只·d-1;中药组:造模后5d,按照鼠-人的折算剂量分别以不同药物灌胃,耳聋左慈丸汤剂按照中药水煎液制备,浓缩至0.3g/m L,0.5m L/只,灌胃22d。观测ABR听力,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平。[结果]ABR听力,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平改善中药组优于空白组、模型组。[结论]耳聋左慈丸可改善老年肾虚耳聋小鼠一般状态、降低ABR阈值、抑制TNF-α、IL-6、IL-1β表达。     

耳聋左慈丸防治庆大霉素诱发大鼠肾耳毒性实验研究

目的观察耳聋左慈丸对庆大霉素所致大鼠肾毒性和耳毒性的防治作用。方法将21只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、庆大霉素组、中药防治组,每组7只。庆大霉素组和中药防治组均肌肉注射庆大霉素(80μg·g-1·d-1),每日2次,持续14天;中药防治组同时灌胃给予耳聋左慈丸(6 g·kg-1·d-1),每日1次,持续14天。对照组通过肌肉注射和灌胃给予等剂量的0.9%NaCl溶液,持续14天。采用听性脑干反应(ABR)检测听力水平,测定肾系数、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN),光镜下观察肾组织的形态学改变。结果与对照组比较,庆大霉素组大鼠各频率ABR值显著增高(P0.01),肾系数、血肌酐、血尿素氮升高(P0.01)。与庆大霉素组比较,中药防治组大鼠各频率ABR值显著降低(P0.01),肾系数显著下降(P0.01),血肌酐、血尿素氮下降(P0.05)。光镜下显示,庆大霉素组大鼠肾小管扩张、肾小管上皮细胞水肿、肾小管腔内有蛋白管型和细胞管型,而中药防治组肾小管结构基本正常。结论耳聋左慈丸可同时减缓庆大霉素引起的肾毒性和耳毒性。     

耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠血清SOD、MDA、PKC的影响

目的研究耳聋左慈丸对老年性耳聋模型小鼠血清SOD、MDA、PKC含量的影响,探讨治疗老年性耳聋的机制。方法将100只健康雄性SPF级昆明小鼠随机分为2组,对照组(CG)15只和造模组85只,造模组采用腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg.d),对照组腹腔注射等剂量0.9%生理盐水,每日1次,连续2个月。造模成功后,将75只小鼠随机分为5组,模型组(MG)、VitC组(VCG)、中药低剂量组(LDG)、中药中剂量组(MDG)、中药高剂量组(HDG),每组15只。VCG灌胃Vit C注射液(150 mg/kg.d),中药治疗组灌胃不同浓度耳聋左慈丸溶液,分别是LDG(0.3 g/ml)、MDG(0.6 g/ml)、HDG(1.2g/m)l,CG和MG灌胃等剂量的0.9%NaC l,每日1次,连续14天。采用听性脑干反应(ABR)检测听力水平,用比色法测定血清的SOD活性、MDA含量的变化,用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测血清中PKC的含量。结果与对照组相比,模型组小鼠的一般情况均减退,且各频率ABR值显著增高(P0.01或P0.05),血清SOD活性降低、血清MDA含量增高(P0.01)、血清PKC的含量升高(P0.01)。与模型组相比,中药组小鼠的一般情况均得到改善,且各频率ABR值降低(P0.01),依次是HDGMDGLDG,血清SOD活性升高,依次是HDGMDGLDG,血清MDA含量逐渐降低,依次是LDGMDGHDG,,减轻了氧自由基引起的病理损伤;VCG小鼠血清的SOD活性、MDA含量与LDG相近。中药各组显著降低血清PKC的含量(P0.01)。结论耳聋左慈丸可以减轻老年性耳聋模型小鼠的病理损害,对氧自由基的损伤有一定的保护作用;降低PKC浓度,从而对c AMP/PKC信号通路起调节作用。     

甲硫酸倍他司汀联合耳聋左慈丸治疗神经性耳鸣30例

目的探讨甲硫酸倍他司汀联合耳聋左慈丸治疗神经性耳聋鸣的临床疗效。方法选取2016年1月—2017年1月在大连市友谊医院耳鼻喉头颈外科就诊的60例神经性耳聋患者,随机分为试验组和对照组,对照组30例,采取甲硫酸倍他司汀治疗,试验组30例,在对照组的基础上使用耳聋左慈丸治疗,比较两组患者的耳鸣症状评分、TEOAE有效引出和临床有效率。结果试验组各项指标均优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论对神经性耳鸣患者采取甲硫酸倍他司汀联合耳聋左慈丸治疗,可以有效改善临床症状,提高治疗效果,值得推广。     

耳聋左慈丸加味联合声治疗对肾精亏虚型耳鸣及抗氧化作用的观察

目的:探讨耳聋左慈丸加味联合声治疗对肾精亏虚型耳鸣的临床疗效和对超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),总抗氧化能力(T-AOC)指标的影响。方法:将79例患者随机按数字表法分为对照组39例和观察组40例。对照组采用声治疗,观察组在声治疗的基础上采用耳聋左慈丸加味内服。两组疗程均为连续治疗3个月。进行治疗前后耳鸣严重程度、耳鸣残疾评估量表(THI),用焦虑自评量表,睡眠自评量表(SRSS)和肾精亏虚证评分;检测治疗前后SOD,MDA,GSH-Px和T-AOC水平。结果:经秩和检验,观察组临床疗效优于对照组(Z=1.936,P0.05);观察组患者耳鸣残疾程度轻于对照组,差异有统计学意义(Z=1.848,P0.05);治疗后观察组患者耳鸣残疾程度轻于对照组,差异有统计学意义(Z=1.887,P0.05);治疗后观察组患者耳鸣严重程度,THI,SA,SRSS和肾精亏虚证评分均低于对照组(P0.01);治疗后观察组患者MDA水平低于对照组,SOD,GSH-Px和T-AOC水平均高于对照组(P0.01)。结论:在声治疗的基础上,耳聋左慈丸加味治疗肾精亏虚型耳鸣患者,可减轻耳鸣严重程度和耳鸣残疾程度,改善临床症状,并对焦虑和睡眠有明显的改善作用,还具有一定的抗氧自由基损伤作用,临床疗效优于单纯的声治疗。     

超临界流体萃取耳聋左慈丸中丹皮酚的研究

目的建立一种用超临界流体萃取和高效液相分析耳聋左慈丸中丹皮酚的方法。方法用正交试验法,考察时间、温度、压力、夹带剂的种类对耳聋左慈丸中丹皮酚的提取量的影响。结果最佳超临界流体萃取条件为:95%乙醇作为夹带剂,压力为20 MPa,温度为50℃,提取时间为90 min。结论该方法可有效的提取和分析耳聋左慈丸中丹皮酚的含量。     

耳聋左慈丸及有效拆方拮抗庆大霉素诱导毛细胞凋亡的实验研究

目的:探讨耳聋左慈丸及其有效拆方(熟地黄泽泻药对、泽泻单味药)对庆大霉素诱导内耳听毛细胞凋亡相关蛋白及酶活性变化的影响。方法:复制内耳螺旋器体外培养庆大霉素损伤模型,采用原位荧光标记及免疫荧光标记观察庆大霉素损伤毛细胞区域凋亡酶Caspases活性、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达量的改变及中药的影响。结果:与正常对照组比较,0.3mmol.L-1庆大霉素能够引起内耳毛细胞Caspase-3,Caspase-9酶活性明显增强,凋亡调节因子Bcl-2/Bax蛋白表达明显下降。与模型组比较,耳聋左慈丸对Caspase-9酶活性有显著抑制作用,对Caspase-3酶活性有抑制趋势,对Bcl-2/Bax蛋白表达有明显上调作用;熟地黄泽泻药对、泽泻单味均能明显抑制Caspase-3,Caspase-9酶活性,显著上调Bcl-2/Bax蛋白表达。结论:耳聋左慈丸、熟地黄泽泻药对及泽泻单味可能通过纠正线粒体凋亡信号转导途径的异常变化,拮抗庆大霉素对毛细胞的损伤。     

桂枝茯苓胶囊对子宫腺肌病小鼠病灶组织MMP-2、MMP-7的影响

目的:探讨桂枝茯苓胶囊治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,以下简称Ad)的实验依据。方法:将7周龄雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组,除正常组以外,对其他3组小鼠行经腹同种异体垂体宫腔移植手术,术后正常组和模型组小鼠灌胃蒸馏水,中药组灌胃桂枝茯苓胶囊,西药组灌胃孕三烯酮,用药3个月,停药后继续饲养3个月,并行病理切片HE染色和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-7免疫组化测定。结果:小鼠Ad发病率模型组(90.0%)>中药组(75.0%)>西药组(69.2%)>正常组(0.0%),且MMP-2和MMP-7在动情间期子宫内膜的表达强于动情期,在模型组Ad病灶中的表达最强,和正常组相比差异显著(P<0.05),在中药组中的表达有所下降,在西药组中的表达更低,与模型组差异显著(P<0.05)。结论:采用BALB/c系小鼠行经腹同种异体垂体移植术可以作为建立Ad动物模型的理想方法,桂枝茯苓胶囊能降低小鼠Ad的发生率,其作用机理与调节MMP-2、MMP-7蛋白表达水平有关。     

香砂六君子丸对脾虚痰浊大鼠小肠组织cAMP/PKA信号通路的影响

目的:通过观察香砂六君子丸对脾虚痰浊证大鼠小肠c AMP/PKA信号通路的影响,探讨香砂六君子丸治疗脾虚痰浊证大鼠可能机制。方法:24只SD大鼠,随机分为空白对照组、脾虚痰浊组、香砂六君子丸治疗组(以下简称治疗组),每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠复制脾虚痰浊证动物模型,14 d后,治疗组采用香砂六君子丸灌胃治疗,空白对照组和脾虚痰浊模型组予等量生理盐水灌胃。灌胃60 d后采用ELISA法检测血浆中c AMP浓度,RT-PCR和Western blot检测大鼠小肠GP、PHK和PKA mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,脾虚痰浊组小肠c AMP活性显著降低,与脾虚痰浊组相比,治疗组小肠c AMP活性显著升高;与空白对照组相比,脾虚痰浊组GP、PHK、PKA mRNA和蛋白含量显著下降,与脾虚痰浊组相比,治疗组GP、PHK、PKA mRNA和蛋白含量显著上升。结论:香砂六君子丸可能通过调控c AMP/PKA信号通路影响脾虚痰浊证大鼠。     

寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织有氧糖酵解抑制的影响

目的 观察寿胎丸防治复发性流产（RSA）的作用,探讨其调控有氧糖酵解的作用。方法 将40只CBA/J小鼠随机分为正常组、RSA组、地屈孕酮组和寿胎丸组,每组10只,分别灌胃蒸馏水、地屈孕酮溶解剂、寿胎丸14天。14天后将正常组CBA/J雌鼠与BALB/c雄鼠2∶1合笼,其余3组雌鼠与DBA/2雄鼠2∶1合笼,建立RSA模型,并按照前法继续灌胃至见栓第10天。计算各组小鼠胚胎丢失率,HE染色观察蜕膜组织,Western Blot、实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测小鼠蜕膜组织己糖激酶（HK）2、M2型丙酮酸激酶（PKM2）、乳酸脱氢酶（LDH）A、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达,乳酸脱氢酶比色法检测乳酸（LA）含量,检测HK、PK、LDH活性。结果 与正常组比较,RSA组小鼠胚胎丢失率升高（P<0.05）,蜕膜组织细胞减少,排列疏松,胞浆空泡样变,部分细胞核消失,蜕膜组织HK2、PKM2、LDHA、Bcl-2蛋白及mRNA表达降低（P<0.05）,Bax、Caspase-3蛋白...     

补肾调经方、逍遥丸对促性腺激素预处理小鼠组织蛋白酶-L mRNA的影响

目的 探讨补肾调经方、逍遥丸对小鼠组织蛋白酶-L（cathepsin-L,Cat L） mRNA的影响。