2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定标本的功效分析

目的比较2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定献血者标本的效果。方法首先采用Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合试剂和2种不同厂家的ELISA试剂对献血者血液标本进行HBV、HCV及HIV-1/2感染性标志物筛查。ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定献血者标本再分别进行一次TaqScreen MPX v2.0单人份标本HBV/HCV/HIV核酸联合检测(策略1)、2次Procleix Ultrio Elite HBV/HCV/HIV分项鉴别实验(策略2)。随后对其中的30份血液核酸检测不确定标本进行追踪分析。结果在检测的81 874份献血者标本中,181份为HBsAg、抗HCV、抗HIV的ELISA检测无反应性而经Procleix Ultrio Elite试剂血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本(0.22%)。在这些不确定标本中,策略1和策略2试验分别检测出核酸反应性标本33份和38份,均为HBV DNA阳性,两者的检出率差异无统计学意义(P0.05)。追踪结果显示,30份血液核酸检测不确定标本在3个月～6个月内均未出现HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA反应性结果。结论 ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本中存在着一定数量的血液HBV DNA反应性标本,多种厂家试剂联合检测可提升检出效率。     

2016—2019年常州地区无偿献血者酶免和核酸平行检测结果分析

目的分析ELISA和NAT平行的血液筛查模式对降低经输血感染病原体风险的有效性。方法收集常州市2016—2019年270215例无偿献血者血液标本,采用两次ELISA并行检测HBsAg、抗HCV、抗HIV和抗TP。268264例ELISA双阴性标本采用6人份混样(pool)NAT进行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA的检测,核酸阳性的pool进行拆分单检。结果270215例无偿献血者HBsAg、抗HCV、抗HIV和抗TP的阳性率分别为2.58‰(697例)、1.49‰(402例)、0.23‰(61例)和3.06‰(827例)。268264例酶免阴性无偿献血者HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA阳性率分别为0.86‰(230例)、0.01‰(3例)和0.01‰(2例)。结论ELISA与NAT两种检测方法能相互补充,极大降低了输血感染病原体的残余风险,保障输血安全。NAT能进一步缩短血液传染性病毒的检测“窗口期”,检出隐匿性病毒。     

核酸检测技术在血液检测中的应用

目的探讨核酸检测技术应用于血液检测的价值。方法抽取2019年1月至3月5000份献血者血液标本展开研究,先进行受ELISA检测,对于两种试剂均无反应或是对1种试剂有反应的样本进行核酸检测。分析检测结果。结果 ELISA检测结果显示5000份血液样本中有4992份样本经过HBsAg、抗-HIV-1/2均无反应或是只对1种试剂有反应;4992份样本接受核酸检测,52份样本的检测结果呈现为阳性结果,阳性检出率为1.12%(56/4992)。阳性结果使用HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA进行分项定量确证,结果 56份样本中有48份结果为HBV DNA阳性,阳性率为85.71%(48/56),其余8例样本未检出HCV RNA、HIV RNA的阳性。结论血液检测中应用核酸检测技术能够在很大程度上弥补ELISA检测的不足,更早的发现HBV、HCV、HIV病毒,对相应疾病的早期诊断和早期治疗有重要意义,也对输血安全有重要意义。     

献血人群HIV血清学筛查联合核酸检测的应用评价

目的 通过ELISA、核酸检测技术联合检测献血人群HIV感染标志物,为检测策略的制定提供参考依据。方法 选取温州地区无偿献血者血液标本363 156份,进行2遍ELISA+1遍核酸检测(NAT)的筛查模式进行HIV感染标志物检测,反应性标本送温州市疾病预防控制中心进行确证试验,并对HIV检测模式进行分组,A组ELISA单试剂(3代)+NAT、B组ELISA单试剂(4代)+NAT、C组ELISA双试剂+NAT,比较分析各组间筛查反应性率、确证阳性符合率、灵敏度、特异性等指标。结果 检测363 156份献血者血液标本,共筛查出反应性样本348份,确证阳性样本45份,3种检测模式均能将45份确证阳性样本正确检出,但不同组合筛查反应性率、确证阳性符合率差异显著。结论 不同组合模式均有很高的检测灵敏度,引入NAT检测后可减掉1遍ELISA检测,不影响灵敏度的同时提高特异性,可降低假阳性血液报废,更好地促进资源的合理利用。     

核酸检测与酶免检测在宁夏地区无偿献血者血液筛查中的应用

目的:对ELISA和NAT检测结果进行分析,找出两种检测方法在血液筛查中的优势、劣势。方法:收集宁夏地区2016年1月到2016年12月无偿献血者标本,进行ELISA和NAT检测,并对检测数据进行比对分析。结果:两种检测方法比对中共检测标本60958份,酶免检测总阳性数为477份,阳性率为0.78%,NAT检测阳性数154份,阳性率为0.25%。ELISA双试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为65.14%,单试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为2.17%,灰区阳性标本与核酸检测结果符合率为0。ELISA检测阴性标本NAT检测阳性数为57例,全为HBV DNA阳性,经电化学发光检测乙肝两对半结果为50例是隐匿性乙肝感染,7例检测结果为阴性。结论:NAT检测假阳性率较ELISA低,ELISA方法漏检主要为隐匿性乙肝感染的漏检。NAT检测方法在献血者血液筛查中优于ELISA检测方法。     

化学发光免疫分析法与酶联免疫法检测艾滋病抗体的对照研究

目的对照研究化学发光免疫分析法(CLIA)与酶联免疫法(ELISA)检测艾滋病(HIV)抗体的效果,以便探究CLIA检测HIV抗体的可行性。方法于2013年2月至2015年3月随机抽查我市3 542例艾滋病高危人员,采集血清,分别采用CLIA与ELISA法检测血清中的HIV抗体,并采用蛋白印迹检测法对检测结果进行确证。结果 ELISA法检测显示血清标本为阳性的56份,阳性率为1.58%,而CLIA检测阳性61份,阳性率为1.72%;3 542份血清标本中,11份标本ELISA法与CLIA法检测结果不一致;CLIA法的阳性预测值为96.72%,检测灵敏度为98.33%,特异度为99.94%;ELISA法的阳性预测值为96.43%,检测灵敏度为90.00%,特异度为99.94%;ELISA法与CLIA法在阳性预测值、检测灵敏度、特异度等指标上无显著的差异性(P>0.05)。结论 CLIA的灵敏度、特异度、准确性高,可用于HIV抗体检测。     

济南市无偿献血者HBV感染情况分析

目的分析济南市无偿献血者HBV感染情况,为隐匿性乙型肝炎(乙肝)的检测提供依据。方法选择2010年6月—2012年12月采集的无偿献血者血液标本207 705份,均经酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查,经筛查后HBsAg、抗-HCV和抗-HIV-1/2无反应性及仅1种试剂为反应性的标本共203 606份,进行核酸扩增技术(nucleic acid amplification techniques,NAT)检测。结果 ELISA检测HBsAg阳性1 059份,阳性率0.510%;NAT检测NAT阳性130份,阳性率0.064%。检出HBV DNA阳性标本74份,阳性率64.910%。结论 HBV感染仍是导致血液淘汰的重要原因之一,通过NAT检测,可以极大地增加隐匿性乙肝的检出率,降低血液残余风险。要加强采血前征询及HBsAg快检工作,提高实验室检测水平,确保血液安全。     

核酸检测技术应用于血站献血者血液筛查中的价值

目的:分析在血站献血者血液筛查中应用核酸检测技术(NAT)的价值。方法:选取我血站2016年1月-2017年5月合格献血者血液标本共38658人份,实施核酸3项联合检测,分项确证NAT检测反应性标本。结果:38658人份血液标本实施NAT检测,阳性检出率为0.12%;HIVRNA分项确证检测阳性率为0%,HCVRNA分项确证检测阳性率为0%,HBVDNA分项确证检测阳性率为65.21%。结论:NAT能在ELISA检测阴性的献血者血液标本中筛查到HIV RNA-1,-2、HCV RNA和HBV DNA反应性标本,有助于提升血站献血质量及安全性。     

HBV、HCV、HIV核酸检测试剂在洛阳地区血液筛查中的应用与分析

目的评估国产核酸检测试剂应用于献血者血液筛查的可行性,以及酶免疫分析(enzyme immunoassay,EIA)检测合格血液的输血残余风险。方法采用苏州华益美生物科技有限公司乙型肝炎(乙肝)病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎(丙肝)病毒(hepatitis C virus,HCV)、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)核酸检测试剂盒及PCR-荧光法,对洛阳市血站经EIA筛查合格的40 195份献血者标本进行核酸筛查。阳性标本经拆分后使用Gen Probe公司试剂进行确认,并采用化学发光法免疫试剂对HBV-DNA阳性样本进行乙肝五项免疫指标检测。结果在40 195份EIA检测合格的献血者标本中,发现25份HBV-DNA阳性(阳性检出率0.622‰),1份HCV-RNA阳性(阳性检出率0.025‰),未发现HIV-RNA阳性。在20份HBV-DNA阳性标本中,发现3份(15.0%)乙肝免疫学指标五项全阴的"窗口期"标本以及17份(85.0%)HBs Ag阴性而HBc Ab阳性的疑似HBV隐匿性感染标本。结论现行血清学EIA筛查方法对于HBV、HCV仍具有一定的输血残余风险,尤其是来自隐匿性HBV感染。在EIA检测后增加核酸检测(nucleic acid testing,NAT)筛查,有助于提高临床用血安全。同时说明国产核酸检测试剂具备较高的敏感性和特异性,试验过程机器运行状态良好,检测数据准确、可靠。     

微流芯片在出入境人群中对HBV HCV HIV联合检测的研究

目的 探讨在出入境人群中应用微流芯片技术联合检测HBV、HCV、HIV的模式及可行性.方法 收集经两种ELISA试验验证的江西口岸出入境体检人员HBV、HCV、HIV230份血液标本,提取核酸后进行扩增,采用微流芯片进行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA检测,用芯片所带的内对照体系监控试验的有效性.结果 206份HBV、226份HCV抗体和228份HIV抗体阴性标本经微流芯片检测DNA/RNA,阴性符合率分别为99％、100％、100％;24份HBV、4份HCV抗体、2份HIV抗体阳性标本经微流芯片检测DNA/RNA,阳性符合率均为100％;206份江西口岸出入境体检人员HBV阴性标本中检出2份HBV DNA(+),2份标本两对半结果为抗- HBe(+)、抗- HBc(+),HBV DNA检出率为0.97％.结论 本次建立的微流芯片法检测结果准确可靠,可用于出入境人员乙肝、丙肝、艾滋病三种传染病的联合检测.     

长沙地区HIV/AIDS合并HBV/HCV感染的调查分析

目的研究长沙地区人免疫缺陷病毒(HIV)-1感染者及获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者合并乙型肝炎病毒/丙型肝炎病毒(HBV/HCV)感染现状及特点。方法针对长沙地区静脉毒瘾人群中发现的166例HIV感染者及长沙市传染病医院2003年1月—2007年7月间所有门诊及住院的132例HIV/AIDS患者,采集血清标本共298份,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV标志物及HCV抗体。结果166份静脉毒瘾人群HIV-1阳性血清标本中,HCV抗体阳性率为84.94%,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性率为15.66%,HIV、HBV、HCV三重感染率为13.86%;就诊的132例HIV/AIDS患者血清标本中,HCV抗体阳性率为9.09%,HBsAg阳性率为13.64%,HIV、HBV、HCV三重感染率为1.52%;上述两组HBsAg阳性率差异无显著性(χ2=0.24,P>0.05),HCV抗体阳性率差异有高度显著性(χ2=169.33,P<0.01),HIV、HCV、HBV三重感染率差异亦有高度显著性(χ2=14.57,P<0.01)。结论长沙地区HIV-1感染者及AIDS患者合并HBV/HCV感染率高,尤其是静脉毒瘾人群,应采取积极措施防止HIV、HBV、HCV的合并感染及传播。     

血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究

目的评价血清学检测与核酸检测在降低输血相关风险中的相关性。方法对大连市血液中心2012年12月1日-2013年5月31日共计33 708份献血者标本同时进行血清学检测(HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶)和HBV/HCV/HIV三联核酸定性检测。单纯核酸检测反应性的标本需进行鉴别试验,对鉴别阴性的献血者进行跟踪检测。将HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体三项酶联免疫检测与核酸检测结果对比分析。结果酶联免疫检测单试剂不合格率为1.38%。酶联免疫检测双试剂反应性而核酸检测无反应性的不合格标本有40份,其中HBsAg反应性12份,HCV抗体反应性28份。单纯核酸检测反应性标本有46份,经鉴别和追踪确认HBV感染献血者15例,HIV窗口期感染1例,无HCV RNA的检出。结论核酸检测对于血清学阴性的HBV感染检出效果明显;但对于感染了HBV但病毒载量极低的献血者,核酸检测存在漏检的可能;血液筛查中核酸检测不能代替血清学检测;慎重对待核酸检测的假阳性结果,制定合理的献血者评估策略以减少献血者流失。     

免疫印迹法在献血员梅毒抗体筛查中的应用

目的研究梅毒螺旋体免疫印迹试验(TP-WB)在献血员梅毒抗体筛查中的应用价值。方法使用梅毒标准血清盘,分析2种TP-ELISA试剂和1种TPPA试剂检测的准确性及不足;使用WB法对无偿献血筛查的279份TP-ELISA试剂阳性标本进一步检测,分析ELISA阳性结果与WB结果的相关性及WB阳性条带的分布特征。结果在40份以TP-WB结果为金标准的血清盘中,XC和WT两公司的TP-ELISA试剂的检测灵敏度均为100.00%,高于TPPA的88.46%,但两公司试剂检测的特异性分别为92.86%与85.71%,均低于TPPA的100.00%;在筛查的279份TP-ELISA法检测阳性标本中,WB确认阳性216份,阳性率为77.42%;其中包括S/CO值5且两种ELISA试剂检测同时阳性的标本205份,其WB确认试验阳性率为100.00%,占216份WB确认阳性标本数的99.91%。有序Logistic回归分析显示,ELISA法S/CO值5和双试剂阳性,与WB检测阳性分别存在统计关联(P0.01);216份TP-WB阳性标本WB条带分布分析,其中TP17条带与梅毒抗体Ig M阳性、TP15条带与Ig G及Ig G+Ig M阳性分别存在统计关联(P均0.01)。结论 ELISA法双试剂阳性且S/CO值5,基本可确诊为梅毒,WB试验条带阳性结果对献血者感染状况的判断有一定的指导意义。     

核酸扩增与酶联免疫法联合在血液筛查中的初步应用

目的:在酶联免疫法(enzyme immunoassay,EIA)检测的基础上,探讨HBV核酸扩增检测(nucleicacid amplification testing NAT)技术应用于血液筛查的意义。方法:分别使用两种模式(单检或混检)NAT与EIA两遍检测方式同时进行血液筛查,对NAT阳性标本作进一步做鉴别试验和病毒血清标志物。结果:20925份EIA(-)标本共发现28份核酸三项(HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA)呈反应性,均为HBV-DNA,即EIA两遍检测合格后的HBV-DNA阳性率0.13%,检测其中11份血清,乙肝标志物均呈阳性。结论:EIA阴性献血者中仍有极少数的HBV感染者,核酸扩增检测和酶联免疫检测互补能够检测出EIA漏检的HBV携带者,对提高HBsAg阴性血液标本中HBV感染检出率具有重要价值。     

胶体金试纸法与酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较

目的对胶体金试纸法与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)做比较,了解胶体金试纸法的灵敏度和特异度。方法采用两种方法检测0~65岁人群血清标本3 578份。结果胶体金试纸法检测出HBsAg阳性标本189份,阳性率5.28%;ELISA法检测出阳性标本200份,阳性率5.59%;两种方法阳性检出率差异无显著统计学意义。胶体金试纸法与ELISA法检测标本符合率为97.74%。胶体金试纸法的灵敏度为77.00%,特异度为98.96%。结论胶体金试纸法操作简便、快速,检测的特异度较好,但其灵敏度有待提高。     

岳阳市无偿献血者梅毒螺旋体抗体检测结果分析

目的分析无偿献血者血液梅毒螺旋体抗体的检测结果。方法采用两种不同厂家ELISA试剂对血液标本作梅毒螺旋体抗体筛查,阳性标本用TPPA试剂确诊。结果 2006-2009年共检测标本113 319份,ELISA检测阳性691份,经TPPA确认阳性326份,真阳性率0.29%,假阳性率0.32%。结论采用灵敏度高、特异性好的试剂,切实做好无偿献血者梅毒螺旋体抗体检测工作,进一步提高血液质量,确保输血安全;对梅毒螺旋体抗体检测阳性的无偿献血者,采用TPPA试剂确认,给献血者准确的血液检测结果。     

免疫层析法与酶联免疫吸附法检测血中HBsAg、抗-HCV、抗-HIV的比较

〔目的〕分析比较乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、HIV抗体(抗-HIV)的免疫层析快速试剂在实际应用中的灵敏度、特异度和准确度,为今后的工作提供参考。〔方法〕对502份健康体检血清标本同时用快速免疫层析法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV,对其灵敏度和特异度进行比较。〔结果〕与ELISA相比,502份血清标本中HBsAg金标法有2份假阴性,5份假阳性,灵敏度为99.6%,特异度为99.0%,准确度为98.6%;抗-HCV金标法无假阴性,有9份假阳性,灵敏度为100%,特异度为98.2%,准确度为98.2%;抗-HIV硒标法有2份假阳性,灵敏度为100%,特异度为99.6%,准确度为99.6%。〔结论〕金标法检测HBsAg灵敏度和特异度稍低于ELISA,有漏检和误检现象,而抗-HCV、抗-HIV快速法与ELISA比较灵敏度相当,而特异度稍低,因此,都要结合ELISA结果才可出具最终检测报告,抗-HIV的检测任何一种方法出现阳性时都要进行确认试验。     

某采供血点无偿献血人群HBV感染状况研究

目的探讨地区无偿献血人群乙型肝炎病毒(HBV)感染状况。方法选取2014年1月-2017年9月于采供血点无偿献血的27 556份血液标本作为研究对象。采用ELISA法对采集的血液标本进行乙肝表面抗原(HBsAg)检测,对以上两种乙型肝炎病毒表面抗原诊断均无反应或其中无反应的标本进行NAT检测。结果27 556份无偿献血者血液标本共检测到HBs Ag阳性88份,阳性率为0.32%,NAT阳性22例,阳性率为0.08%;2014-2017年HBs Ag阳性和NAT阳性感染率呈逐年递减趋势(P0.05);18～29岁、30～49岁和50岁以上献血人群HBV阳性率分别为0.40%、0.39%和0.40%,男性和女性献血人群HBV阳性率分别为0.39%和0.41%,不同年龄段及不同性别无偿献血者HBV阳性率比较差异无统计学意义;农村和城市献血人群HBV阳性率分别为0.22%和0.48%,1次、2次和3次及以上献血人群HBV阳性率分别为0.90%、0.26%和0.23%,城市献血人群HBV阳性率高于农村,首次无偿献血者HBV阳性率高于2次和≥3次献血者(P0.05)。结论地区无偿献血者HBV阳性检出率呈下降趋势,存在一定的地域差异性。因此,应该继续加大预先筛检和血液检测强度,巩固固定无偿献血者队伍,保障输血安全,进一步降低输血传播HBV的风险。     

国产核酸扩增(PCR)试剂在献血者血液HBV DNA筛查中的应用研究

目的为了提高输血安全性,探讨国产核酸扩增试剂在血站血液乙型肝炎病毒(HBV)筛查中应用的可行性。方法在酶联免疫吸附试验(ELISA)常规筛查血液乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的基础上,采用荧光聚合酶链反应(PCR)技术(国产核酸扩增试剂)对初、复检合格的献血者的血清汇集标本(8人份×150μL)进行HBV DNA检测,对初始反应阳性的汇集标本拆分后再进行单份检测,用国家标准质控品考评检测限量,用已知HBV DNA阳性血样评估检出情况。结果应用国家HBVDNA标准品考评,本方法的95%检测限量为98.0IU/mL,可信限范围为[55.8,548]。对9611份标本共1208个汇集池进行检测,初始检测阳性池7个,阳性率为0.58%,进一步拆分检测,未检出HBV DNA阳性标本;对检测阴性的汇集标本随机进行234份单份检测(1400μL上样浓缩),亦未检出HBV DNA阳性标本。结论同国际知名核酸检测试剂相比,国产核酸扩增试剂的灵敏度和特异性有待进一步提高。     

G145R变异HBsAg免疫检测方法的建立及其应用特征的实验研究

目的 建立G145R变异HBsAg检测ELISA,并探讨其应用特征.方法 采用SPA亲和层析纯化抗体;以抗G145R变异HBsAg McAb包被,羊抗HBs-HRP示踪,建立双抗体夹心ELISA;将该法初步应用于临床标本的检测,并将阳性标本以PCR、DNA直接测序、雅培Abbott试剂等方法做对比分析,探讨其临床检测特征.结果 该法能特异检测G145R变异HBsAg,而与野生型HBsAg无交叉反应,灵敏度约为2.0μg/L;平均批内及批间CV分别为(8.87±3.04)%和(8.3±2.95)%.该法从206例特定HBV感染相关标本中检出阳性18份,阳性率为8.7%;18份阳性标本中HBV DNA阳性6例,直接测序检出I126A及M133T各一例;雅培Abbott试剂检测该6份标本HBsAg含量在(4.62～211)IU/ml间.结论 建立了一种快速、简便的G145R变异HBsAg检测ELISA,该法也能检测部分具有类似抗原性漂移的其它逃逸变异HBsAg.