中药血清对大鼠bMSCs体外成软骨分化中Col2a1和Acan表达的影响

目的观察中药雪莲花、丹参、仙灵脾、黄芪和复方右归饮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Ⅱ型胶原α1(Col2a1)和软骨聚糖蛋白(Acan)表达的影响。方法 2月龄SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养。传至第3代后,将培养细胞分为未诱导组、TGF诱导组、中药血清诱导组和TGF-中药血清联合诱导组。中药血清的使用浓度为5%,由上述中药连续大鼠灌胃3 d后,分离外周血获得。各组细胞诱导至7 d和14 d时,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Col2a1和Acan的表达,同时应用细胞免疫化学法检测诱导14 d的Ⅱ型胶原的表达。结果 bMSCs在TGF-β1的诱导下可以分化为软骨样细胞,在诱导后7 d和14 d,TGF诱导组Col2a1的表达量显著高于未诱导组,分别为14.272倍和35.833倍,中药血清组Col2a1的表达量变化不显著,TGF-中药血清联合诱导组Col2a1的表达量虽高于未诱导组,但显著低于TGF诱导组。Acan基因的表达量在各组中均显著低于未诱导组。结论骨髓间充质干细胞在体外可以分化为软骨样细胞,中药对细胞成软骨分化没有明显的促进作用,并对TGF诱导效应具有一定的抑制作用。     

龟鹿二仙胶汤含药血清对体外软骨细胞表型BMSCs凋亡的影响

目的:观察龟鹿二仙胶汤含药血清干预软骨细胞表型化骨缱质基质干细胞(BMSCs)凋亡的影响.方法::抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,将龟鹿二仙胶汤含药血清诱导出的软骨细胞表型化BMSCs,用IL-1β诱导凋亡,分别于24h、48h、72h后,采用透射电子显微镜、免疫荧光组织化学、流式细胞仪等实验技术,研究龟鹿二仙胶汤对软骨表型化BMSCs凋亡的影响.结果:龟鹿二仙胶汤能减少软骨表型化BMSCs凋亡的数量及程度,降低细胞凋亡率.结论:龟鹿二仙胶汤可以明显抑制或逆转软骨表型化BMSCs凋亡,能显著延缓软骨表型化BMSCs的凋亡.     

补肾法诱导骨髓间充质干细胞定向成骨分化的研究进展

中医学认为:肾主骨,生髓。骨的生成,发育,强弱,盛衰均与肾有密切关系。众多研究表明补肾法能诱导骨髓间质干细胞定向成骨分化,骨髓间质干细胞是多能细胞,通过诱导可分化成为骨、软骨、脂肪、肌腱,这是用现代科学技术更完善地阐释补肾法的理论依据,对防治骨质疏松症,骨坏死,骨缺损等也有重大价值。     

软骨发育不全性侏儒症2例报告

<正> 软骨发育不全症(Achondroplasia)是一种先天的软骨发育障碍,累及软骨内成骨的骨骼,临床上以特有的侏儒状态为其特征。软骨发育不全性侏儒症是一种常染色体显性遗传性疾病,笔者近日收集到由近亲婚配所生2个女儿均患该症,报告如下。 患者女性,25岁。已婚,因右小腿疼痛3天就诊。体格检查:身高106cm,头部相对较大,前额凸出,鼻根部平坦,鼻梁凹陷,下颌向前,胸部心肺正常,腹部平坦,脐位于身长中点水平线以下,肝睥不肿大,站     

中国围产儿软骨发育不全特征分析

目的 :了解我国围产儿软骨发育不全的流行病学特征。方法 :在 1987～ 1992年 ,采用以医院为单位的整群抽样方法 ,对全国 5 0 0多所医院孕 2 8周至产后 7天的围产儿进行监测。结果 :我国软骨发育不全的发生率为 0 .18/万。男性的发生率为 0 .18/万 ,女性为 1.17/万 ;城镇、乡村的发生率分别为 0 .19/万、 0 .15 /万。 76%足月软骨发育不全儿的身长低于5 0 cm ,软骨发育不全常伴发肌肉骨骼系统其他畸形 ,其围产期死亡率为 0 .0 1‰。结论 :软骨发育不全是一种较常见的畸形 ,其发生无性别和城乡差异 ,常累及肌肉骨骼系统。     

中药在软骨组织工程的研究进展

软骨组织工程学是最有可能解决软骨缺损的希望,骨髓间充质干细胞具有多向分化的潜能,是软骨组织工程学的理想种子细胞。研究表明中药具有调节BMSC向软骨细胞分化的作用,本文就中药诱导BMSC的软骨分化的研究现状行综述,以此来探讨中药在软骨组织工程中的应用前景。     

微重力影响间充质干细胞向软骨细胞分化的研究进展

关节软骨损伤的治疗是骨科研究的热点之一。软骨组织工程研究致力于通过构建细胞与生物材料的三维复合体,形成具有生物活性的软骨组织,在功能及形态方面完全替代缺损处的软骨,以医治大面积的软骨缺损。但在重力环境下,培养出的软骨细胞失去原有的细胞表型及电生理特性,构建出的软骨组织只能在形态和生化成分上与原缺损处软骨组织相似。而微重力环境可影响间充质干细胞的增殖和分化,有促进干细胞向软骨细胞分化的作用。本文从微重力环境的建立和优点、微重力对间充质干细胞向软骨细胞分化的影响两大方面,对近年来的研究进展进行了综述。     

齐墩果酸诱导多种小鼠胚胎干细胞向生殖细胞方向分化研究

目的:寻找一种能诱导多种胚胎干细胞向生殖细胞方向分化的化合物,并以常用的诱导物维甲酸(Retinoic Acid,RA)作为阳性参照物。方法:分别培养小鼠胚胎干细胞1B10、D3、R1/E,诱导它们形成拟胚体,让拟胚体贴壁生长,加入特定化合物诱导贴壁细胞分化,诱导72 h后,提取被诱导细胞的RNA,再合成c DNA,最后利用实时荧光定量PCR检测各被诱导细胞中与生殖分化相关的基因的表达水平的变化。结果:发现齐墩果酸(Oleanolic Acid,OA)显著上调了所有被研究的小鼠胚胎干细胞的生殖分化关键基因的表达水平,同时发现阳性参照物RA仅能诱导1B10、R1/E,而不能诱导D3向生殖细胞方向分化。结论:OA能诱导多种胚胎干细胞向生殖细胞方向分化,诱导能力方面具有比常用诱导物维甲酸更广泛的普遍性。     

中药诱导大鼠间充质干细胞向神经干细胞分化研究

目的筛选具有诱导大鼠自体骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的有效中药成分。方法用分别舍有黄芩苷、三七总皂角苷、红景天苷和察丹酚酸B的诱导培养基对经培养传代的大鼠间充质干细胞进行诱导培养．并设对照组,再将以上4种中药单体诱导的间充质干细胞和对照组细胞用抗神经元特异烯化酶（NSE）抗体、抗胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）抗体和抗Nestin抗体进行免疫组化鉴定,以明确大鼠间充质细胞经这4种中药单体诱导后生长的细胞的性质。结果4种中药单体诱导的间充质干细胞都表达NSE、GFAP和Nestin,这些细胞形态均表现出具有丰富的胞体和明显的突起,对照纽则为胞体较小、呈圆形或椭圆形,突起少且短,甚至没有突起的细胞。结论三七总皂苷、红景天苷、黄芩苷和察丹酚酸B具有诱导间充质干细胞向神经细胞分化的作用．     

骨髓间充质干细胞移植治疗脑缺血损伤及中医药对其影响的研究进展

MSCs是继胚胎干细胞和神经干细胞之后,又一种能在体内外能向神经细胞分化的干细胞。其具有分化潜能好、来源丰富、取材容易、能克服伦理和免疫反应等优势,促进脑缺血损伤后神经功能的恢复,成为治疗脑缺血损伤理想的种子细胞。中医药在MSCs移植治疗脑缺血损伤方面有促进神经细胞存活、改善微环境等作用,显示出良好的临床应用前景。     

魟鱼软骨多糖诱导膀胱癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨缸鱼软骨多糖体外抑制膀胱癌EJ细胞株及诱导凋亡的作用。方法：体外培养膀胱癌EJ细胞株，以不同浓度缸鱼软骨多糖和丝裂霉素C处理，12，24，48和72h后通过MTT法测定细胞生长抑制作用，采用电镜观察和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：缸鱼软骨多糖和丝裂霉素C能抑制EJ细胞的生长，并在一定剂量和时间范围内存在时间、浓度依赖关系。电镜下凋亡细胞体积缩小，染色质浓缩致密，并沿核膜分布形成花瓣形。丝裂霉素C组和各缸鱼软骨多糖组细胞周期阻滞于G2／M期；不同浓度的缸鱼软骨多糖均可诱导EJ细胞凋亡，随缸鱼软骨多糖浓度和时间增加，可细胞凋亡率增加；50mg／mL和100mg／mL组凋亡率与丝裂霉素C组比较无显著差异。结论：缸鱼软骨多糖能抑制膀胱癌EJ细胞株的生长，诱导凋亡可能为其抗肿瘤作用机制之一。     

兔骨髓基质细胞源性神经干细胞诱导分化及移植修复脊髓损伤实验研究

目的:探究骨髓基质源性神经干细胞对于修复脊髓损伤的可行性和可靠性。方法:采用新西兰白兔作为研究对象,提取骨髓基质细胞加以培养分化,手术方式将骨髓基质细胞源性神经干细胞悬浊液移植到脊髓损伤部位,观察损伤区域再生情况。结果:早期培养细胞在无诱导分化时能表达巢蛋白,表明其有干细胞活性;干细胞移植后脊髓损伤部位增殖细胞排列无层次,且Brd U染色呈阳性。结论:兔骨髓基质细胞在合适的体外培养条件下能分化成干细胞,具有增殖分化能力,可以应用于修复脊髓损伤等神经学科领域。     

中药诱导骨髓间充质干细胞成软骨及成骨分化的研究进展

骨髓间充质干细胞(BMSCs)不仅具有强大的自我更新能力、多向分化潜能,还兼具低免疫原性及归巢能力,是骨及软骨组织工程中理想的种子细胞。目前,诱导BMSCs分化的细胞因子由于价格昂贵和安全性问题而无法广泛应用于临床实践中。研究表明中药及其有效成分可诱导BMSCs分化,具有与细胞因子类似的生理活性。文章旨在对中药诱导BMSCs成软骨及成骨分化的研究进展进行综述,以期为骨科疾病的防治研究提供参考。     

中医药在干细胞治疗缺血性心脏病中的研究进展

干细胞移植再生心肌是近年来心血管界研究的热点,作者综述了中医药在干细胞移植治疗缺血性心脏病方面的重要作用,如动员骨髓干细胞、促进干细胞增殖、成活、诱导其向心肌细胞分化等,显示出了中医药在于细胞治疗缺血性心脏病中的研究进展良好的应用前景.     

骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的研究进展

骨髓间充质干细胞（BoneMarrowMesenchymalstemcells,BMSCs）又称骨髓基质千细胞,是骨髓细胞中除去造血干细胞（非粘附细胞）之外的细胞部分,作为成体干细胞之一,具有多项分化潜能,能向骨、软骨、肌肉、神经、角膜上皮细胞等中胚层或外胚层组织细胞分化,是组织工程中重要的种子细胞之一,并且具有取材方便,扩增迅速,可自体移植等特点,因此,具有广泛的应用前景。     

戴村骨伤膏提取液对胎盘源性间充质干细胞成骨诱导分化的影响

目的:为了研究戴村骨伤膏对骨折愈合的影响,我们通过人胎盘源性间充质干细胞(hPMSC)的体外细胞试验,观察药物对干细胞成骨诱导分化的影响。方法:在体外培养的hPMSC中,加入不同药物剂量浓度的实验药液和成骨诱导液混合液,诱导2~4周后进行检测。采用偶氮偶联法进行碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞形成。Von Kossa染色法鉴定钙结节形成。以鼠抗人I型胶原单克隆抗体为一抗,羊抗鼠SABC为二抗,进行免疫组织化学染色。用流式细胞仪检测细胞表面标志。结果:hPMSC在诱导培养基培养条件下3 d出现细胞变粗,1周后细胞变为多角形或者是圆锥形,周边出现丝状突出,2周可见细胞基质矿化物逐渐出现,形成多层小结结构。实验2周后细胞基质内出现钙化,4周Von Kossa染色钙结节阳性,程度随药物剂量递增,药物诱导组(50mg.L-1)可见大量的黑色钙结节,单纯诱导组可见少量黑色钙结节形成,而对照组在任何时间都没有阳性反应。药物诱导2周后细胞碱性磷酸酶染色阳性,并且程度与药物剂量成正比,而单纯诱导液组的染色为弱阳性,未经诱导的显示阴性。经流式细胞术检测细胞表型发现经诱导而成的成骨细胞细胞表型无改变,表明其来源来自间充质干细胞。结论:戴村骨伤膏提取液能促进胎盘源性间充质干细胞成骨诱导分化,并且随药物剂量增加而效果提高。     

阿魏酸钠诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的初步研究

目的 探讨阿魏酸钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的可能作用。方法 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，采用阿魏酸钠对其进行诱导培养，倒置显微镜下观察诱导培养不同时间后细胞的形态变化，并应用免疫细胞化学方法鉴定诱导培养后细胞表面神经细胞特异性标志物神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果 阿魏酸钠诱导培养6h后即可见细胞形态发生明显变化，24h后表现为典型的神经细胞样形态，NF和NSE神经细胞特异性标志物呈阳性表达。结论 初步证实阿魏酸钠具有诱导体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。     

中药对软骨细胞增殖作用的研究进展

“软骨一旦破坏,即无法得到修复”,早在1743年Hunter即提出了此观点。两个半世纪以来,人们一直在探索修复软骨缺损的最佳方法和途径[1]。Reddi[2]将组织工程学定义为:制备用于替代缺损组织而再生新组织的一门科学。组织工程学是利用工程学和生命科学的原理和方法发展生物机体的组织器官或功能替代物的新兴学科[3],软骨组织工程是其一个分支,基本步骤为:①种子细胞的获得,从软骨组织中分离或从胚胎干细胞、骨髓基质干细胞分离分化出软骨细胞,并在体外进行培养;②将体外培养的软骨细胞种植在天然或人工合成生物载体材料上,并在生物载体材料上…     

1例套细胞淋巴瘤患者行自体造血干细胞移植的护理

套细胞淋巴瘤(MCL)是一种少见的以中老年人为主要发病的B细胞侵袭性非霍奇金淋巴瘤(NHL),目前套细胞淋巴瘤没有标准的治疗方案,但自体造血干细胞移植优于常规化疗,能使得部分患者达到长期缓解,因此做好套细胞淋巴瘤患者自体造血干细胞移植期间的护理,可有效改善套细胞淋巴瘤患者的生存质量。     

传代神经干细胞体外分化研究

目的：分离、培养和鉴定Wistar大鼠脑部的神经干细胞,传代培养后进行诱导分化。方法：分离培养神经干细胞,传代后进行诱导分化研究。结果：所分离培养的细胞具有增殖能力和分化潜能,表达nestin蛋白,诱导分化后经细胞免疫学证实为表达NSE的神经元和表达GFAP的星形胶质细胞。结论：神经干细胞具有体外诱导分化为神经元和星形胶质细胞的能力。