补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化的机制研究

目的:通过观察补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏TGF-β_1/Smads通路信号分子的表达作用,阐释补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤的作用。方法:将20只雄性盐抵抗大鼠(dahl salt resistant rat,SS)随机分为正常对照组,中药对照组,20只雄性dahl盐敏感大鼠(dahl salt sensitive rat,DS)随机分为模型组和中药治疗组,每组10只。高盐饲料喂养12 d后,中药对照组和中药治疗组予以补阳还五汤灌胃治疗,每日1次,共治疗5周。治疗结束后取大鼠左肾组织检测TGF-β_1Smad2 Smad7及α-SMA的mRNA表达和P-Smad2蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组TGF-β_1Smad2和α-SMA的mRNA表达升高(P0.05),Smad7mRNA表达降低(P0.05),P-Smad2蛋白表达升高(P0.05);补阳还五汤治疗后,与模型组比较中药治疗组TGF-β_1Smad2和α-SMA的mRNA表达降低(P0.05);Smad7mRNA表达升高(P0.05),P-Smad2蛋白表达降低(P0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过调节肾脏TGF-β_1/Smads通路相关信号分子的表达抑制肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤。     

黄芪-丹参药对通过改善肾脏血流对自发性高血压大鼠肾脏保护机制的实验研究

目的:观察黄芪-丹参药对通过改善肾脏血流对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏的保护作用。方法:45只SHR随机等分为5组,每组9只,分别为黄芪组(H)、丹参组(D)、黄芪-丹参药对组(HD)、缬沙坦组(X)、SHR模型组(M),9只WKY大鼠作为对照组(W)。相应药物灌胃治疗,观察黄芪丹参药对对早期肾损害相关指标、肾脏形态、肾血流及肾脏组织病理变化的影响。结果:HD明显改善SHR的早期肾损害,可降低双肾的血流阻力指数(RI),改善肾脏组织病理变化,其余各治疗组均有不同程度疗效。结论:黄芪-丹参药对能延缓大鼠肾损害的病理进程,改善高血压早期肾损害的病理变化。     

电针对高血压前期Dahl盐敏感大鼠肾脏保护作用机制研究

目的:观察电针"曲池""足三里"穴对高血压前期Dahl盐敏感(DS)大鼠肾脏NO/c GMP/PKG信号通路的影响及组织形态的改变,探讨电针"曲池""足三里"对高血压前期肾脏损害保护作用机制。方法:盐抵抗大鼠(DR)10只作为正常组;DS大鼠30只,随机分为模型组、针刺组和非穴位组,每组10只。采用高盐饲料喂养的方法诱发高血压前期模型。电针组电针"曲池""足三里"穴,1次/d,6次/周,共5周。非穴位组取双侧髂嵴上10~15 mm、后正中线旁开20mm区段内一个固定对照点,治疗方法同电针组。测量大鼠治疗期间血压变化情况以及治疗后血清血清尿素氮(UREA)、血肌酐(CREA)、血尿酸(UA)含量;ELISA法检测NO含量;荧光定量PCR检测大鼠肾组织溶解型鸟苷酸环化酶(s GC)、蛋白激酶G(PKG)的mRNA表达;HE染色检测大鼠肾组织病理形态变化。结果:治疗期间,电针组大鼠血压逐步下降。与正常组相比,模型组血清UREA、CREA、UA含量显著升高(P<0.05),NO含量显著降低(P<0.05),s GC、PKG mRNA表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,电针组血清UREA、CREA、UA含量显著降低(P<0.05),NO含量显著升高(P<0.05),s GC、PKG mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论:电针能有效降低高血压前期DS大鼠血压,提高NO含量、c GMP、PKG基因表达,改善组织小管扩张、间质炎症细胞浸润等,这可能是电针通过NO/c GMP/PKG信号通路发挥对高血压前期DS大鼠肾脏保护作用机制之一。     

针刺对自发性高血压大鼠肾脏形态结构及转化生长因子-β1mRNA表达的影响

目的:探讨针刺干预高血压大鼠肾间质纤维化的机制.方法:将24周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR) 24只随机分为模型组、培哚普利组、针刺组,每组8只.针刺组:捆绑大鼠后电针刺激大鼠双侧“曲池”“足三里”穴,强度以针柄微颤为度,刺激20 min,1次/d;培哚普利组:培哚普利(0.4 mg/kg)悬液每天灌胃1次;模型组每日捆绑束缚20 min,不予治疗;同龄同种系正常血压的京都大鼠(WKY)8只为空白对照组.空白对照组自由饮食,不予处理.实验疗程为6周.测量大鼠尾动脉收缩压;HE染色观察肾脏组织形态结构;免疫组织化学染色法观察肾Ⅰ、Ⅲ型胶原在肾脏沉积光密度;RT-PCR法检测转化生长因子-β1mRNA (TGF-β1 mRNA)在各组大鼠肾脏表达情况.结果:与模型组比较,针刺组血压显著下降(P＜0.01);肾脏形态结构损害程度较轻;肾I、Ⅲ型胶原蛋白沉积阳性面积明显减少(均P＜0.05);肾TGF-β1mRNA的半定量分析表达下降(P＜0.05),其作用和西药培哚普利相似.结论:针刺“曲池”“足三里”穴可能通过减少肾脏Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和抑制TGF-β1在肾脏表达而干预肾脏纤维化的进程.     

针刺对实验性脑出血大鼠脑组织bFGF表达的影响

目的:探讨急性脑出血后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的动态表达及针刺的干预作用。方法:选取健康的雄性Wistar大鼠96只,随机分为模型组、模型加针刺组(针刺组)、模型加忆立福组(西药组)3组。每组又分为6h、24h、48h、72h和168h 5个时相点,每个时相点有6只大鼠,制备脑出血大鼠模型,采用Western免疫印迹技术观察头穴针刺治疗对脑出血bFGF的表达水平。结果:针刺组大鼠脑内bFGF蛋白表达在不同时相点均有显著上调,与模型组比较,均有显著性差异(P0.01),具有统计学意义。结论:上调脑内bFGF可能是有关针刺治疗脑出血一个机制,针刺可能通过使血肿周围脑组织内bFGF蛋白水平增加,从而减轻神经元损伤并促进神经修复与再生。     

电针对高血压前期Dahl大鼠肾脏CaM/NO通路的影响

目的探讨电针对高血压前期Dahl盐敏感大鼠模型肾脏Ca M-e NOS-NO信号通路的影响。方法将30只7周龄雄性Dahl盐敏感大鼠(Dahl salt-sensitive rats,DS)按照随机数字表法随机分为模型组、针刺组和非经非穴组。选择7周龄雄性盐抵抗大鼠(Dahl salt-resistant rats,DR)10只作为空白组。大鼠统一喂养于SPF动物实验中心,在1星期适应性喂养结束后,改为8%Na Cl高盐饲料喂食。其间采用智能无创血压计监测大鼠血压,当12 d后血压值升至120~139/80~89 mm Hg范围时,确定为高血压前期大鼠模型。停止高盐喂养,改为普通饲料。空白组、模型组采取普通固定15 min,不予治疗;针刺组予以双侧曲池、足三里电针治疗;非经非穴组在双侧髂嵴上10~15 mm、后正中线旁开20 mm区段内选择1个固定对照点进行电针治疗。每日1次,每星期治疗6次,连续治疗5星期。取大鼠左肾组织,荧光定量PCR法检测Ca M、e NOS的m RNA表达,western blot和免疫组化法对e NOS进行定量和定位检测,Elisa法测定NO含量表达。结果与空白组比较,模型组Ca M、e NOS的m RNA表达显著降低(P0.05),e NOS的蛋白含量明显减少(P0.05),NO含量也明显降低(P0.05)。与模型组比较,针刺组Ca M、e NOS的m RNA表达显著升高(P0.05),e NOS的蛋白含量显著增多(P0.05),NO含量也明显升高(P0.05)。与模型组比较,非经非穴组Ca M表达虽明显增高(P0.05),但是e NOS中m RNA表达、NO含量均无统计学差异(P0.05)。结论电针曲池、足三里对高血压前期DS大鼠肾脏保护作用可能与上调大鼠肾脏Ca M-e NOS-NO信号通路有关。     

保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞作用的实验研究

目的 :从细胞水平上探讨对慢性肾功能衰竭疾病治疗有效的中药复方保肾片对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞的影响。方法 :本实验取SD大鼠肾间质成纤维细胞进行体外培养 ,以保肾片喂服SD大鼠后的含药血清加入到培养细胞中 ,应用MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡。结果 :喂服中药保肾片的大鼠血清 ,与不喂药的大鼠血清对照组相比 ,显著抑制细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ,并且能诱导细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理可能与抑制肾间质成纤维细胞增殖和诱导其发生凋亡有关     

姜黄素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用研究

目的:观察姜黄素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用。方法:取新西兰大白兔12只,随机分为4组,空白组(A组)、模型组(B组)、姜黄素组(C组)和地塞米松组(D组),除空白组外,其余各组建立兔耳增生性瘢痕模型,瘢痕上皮化后C、D两组分别涂抹姜黄素软膏、地塞米松软膏,B组不予特殊处置。连续用药28 d后对各组瘢痕进行大体观察及组织学观察;考察各组瘢痕的瘢痕增生指数(HI)、成纤维细胞密度(NA);增殖细胞核抗原蛋白(Ki-67)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果 C、D两组与B组比较,瘢痕体积明显缩小,质地变软,颜色变浅,有向A组转化的倾向;HE结果显示,C、D组中胶原纤维排列较B组规则,成纤维细胞(Fb)数目明显减少;HI及NA方面,C、D组明显低于B组,差异具有统计学意义(P<0.05),但C、D两组比较无明显差异(P>0.05);免疫组化结果表明,Ki67及α-SMA在B组中大量表达,而在C、D两组中表达量减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素能有效改善瘢痕组织内纤维过度沉积的现象,其可通过抑制Fb的增殖及向肌成纤维细胞(MFb)的转化来抑制...     

血府逐瘀汤对肺纤维化大鼠肺组织上皮间质转化的影响及其机制研究

目的:研究血府逐瘀汤对肺纤维化(PF)大鼠肺组织上皮间质转化(EMT)的影响,并探讨其可能机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.000405 g·kg~(-1)·d~(-1))和血府逐瘀汤高、中、低剂量组(14.04、7.02、3.51 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均于气管内滴注博来霉素溶液建立PF模型。造模后第2天开始灌胃给药,正常组和模型组予蒸馏水溶液(10 m L·kg~(-1)·d~(-1));各给药组灌胃相应药物,每日1次,连续28 d。末次给药24 h后,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,采用Western blot法检测大鼠肺组织中TGF-β1、Smad3的表达情况。结果:模型组大鼠肺组织E-cadherin表达显著低于正常组(P 0.01),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著高于正常组(P 0.01);与模型组比较,血府逐瘀汤高、中、低剂量组肺组织E-cadherin表达显著升高(P 0.05或P 0.01),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著降低(P 0.05或P 0.01);与地塞米松组比较,血府逐瘀汤低剂量组的E-cadherin表达显著降低(P 0.05),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著升高(P 0.05或P 0.01)。结论:血府逐瘀汤可通过干预上皮间质转化来减轻肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

不同角度针刺对大鼠颈部韧带慢性劳损影响的比较研究

目的:观察针刺对于慢性劳损型韧带损伤的影响,比较不同角度针刺的效果差异,总结出较好的针刺方案,为颈椎病初期以韧带慢性劳损为表现的治疗提供可参依据,为不同组织的针刺方法提供新的思路。方法:通过将大鼠颈部脱水造成椎体关节失稳并施加作用力持续牵拉,使颈后肌群长期处于异常应力作用而出现韧带损伤,拍X光片观察韧带钙化点及慢性劳损程度。采用不同角度的排刺治疗,治疗前后分别在光镜下观察大鼠颈部韧带的病理变化并对成纤维细胞数量进行统计。结果:脱水和持续牵拉造成的异常应力作用可使韧带慢性劳损,X光片上显示大鼠韧带纹理不同程度增粗并伴隐约钙化点;针刺可明显改善韧带组织的损伤程度和纤维化程度,成纤维细胞数量平刺和斜刺的改善效果更显著(P0.05),以平次最优(P0.01)。结论:针刺对于颈部韧带慢性劳损有一定作用,平刺和斜刺对于韧带损伤的改善明显,以平刺最优。不同组织需采用不同的针刺方法和针刺角度才能达到最佳效果,从而达到治疗颈椎病初期病理变化的作用,未病先防。     

电针“梁门”穴治疗大鼠实验性胃溃疡的机理探讨

本文探讨了电针“梁门”穴治疗大鼠实验性胃溃疡的机制。结果表明：电针能抑制胶元纤维的过度增生而利于溃疡的愈合;改变了病理状态下胃粘膜 ＰＧ含量,从而起到对胃粘膜的保护作用;升高胃组织的ＳＯＤ含量以阻止胃粘膜组织的进一步损伤和促进损伤的胃粘膜修复;使红细胞Ｃ_３ｂ受体花环率增高,以增强免疫功能,从而提高机体的防病抗病能力。     

电针对围绝经期大鼠神经保护作用的研究

目的:探讨电针法对围绝经期大鼠的神经保护作用及其机制研究。方法:利用双侧卵巢切除(OVX)的方法制备围绝经期大鼠模型,SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌激素组和电针组。采用原位末端标记法(TUNEL)检测海马区细胞凋亡、尼氏染色检测神经元结构、免疫荧光染色法检测海马区NF-M表达情况、Western Blot法检测脑源性神经营养因子(BDNF)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、p-CREB蛋白表达情况。结果:与假手术组相比,模型组大鼠海马区神经细胞凋亡数量增加,神经元排列疏松散乱(P 0. 01),NF-M荧光强度减弱(P 0. 01),BNDF蛋白表达减少、p-CREB/CREB比值降低(P 0. 01)。经电针和雌激素治疗后,大鼠海马凋亡细胞数量减少,神经元排列整齐数量增加,NF-M荧光强度增加,BNDF蛋白表达增加、p-CREB/CREB比值增加(P 0. 01)。结论:电针对围绝经期大鼠具有一定的神经保护作用,可能与上调脑组织CREB-BDNF信号通路主要蛋白表达有关。     

电针对去卵巢大鼠下丘脑GnRH系统影响的分子机制

目的：探索电针调整下丘脑垂体卵巢轴功能异常的中枢机制，观察切除卵巢后大鼠下丘脑GnRH及其受体改变，以及电针对它们的影响。方法：应用免疫组化和RT-PCR方法，观察大鼠切除卵巢4星期后，下丘脑GnRH免疫阳性神经元数量和分型、GnRH免疫阳性纤维的变化以及GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的改变，及电针对它们的影响。结果：电针后，大鼠下丘脑GnRH神经元数目较去卵巢4星期时明显增多，棘型细胞比例增加，纤维膨体密度增加，下丘脑组织GnRHmRNA表达增高，垂体GnRH受体mRNA表达升高。结论：电针可在分子水平调整去卵巢大鼠中枢GnRH的合成与释放，以及垂体GnRH受体的表达，这可能是电针调整下丘脑－垂体卵巢轴功能异常的中枢机制。     

补阳还五汤对高血压前期大鼠血管炎症保护机制研究

目的:通过观察补阳还五汤对高血压前期大鼠胸主动脉NF-κB信号通路的影响,探讨其对高血压前期血管炎症损伤的保护机制。方法:选择7周龄盐抵抗大鼠(SS)与盐敏感大鼠(DS),随机分成正常组、模型组、模型给药组和正常给药组,每组各10只。各组大鼠以8%Na Cl高盐饲料喂养,期间采用智能无创血压计监测大鼠尾动脉收缩压,造模成功之后,予以补阳还五汤灌胃治疗,每日1次,连续治疗5周。Elisa法检测血清中TNF-α含量;荧光定量PCR法检测胸主动脉TRAF-6、IKK、IκB、NF-κBp65的m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠TNF-α的含量明显升高,TRAF-6、IKK、NF-κB的m RNA表达显著升高,IκB的m RNA表达明显降低;与模型组比较,模型给药组TNF-α的含量明显降低,TRAF-6、IKK、NF-κB的m RNA表达显著降低,IκB的m RNA表达明显升高。结论:补阳还五汤通过调节TNF-α/NF-κB炎症信号通路,减轻炎症反应,保护血管,从而延缓高血压前期的发展进程。     

基于突触可塑性探讨电针改善大脑中动脉闭塞大鼠运动障碍的作用机制

目的：基于突触可塑性观察电针曲池、足三里对大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠运动障碍的改善。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、穴位组、非穴组,每组15只。采用Zea Longa线拴法制备MCAO大鼠模型,电针曲池、足三里,干预14 d。通过神经功能评分判断大鼠的神经功能缺损情况;CatWalk步态分析比较各组大鼠运动功能,TTC染色观察脑梗死体积,透射电镜观察突触超微结构和数量,免疫荧光检测缺血侧运动皮层突触相关因子突触后致密物-95（PSD-95)、突触蛋白的表达情况。结果：干预14 d后,与模型组比较,穴位组大鼠神经功能评分降低(P<0.05);步行速度提高、双足支撑时间缩短(P<0.05);脑梗死体积减少(P<0.05);突触超微结构改善明显,突触数量增加(P<0.05),突触相关因子突触蛋白、PSD-95表达上调(P<0.05)。Catwalk步态参数、脑梗死体积与突触超微结构改善有一致性。结论：电针曲池、足三里穴可改善MCAO大鼠运动障碍,其机制可能与上调突触相关因子的表达,改善突触可塑性有关。     

电针调整去卵巢大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴异常 功能的生化机制

目的：观察电针对去卵巢大鼠脂肪、肝脏和及职组织芳香化酶（雌激素合成酶）活性的影响。方法：以去卵巢大鼠为实验动物模型,用改进的放射酶学法和雌二醇（E2）放射免疫分析,测定脑组织和外周脂肪组织、肝组织中芳香化酶的活性及血E2的水平。结果：去卵巢术后3－4个星期,大鼠脂肪组织、肝组织和脑组织 中的酶活性稍有升高的趋势,但无统计学差异。经电针后,脂肪和肝中的组织芳香化酶活性显著提高（P＜0．01）。同时血E2水平也比针前明显升高（P＜0．01）,而脑组织芳香化酶的活性只显示轻度升高,与针前比较,无统计学差异。电针处理后,正常组大鼠（INT）未观察到类似的变化。结论：电针可能有促进去卵巢大鼠脂肪组织和肝组织中芳香化酶活性的作用,使雄激素转化为雌激素增多,血E2水平提高。这可能是针刺调整下丘脑－垂体－卵巢轴异常功能的机制之一。     

电针足阳明经穴对大鼠胃黏膜损伤修复机制的研究

目的比较电针足阳明、足少阳经穴对实验性胃溃疡大鼠胃黏膜损伤修复作用的异同,探讨足阳明经与胃相关的特异性及电针足阳明经穴对胃黏膜损伤细胞修复作用的可能机制。方法将40只大鼠随机分为空白组、模型组、胃经组、胆经组。造模采用水浸束缚法。实验结束后取血清及胃黏膜组织,采用放射免疫分析法测定表皮生长因子(EGF)、转化生长因子α(TGF-α)含量,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR法)分析胃黏膜EGFRmRNA表达。结果电针足阳明经穴均能使胃黏膜损伤指数显著降低,能显著升高胃黏膜EGF、TGF-α含量;电针上调EGFRmRNA在胃黏膜的表达水平,其中以足阳明经穴组作用最强,与足少阳经组比较差异显著。结论电针足阳明经穴对大鼠胃黏膜损伤的细胞修复作用是通过促进EGF、TGF-α等相关因子的合成、分泌与释放实现的;增强EGFRmRNA在胃黏膜局部的表达,可能是电针足阳明经穴对大鼠胃黏膜损伤修复作用的另一机制;足阳明经与胃具有相对的特异性。     

电针预处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的可能机制

目的：观察新生大鼠缺氧缺血后大脑早期即刻基因c—fos和c—jun蛋白含量的变化,电针预处理及合用ATP敏感钾通道(KATP)阻滞剂对其影响,以探讨电针预处理对缺氧缺血性脑损伤保护作用的可能机制。方法：采用免疫印迹方法,结合计算机图像处理,测定其积分光度值(ID)。结果：新生大鼠脑缺氧缺血后海马和皮层部位可同时诱导出c—fos和c—jun蛋白,2～4h达到峰值;海马的表达较皮层高;电针预处理可以降低KATP阻滞剂所致的海马区域的持续高表达。结论：针刺预处理抗脑缺氧缺血作用可能与激活KATP、抑制早期即刻基因诱发缺氧缺血后神经细胞凋亡有关。     

电针对大鼠脑缺血-再灌注损伤的防护

目的　观察电针治疗缺血性脑病的可能机制。方法　采用结扎大鼠双侧颈总动脉造成的脑缺血 -再灌注损伤模型 ,测定不同时间电针前后海马内 MDA含量和 SOD、GSH -Px活性并计数断头后大鼠喘息次数和持续时间。每日电针“百会”、“风池”、“大钟”及“足三里”穴 30 min共 14 d,取疏 -密波 ,频率 :2 -2 0 H z,强度 :2 .0 A。结果　电针能显著延长大鼠脑缺血 -再灌注后的存活时间 ;降低缺血 -再灌注后大鼠海马的 MDA含量 (d7:2 .5 7± 0 .62 nmol/mg,d14 :1.18± 0 .47nm ol/m g)及提高SOD(d7:5 .18± 1.82 u/m g,d14 :6.91± 2 .47u/mg)及 GSH-Px(d7:9.5 0± 1.0 9u/mg,d14 :11.65± 1.72 u/m g)的活性。结论　电针能提高大鼠抵抗脑缺血 -再灌注的损伤能力 ,其作用机制可能与电针提高动物体内氧化酶活性、抑制自由基生成有关