敲减CCDC132表达对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡的影响

目的 分析敲减CCDC132表达对宫颈癌HeLa细胞生长和凋亡的影响.方法 以CCDC132-shRNA(shCCDC132组)和阴性对照Ctrl-shRNA(shCtrl组)慢病毒感染人宫颈癌HeLa细胞后,采用荧光显微镜观察HeLa细胞感染效率,应用实时荧光定量PCR检测HeLa细胞中CCDC132 mRNA表达水...     

Inotodiol对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的:研究桦褐孔菌单体(Inotodiol)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:采用MTT法检测Inotodiol对HeLa细胞的增殖抑制率;通过倒置显微镜、HE染色观察HeLa细胞形态学改变;通过免疫细胞化学法检测核增殖抗原Ki-67表达。结果:随着Inotodiol浓度增加及作用时间延长,抑制率明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。Inotodiol作用于Hela细胞后,形态学观察示细胞凋亡。Inotodiol组Ki-67表达明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Inoto-diol对宫颈癌HeLa细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡作用。     

越橘提取物花色苷对宫颈癌HeLa细胞的作用

目的:研究越橘提取物花色苷对宫颈癌Hela细胞的影响作用。方法:以不同浓度的越橘提取物花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h,采用MTT法观察越橘花色苷对Hela细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞形态学改变,以流式细胞术观察DNA含量和细胞凋亡的变化情况,同时检测细胞培养上清液中IL-10、IFN-γ、TNF-α的变化。结果:Hela细胞用10、20、30、40mg/ml的越橘提取物花色苷处理48h后,随越橘花色苷浓度加大,细胞抑制率显著升高;荧光染色可见,浓染致密的颗粒状荧光,并呈现凋亡核固缩形态;流式细胞仪检测,细胞周期改变明显;IFN-γ和IL-10高于对照组,但IFN-γ与对照组有显著差别(P0.05);各组之间TNF-α变化不明显(P0.05)。结论:越橘提取物花色苷在体外对宫颈癌Hela细胞的生长有明显地抑制作用,可能与其改变细胞DNA周期、促进调亡有关。     

原花青素对宫颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响

目的 探讨原花青素对官颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响.方法 将按照不同终浓度原花青素(0,37.5μmol/L,75.0 μmol/L,150.0μmol/L,300.0μmo/L和600.0 μmol/L)处理宫颈癌HeLa细胞,分别纳入对照组(空白对照),37.5μmol/L PC组,75.0μmol/L PC组,150.0μmol/L PC组,300.0 μmol/L PC组和600.0 μmol/L PC组.继续培养24 h,收集细胞进行实验.采用RT-PCR检测Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA表达变化.采取Western blot检测caspase-3和survivin蛋白表达的变化.采用比色法检测caspase-3相对活性.结果 随着原花青索浓度增加,Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平逐渐增加,而Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平逐渐减少;随着处理官颈癌HeLa细胞原花青素浓度升高,caspase-3相对活性逐渐增加,且差异有显著意义(P＜0.05),在原花青素为600.0/μmol/L 时,活性最大.结论 原花青素可剂量依赖性地增加Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平及caspase-3活性,并且可剂量依赖性减少Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平.     

Survivin蛋白抑制剂SNAP对宫颈癌HeLa细胞X射线照射后细胞凋亡的影响

目的:探讨SNAP是否可以降低宫颈癌HeLa细胞对放射的敏感性,为其在临床上用作放疗增敏剂提供理论依据。方法:通过流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测接受6GyX射线照射的SNAP处理HeLa细胞中Survivin的表达水平。结果:HeLa细胞接受6GyX射线照射后,12h之后其Survivin的表达量开始显著提高(P0.05)。SNAP处理的HeLa细胞接受6GyX射线照射后,12h时细胞凋亡率为7.01%(P0.05),24h时细胞凋亡率为11.93%(P0.01)。结论:SNAP可以显著降低宫颈癌HeLa细胞中Survivin的表达水平,从而显著提高HeLa细胞对X射线的敏感性,增强其细胞凋亡率。     

雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭转移的影响及机制

目的探讨雷帕霉素对女性宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭转移的机制。方法培养女性宫颈癌HeLa细胞,根据雷帕霉素剂量不同分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,比较4组HeLa细胞增殖、侵袭、转移能力。结果 4组HeLa细胞各项指标差异均有统计学意义(P0.05),随雷帕霉素剂量增加,HeLa细胞抑制率呈明显升高趋势(P0.05),侵袭试验、转移试验透膜细胞数,均呈明显减少趋势(P0.05),Akt、m TOR磷酸化水平呈明显降低趋势(P0.05),HIF-1αmRNA、VEGF mRNA表达水平呈明显降低趋势(P0.05)。结论雷帕霉素能够有效抑制女性宫颈癌HeLa细胞的增殖、侵袭、转移,且抑制作用存在剂量依赖性。     

CXCR2和CXCR4对人宫颈癌HeLa细胞作用

目的 了解 CXCR2 和 CXCR4 对 HeLa 细胞迁移、增殖和分泌 VEGF 的影响。方法 Transwell 检测 HeLa 细胞迁移情况;MTT 法检测 CXCR2 和 CXCR4 对HeLa细胞增殖的影响;ELISA法检测HeLa细胞VEGF表达情况。结果 敲除 CXCR2 或 CXCR4 后,宫颈癌 HeLa 细胞迁移率分别为（2.1±0.8）和（2.6±0.9）,未敲除组迁移率为（3.6±1.1）,差异有统计学意义（P<0.05）;激活 CXCR2 或 CXCR4 后,HeLa 细胞增殖率分别为（86.1±15.3）% 和（83.9±15.9）%,未激活组HeLa细胞增殖率为（66.7±8.7）%（P<0.05）,激活 CXCR2 或 CXCR4 后,VEGF 表达水平分别为（6.84±0.19）和（6.59±0.14） pg/L ,未激活组为（0.74±0.03） pg/L（P<0.05）。结论 HeLa细胞表面高表达的 CXCR2 和 CXCR4 在诱导 HeLa 细胞迁移、增殖和分泌 VEGF 方面具有重要的作用。     

叶黄素对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨叶黄素对体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法选择对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞为研究对象,采用随机数字表法,将其随机分为6组:20,40,80,160,320μmol/L叶黄素组及对照组,叶黄素组分别加入200μL含20,40,80,160,320μmol/L叶黄素终浓度的RPMI1640培养基及HeLa细胞,对照组仅加入200μL RPMI1640培养基及HeLa细胞。采用噻唑蓝(MTT)法检测人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率,并采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率。采用统计学方法分析相同时间不同浓度叶黄素培养及相同浓度叶黄素培养不同时间的HeLa细胞增殖抑制率及凋亡率差异。结果 HeLa细胞在培养时间相同(为24h或48h或72h)时,随着叶黄素浓度依次增加(分别为20,40,80,160,320μmol/L)均较前一低浓度组的增殖抑制率及凋亡率显著升高,且差异均有统计学意义(P<0.01);HeLa细胞在叶黄素浓度相同(为20μmol/L或40μmol/L或80μmol/L或160μmol/L或320μmol/L)培养时,随着培养时间增加(分别为24,48,72h)均较前一时间点的增殖抑制率及凋亡率显著升高,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论叶黄素可抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导其凋亡,并且HeLa细胞体外培养的增殖抑制率及凋亡率分别随着叶黄素浓度增加及作用时间延长而升高。     

三氧化二砷及亚砷酸钠抑制宫颈癌HeLa细胞和人肝癌BEL7404细胞生长时细胞超微结构的变化

为研究三氧化二砷和亚砷酸钠抑制人肝癌BEL7404细胞及宫颈癌HeLa细胞生长时细胞超微结构的变化,调整细胞密度均为1×105个/ml,分别加入0(对照)、0.25、2.0 μmol/L三氧化二砷溶液或亚砷酸钠溶液染毒7 d.在电镜下观察细胞的超微结构.结果 显示,与对照组比较,2.0 pmol/L三氧化二砷处理的He...     

硒化合物对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移及粘附功能影响的研究

目的探讨甲基硒酸(Me Se A)、硒代蛋氨酸(Se Met)和甲基硒代半胱氨酸(Me Se Cys)对宫颈癌He La细胞的增殖、迁移及粘附功能的影响。方法体外培养He La细胞,3μmol/L的Me Se A、Se Met和Me Se Cys处理He La细胞12~72 h,分别采用MTT法、划痕实验和体外基质粘附实验检测He La细胞的增殖、迁移及粘附功能。结果与对照细胞相比,Me Se A处理组He La细胞的增殖速度明显降低(P<0.01)。Me Se A处理组He La细胞在4 h和8 h的迁移抑制率分别为34%(P<0.05)和26%(P<0.05);Se Met处理组He La细胞在4 h和8 h的迁移抑制率分别为18%和13%;Me Se Cys处理组He La细胞在4 h和8 h的迁移抑制率分别为28%(P<0.05)和5%。Me Se A、Se Met和Me Se Cys对He La细胞粘附功能的抑制率分别为36%(P<0.01)、25%和49%(P<0.01)。结论 Me Se A可以更好地抑制He La细胞的增殖和迁移,而Me Se Cys对He La细胞的粘附功能的抑制作用更强。     

刺五加注射液诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡机理的研究

目的 探索刺五加注射液诱导宫颈癌细胞HeLa发生凋亡的效应和分子机理.方法 以不同浓度的刺五加注射液作用于体外培养的宫颈癌HeLa细胞24h,应用AO/EB双染的荧光显微镜观察法和Annexin V-FITC染色的流式细胞技术,检测不同浓度刺五加注射液诱导HeLa细胞凋亡的形态改变和凋亡率;应用免疫细胞化学方法,检测HeLa细胞凋亡蛋白酶caspase-3和caspase-8的表达水平.结果 刺五加可诱导HeLa细胞发生凋亡,并随着药物浓度升高细胞凋亡率增加;荧光显微镜观察发现,在刺五加的作用下,HeLa细胞数量明显减少,呈现特征性的凋亡形态;免疫细胞化学检测显示,HeLa细胞的caspase-3和caspase-8的表达水平随刺五加浓度的增加而升高,呈现剂量依赖性.结论 刺五加注射液诱导HeLa细胞凋亡的机理可能涉及了caspase依赖性的细胞凋亡信号途径.     

穿心莲内酯诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其机制

目的:明确穿心莲内酯诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其机制.方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞株,经穿心莲内酯处理后MTS法检测细胞的增殖情况,荧光显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡水平变化,蛋白印迹(Western blot)方法检测内质网应激相关蛋白CHOP、凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达变化.结果:穿心莲内酯可以剂量依赖地抑制HeLa细胞的增殖(P＜0.05),引起细胞凋亡相关的形态学变化,诱导细胞凋亡(P＜0.05),引起CHOP蛋白的表达上调,活化Caspase-3和Caspase-9蛋白.结论:穿心莲内酯可以通过内质网应激途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡.     

氟化物对两种人类细胞系细胞生长的影响以及对HeLa细胞DNA和蛋白合成的作用

本文研究了氟化钠对培养的人类细胞生长的影响以及生长受抑制的机理。于HeLa细胞和人接合(conjunctive)克隆1-5 C-4细胞的培养液中,分别加入0.95和1.90mM氟化钠(相当于18和36ppm F~-),细胞的生长几乎完全停止。为确定氟化钠引起上述两种细胞生长抑制的原因,研究了DNA的合成。结果发现,至少在加入氟化钠之后的头24小时期间,DNA     

siRNA抑制IKCa1基因表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的:研究siRNA(small interfering RNA)抑制钙激活性中电导钾离子通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:构建含有IKCa1基因的siRNA表达载体,脂质体法转染HeLa细胞,通过RT-PCR和Western Blot检测HeLa细胞IKCa1 mRNA和蛋白表达变化;WST-1检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析HeLa细胞周期变化。结果:成功构建针对IKCa1基因的真核表达载体,所获表达载体转染HeLa细胞可使IKCa1mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并能有效抑制HeLa细胞增殖(P<0.05),使细胞周期停留在G0～G1期,S期细胞明显减少。结论:应用siRNA干扰技术能有效抑制IKCa1基因的表达,同时也可有效抑制宫颈癌HeLa细胞体外增殖活性。     

塞来昔布对宫颈癌HeLa细胞的放射增敏作用及影响因素的研究

目的:研究塞来昔布(Celecoxib)对人宫颈癌HeLa细胞放射增敏作用以及给药顺序对放射增敏作用的影响。方法:采用MTT法测定塞来昔布作用于HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50),应用克隆形成和单击多靶数字模型检测塞来昔布的放射增敏作用及不同给药顺序的细胞存活率及放射增敏比(SER)。结果:塞来昔布对宫颈癌Hela细胞株增殖有抑制作用,其作用呈现剂量-效应和时间-效应依赖性,塞来昔布对Hela细胞的IC50为44μmol/L,取40μmol/L塞来昔布联合X射线照射作用于Hela细胞,先给药后照射组SER为2.46,给药中照射组SER为1.91,先照射后给药组SER为1.44;免疫化学实验证实塞来昔布可下调Hela细胞VEGF的表达。结论:塞来昔布对Hela细胞具有放射增敏作用,其增敏作用有顺序依从性;其机制可能是通过下调人宫颈癌Hela细胞的VEGF表达而实现。     

松口蘑菌丝体蛋白对HeLa细胞凋亡的影响

目的 :　研究松口蘑发酵菌丝体水提液中菌丝体蛋白质 (TMP- B)的体外抗癌作用。方法 :　体外培养 He La细胞 ,培养时添加不同浓度的 TMP- B,绘制细胞生长曲线。利用扫描电镜、流式细胞术及 DNA凝胶电泳等进行体外抗人子宫颈癌 He La细胞增殖和诱导细胞凋亡机制的研究。结果 :　 TMP- B在体外具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。扫描电镜观察到 TMP- B处理细胞产生明显的凋亡小体 ;TMP- B对细胞周期的影响是通过抑制细胞从 S到 G2 /M期的转化来抑制He La细胞增殖 ,诱导细胞发生凋亡的 ;流式细胞仪分析图上出现凋亡峰 ;DNA电泳出现以 2 0 0 bp左右为单位的 DNA碎片。结论 :　采用液体培养方法生产的松口蘑菌丝体蛋白质 ,具有显著的抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。     

过表达GCNF对HeLa细胞生物学行为的影响

目的:将成功构建的人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞生物学功能的影响。方法:将重组质粒pcDNA3.1-GCNF转染HeLa细胞,通过MTT比色法、基质胶黏附实验和Transwell侵袭试验对转染后HeLa细胞增殖、黏附和侵袭力进行分析。结果:成功获得瞬时转染的pcDNA3.1-GCNF HeLa细胞,转染目的基因组(0.239±0.014)与转染空质粒组(0.198±0.020)及未转染组(0.204±0.012)相比,细胞增殖最快(P<0.05)。转染目的基因后细胞粘附、侵袭力未见明显改变。结论:GCNF基因促进了体外培养的宫颈癌HeLa细胞增殖,但对HeLa细胞粘附、侵袭力没有明显的影响。     

锌指蛋白267在宫颈癌中的表达水平及其对HeLa细胞增殖、凋亡、周期的影响

目的研究锌指蛋白267 (ZNF267)在宫颈癌组织中的表达,及其对宫颈癌He La细胞增殖、凋亡、和周期的影响,为临床治疗宫颈癌提供参考依据。方法通过荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测宫颈癌组织中ZNF267的表达,并利用小干扰RNA技术(siRNA)沉默宫颈癌He La细胞中ZNF267的表达。通过CCK-8法检测ZNF267对宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测ZNF267对宫颈癌细胞凋亡及周期的影响。结果宫颈癌组织中ZNF267的表达水平显著高于正常宫颈组织。沉默He La细胞中ZNF267的表达后,细胞的增殖能力受到显著抑制,而凋亡能力则显著增强。此外,与ZNF267-NC组细胞相比,转染ZNF267-siRNA的宫颈癌细胞周期明显被阻滞于G1期。结论 ZNF267在宫颈癌中表达显著上调,并可促进HeLa细胞增殖。