食积因素对FM1流感病毒感染小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：通过检测不同时相食积复合流感病毒（FM1）感染小鼠血清免疫球蛋白M（IgM）、IFN-γ、IL-4及TH1/TH2水平,探讨食积对流感病毒感染（FM1）小鼠免疫功能的影响。方法：通过喂饲小鼠高蛋白、高热量特制饲料复制食积模型,在此基础上,经鼻感染FM1甲型流感病毒,复制病毒性感染模型,于感染后第1、3、5天,分别检测各组小鼠血清IgM、IFN-γ、IL-4及TH1/TH2水平。结果：小鼠感染FM1流感病毒后第5天,单纯感染组、食积感染组小鼠血清IgM含量均较正常组下降,且食积感染组结果差异有统计学意义（P〈0.05）,食积感染组较单纯感染组正常组血清IgM含量明显降低,且结果有统计学意义（P〈0.01）;病毒感染后第1、3、5天,单纯感染组、食积感染组小鼠血清TH1（IFN-γ）/TH2（IL-4））水平均较正常组降低,且在第3天差异有统计学意义（P〈0.05）,第3、5天食积感染组较正常组降低更为明显,且差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：食积可能通过影响机体IgM、IFN-γ、IL-4及TH1/TH2水平对流感病毒感染（FM1）小鼠的免疫失衡产生影响,从而提示食积因素可能对流感的发生发展产生了影响。     

甘露消毒丹及其挥发油对流感病毒感染小鼠黏膜免疫的影响

目的:观察甘露消毒丹(GXM)及其挥发油对流感病毒(IV)感染的BALB/c小鼠免疫球蛋白、细胞因子的含量变化以探讨其对黏膜免疫的影响。方法:SPF级BALB/c小鼠108只按照随机数字表法分为6组,分别为:正常组(A组)、模型组(B组)、GXM灌胃组(C组)、GXM滴鼻组(D组)、GXM合用组(E组)、奥司他韦组(F组),每组18只。除A组动物外,其余5组均以流感病毒FM1-6-E2滴鼻制备感染模型。于造模后第3、7、10天采集标本,采用ELISA方法检测肺泡灌洗液(BALF)及鼻咽冲洗液(NAIF)中sIgA、血清中IgA、IL-5、IL-6含量。结果:IV感染小鼠后,NAIF和BALF中sIgA含量降低;血清中IL-5、IL-6水平升高,而IgA含量降低。与B组比较,D、E组能够升高NAIF中sIgA含量,而C组在第10天升高明显(P0.05),F组作用不明显(P0.05);E组能够升高血清中IgA、BALF中sIgA含量,而C组、D组分别在第7天、第10天升高明显(P0.05),F组作用不明显(P0.05);C、E、F组能够降低IL-5、IL-6含量(P0.05),而D组作用不明显(P0.05)。结论:GXM挥发油可促进sIgA的分泌且起效迅速,GXM醇提物可升高IgA、sIgA含量,降低IL-5、IL-6含量,两种给药方式合用效果更佳。     

银莱汤对食积复合FM1流感病毒感染小鼠血清免疫球蛋白及细胞因子含量的影响

目的探讨银莱汤对食积复合流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,为银莱汤药效机理的研究提供实验依据。方法雄性昆明小鼠90只,随机分为正常对照组、感染模型组、食积感染模型组、银莱汤高中低剂量组、双黄连组、小儿化食丸组、利巴韦林组共九组,每组10只。食积感染模型组及各治疗组均采用高蛋白、高热量饲料结合52%牛奶溶液灌胃的方法制作食积动物模型,感染组小鼠则采用流感病毒亚甲型鼠肺适应株流感病毒滴鼻处理,并予相应的治疗药物或生理盐水灌胃。实验结束后,取眼球血,采用ELISA法检测血清中免疫球蛋白及细胞因子的含量。结果与正常组比较,感染组、食积感染组各免疫球蛋白A、G、M及白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-a,TNF-α)及干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)水平显著增高(P0.05);而食积感染组的IL-4降低。与食积感染组比较,各治疗组免疫球蛋白A、G、M的水平降低,其中银莱汤低剂量组和利巴韦林组明显降低(P0.05);银莱汤各治疗组细胞因子IFN-γ升高(P0.05)。与正常组相比,银莱汤各治疗组免疫球蛋白A、G、M升高,但无统计学差异,而细胞因子IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ水平显著升高(P0.05)。银莱汤各剂量组与小儿化食丸组、双黄连组相比,免疫球蛋白A、G、M无统计学差异,银莱汤各剂量组与小儿化食丸组、双黄连组、利巴韦林组的细胞因子IL-4、IL-10、TNF-α相比无统计学差异。结论银莱汤可通过调节免疫球蛋白及细胞因子的分泌,有效调节小鼠免疫功能,进而发挥其抗病毒疗效。     

银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用

目的:研究银翘散对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用及作用机制。方法:将实验小鼠分为空白对照组、模型组、病毒唑组及银翘散大、中、小剂量组,分别观察实验小鼠行为状态、死亡率、肺指数及肺指数抑制百分率。结果:银翘散各剂量组有明显改善流感病毒FM1感染小鼠行为状态的作用;银翘散中、小剂量组与模型组比较,死亡率显著降低,表明银翘散对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用;银翘散大、中剂量组显著降低流感病毒FM1感染小鼠模型的肺指数,说明银翘散能显著抑制病毒在体内增殖,减轻肺部炎性病变。结论:银翘散中、小剂量组对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用,其作用机制可能与银翘散能显著抑制病毒在体内的增殖、减轻肺部炎性病变有关。     

CD54和CD106在流感病毒FM1感染小鼠咽部黏膜上的表达

目的:研究咽部黏膜细胞中细胞间黏附分子-1(CD54)、血管细胞黏附分子-1(CD106)在小鼠流感病毒H1N1型FM1感染中的表达及其意义。方法:18～20g清洁级昆明小鼠40只,随机分为实验组和对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测和采用免疫组化技术检测咽部黏膜上CD54、CD106的表达。结果:ELISA检测实验组小鼠黏膜匀浆中CD54含量,免疫组化检测实验组小鼠黏膜细胞中CD54、CD106含量与对照组比较明显升高(P<0.01)。结论:CD54、CD106在小鼠流感病毒FM1感染中发挥了重要作用,有助于实验判断病毒感染的程度,对于治疗和预防病毒感染提供重要信息。     

金柴抗病毒胶囊对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的 :观察金柴抗病毒胶囊对H1N1流感病毒FM1感染免疫低下动物的防治作用。 方法 :采用环磷酰胺注射造成免疫低下模型,经滴鼻感染甲型H1N1流感病毒FM1株造成肺炎模型,分别经预防给药5 d和治疗4 d,取各组小鼠肺组织,称重,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中相对病毒载量,观察金柴抗病毒胶囊对小鼠肺指数、病毒载量的影响。 结果 :模型组小鼠经流感病毒FM1株感染后,肺指数明显升高,肺组织中相对病毒载量显著高表达,金柴抗病毒胶囊各剂量组均可明显降低流感病毒感染免疫低下小鼠肺指数以及肺组织中相对病毒载量,降低动物模型肺指数、相对病毒载量的作用与达菲比较无显著性差异。 结论 :金柴抗病毒胶囊对流感病毒感染免疫低下小鼠有较好的治疗和预防作用。     

卫益颗粒对流感病毒FM1株感染小鼠血清中细胞因子水平的影响

目的 :观察卫益颗粒对病毒性肺炎小鼠血清中细胞因子水平的影响。方法 :用流感病毒鼠肺适应株FM1感染的小鼠肺炎模型 ,应用胸腺细胞法测其血清中IL - 1,用结晶紫染色法测其TNF -α对L92 9细胞的杀伤作用 ,应用淋巴母细胞法测其IL - 2。结果 :模型组小鼠较正常对照组血清中IL - 1及TNF -α水平显著升高 (P <0 .0 5 ) ,IL - 2水平显著降低 (P <0 .0 5 ) ,用卫益颗粒治疗后 ,血清中IL - 1、TNF -α水平显著降低 (P <0 .0 5 ,0 .0 1) ,IL - 2水平明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :卫益颗粒通过抑制IL -1、TNF -α的过量产生而减轻病毒感染引起的免疫病理损害 ,并通过促进IL - 2的产生 ,提高机体抗病毒感染的细胞免疫功能。     

毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响

目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠（SPF级）作为研究对象。实验分为7组：毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组。流感病毒FM1感染小鼠造模连续7d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT—PCR法测定肺组织中INF—γmRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Western blot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平。结果FM1感染模型组的肺指教明显高于正常组（P〈0．001）,利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低（P〈0．001或P〈0．01）,其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录（P〈0．001）,且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组（P〈0．001）;毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γmRNA基因转录（P〈0．001）,且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义（P〉0．05）。毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达（P〈0．001）,抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组（P〈0．05）。结论毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γmRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。     

升降散对流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠免疫功能的影响

目的:研究升降散对亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠免疫功能的影响。方法:建立亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺炎模型,用升降散全方、升降散拆方、升降散与麻黄杏仁甘草石膏汤合方治疗后,第5天用ELISA方法检测小鼠支气管肺泡、大小肠灌洗液中sIgA、血清中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IL-lra、sTNFR的含量;流式细胞仪法测定外周全血中T细胞亚群CD4~+、CD8~+的百分比和CD4~+/CD8~+值;计算胸腺指数和脾指数。结果:模型组小鼠较正常组小鼠支气管肺泡、大小肠灌洗液中sIgA含量显著降低,血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IL-lra、sTNFR的含量显著升高,全血CD8~+的百分比增高,CD4~+百分比和CD4~+/CD8~+值下降,胸腺指数明显降低,但对脾指数无明显影响。升降散(4.55g/kg)能显著提升支气管肺泡、大小肠灌洗液中sIgA含量,降低血清IL-1βIL-6,TNF-α含量,升高IL-10、IL-lrα、sTNFR的含量、全血CD4~+百分比、CD4~+/CD8~+值及胸腺指数,升降散组对这些指标的改善作用优于拆方组而逊于合方组。结论:升降散增加黏膜分泌IgA,调控炎性因子和抗炎因子的平衡及提高T细胞亚群的比值,是其改善肺部炎症的机制之一,也是升降散治疗病毒性肺炎效用机制的初步阐明。     

寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染肺炎小鼠的保护作用

目的研究寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法①ICR小鼠60只,随机分为正常组、模型组、达菲组及寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠用甲型流感病毒鼠肺适应株FM1溶液(病毒原液稀释4.0×10~3倍)滴鼻感染小鼠造模。达菲组给予达菲47 mg/kg,寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组分别给予寒喘祖帕颗粒浸膏1.08 g/kg、0.54 g/kg、0.27 g/kg,正常组和模型组给予同体积蒸馏水。各组均连续干预5 d,于6 d时称取小鼠体质量,摘取全肺,计算其肺指数及抑制率;末次给药24 h后ELISA法测定小鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)水平;HE染色观察小鼠肺组织病理学改变并进行评分。②ICR小鼠160只,随机分为正常组、模型组、达菲组及寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组,正常组10只,其余各组每组30只。除正常组外,其余各组小鼠用流感病毒鼠肺适应株FM1溶液(病毒原液稀释3.5×10~3倍)滴鼻感染小鼠造模。造模当天开始各组分别灌胃给药,达菲组给予达菲47 mg/kg,寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组分别给予寒喘祖帕颗粒浸膏2.16 g/kg、1.08 g/kg、0.54 g/kg,正常组和模型组给予同体积的蒸馏水。各组均连续干预5 d,观察14 d内小鼠死亡情况,记录小鼠存活时间并计算死亡率。结果①与正常组比较,模型组小鼠体质量降低(P0.01),肺指数增加(P0.01),血清TNF-α水平升高(P0.01),肺组织病理得分增加(P0.01);与模型组比较,达菲组和寒喘祖帕颗粒高、中剂量组小鼠体质量增加(P0.05,P0.01),肺指数降低(P0.05,P0.01),血清TNF-α水平降低(P0.01),肺组织病理得分降低(P0.01);达菲组与寒喘祖帕颗粒各剂量组比较、寒喘祖帕颗粒各剂量组组间比较,上述指标差异均无统计学意义(P0.05)。②与正常组比较,模型组小鼠存活时间减少(P0.01),死亡率增加(P0.01);与模型组比较,达菲组和寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组存活时间增加(P0.01),达菲组寒喘祖帕颗粒高剂量组死亡率降低(P0.01)。与达菲组比较,寒喘祖帕颗粒中、低剂量组存活时间减少(P0.05),寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组死亡率升高(P0.01)。与寒喘祖帕颗粒高剂量组比较,寒喘祖帕颗粒中、低剂量组存活时间减少、死亡率升高(P0.05)。结论寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠有一定的保护作用,该作用可能与抗炎、降低血清TNF-α含量有关。     

清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响

目的:研究清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响。方法:48只小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、清暑解表方高、中、低剂量组,共6组,用流感病毒FM1滴鼻建立小鼠感染模型。观察肺组织病理变化情况,并测定肺、胸腺、脾指数。结果:与正常组比较,模型组肺指数明显升高(P0.05),胸腺指数明显降低(P0.05)。清暑解表方高剂量组能降低肺指数(P0.05),中剂量组能升高胸腺指数(P0.05),但3个剂量组对脾指数均无显著性差异(P0.05)。结论:清暑解表方能改善FM1感染小鼠的肺部病变,降低肺指数并升高胸腺指数。     

升降散对流感病毒鼠肺适应株FM1感染肺炎小鼠保护作用观察

目的:研究升降散对亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠的保护作用。方法:建立亚甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠肺炎模型,观察升降散全方、升降散拆方、升降散与麻黄杏仁甘草石膏汤合方对小鼠的一般状态、肺指数、肺干湿质量比、肺组织形态和肺泡Ⅱ型细胞结构变化的影响情况。结果:各用药组能减轻病毒性肺炎小鼠的全身症状,抑制体质量减轻,降低死亡率和肺指数,提升肺干湿质量比,降低肺组织病理学评分和改善肺泡Ⅱ型细胞结构的病理损伤。各项观察指标的改善,呈现出升降散组(4.55g/kg)作用优于各拆方组、合方组作用优于升降散、中药对照单方组的作用趋势。结论:升降散全方对流感病毒感染小鼠有一定保护作用,同时也能提升麻杏甘石汤的效用。     

麻杏甘石汤加味方对A型流感病毒感染小鼠免疫功能的影响

目的:研究麻杏甘石汤加味方对A型流感病毒感染小鼠免疫功能的影响.方法:用A型流感病毒鼠肺适应株经鼻腔接种小鼠,建立感染模型.实验设10倍麻杏甘石汤加味方组、5倍麻杏甘石汤加味方组、感染模型组、正常对照组.正常对照组、感染模型组灌胃给生理盐水,其它2组灌胃给相应浓度的药物.最后一次给药后禁水、禁食8h,取标本检测IFN-γ含量和T细胞亚群百分率.结果:10倍麻杏甘石汤加味方组IFN-γ含量显著高于感染模型组(P＜0.05),CD3 、CD4 T细胞亚群百分率、CD4 /CD8 比值显著高于感染模型组(P＜0.05),CD8 T细胞亚群百分率显著低于感染模型组(P＜0.05).结论:麻杏甘石汤加味方能促进A型流感病毒感染小鼠IFN-γ的分泌,调整T细胞亚群的百分率.     

黄芩苷对流感病毒FM1肺炎小鼠肺损伤的保护研究

目的:研究黄芩苷对流感病毒FM1感染小鼠肺组织NO及氧化损伤的保护作用。方法:将96只ICR鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组(100mg.kg-1.d-1),黄芩苷大剂量组(1 500mg.kg-1.d-1),黄芩苷中剂量组(750mg.kg-1.d-1)和黄芩苷小剂量组(375mg.kg-1.d-1),每组16只。用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察小鼠肺指数、肺组织H-E染色切片病理形态变化,比色法检测肺组织匀浆总NO合成酶(NOS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量或活性。结果:黄芩苷中、小剂量组均能明显降低肺指数,减轻肺组织病变;显著下调肺匀浆总NO合成酶、丙二醛及上调谷胱甘肽过氧化物酶含量或活性(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩苷可通过抑制流感病毒性肺炎小鼠肺组织NO及过氧化物水平而发挥保护作用。     

人参皂苷Rb1、Rg1与5-氟脲嘧啶对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:探讨人参皂甙Rb1、Rg1与5-氟脲嘧啶联合应用对荷瘤小鼠免疫功能的交互影响作用。方法:建立荷瘤小鼠模型,随机分为6组,人参皂甙Rb1和Rg1灌胃给药,每天0.2 mL/20 g,每日1次;5-氟脲嘧啶腹腔注射,每天0.2 mL/20 g,每日1次;模型组给予生理盐水0.2 mL/20 g,每日1次。10 d后检测NK细胞杀伤功能、T淋巴细胞增殖功能和腹腔巨噬细胞TNF-α含量。结果:5-氟脲嘧啶可降低NK细胞杀伤功能、T淋巴细胞增殖功能和腹腔巨噬细胞TNF-α含量(P<0.05);人参皂苷Rb1能够显著提高NK细胞功能和TNF-α含量,并可拮抗5-氟脲嘧啶的抑制作用(P<0.05),但对T淋巴细胞增殖功能无影响(P>0.05);人参皂苷Rg1能够显著提高T淋巴细胞增殖功能和TNF-α含量,并可拮抗5-氟脲嘧啶的抑制作用(P<0.05),但对NK细胞功能无影响(P>0.05)。结论:人参皂甙Rb1、Rg1可拮抗5-氟脲嘧啶对免疫功能的抑制作用。     

复方一枝蒿微丸抗甲型H1N1流感病毒的研究

目的:观察复方一枝蒿微丸抗甲型HlNl流感作用,为临床治疗流感提供试验依据。方法:体外试验,以甲型HlNl流感病毒致人喉癌上皮细胞(Hep-2)病变,采用Reed-Muench法计算半数有毒浓度(TC_(50))、最大无毒浓度(TC_0)、半数抑制浓度(IC_(50))和治疗指数(SI);体内试验,以甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株PR8滴鼻感染小鼠,计算小鼠存活率、存活天数及肺指数。结果:复方一枝蒿微丸对甲型H1N1流感病毒的TC_(50)为198.6 mg/ml,TC_0为18.2 mg/ml,IC_(50)为8.6±1.85 mg/ml,SI为41.5;复方一枝蒿微丸能降低感染甲型H1N1流感病毒的小鼠死亡率,抑制流感病毒所致的小鼠肺损伤。结论:复方一枝蒿微丸具有明显的抗甲型H1N1流感病毒作用。     

清热解毒中药对流感病毒FM1株感染所致小鼠肺组织病理损伤的影响

目的 动态观察清热解毒中药对流感病毒感染所致小鼠肺组织病理损伤的影响.方法 将96只健康雄性BALB/cAnN小鼠随机分为空白对照组、流感病毒感染模型组、中药治疗组,每组按照流感病毒感染1、3、5、7天不同时相再分为4个小组,每小组8只小鼠.用流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1株)感染小鼠建立流感病毒性肺炎模型.在FM...     

黄芩对流感病毒FM1所致肺炎小鼠病理损伤修复作用的研究

目的动态观察清热解毒中药黄芩对流感病毒感染所致小鼠气管、肺组织病理损伤的影响。方法建立流感病毒肺适应株(FM1)感染的肺炎小鼠模型,将96只BALB/c An N小鼠随机分为空白对照组、流感病毒感染模型组、黄芩组。在FM1株感染1、3、5、7 d,分别采用肉眼观察、光学显微镜、气管电镜扫描动态观察各组小鼠气管、肺组织病理学变化。结果肉眼观察,黄芩组在感染后肺组织充血、水肿,肺门见暗褐色实变区较模型组实变区面积减少。光镜下观察,黄芩组在感染后气管、肺组织病变程度较模型组明显减轻。气管电镜扫描观察,黄芩组气管内壁黏膜完整性、细胞的饱满度、纤毛数量、纤毛排列均好于模型组。结论清热解毒中药黄芩能够显著改善FM1株感染所致小鼠气管、肺组织的炎性病变,对FM1株感染所致小鼠肺组织病理损伤具有较强的修复作用。