欢乐宁方对围绝经期综合征小鼠下丘脑KNDy及相关受体信号通路调控作用的研究

目的:探讨欢乐宁方对围绝经期综合征小鼠下丘脑KNDy编码基因及其相关受体信号通路的影响。方法:建立11月龄ICR小鼠围绝经期综合征模型,随机分为模型组、欢乐宁方低、中、高剂量组、补佳乐组,另取2月龄小鼠作为正常组,每组各10只;测定各组小鼠血清E_2、LH、FSH水平,检测下丘脑组织Ki SS-1、NKB、DYN及相关受体GPR54、NK3和KOR mRNA的表达。结果:围绝经期小鼠血清E2明显降低,血清FSH、LH明显升高;Kiss-1、GPR54、NKB、NK3、DYN、KOR mRNA表达量明显上升。欢乐宁方能明显升高围绝经期小鼠血清E2水平,降低血清FSH、LH水平,能下降下丘脑Kiss-1、GPR54、NKB、NK3、DYN、KOR mRNA的表达,以中高剂量为佳。结论:欢乐宁方能有效调节围绝经期综合征小鼠的性激素水平;欢乐宁方可能通过作用于KNDy神经元,从而影响GnRH的分泌来调节H-P-O轴,这可能是欢乐宁方治疗围绝经期综合征的作用机制之一。     

知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对HPGA轴的作用研究

[目的]探讨知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用。[方法]建造雌性性早熟SD大鼠模型,随机分为模型组、知母总皂苷低剂量组(知低组)、知母总皂苷高剂量组(知高组)、阳性对照组,另设正常组。经相应干预后,记录各组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间;取大鼠性器官,计算子宫、卵巢指数;HE染色观察大鼠卵巢形态学变化;ELISA检测大鼠血清性激素卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)水平;qPCR和Western blot检测大鼠下丘脑肿瘤转移抑制基因亲吻素-1(KISS-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)、促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRHR)mRNA与蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较短,子宫、卵巢指数较高,黄体数量较多,血清FSH、LH、E2水平较高,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较高(P<0.05);与模型组比较,知低组、知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知低组比较,知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知高组比较,阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05)。[结论]知母总皂苷可调节雌性性早熟SD大鼠性激素水平,对HPGA轴有抑制作用。     

自然衰老ICR小鼠进入围绝经期时限的研究

目的：探讨自然衰老小鼠进入围绝经的时限。方法：通过观察阴道脱落细胞，了解自然衰老及青年小鼠的动情周期情况，比较其卵巢组织形态及血清中雌二醇（E2）、孕酮（P）、促黄体激素（LH）及卵泡刺激素（FSH）含量，判定小鼠进入围绝经期。结果：11～12月龄的ICR小鼠动情周期紊乱；成熟卵泡减少，黄体数目下调；血清E2、P水平均明显降低，FSH及LH水平均明显升高。结论：11～12月龄的ICR小鼠已经进入了自然围绝经状态。     

欢乐宁方对围绝经期大鼠下丘脑KNDy的影响

目的观察欢乐宁方对围绝经期大鼠下丘脑(Kiss-1、NKB及DYN,KNDy)编码基因及其相关受体的影响。方法取60只13月龄雌性SD大鼠,随机分为模型组、欢乐宁方低、中、高剂量组(低、中、高剂量组)、补佳乐组、六味地黄丸组(地黄丸组),每组各10只,另取10只3月龄雌性SD大鼠作为正常组,观察各组大鼠水迷宫活动、皮肤含水量、血清E2、FSH水平和下丘脑组织Kiss-1及其相关受体GPR54、NKB、DYN mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组逃避潜伏期、FSH及Kiss-1、GPR54、NKB、DYN mRNA升高,皮肤含水量、E2降低(P0.01,P0.05)。与模型组比较,各给药组逃避潜伏期、FSH及Kiss-1、GPR54、NKB、DYN mRNA降低(P0.01,P0.05),皮肤含水量、E2升高(P0.01,P0.05)。与补佳乐组比较,低、中剂量组及地黄丸组皮肤含水量降低(P0.01,P0.05)。结论欢乐宁方可抑制KNDy神经元表达,上调E2水平,下调FSH水平。     

六味地黄汤对快速老化模型小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用及机理研究

目的 研究快速老化模型小鼠(senescence accelerated mice,SAM)增龄过程中下丘脑一垂体一卵巢(HPO)轴功能的变化及六味地黄汤(LW)的调节作用。方法采用阴道涂片法确定动物的动情周期;放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)水平及下丘脑β-内啡肽(β-EP)和P物质(SP)含量;蛋白免疫印迹法(westemb lotting法)检测垂体促黄体生成素(LH)、垂体及卵巢雌激素受体a(ERa)水平。结果在增龄过程中SAM快速老化亚系SAM-prone／8(SAMP8)的动情周期和动情间期均较同龄抗快速老化系SAM-resis-tance／1(SAMRl)明显延长,血清E2水平显著降低、垂体LH水平显著升高,下丘脑β-EP含量随增龄逐渐下降,SP含量一过性升高后又下降,卵巢ERa表达量明显低下。LW能显著缩短SAMP8动情间期,增加卵巢重量,升高血清E2水平,明显降低垂体LH水平;并能升高下丘脑β-EP含量,提高卵巢ERa的表达量,但却明显降低下丘脑SP含量。口服雌激素能显著提高SAMP8血清E2水平,降低垂体LH水平,升高下丘脑β-EP及SP含量,并增加垂体ERa表达量,但明显降低卵巢重量及ERa水平。结论SAMP8在衰老过程中所表现的进行性HPO轴功能紊乱与下丘脑肽类神经递质含量及卵巢ERa水平的变化具有密切关系。LW对SAMP8 HPO轴功能紊乱具有改善或调节作用。     

调更汤对围绝经期雌性大鼠生殖内分泌影响的实验研究

目的观察调更汤对围绝经期雌性大鼠生殖内分泌的影响,探讨其对围绝经期综合征症状改善的作用机制。方法 40只4~5月龄雌性SD大鼠,随机选择10只为青年组,其余30只均摘除双侧卵巢去势。随机分为3组,分别为模型组、中药组、西药组。围绝经期模型组与青年组予0.9%Na Cl溶液灌胃,中药组予调更汤,西药组予倍美力。灌药8周后,检测下丘脑及血清促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(Leptin)水平,观察各组大鼠生殖内分泌情况。结果 1造模成功后血清及下丘脑性激素的变化:与青年组比较,模型组血清E2、T水平显著降低(P0.01),FSH、LH、Leptin水平显著升高(P0.05,P0.01)。2中药组给予调更汤后血清性激素的变化:与模型组比较,中药组血清E2水平显著提高(P0.05),FSH、Leptin水平显著降低(P0.05,P0.01),但对LH、T影响不明显(P0.05)。与西药组比较,中药组血清E2、T含量降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。3中药组给予调更汤后下丘脑性激素的变化:与模型组比较,中药组下丘脑E2、FSH、LH、T变化不明显(P0.05),但可明显降低下丘脑Leptin含量(P0.05)。与西药组比较,中药组下丘脑E2、T含量降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论调更汤可通过提高血清E2水平,降低FSH与Leptin水平,进而减缓卵巢退行性变,延缓卵巢衰退,提高卵巢功能,从而起到治疗围绝经期综合征的作用。     

紫河车对围绝经期模型大鼠E2、LH、FSH干预作用研究

目的：探讨紫河车对围绝经期大鼠血清雌二醇（E2）、促卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）的影响。方法：选取4 月龄阴道细胞学涂片显示动情周期正常的青年雌性SD 大鼠,和18 月龄阴道细胞学涂片表现为无动情周期的老年SD 大鼠,为正常对照组;选取11~12 月龄阴道细胞学涂片显示动情周期紊乱的围绝经期SD 大鼠,随机分为模型组、治疗组和阳性对照组,正常对照组、模型组给予生理盐水,治疗组给予紫河车,阳性对照组给予教材方,观察紫河车对围绝经期模型大鼠E2、LH、FSH 的干预作用。结果：与青年组比较,老年组、模型组血清E2 水平均显著降低（P＜0.01）,FSH 和LH 水平均显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,治疗组、阳性对照组血清E2 水平均显著升高（P＜0.01）,FSH 和LH 水平均显著降低（P＜0.01）。结论：紫河车及教材方均能降低围绝经期大鼠的FSH、LH 水平和提高雌激素水平。     

大补阴丸治疗雌性大鼠真性性早熟的实验研究

目的:研究大补阴丸对雌性大鼠真性性早熟的治疗作用,并探讨其可能的作用机制.方法:26日龄SD雌性大鼠于每日14:00和16:00皮下注射N-甲基-DL-天冬氨酸(N-methyl-DL-aspartic acid,NMA)40 mg·kg-1建立性早熟模型,同时给予大补阴丸进行干预,通过肉眼观察大鼠阴门开启时间;阴道涂片法观察第1个发情间期出现的时间;取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的E2水平等对大补阴丸对NMA性早熟大鼠的治疗作用进行判定,并通过半定量RT-PCR法检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、G蛋白偶联受体54(GPR54)和Kiss-1 mRNA的表达,探讨大补阴丸的可能作用机制.结果:大补阴丸1.62,3.24 g·kg-1剂量能明显减轻性早熟大鼠的子宫系数(P＜0.05),减少动物阴道开口数(P＜0.01),对子宫壁厚度和黄体生成数均有一定的降低作用(P＜0.05),且能明显下调下丘脑GnRH,GPR54,Kiss-1 mRNA的表达水平(P＜0.05),而对血清E2水平无明显影响.结论:大补阴丸可能通过下调下丘脑Kiss-1/GPR54 mRNA的表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,达到治疗真性性早熟的目的.     

电针对PCOS合并IR大鼠下丘脑瘦素/Kisspeptin信号的影响

目的:通过电针对多囊卵巢综合征(PCOS)合并胰岛素抵抗(IR)大鼠生殖内分泌与代谢功能的同时调节,探讨其与影响下丘脑瘦素(LEP)/Kisspeptin(KP)信号传导的关联性。方法:3周龄SD雌性大鼠以硫酸普拉睾酮钠皮下注射联合高脂饲料喂养21 d建立PCOS合并IR模型,建模后随机分为模型组、西药组、电针组,继续高脂饲料喂养。另设空白组,每组8只。电针组大鼠予三阴交、关元、中脘、足(后)三里穴位电针治疗,西药组大鼠予二甲双胍溶液灌胃,连续治疗28 d。检测血清T、LH、FSH、LEP、FINS和FPG水平变化,计算HOMA-IR;HE染色观察卵巢形态学变化;实时PCR法检测下丘脑LEP mRNA、Kiss-1 mRNA和GnRH mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测下丘脑LEP和KP蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠性激素紊乱、糖脂代谢异常(P<0.01),下丘脑LEP mRNA及蛋白表达降低且Kiss-1 mRNA、GnRH mRNA及KP蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠血清LH、LEP水平及HOMA-IR降低(P<0.01或P<0.05),下丘脑LEP mRNA及蛋白表达升高(P<0.01或P<0.05),GnRH mRNA表达降低(P<0.05);西药组大鼠血清T、LH、LEP、FINS水平及HOMA-IR降低(P<0.05或P<0.01),下丘脑LEP mRNA表达升高(P<0.01)。西药组和电针组大鼠卵巢结构均较模型组改善,电针组大鼠血清T、LH、FSH、LEP、FINS、FPG水平,HOMA-IR,下丘脑LEP mRNA、Kiss-1 mRNA及GnRH mRNA表达,以及LEP及KP蛋白表达与西药组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:电针干预PCOS合并IR大鼠,可影响下丘脑LEP/KP信号传导,可能是电针同时调节糖脂代谢与生殖内分泌治疗PCOS的机制。     

补肾法对围绝经期综合征大鼠性激素及卵巢雌激素受体的影响

目的研究补肾法对围绝经期综合征(PPS)大鼠性激素及卵巢雌激素受体alpha(ERα)、beta(ERβ)的影响。方法筛选12周龄、具有正常动情周期的雌性SD大鼠8只为对照组,筛选12月龄雌性SD大鼠24只进行造模,以自然衰老法建立PPS模型大鼠,造模成功后根据随机数字表分为模型组、左归丸组及右归丸组,每组8只。左归丸组大鼠以生药浓度1.39 g/mL左归丸水煎剂1 mL/100 g进行灌胃,右归丸组大鼠以生药浓度1.24 g/mL右归丸水煎剂1 mL/100 g进行灌胃,对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,每日1次。给药21 d后采用放射性免疫技术检测4组大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平,采用实时荧光定量PCR (RTPCR)法分析计算各组ERα mRNA、ERβ mRNA相对表达量。结果与对照组比较,模型组E₂水平显著降低(P<0.01),FSH、LH水平显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,左归丸组、右归丸组E₂水平显著上升(P<0.05或P<0.01),...     

Intradermal Needle Method

Also called needle-embedding,is a development of retention of needles method.Insert a granular intrdermal needle or ringheaded thumbtack needle into the selected point,then fix the needle with adhesive plaster.The skin is stimulated lightly for a long time.This method can regulate the functions of the Zang-fu     

浅论"消法"

消法是通过消积导滞、消坚散结作用,使气、血、痰、食、水、虫等有形之结聚、积滞渐消缓散的一种治法。其核心是“消”与“散”,适用于蓄积有形之邪的病证。临床有消导食积、消痞化癜、消痰祛水、消疳杀虫、消疮散痈等具体方法。     

反佐法刍议

文章论述了反佐法的渊源与本义,应用的原则与适用的范围.具体讨论了反佐法应用的形式,并进一步明确了反佐法的概念及与佐制的区别.     

论反佐法

重新确定反佐法的概念,论述了反佐法的起源与立法依据,并将反佐法概括为反佐六法.     

一种基于EDTA脱钙法的改良骨组织脱钙方法

目的:探索操作方法简便、脱钙时间更短且对骨组织伤害较小的脱钙方法。方法:DBA/1小鼠40只,随机分组为胶原诱导关节炎模型组和正常组,并对模型组小鼠建立胶原诱导关节炎模型。分别取模型组和正常组踝关节,使用改良前后的脱钙方法进行脱钙,从关节病理及其评分、免疫组织化学方面进行比较脱钙效果。结果:经改良后,在脱钙温度4℃和脱钙液更换周期24 h条件下,脱钙速度较高(7 d),且此时对骨组织结构和骨组织内蛋白表达无明显影响。结论:优化的螯合剂脱钙法可以有效提高脱钙速度,可为快速制备病理诊断用骨切片提供了参考。     

关于微透析法与血药浓度法的异同及其药动学数据特殊处理的探索与思考

从采样方式、采样原理、适用性、发展趋势、样品浓度与机体整体浓度的关联性角度比较微透析采样技术与经典药动学采样技术的异同,探讨微透析技术进行药动学研究的适用性,根据采样对象性质,深入思考其样品数据处理的特殊性,提出并总结关于微透析样品数据的校正方法以提升微透析技术进行药动学研究的稳健性及结果可靠性。     

土木香趁鲜切制与传统切片方法的比较

目的: 探讨鲜切土木香饮片的可行性,对土木香传统切片工艺进行改良。 方法: 以土木香内酯、异土木香内酯及总黄酮含量为指标,通过正交试验考察含水量、干燥方式及切片厚度对土木香直接鲜切饮片工艺的影响,并与传统切片工艺进行比较。采用紫外分光光度法测定总黄酮含量;HPLC测定土木香内酯和异土木香内酯含量,色谱条件为SHIMADZU C₁₈色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相乙腈-0.1% 磷酸溶液(50:50),柱温30 ℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长220 nm,进样量20 μL。 结果: 优选的鲜切饮片工艺为土木香药材在含水量为35% 时切片,饮片厚度2.5~3.0 mm,阴干。鲜切饮片中土木香内酯、异土木香内酯及总黄酮质量分数分别为(22.41±1.38),(12.87±0.73),(15.04±0.64) mg·g^-1,传统工艺切制饮片中则依次为(22.94±1.24),(13.24±0.83),(14.12±0.58) mg·g^-1。 结论: 趁鲜切制土木香饮片产品质量稳定,具有推广意义。     

谈舒肺达肝法

舒肺达肝法在百家著述中少有论及 ,余在数十年的临床实践中却取得了满意的疗效。因为肺脏在人体功能中占重要地位。肺居上焦 ,主诸气 ,司呼吸 ,主通调 ,在生理状态和病理变化中是个主角。肝为藏血脏器 ,性喜条达而主疏泄 ,对人的情志状态有着极其重要的作用。由于脏器的互相关系 ,肝与肺在生理和病理方面又有其制约与乘侮之变化 ,例如 ,肺气宣降 ,肝气条达则百脉通畅 ,精神愉快 ,这是人所共知的。可是在病变的情况下 ,肺失宣降可影响肝气条达 ,肝失条达 ,可危害肺气宣降 ,这就可能还有人不甚理解 ,喻嘉言的金伐木荣之说和朱丹溪的木火刑金之…     

和法析要

和法是中医主要治法之一,其治法精神源于<黄帝内经>,其治法内涵当首推<伤寒论>.但由于"和"在中医学中的含义甚多,因此导致和法的概念模糊,和法的含义纷杂.这对正确使用和法、探讨和法的作用机制等均无裨益.