NSCLC患者ctDNA与病理组织中EGFR、PIK3CA基因突变检测结果一致性及影响因素

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)与病理组织中上皮生长因子受体(EGFR)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)基因突变检测结果的一致性,并分析其影响因素。方法 纳入2019年12月—2020年12月我院收治的118例NSCLC患者作为研究对象。检测患者外周血ctDNA及病理组织中EGFR、PIK3CA及c-Met、TP53、FGFR1、BRAF、STK11、FANCA、KRAS、ERBB2基因状态,比较ctDNA与组织中EGFR、PIK3CA检测结果的一致性,并将患者分为一致组和非一致组;比较两组患者的临床资料,多因素Logistic回归分析影响检测结果一致性的因素;Kaplan-Meier法绘制生存曲线分析ctDNA检测EGFR、PIK3CA突变患者1年生存情况。结果 ctDNA检测结果显示,84例(71.19%)患者检出至少1个EGFR突变位点,19del、L858R、T790M突变检出率分别为37.29%、23.73%、33.05%,33例(27.97%)检出至少1个PIK3CA突变位点,p.E545K、p.H1047R、p.E...     

ARMS与NGS对比检测NSCLC患者标本EGFR、KRAS、BRAF、EML4-ALK融合等基因探索

目的 探讨突变扩增阻滞系统(ARMS)法和下一代测序(NGS)法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者标本多驱动基因改变上的差异,指导临床个体化治疗.方法 51例NSCLC患者标本首先采用ARMS法,对所有样本进行表皮生长因子受体(EGFR)、鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌基因同源体B1 (BRAF)、棘皮动物微管相关类蛋白4-间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)等基因检测,随后采用NGS对上述标本进行高通量检测对比,收集临床资料,定期随访.结果 51例NSCLC样本应用ARMS法与NGS检测EGFR、KRAS、EML4-ALK突变阳性率(48.9％vs53.3％、11.1％ vs 8.9％、13.7％ vs 5.9％)差异无统计学意义.两种方法检测出的EGFR-19del突变组比EGFR-L858R突变组靶向治疗生存期较长,差异有统计学意义(P=0.0L0),但两组在性别、年龄、靶向治疗阶段等方面差异无统计学意义.NGS法检测出EGFR-19del、L858R突变患者肿瘤特有基因平均数量分别为7.1、4.6个,EGFR-L858R多为抑癌基因突变(91％).2例EGFR/KRAS双突变患者较EG-FR单突变患者预后差.结论 ARMS法和NGS均适用于NSCLC患者突变驱动基因检测.对于DNA点突变检测,NGS不仅显示ARMS检测的遗漏,还显示突变丰度、伴随突变及非常规突变等,对ARMS检测有补充作用.EGFR-19del患者靶向治疗生存期比EGFR-L858R突变患者长,EGFR-L858R主要为抑癌基因突变.EGFR合并KRAS双突变患者预后较差,但仍需进一步研究证实.     

赣南地区原发性肺腺癌中EGFR基因突变的临床研究

目的探讨赣南地区原发性肺腺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)基因的突变情况及其临床病理特征。方法采取DNA测序结合扩增耐突变系统(ARMS)法检测126例原发性肺腺癌组织EGFR基因外显子18、19、20及21的突变情况,进一步分析其与性别、吸烟情况及TNM分期等临床病理特征的关系。结果入组病例中检测出64例EGFR基因突变,突变率为50.79%(64/126),其中19del突变45例(70.3%,45/64),L858R突变14例(21.9%,14/64),G719A突变2例(3.1%,2/64)。另见3例原发T790M突变,其中2例为L858R、T790M二联突变,1例为19del、T790M二联突变。女性患者EGFR突变率[66.7%(38/57)]明显高于男性[37.7%(26/69)],不吸烟患者突变率[59.7%(43/72)]明显高于吸烟患者[38.9%(21/54)],两者之间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论赣南地区原发性肺腺癌中女性、不吸烟患者EGFR基因突变率较高,突变类型以19del为主,提示其更能从EGFR-TKIs治疗中获益。     

EGFR19、21外显子突变丰度与NSCLC患者临床特征及吉非替尼疗效的关系

目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)基因19、21外显子突变丰度与非小细胞肺癌（NSCLC）患者临床病理特征及吉非替尼疗效的关系。方法 收集2013年10月～2016年11月在本院采用吉非替尼治疗的94例NSCLC患者,采用下一代测序(NGS)法检测血液中EGFR19、21外显子突变情况及突变丰度,统计患者临床病理特征及无进展生存期（PFS）和总生存率（OS）,分析EGFR19、21外显子突变丰度与患者临床病理特征及PFS、OS的关系。结果 94例患者检测EGFR19外显子突变59例（62.77％）,EGFR21外显子突变35例（37.23％）,其中突变高丰度48例,突变低丰度46例;EGFR19、21外显子突变丰度与患者性别、年龄、吸烟史、TNM分期等无关（P＞0.05）,与病理类型、组织分化程度有关（P＜0.05）; 高丰度组疾病控制率89.58％高于低丰度组63.04％（P＜0.05）;高丰度组中位PFS（15.98±3.24）个月高于低丰度组（12.06±2.87）个月（P＜0.05）;高丰度组OS 64.58％高于低丰度组OS 39.13％（P＜0.05）。结论 NSCLC患者EGFR基因突变丰度的高低与患者临床病理类型及组织分化程度有关。与低丰度患者相比,EGFR基因突变高丰度的NSCLC患者具有较高的吉非替尼疗效,PFS和OS明显延长。     

非小细胞肺癌171例患者EGFR基因突变分析

目的 研究171例非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状况,为肺癌的基因诊断和靶向治疗提供依据.方法 171例肺癌患者取新鲜病理组织标本,用厦门艾德核酸提取试剂提取体细胞DNA,采用扩增阻滞突变系统荧光PCR(ARMS-PCR)技术检测EGFR基因突变.结果 在95例男性肺癌患者中,共有4例患者EGFR基因同时检测到存在2个位点突变.171例NSCLC病例中,EGFR基因野生型比率为48.57%(85/175),EGFR基因突变型比率为51.43%(90/175),突变型中21L858R点突变占24.00%(42/175),19Del突变占21.71%(38/175).男女患者比较,EGFR基因野生型比率男性为57.58%(57/99),女性为36.84%(28/76),差异有统计学意义(P=0.007);EGFR基因19Del女性为28.95%(22/76),男性为16.16%(16/99),差异有统计学意义(P=0.042).EGFR基因21L858R点突变女性为28.95%(22/76),男性为20.20%(20/99),差异无统计学意义(P=0.179).结论 NSCLC患者EGFR基因突变率大约为50%左右,突变型以21L858R和19Del占大多数,突变型中女性显著多于男性.     

非小细胞肺癌浅表转移淋巴结EGFR基因状态及EGFR-TKI疗效分析

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者浅表淋巴结EGFR基因突变状态及其采用EGFR-TKI治疗的效果。方法:选取经病理确诊为NSCLC转移浅表淋巴结及部分配对肿瘤原发灶石蜡组织标本行EGFR基因检测,分析临床病理资料,比较部分病例浅表淋巴结转移灶与肿瘤原发灶EGFR基因突变状态差异。此外,根据检测结果分组,比较各组的PFS,并采用COX回归分析了解PFS的影响因素。结果:56例浅表淋巴结行EGFR检测,35例EGFR突变阳性与EGFR野生型21例。无吸烟、腺癌与EGFR突变相关,而女性突变率高于男性,但差异无统计学意义(P>0.05)。11例淋巴结与配对肿瘤原发灶一致性分析,两者一致率为81.8%,Kappa值为0.645,P值为0.020。35例EGFR突变阳性者采用EGFR-TKI治疗,其PFS优于21例采用化疗的EGFR野生型组。COX多因素回归显示,校正腺癌、PS评分,EGFR突变阳性者有利于延长PFS。结论:非小细胞肺癌浅表转移淋巴结EGFR突变检测可用于指导EGFR-TKI的使用。     

PIK3CA对埃克替尼治疗EGFR基因突变的非小细胞肺癌病人的疗效预测

目的探讨PIK3CA对埃克替尼治疗EGFR基因突变的非小细胞癌（NSCLC）病人疗效预测价值。方法首先应用ARMS法对确诊肺腺癌标本给予EGFR基因突变检测。对于EGFR检测阳性肺腺癌标本应用免疫组化蛋白定性法进行PIK3CA表达状态分析。对EGFR检测阳性者给予埃克替尼治疗,观察PIK3CA高表达组与低表达组埃克替尼治疗后的无进展生存期（PFS）。结果在62例EGFR突变的肺癌病人中,48.38%同时存在PIK3CA高表达。在PIK3CA表达阳性病人应用埃克替尼后中位疾病PFS 10.5个月（95% CI:5.6~15.4）;PIK3CA表达阴性的病人应用埃克替尼后中位疾病PFS 17.0个月（95% CI:10.1~23.8）。PIK3CA低表达病人用埃克替尼治疗的应答率、中位PFS、EGFR-TKIs耐药率均有较高的趋势（χ2=7.16,P < 0.05）。结论在EGFR突变的接受埃克替尼治疗的NSCLC病人,检测PIK3CA表达状态有助于鉴别出EGFR-TKIs治疗有效较低的病人,提前进行干预,从而延长病人中位PFS。     

应用酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌患者胸腔积液表皮生长因子受体基因突变

目的 探讨酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液表皮生长因子受体基因(EGFR)外显子19缺失和外显子21 L858R突变的临床意义.方法 采用EGFR基因突变酶切富集及非酶切富集PCR法对30例NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21 L858R突变进行分析.结果 30例NSCLC患者中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因外显子19缺失10例(33.3%)和外显子21 L858R突变5例(1.7%),非酶切富集PCR法则仅能分别检出6例(20.0%)和1例(3.3%);两种方法检出率差异有统计学意义(P=0.032).在接受吉非替尼治疗的4例患者中,2例检出EGFR基因突变患者治疗后肿瘤均部分缓解.结论 酶切富集PCR法可以高效、经济、准确地检测NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因突变,可能成为临床NSCLC患者选择EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的预测方法.     

老年晚期非小细胞肺癌EGFR基因突变情况的研究

目的 通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)的人表皮生长因子受体(EGFR)基因突变,以探讨老年晚期患者的EGFR突变类型及突变特征。方法 45例经CT引导下经皮肺穿刺术的NSCLC的病理组织标本,经基因测序法检测其EGFR基因突变情况,并对EGFR基因各外显子的突变类型进行统计分析。结果 45例NSCLC标本,EGFR基因突变率为37.8%,其中外显子19约占52.9%;外显子21占41.2%,两者合占基因总突变数的94.1%。外显子19突变主要发生在DNA链上的碱基序列第746～753位密码子上,均为碱基删除突变,其中,最常见的突变类型是del E746-A750;外显子20突变1例,突变发生在DNA链上的碱基序列第768位密码子上的错义突变;外显子21突变发生在DNA链上的碱基序列第848、858、861位密码子上的错义突变,而L858R是最常见类型。突变阳性率,男性22.7%,女性52.2%;吸烟者15.4%,非吸烟者46.9%;鳞癌14.2%,腺癌48.4%;Ⅲ期26.5%,Ⅳ期36.8%,EGFR基因突变率在性别比例、吸烟情况以及病理类型之间的比较,差异均有显著性学意义(P&lt;0.05);在肺癌分期的比较,差异无意义(P&gt;0.05)。结论 (1)EGFR基因突变约占NSCLC总数的37.8%, 以外显子19、21突变为主。(2)EGFR主要突变类型为碱基删除突变、错义突变,大部分突变发生在女性、非吸烟、腺癌患者,其中,半数以上存在复合突变。     

基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用

目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,手术后留取新鲜肺癌组织,提取基因组DNA,采用多重聚合酶链式反应(PCR)对组织样本的EGFR基因18、19、20和21号外显子中包含8种高频突变位点的特异片段进行扩增,并经多重连接酶检测反应(LDR)以特异性探针对扩增片段中的突变进行连接,再基于悬浮点阵技术平台对连接产物进行检测,最后通过DNA测序对检测结果进行验证。结果在61例NSCLC组织样本中,运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术共检出EGFR基因突变19例,突变率为31.1%,其中外显子19缺失突变E746-A750 del(1)、E746-A750 del(2)各1例,外显子20点突变T790M 1例,外显子21点突变L858R 14例、L861Q2例,经DNA测序验证完全正确。结论运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术初步建立了一种新型的EGFR基因突变检测方法,能同时准确检测EGFR基因中的8种高频突变...     

基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用

目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,手术后留取新鲜肺癌组织,提取基因组DNA,采用多重聚合酶链式反应(PCR)对组织样本的EGFR基因18、19、20和21号外显子中包含8种高频突变位点的特异片段进行扩增,并经多重连接酶检测反应(LDR)以特异性探针对扩增片段中的突变进行连接,再基于悬浮点阵技术平台对连接产物进行检测,最后通过DNA测序对检测结果进行验证。结果在61例NSCLC组织样本中,运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术共检出EGFR基因突变19例,突变率为31.1%,其中外显子19缺失突变E746-A750 del(1)、E746-A750 del(2)各1例,外显子20点突变T790M 1例,外显子21点突变L858R 14例、L861Q2例,经DNA测序验证完全正确。结论运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术初步建立了一种新型的EGFR基因突变检测方法,能同时准确检测EGFR基因中的8种高频突变...     

非小细胞肺癌患者不同类型样本EGFR基因突变分析

目的: 探讨非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)患者不同类型样本表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态及临床意义。方法: 采用扩增阻滞突变(amplification refractory mutation system,Arms ) 荧光定量PCR (QPCR)、超级(super)Arms QPCR分别检测NSCLC石蜡组织、细胞学涂片及外周血中EGFR基因突变状态,同时分析EGFR、19号外显子缺失(E19 DEL)、21号外显子L858R(E21 L858R)点突变与患者的性别、年龄、样本类型的相关性。结果： 705例NSCLC患者中EGFR突变率为52.06%(367/705), 与患者的性别、年龄和样本类型有关; 女性患者突变率(67.69%)显著高于男性(38.68%, χ2=59.06,P60岁 (48.93%, χ2=5.45,P60岁(22.01%, χ2=4.31,P<0.05)。E21 L858R突变率为39.78% (146/367), 女性患者(28.62%)显著高于男性(13.95%, χ2=22.95,P<0.01), 石蜡组织(22.30%)明显高于细胞学涂片(12.70%)、外周血样本(6.25%, χ2=7.47,P<0.05)。结论： 不同类型样本EGFR基因突变状态存在差异,临床医师应正确送样检测。     

老年非小细胞肺癌表皮生长因子受体突变的影响因素与分子靶向治疗的效果研究

目的：探讨老年非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)突变的影响因素与分子靶向治疗的效果。方法：选取2017年1月-2019年6月在黄州区人民医院经病理检查确诊为NSCLC的268例老年患者作为研究对象。患者均进行EGFR突变检测,并应用表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗。分析EGFR突变的影响因素与EGFR-TKIs治疗的效果。结果：纳入的268例NSCLC患者中,EGFR基因突变阳性136例,突变率为50.75%。年龄>70岁和≤70岁患者的突变率比较,差异无统计学意义(P>0.05);女性患者突变率高于男性,无吸烟史患者突变率高于有吸烟史患者,腺癌患者突变率高于黏液腺癌及其他类型NSCLC患者,差异均有统计学意义(P<0.05);EGFR基因突变阳性患者的疾病控制率高于EGFR基因突变阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：NSCLC患者EGFR基因突变率较高,以女性、无吸烟史和腺癌患者多见,EGFR基因突变阳性患者应用EGFR-TKIs治疗的效果更好。     

非小细胞肺癌患者外周血表皮生长因子受体基因突变的检测及临床意义

目的探讨外周血表皮生长因子受体(EGFR)基因突变在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼治疗适宜患者筛选中的价值。方法对2005年12月至2007年12月在广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心治疗的170例NSCLC患者,应用EGFR基因突变酶切富集PCR法分析血浆游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21L858R突变。分析血浆EGFR基因突变与性别、吸烟史、病理类型、TNM分期、吉非替尼治疗客观缓解率和疾病无进展生存期间的关系。结果 170例血浆标本共检出血浆EGFR基因突变77例,突变率为45.3%。血浆EGFR基因突变主要见于肺腺癌患者(P<0.001)及非吸烟者(P=0.001)。在33例接受吉非替尼治疗的患者中,血浆EGFR基因突变阳性患者的客观有效率和中位疾病无进展生存期均显著优于血浆EGFR基因突变阴性患者(P=0.001)。结论血浆游离核酸酶切富集PCR法能够灵敏而特异地检测NSCLC的EGFR基因突变。突变检测阳性者对吉非替尼的反应率明显高于野生型患者。     

肺腺癌病人胸腔积液与相应肿瘤组织EGFR基因突变检测的对比研究

目的：探讨利用胸腔积液检测EGFR基因突变的临床可行性。方法：在分别获取肺腺癌病人的肿瘤组织和胸腔积液以后,使用 ARMS-PCR法对肿瘤组织EGFR基因突变情况进行检测分析。结果：（1）从EGFR基因突变率上来看,女性病人普遍高于男性病人(P=0.013),非吸烟患者高于吸烟病人(P=0.002)。（2）两种检测样本中的EGFR基因突变热点都包含19-del突变、L858R突变。（3）配对样本中突变率无明显差异(P=0.532),通过分析EGFR基因突变检测情况可得,突变一致率高达84.78%,一致性Kappa值约0.697,表明这二者有良好的一致性(P<0.001)。结论：（1）在晚期肺腺癌病人中,EGFR基因突变风险相对就高的病人包括女性病人和非吸烟病人,这种基因的突变率并不会受到肿瘤组织获取方式和病人年龄的影响。（2）本次研究获取的两种检测样本中的EGFR基因突变热点均有19-del突变、L858R突变。（3）EGFR基因突变在两种检测样本中有良好的一致性,在临床上可以考虑使用患者胸腔积液对EGFR基因突变情况进行检测。     

非小细胞肺癌脑转移瘤患者表皮生长因子受体基因突变情况及术后预后影响因素

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移瘤患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变情况及术后预后的影响因素。方法纳入56例NSCLC脑转移瘤患者为研究对象。所有患者均行脑转移灶手术治疗,术后行脑肿瘤组织EGFR基因突变检测,并接受靶向治疗、化疗或者放疗。分析患者术后生存情况及其影响因素。结果 56例患者中,共有30例患者存在EGFR基因突变,突变率为53.6%,以19号外显子缺失突变(19del)及21号外显子点突变(L858R)为主。56例患者术后中位生存期为15个月,EGFR基因突变状态、单发脑转移、术后放疗患者中位生存时间分别长于EGFR基因未突变、多发脑转移、术后未放疗者(均P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示, EGFR突变类型、脑转移个数、术后放疗情况是NSCLC脑转移瘤患者术后生存情况的影响因素(均P<0.05)。结论 NSCLC脑转移瘤患者EGFR基因突变较为常见,术后预后较非EGFR基因突变患者好。术后联合放疗可延长患者的生存期,单发脑转移患者术后获益更大。     

人非小细胞肺癌组织中检测表皮生长因子受体突变两种方法的比较

目的:通过免疫组织化学染色与实时荧光定量PCR检测表皮生长因子受体(EGFR)突变的比较,探讨两种检测方法的一致性及在非小细胞肺癌(NSCLC)临床检测中的应用价值。方法:随机选择36例NSCLC存档石蜡组织,采用特异性突变抗体(E746-A750del和L858R)的免疫组织化学染色方法和Roche商品化的cobas?EGFR PCR检测试剂盒检测EGFR的突变状态。结果:EGFR突变蛋白阳性定位于肿瘤细胞质和或胞膜。免疫组织化学检测显示NSCLC中EGFR突变阳性率为47.22%(17/36),其中鳞癌的突变率为9.09%(1/11),腺癌的突变率为64.00%(16/25),二者的差异有显著性(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测NSCLC中EGFR突变阳性率为50.00%(18/36),其中鳞癌的突变率为18.18%(2/11),而腺癌的突变率为64%(16/25),二者的差异有显著性(P<0.05)。免疫组织化学染色与实时荧光定量PCR检测EGFR突变具有极好的一致性(κ=0.833,P<0.01),并且检测到的主要突变位点都是19号外显子的缺失突变(E746-A750del)和21号外显子的点突变(L858R)。结论:EGFR突变特异性抗体的免疫组织化学检测是一种可在NSCLC中进行EGFR突变筛查并对EGFR-TKI治疗快速反应的方法,具有检测费用较低、检测时间较短且结果易于判读,是一种可以在临床进行广泛推广的检测方法。EGFR突变在肺腺癌中更为常见。     

非小细胞肺癌患者经支气管内超声引导支气管针穿刺获取的转移淋巴结标本与原发病灶标本中表皮生长因子受体基因突变比较

目的比较晚期非鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)患者经支气管内超声引导支气管针穿刺(EBUS-TBNA)获取的转移淋巴结(LN)标本与原发病灶(PT)标本的表皮生长因子受体(EGFR)突变状态,评价EBUS-TBNA获取标本用于检测EGFR基因突变的价值。方法对2014年1月至2016年1月郑州大学人民医院收治的72例初治、非鳞状NSCLC患者(Ⅲ期和Ⅳ期)的PT标本与EBUS-TBNA获取的转移LN标本进行EGFR基因突变检测。通过扩增阻滞突变系统(ARMS)法检测EGFR基因突变情况,比较EGFR基因突变的一致率,并评估不同EGFR基因突变患者靶向治疗的疾病控制率。结果 72例标本中,34例(47.2%)显示至少1个EGFR基因突变,其中PT标本33例,转移LN标本30例;主要是外显子19缺失和外显子21 L858R突变。PT和转移LN标本EGFR基因突变的一致率为88.9%(64/72)。1例患者的PT和转移LN标本中均有外显子21 L858R突变,而仅在转移LN标本中检测到T790M突变。EGFR基因突变的病例中有28例患者接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗,其疾病控制率为71.4%(20/28,部分缓解16例,疾病稳定4例)。PT和转移LN标本中EGFR基因突变一致患者和突变不一致患者的TKI治疗疾病控制率比较差异无统计学意义(χ~2=0.07,P>0.05)。结论通过EBUS-TBNA取得的转移LN标本的EGFR基因突变结果与同一患者的PT标本具有较高的一致性,晚期非鳞状NSCLC患者通过EBUS-TBNA获得的转移LN标本可以用于EGFR突变的检测。     

EGFR基因突变与肺腺癌脑转移相关性研究

目的 探讨肺腺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与脑转移的相关性。方法 比较EGFR 19外显子缺失(19 Del)和21外显子点突变(21 L858R)患者初诊以及接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)靶向治疗后脑转移情况；CCK-8法检测并计算EGFR突变肺腺癌细胞株PC9 (19 Del)和H3255 (21 L858R)对吉非替尼的半抑制浓度(IC₅₀)。结果 纳入410例肺腺癌患者，总体脑转移153例(37.3%),年龄、淋巴结转移和EGFR 21 L858R突变是脑转移高危因素。其中初诊EGFR突变患者脑转移48例，19 Del和21 L858R分别为14和34例(P=0.006);EGFR-TKIs靶向治疗后有17例19 Del和20例21 L858R患者发生脑转移，其脑转移中位数时间(月)分别为15(8.50, 25.00)和7(4.25, 12.25)(P=0.013)。PC9和H3255对吉非替尼的IC₅₀分别(0.037±0.008)和(0.150±0.040)μmol/L(P=0.007)。结论...     

建立基于脱氧次黄嘌呤核苷修饰等位基因PCR方法检测EGFR基因热点突变

目的建立基于脱氧次黄嘌呤修饰等位基因特异荧光聚合酶链反应（dI-AS-PCR）方法,检测表皮生长因子受体（EGFR）基因热点突变L858R 和19del（2235～2249,2236～2250）。方法设计包含扩增EGFR基因L858R 和19del 热点突变在内的特异性引物、荧光探针和内参体系;且特异检测基因突变的等位基因PCR引物3’- 末端n-1 或n-2 位置采用脱氧次黄嘌呤（dI）修饰。建立标准品和质控样品,应用荧光PCR 检测,并分析结果。结果dI-AS-PCR能够在野生型背景下检测低于0.1%的突变,对50 例肺癌临床样本进行检测,有9 例（18%）EGFR 基因发生L858R 突变,14（28%）例19del 基因突变。基因热点突变率为46%,其检测结果与DNA 测序完全一致。结论基于dI-AS-PCR 技术的特异荧光PCR 检测EGFR基因热点突变,敏感性高,特异性强,可以应用于临床EGFR基因突变检测,指导个性化用药及酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗耐药监测。