红景天苷通过NF-κB/TGF-β1信号通路抑制哮喘小鼠气道重塑的实验研究

目的探讨红景天苷对支气管哮喘小鼠气道重塑及核因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路的影响。方法 40只清洁级雌性BABL/c小鼠,随机分为4组,每组10只,分别为对照组、模型组、红景天苷低剂量组、红景天苷高剂量组。以卵蛋白(OVA)致敏、激发制备小鼠哮喘模型,在末次激发24 h后取小鼠左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色、PAS染色、Masson染色;取右肺组织分别用酶联免疫吸附法(ELISA)、RT-PCR和Western blotting检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13水平以及TGF-β1 mRNA、蛋白和NF-κB p65蛋白表达。结果模型组与对照组比较,小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平增高;肺组织TGF-β1 mRNA、蛋白和NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高(P<0.05、0.01)。红景天苷组与模型组比较,小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平,TGF-β1 mRNA、蛋白和NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),不同剂量红景天苷组间上述各指标间差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天苷可抑制哮喘小鼠气道重塑的发生,其部分机制可能是通过抑制NF-κB/TGF-β1信号通路而实现的。     

平喘汤”通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制哮喘大鼠气道重塑机制研究

目的:基于转化生长因子-β1(TGF-β 1)/Smad通路探讨效方"平喘汤"抑制哮喘大鼠气道重塑的作用机制。方法:36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.001g/kg)及平喘汤低、中、高剂量(5.3g/kg、10.6g/kg、21.2g/kg)组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠采用卵清白蛋白(OVA)致敏和激发制备哮喘大鼠模型。注射OVA致敏后,于OVA溶液雾化激发的同时各给药组灌胃给予相应的药物,模型组与正常组予等量生理盐水灌胃,雾化激发与给药均每日1次,连续3周。采集各组3只大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测BALF中TGF-β 1含量。取各组另3只大鼠肺组织,右肺组织苏木素-伊红(HE)染色后观察肺组织病理形态学变化,马松(Masson)染色后观察胶原纤维情况,免疫组化染色法检测肺组织TGF-β 1、Smad2和Smad3蛋白表达;左肺组织采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TGF-β 1、Smad2和Smad3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠BALF中TGF-β 1含量、肺组织中TGF-β 1、Smad2和Smad3蛋白表达水平均显著升高(P<0.001),肺组织炎性细胞浸润、胶原纤维沉积明显。与模型组比较,各给药组大鼠BALF中TGF-β 1含量均显著降低(P<0.001),其中地塞米松组和平喘汤高剂量组大鼠BALF中TGF-β 1含量显著低于平喘汤中剂量组、低剂量组(P<0.001),且2组间比较差异无统计学意义(P>0.05),平喘汤中剂量组大鼠BALF中TGF-β 1含量显著低于低剂量组(P<0.001)。与模型组比较,各治疗组大鼠肺组织损伤、炎性细胞浸润、胶原纤维沉积情况均有不同程度的减轻,其中以地塞米松组和平喘汤高剂量组改善最为明显。与模型组比较,地塞米松组与平喘汤高、中剂量组大鼠肺组织TGF-β 1、Smad2、Smad3蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),其中地塞米松组改善最为明显(P<0.05,P<0.01,P<0.001),平喘汤高剂量组改善显著优于中、低剂量组(P<0.05,P<0.01,P<0.001),中剂量组改善显著优于低剂量组(P<0.05,P<0.001)。结论:平喘汤可能通过调控TGF-β 1/Smad信号通路,下调TGF-β 1、Smad2和Smad3表达,从而抑制哮喘大鼠的气道重塑,且其作用呈现明显的剂量依赖性。     

全真一气汤通过HIF-1α/VEGF通路抑制COPD大鼠气道重塑的研究

目的：探讨全真一气汤抑制慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠气道重塑的机制。方法：将39只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组（n=9）、模型组（n=10）、氨茶碱组（n=10）和全真一气汤组（n=10）。除空白组外,其余各组大鼠采用LPS联合烟熏的经典造模法进行COPD造模。验证造模成功后,各药物组大鼠给予相应药物灌胃,空白组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续给药28 d。处死各组大鼠,收集样本并行HE染色、透射电镜及免疫组化等相关检测。结果：HE染色结果显示：空白组大鼠肺泡结构完整,肺泡间隔无明显增厚;模型组大鼠可见肺泡腔扩张明显并且破裂、肺泡间隔明显增厚,单位面积内的肺泡数量明显减少;氨茶碱组大鼠可见肺泡腔轻度扩张并且部分破裂、肺泡间隔轻度增厚,单位面积内的肺泡数量稍有减少;全真一气汤组大鼠可见肺泡腔轻度扩张、肺泡间隔轻度增厚,单位面积内的肺泡数量稍有减少;与空白组比较,模型组大鼠单位面积内的肺泡数量明显减少（P<0.01）;与模型组比较,氨茶碱组和全真一气汤组大鼠单位面积内的肺泡数量明显增加（P<0.01）。透射电镜结果显示：空白组线粒体（M）未见明显肿胀...     

人参皂苷通过Nrf2/ARE信号通路发挥抗氧化应激作用的研究进展

人参皂苷作为一种从人参属药材中提炼的物质,被视为是人参中的活性成分,因而成为热门的研究目标。而Nrf2/ARE信号通路是迄今为止发现的最为重要的内源性抗氧化应激通路,其调控的下游抗氧化基因在抗氧化应激中发挥了重要的作用。就人参皂苷通过调控Nrf2/ARE信号通路下游多种保护性基因的表达发挥其抗氧化应激的作用进行综述,为今后人参皂苷用于氧化应激的治疗提供科学依据。     

人参皂苷Rg1下调内皮细胞MMP-9及VEGF的表达

目的:探讨人参皂苷Rg1对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及血管内皮生成因子(VEGF)表达的影响,为临床治疗自身免疫性疾病提供理论及实验依据。方法:以TNF-α10 ng/ml刺激HUVECs,在上述条件中加入不同浓度Rg1(0,0.4,4及40 mmol/L),培养24 h后,分别用实时荧光定量PCR(real-time PCR)及免疫印迹实验(western Blot)检测MMP-9及VEGF的表达。结果:在基因水平,Rg1能抑制由TNF-α诱导HUVECs的MMP-9和VEGF的表达;在蛋白水平,Rg1能显著下调TNF-α诱导HUVECs的MMP-9和VEGF的表达。结论:Rg1通过抑制由TNF-α诱导HUVECs的MMP-9和VEGF的表达,从而在RA疾病治疗过程中发挥作用。     

吴茱萸碱通过调控Notch通路抑制Skp2的表达对哮喘小鼠气道重塑和炎症反应的影响

目的 探究吴茱萸碱对哮喘小鼠的气道重塑和炎症反应的影响及其相关机制。方法 48只BALB/c小鼠按随机数字法分为正常对照组、模型组、吴茱萸碱组和吴茱萸碱处理的过表达Notch信号通路抑制剂Kyo T2的腺病毒载体干预组,每组12只。采用卵清蛋白(OVA)诱导建立小鼠哮喘模型,吴茱萸碱组和吴茱萸碱加Kyo T2腺病毒载体干预组以30 mg/kg的吴茱萸碱溶于生理盐水灌胃,其中,吴茱萸碱加Kyo T2腺病毒载体干预组经鼻滴入5×10⁸pfu的Kyo T2腺病毒干预,其余组灌胃等量的生理盐水。末次激发24 h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞计数;ELISA法检测炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-4和OVA特异性IgE和IgG₁;过碘酸雪夫(PAS)染色法检测气道杯状细胞增生;Masson染色法观察肺组织胶原沉积现象;免疫组化法检测α-SMA的表达;Western blot法检测α-SMA、Hes1、Skp2蛋白的表达。结果 与对照组相比,模型组小鼠BALF中总细胞和嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞数均显著升高(P <0.05...     

丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑及MMP-9, TIMP-1的影响

目的:研究丹龙定喘汤对哮喘小鼠气道重塑和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响.方法:SPF级BALB/c小鼠56只随机分为正常组、模型组、地塞米松组、丹龙定喘汤组.卵蛋白(OVA)致敏激发小鼠制作哮喘气道重塑模型,在实验第41～69天,正常组、模型组以生理盐水灌胃,其余两组分别给予0.02％地塞米松雾化及ig生药丹龙定喘汤42 g·kg-1治疗.实验结束后HE染色观察哮喘小鼠肺组织病理形态变化,采用ELISA法检测血清MMP-9,TIMP-1水平.结果:丹龙定喘汤能改善哮喘小鼠气道炎性细胞的浸润及支气管平滑肌的增厚;与正常组比较模型小鼠MMP-9,TIMP-1均明显升高(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,西药组和丹龙定喘汤组MMP-9,TIMP-1水平明显降低(P＜0.01),MMP-9/T1MP-1比值在两组明显增高(P＜0.05),且两组间未见差异.结论:丹龙定喘汤能够抑制哮喘小鼠血清MMP-9,TIMP-1的分泌,改善哮喘小鼠气道重塑状态.     

护心康片通过VEGF/VEGFR-2信号通路影响ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的 观察护心康片对动脉粥样硬化（AS）小鼠主动脉斑块的影响,探讨其作用机制。方法 以高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠12周建立AS小鼠模型,设空白组、模型组、护心康低剂量组、护心康中剂量组、护心康高剂量组和阿托伐他汀钙组,连续给药12周,分别行HE染色观察主动脉形态学改变,油红O染色观察脂质含量,免疫组化法测定CD34、MOMA-2、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达情况,RT-qPCR检测VEGF、VEGFR-2mRNA表达水平,Western blotting检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)蛋白表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠主动脉有较大斑块形成,脂质含量多（P <0.01）,α-SMA表达减少（P <0.01）,CD34、MOMA-2表达增加（P <0.01）,VEGF、VEGFR-2 mRNA及蛋白表达增加（P <0.01或P <0.05）;与模型组比较,给药各组小鼠主动脉斑块均明显减小,脂质含量减少（P <0.01或P <0.05）,α-SMA表达增加（P <0.01）,CD34...     

厚朴多糖通过调控PI3K/Akt信号通路对哮喘大鼠气道重塑的作用

目的 探讨厚朴多糖减轻哮喘大鼠气道重塑的作用及潜在机制。方法 将60只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(1 mg/kg)及厚朴多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),每组10只。采用腹腔注射卵清蛋白致敏及雾化吸入激发法建立大鼠哮喘模型,灌胃给药14 d后,观察哮喘行为并评分,监测气道反应性,观察肺组织病理学并进行肺损伤评分,检测血清IgE及支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平,检测肺组织MMP-9、TIMP-1、ColⅠmRNA表达,检测肺组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达。结果 与模型组比较,厚朴多糖中、高剂量组大鼠哮喘症状评分降低(P<0.01);除6.25、12.50 g/L乙酰甲胆碱溶液激发后的厚朴多糖低剂量组大鼠Penh值无明显变化外(P>0.05),其余各组大鼠Penh值均降低(P<0.05,P<0.01);厚朴多糖各剂量组大鼠支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数量及肺组织病理损伤评分均降低(P<0.05,P<0.01),血清IgE、支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、...     

人参皂苷Rh2的抗过敏活性

从红参中分离出Rg3,经人肠道菌转化,分离得到主要代谢物人参皂苷Rh2,研究其抗过敏活性。试验观察对β-氨基己糖苷酶释放、NO和PGE2产生、透明质酸酶活性、小鼠被动皮肤过敏反应的作用以及抗氧化、抗组胺活性等。实验动物选用雄性ICR小鼠和豚鼠。结果与结论:人参皂苷Rh2强烈抑制IgE诱导RBL-2H3细胞释放β-氨基己糖苷酶(IC50为0.1mM)和小鼠被动皮肤过敏反应[25mg/kg腹膜内注射时抑制率为(88±8.2)%],作用强于色甘酸钠。此化合物在不同的扫描测热计上显示膜稳定作用,对LPS刺激RAW264.7细胞产生NO和PGE2具有抑制作用。但不抑制透明…     

伊贝母异甾体生物碱通过Wnt/β-catenin信号通路调节哮喘大鼠气道炎症和气道重塑机制的研究

目的 探讨伊贝母异甾体生物碱对哮喘大鼠气道炎症、气道重塑及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 本研究采用吸入卵清蛋白（OVA）致敏和激发的方法建立大鼠哮喘模型，连续给予药物7天；抽取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行白细胞分类计数，酶联免疫吸附法（ELISA）检测BALF中白介素4（IL-4）、白介素5（IL-5）和白介素13（IL-13）的水平；取肺组织进行苏木精-伊红（HE）染色，观察药物对哮喘大鼠气道重塑的影响；采用Western blot技术考察异甾体生物碱对Wnt/β-catenin信号通路上Wnt5a、Wnt7b和β-catenin蛋白的调节作用。结果 与模型组比较，异甾体生物碱组大鼠肺泡间质炎性细胞浸润和支气管管腔狭窄均显著改善，支气管壁厚度和平滑肌厚度均明显降低；Western blot结果显示异甾体生物碱对于哮喘大鼠Wnt/β-catenin通路上的Wnt5a、Wnt7b和β-catenin蛋白表达均有显著的调节作用。结论 异甾体生物碱对于哮喘相关的病理变化-炎症和气道重塑均有一定的治疗作用，且该治疗作用与Wnt/β-catenin信号通路有关。     

人参皂苷Rg1通过激活Nrf2/HO-1信号通路抑制H2O2-N2a细胞氧化应激损伤的研究

目的 探究人参皂苷Rg1对H2O2诱导的N2a细胞的保护作用及机制.方法 实验分为对照组、模型组、给药组,通过500μmol/LH2O2孵育5h构建体外细胞损伤模型,给药组给予50 μmol/L Rg1.采用CCK-8法检测细胞存活率,运用Hoechst 33258染色法及免疫荧光化学法检测细胞凋亡率,选用试剂盒检测各...     

穿山龙总皂苷通过JAK2/STAT3通路对哮喘大鼠肺功能及肺组织炎症和气道重塑的影响

[目的]探讨穿山龙总皂苷对哮喘大鼠气道上皮细胞损伤的影响及对Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路的调节作用。[方法]采用卵清蛋白诱导建立哮喘大鼠模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组、穿山龙总皂苷低剂量组、穿山龙总皂苷中剂量组和穿山龙总皂苷高剂量组,另设正常对照组,支气管插管测定大鼠肺顺应性和肺弹性阻力,酶联免疫吸附法（ELISA）测定肺泡灌洗液中白介素（IL）-4、IL-6和干扰素γ(IFN-γ)水平,苏木精-伊红（HE）染色观察支气管病理损伤,实时荧光定量（qRT-PCR）法检测支气管组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad2 mRNA水平,蛋白印迹法检测p-JAK2和p-STAT3蛋白相对表达量。[结果]正常组大鼠肺组织结构正常完整,无炎性细胞浸润;模型组大鼠肺组织炎症中性粒细胞浸润、间质水肿、肺泡间隔增厚、肺泡内及间质斑片状出血;穿山龙低、中和高剂量组大鼠肺组织病理损伤减轻。与正常对照组比较,模型组大鼠肺顺应性降低,肺弹性阻力、IL-4、IL-6和IFN-γ水平、TGF-β1和Smad2 mRNA水平升高以及p-JAK2/JAK2和p...     

健脾益肺汤抑制NF-κB/STAT3信号通路改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑作用研究

目的观察健脾益肺汤通过抑制核因子-κB/信号转导及转录激活因子3(NF-κB/STAT3)信号通路改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑的作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和健脾益肺汤组,采用卵蛋白(OVA)联合氢氧化铝凝胶多次激发致敏法造模,健脾益肺汤组以5 g/(kg·d)进行灌胃,每日1次,持续30 d,对照组和模型组给予等量0.9%氯化钠注射液。末次给药1 h后处死大鼠后进行大鼠肺组织切片观察,测量肺内气管壁厚度和平滑肌厚度。检测肺泡灌洗液中蛋白含量INF-γ、IL-4、IL-6、IL-13含量。应用Western blotting检测大鼠肺组织中NF-κB、p-NF-κB、STAT3和p-STAT3含量。结果与对照组比较,模型组大鼠气管壁厚度和平滑肌厚度增加,肺泡灌洗液中蛋白、IL-4、IL-6和IL-13增加,肺组织中NF-κB、p-NF-κB、STAT3和p-STAT3增加,肺泡灌洗液中IFN-γ降低(P 0.05);给予健脾益肺汤干预后,模型组大鼠气管壁厚度和平滑肌厚度降低,肺泡灌洗液中蛋白、IL-4、IL-6和IL-13降低,肺组织中NF-κB、pNF-κB、STAT3和p-STAT3降低,肺泡灌洗液中IFN-γ增加(P 0.05)。结论健脾益肺汤能改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑,其机制可能与抑制NF-κB/STAT3信号通路,减轻大鼠炎性反应有关。     

人参皂苷Rh2 及其衍生物的研究进展

人参皂苷Rh2是红参中特征性成分之一,也是一种生物活性较高的稀有皂苷.近年来,人参皂苷Rh2的制备研究由酸水解法、碱水解法、合成法逐渐转到生物转化法,微生物及酶转化法以其独特优势成为制备人参皂苷Rh2的理想方法;人参皂苷Rh2及其衍生物的生物活性、药代动力学等也均有较多研究.本文对人参皂苷Rh2及其衍生物的制备、药理活性等方面进行综述,为该化合物深入研究开发提供参考.     

023人参皂苷Rh2的抗过敏活性

从红参中分离出Rg3，经人肠道菌转化，分离得到主要代谢物人参皂苷Rh2，研究其抗过敏活性。     

人参皂苷Rh2抗肿瘤机制的研究进展

人参皂苷Rh2作为一种生物活性较高的稀有皂苷,在癌症的预防和治疗方面具有较强的活性。文章对人参皂苷Rh2抑制肿瘤细胞增殖、促进凋亡、诱导分化、抵抗侵移、提高免疫力等抗肿瘤作用机理进行了梳理,为其深入研究及相应药剂开发提供参考。     

人参皂苷Re调控Wnt/β-catenin信号通路抑制心肌成纤维细胞增殖研究

目的:观察人参皂苷Re对体外高糖培养的原代心肌成纤维细胞（CFs）增殖与蛋白分泌的影响,以及对Wnt/β-连接蛋白（β-catenin）信号通路的调控作用。方法:采用体外高糖诱导CFs增殖模型,经不同浓度的人参皂苷Re干预后,采用MTT法检测CFs细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞增殖周期,ELISA法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型...