脑胶质瘤免疫治疗的实验研究

目的：提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物（HAC），免疫大鼠，观察HAC的抑瘤作用。方法：彩免疫亲和层析方法提纯鼠脑胶质瘤C6细胞HAC，免疫20只大鼠为实验组，以另20只大鼠作为对照组，于免疫后1周，采用立体定向脑内接种方法，以C6细胞攻击两组大鼠，于肿瘤细胞攻击后第2周，取两组动物外周静脉血，并采20只正常动物的外周静脉血做为正常对照，测定外周静脉血淋巴细胞计数。观察饲养过程中实验动物出现的症状、体征和第四周实验动物存尖率。于第四周处死存活动物，取脑组织进行HE染色病理组织学检查，并用免疫组化方法分析脑胶质瘤浸润区T淋巴细胞分布情况。结果：实验组大鼠外周血淋巴细胞计数显高于对照组（P＜0．01）。实验组胶质瘤局部浸润的CD3＋和CD4＋细胞数均显高于对照组（P＜0．01），实验组胶质瘤局部浸润的CD8＋细胞数与对照组比较无显性差异（P＞0．05），实验组胶质瘤局部浸润T淋巴细胞CD4＋／CD8＋显高于对照组（P＜0．01）。实验组动物症状出现时间显晚于对照组动物（P＜0．05），实验组动物四周末存活率显高于对照组（P＜0．01）。结论：C6细胞中HAC可以诱导大鼠产生对C6细胞的细胞免疫，提高大鼠存活率。     

荧光引导脑胶质瘤切除的临床应用

目的 探讨荧光素钠引导在脑胶质瘤切除中的应用.方法 对10例脑胶质瘤患者术中应用荧光素钠将肿瘤染色,根据荧光染色强度判定肿瘤的边界并切除.结果 星形细胞瘤( WHOⅡ级)4例,间变性星形细胞瘤(WHOⅢ级)、胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)各3例,术中肿瘤切除范围与病理学检查相符,术后1周MRI增强扫描显示肿瘤全切除8例,次全切除2例.术后语言肢体运动障碍一过性加重3例,给予对症治疗后逐渐恢复.结论 该方法应用简便、安全、经济,对高级别胶质瘤术中可直观、实时判断肿瘤的边界,大大提高了肿瘤切除率.     

单克隆抗体标载的^131I脑胶质瘤瘤内近距离放疗

一、资料与方法本组男38例,女18例,年龄18～70岁,平均36岁。全部病例经手术病理证实为脑恶性胶质瘤,其中胶质母细胞瘤34例,星形细胞瘤22例(Ⅱ～Ⅲ级)。第一次手术者20例,余为复发后手术病例。手术中根据肿瘤大小和部位,尽可能在保护脑功能前提下切除肿瘤。行瘤腔彻底止血后,将Omaya化疗囊出药端置入瘤腔内,丝线固定后,将进药端埋于头皮下,避开头皮切口。术后4d口服复方碘溶液1.5ml,3次/日,共服用10d,以封闭甲状腺,减少放射线对甲状腺的损伤。术后7d化疗囊内注入131I-chTNT30mci,15～20d后重复注入一次。二、结果所有患者于末次注药后2个月…     

大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗机制的实验研究

目的研究大鼠脑胶质瘤伽玛刀治疗的机制，初步探讨胶质瘤细胞凋亡和坏死的发生规律。方法立体定向法制作C6大鼠脑胶质瘤模型18只，分为实验一、二组和对照组，实验组于肿瘤接种后21d行伽玛刀治疗，实验一组、实验二组照射剂量分别为9Gy、12Gy，治疗后1周行病理检查及流式细胞学检查测定肿瘤细胞的凋亡和坏死，分析凋亡率和坏死率与照射剂量的关系。结果实验组坏死特点明显不同于对照组，实验组可见肿瘤细胞凋亡。流式细胞学检查实验一、二组肿瘤细胞的凋亡和坏死明显高于对照组，随着照射剂量的增加，肿瘤的坏死增加、凋亡反而降低。结论肿瘤细胞的凋亡和坏死皆为伽玛刀治疗胶质瘤的作用机制．提高肿瘤细胞的凋亡具有重要临床意义。     

脑胶质瘤化疗敏感性的体外实验研究

目的 探讨体外培养的脑胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性,为临床有效治疗胶质瘤提供实验依据.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测26例原代培养胶质瘤细胞在体外对顺铂(DDP)、环磷酰胺(CTX)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)化疗药物的敏感性.结果 19例胶质瘤细胞对单一化疗药物的敏感性从高到低依次为DDP>CFX>5-FU>VCR.患者年龄与药物敏感性均无明显相关性;除DDP外,病理分级与其他药物敏感性无明显相关性.结论 比色法是一种快速、有效检测体外药物敏感性的方法.体外药敏试验对排除无效药物、筛选敏感药物进行个体化的化疗,提高临床化疗效果,具有重要意义.     

脑胶质瘤化疗敏感性实验研究

目的探讨脑胶质瘤细胞体外对化疗药物的敏感性，为临床有效治疗胶质瘤提供实验依据。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测50例原代培养胶质瘤细胞在体外对替尼泊甙（VM-26）、卡氮芥（BCNU）、顺铂（CDDP）、长春新碱（VCR）、甲氨蝶呤（MTX）5种化疗药物单一或联合化疗的敏感性。结果42例获得药敏结果，成功率达84％。42例胶质瘤细胞对单一化疗药物的敏感性从高到低依次为VM-26〉BCNU〉CDDP〉VCR〉MTX。两种联合化疗方案（BCNU＋VM-26＋CDDP）和（BCNU＋VCR＋MTX）对胶质瘤细胞的敏感性明显优于单一用药（P〈0．01），且对绝大多数胶质瘤细胞增殖抑制率较高。结论两种联合化疗方案（BCNU＋VM-26＋CDDP）和（BCNU＋VCR＋MTX）可能对胶质瘤的化疗效果更好。     

脑胶质瘤的铁蛋白免疫组化研究

用肝、脾铁蛋白抗体对123例活检脑胶质瘤石蜡切片进行双PAP染色,结果显示69/123例(56％)脾铁蛋白阳性,68/119例(57％)肝铁蛋白阳性,其阳性率随肿瘤恶性度增高而增加。铁蛋白主要分布于肿瘤细胞内,少数分布于血管内、外皮细胞和吞噬细胞内。这提示脑胶质瘤组织中的瘤细胞和间质反应细胞能产生铁蛋白。铁蛋白阳性瘤细胞在组织中的分布不均,说明肿瘤异质性。     

脑胶质瘤术中荧光显像的实验研究

目的 探讨采用荧光标记白蛋白行胶质瘤术中荧光实时显像的可行性.方法 采用化学合成法将荧光素钠标记鼠血清白蛋白.先行体外实验:将C6胶质瘤细胞、星形胶质细胞分别与0.1 mg/ml荧光白蛋白培养24 h,观察细胞荧光染色情况.再行体内实验:术前24h,在载瘤大鼠静脉内注射荧光白蛋白溶液,术中分别在日光及荧光系统下观察肿瘤与正常脑组织形态,并对荧光处组织取活检行苏木精-伊红染色.结果 体外实验:荧光显微镜下,C6细胞发出强绿色荧光,星形胶质细胞荧光较弱.体内实验:术中日光下肿瘤组织呈黄色,荧光系统下呈绿色荧光.正常脑组织无荧光显示;苏木精-伊红染色提示荧光处组织为胶质瘤组织.结论 荧光白蛋白引导的胶质瘤术中实时显像能有效帮助术者区分胶质瘤与正常脑组织.     

神经外科导航辅助下邻近功能区脑胶质瘤的手术治疗

目的 总结神经导航系统在邻近重要功能区手术切除脑胶质瘤的价值.方法 应用德国Brain-LAB公司VV2神经导航系统辅助切除大脑半球邻近脑功能区胶质瘤56例,并对神经外科导航应用于脑胶质瘤切除手术的优越性、精确性和注意事项进行分析和总结.结果 本组病例中,平均注册误差为1.6±0.5mm,术后近期复查CT或MRI证实肿瘤影像学全切率为87.5%,患者临床症状均得已改善,肢体活动等重要神经功能与术前比较均未受明显影响,手术并发症少.短期随访3～13个月期间,5例复发.结论 神经导航系统辅助手术切除邻近重要功能区胶质瘤具有定位准确、精确性好、具有微侵袭等特点,有助于提高脑胶质瘤的全切率及降低手术并发症,相对提高病人生存质量和疗效.     

噬菌体抗体库的构建及抗人脑胶质瘤单抗的筛选

目的采用噬菌体展示技术制备抗人脑胶质瘤单抗.方法以人脑胶质瘤细胞系SHG-44免疫小鼠,取其脾淋巴细胞,应用噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库,并筛选抗人脑胶质瘤单抗.结果筛选得到的小鼠全套免疫球蛋白的重、轻链可变区基因片段分别为340bp和325bp,建成的抗体库库容为5.7×106,60/96克隆具有与肿瘤细胞结合活性,阳性率为62.5%,与正常人淋巴细胞则全部呈阴性反应.结论为胶质瘤单抗制备提供了一种新的方法.     

人参皂甙、CD3与IL-2协同诱导PBMC治疗恶性脑胶质瘤的实验研究

目的　提高人脑胶质瘤过继免疫治疗的效果 ,探索治疗脑胶质瘤的新途径。方法　用人参皂甙 (GS)、抗CD3单抗 (CD3 )和 IL-2共同诱导人外周血单个核细胞 (PBMC) ,诱导、扩增新型抗胶质瘤效应细胞 GS-CD3 AK细胞 ,并与 CD3 AK细胞在某些生物学方面进行了比较。结果　两组效应细胞增殖曲线均于第 6天达高峰 ,峰值可见 GS-CD3 AK细胞 >CD3 AK细胞 (P <0 .0 5 ) ;GS-CD3 AK细胞扩增倍数明显高于 CD3 AK细胞 (P <0 .0 5 ) ;两组效应细胞于培养的第 6天所测得的杀伤恶性脑胶质瘤细胞 BT3 2 5活性可见 GS-CD3 AK细胞 >CD3 AK细胞 (P <0 .0 5 )。结论　GS、CD3和 IL-2具有协同增强作用 ,使 GS-CD3 AK细胞成为较 CD3 AK细胞增殖能力、杀伤活性更强的免疫效应细胞 ,且 IL-2用量减少 ,为胶质瘤的过继免疫治疗打下了理论基础。     

Long-Term Inhibition of Stress-Induced Adrenocorticotropin Release by Intracerebral Administration of a Monoclonal Antibody to Rat Corticotropin-Releasing Factor Together with Ricin A Chain and Monensin

Previous studies have shown that microinjection of cytotoxic lgG2a monoclonal antibody to rat/human corticotropin-releasing factor (CRF-MAb) into the hypothalamic paraventricular nucleus of Long Evans rats resulted in antibody uptake into specific neurons of the paraventricular nucleus. We tested the hypothesis that this neuronal uptake may allow non-linked toxins to enter into specific neurons. The effects of central or peripheral administration of a mix containing CRF-MAb and cellular toxins (toxin/ CRF-MAb) on plasma adrenocorticotropin levels were determined before and after exposure to ether stress in freely moving rats. Peripheral injection (jugular vein) of the toxin/CRF-MAb mix or injection into the supraoptic nuclei did not affect resting or stress-induced adrenocorticotropin secretion. In contrast, bilateral injection of the same mix into the paraventricular nucleus or the lateral ventricle caused a consistent 70% reduction of the ether stress-induced adrenocorticotropin release but had no significant effect on the resting adrenocorticotropin levels. The blocking effect of intracerebroventricular administration disappeared after 24 h whereas the blockade persisted for at least 15 days after local injection into the paraventricular nucleus. The injection into the paraventricular nucleus of CRF-MAb without toxins restricted the inhibitory effects to 24 h. These data suggest that administration of a mix of toxins added to a specific lgG2a monoclonal antibody to CRF resulted in a long-term interference with the control of adrenocorticotropin secretion. This new approach may be of use for elucidating the physiological roles of different central peptidergic systems.