红细胞胰岛素受体分析法的改良及其初步应用

胰岛素受体（ＩＲ）异常导致胰岛素作用障碍，是Ⅱ型糖尿病（ＮＩＩＤＭ）发病中的一个主要因素。本文改良国内外人红细胞ＩＲ分析方法，并应用于ＮＩＤＤＭ临床实践，取得满意结果。方法学的平均批内变异系数的５．６６％，批间变异系数的１２．６７％。健康人２３名（年龄２９￣７０岁），高亲和力ＩＲ位点数为２２．４±８９．８位点／细胞，平衡解离常数Ｋｄ＝（５．７１±０．６５）×１０＾－１１ｍｏｌ／Ｌ；低亲和力ＩＲ位点     

非胰岛素依赖型糖尿病患者的红细胞免疫功能

血管病变、感染为糖尿病（ＤＭ）常见的并发症。为了观察非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者的红细胞免疫功能 ,探讨其与血管病变、感染的关系 ,我们采用酵母菌花环试验 ,测定了４２例ＮＩＤＤＭ患者外周血ＲＢＣ Ｃ３ｂＲ花环率及ＲＢＣ ＩＣＲ花环率。１材料和方法１ .１材料研究对象 :按ＷＨＯ１９８５年诊断标准临床确诊为ＮＩＤＤＭ的患者４２例,年龄３１～７７岁,病程０．５～２１年,所有患者均无酮症酸中毒及心衰。对照组为２０例健康体检者 ,年龄３０～６４岁。主要试剂 :补体致敏及未致敏的冻干ＹＳ酵母菌体 ,购自第二军医…     

钙对中国人乳癌细胞BCaP—37的生物学作用

应用细胞培养技术，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ和图像细胞分析技术（ＩＣＭ）研究钙对中国人乳癌细胞株ＢＣａＰ－３７的生长、增殖和基因表达的影响。生长曲线结果显示，钙对细胞生长具有显著抑制作用（Ｐ〈０．０１）。基因表达结果显示，钙（１２．０ｍｍｏｌ／Ｌ）对癌相关基因ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ的表达有抑制作用。测定ＩＣＭ的四项指标包括ＤＩ值，Ｓ期百分比，总ＤＮＡ含量及核面积，结果显示，两实验组（１．２ｍｍｏｌ／Ｌ     

新生儿红细胞增多症37例临床分析

新生儿红细胞增多症３７例临床分析青岛市市立医院儿科（２６６０１１）于凌翔，张素桂新生儿红细胞增多症是指新生儿生后２周内有红细胞数的异常增多，且伴有血红蛋白及红细胞压积的异常升高。当红细胞（ＲＢＣ）数＞７．００×１０／Ｌ、血红蛋白（Ｈｂ）＞２２０ｇ／Ｌ...     

虎杖甙对正常大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察虎杖甙（ＰＤ）对培养的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内钙离子浓度的变化机理。方法：用Ｆｌｕｏ－３－ＡＭ标记培养的ＶＳＭＣ，在粘附式细胞仪上测定细胞内游离钙的变化。结果：实验结果表明，ＰＤ（００２～２０ｍｍｏｌ／Ｌ）可使大鼠ＶＳＭＣ内游离钙浓度升高，波形变宽，其引起的钙波形态与去甲肾上腺素（ＮＥ）及氯化钾所引起的高尖钙波不同，ＰＤ使ＶＳＭＣ产生一种剂量依赖性的、持续缓慢升高的钙波。ＰＤ引起的细胞内游离钙升高可被ＥＧＴＡ（２ｍｍｏｌ／Ｌ）及维拉帕米（５０μｍｏｌ／Ｌ）明显抑制。结论：以上结果提示ＰＤ既促进ＶＳＭＣ外钙离子进入细胞内，还能诱导细胞内钙离子释放；ＰＤ可能会提高正常ＶＳＭＣ的收缩性，增加正常血管的张力。     

MCV、RDW结果对部分血液流变学指标的影响

目的 探讨红细胞体积,分丰宽度（ＭＣＶ、ＲＤＷ）对部分血液变指标的影响。方法 用Ｆ－８００测定ＭＣＶ、ＲＤＷ值,用ＬＢＹ－Ｎ５Ｂ转板式血液流变仪测定血液变指标,根据ＭＣＶ、ＲＤＷ值的不同分组统计,得出相庆血液变指标的变化。结果 ＭＣＶ低值组红细胞聚集指数（ＣＥ）、红细胞刚性指数（ＣＥ）、红细胞刚性指数（ＩＲ）、全血还原粘度（ｎｗ）的值显著高于对照指数（Ｐ〈０．０５）;ＲＤＷ高值组红细胞聚集指数、Ｋ     

钙对中国人乳癌细胞系BCaP－37的生物学作用

应用细胞培养技术，ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ和图像细胞分析技术（ＩＣＭ）研究钙对中国人乳癌细胞株ＢＣａＰ－３７的生长、增殖和基因表达的影响。生长曲线结果显示，钙（１８．０ｍｍｏｌ／Ｌ，３６．０ｍｍｏｌ／Ｌ）对细胞生长具有显著抑制作用（ｐ＜０．０１）。基因表达结果显示，钙（１２．０ｍｍｏｌ／Ｌ）对癌相关基因ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达有抑制作用。测定ＩＣＭ的四项指标包括ＤＩ值，Ｓ期百分比，总ＤＮＡ含量及核面积。结果显示，两实验组（１．２ｍｍｏｌ／Ｌ，１２．０ｍｍｏｌ／Ｌ）ＤＩ值分别为１．７８和１．７７，表现为恶性细胞的特征。其它三项指标均显著低于对照组（ｐ＜０．０１，ｐ＜０．０５）。综合评价ＩＣＭ各项指标结果显示，钙对细胞的增殖具有显著抑制作用。     

用MCV／RDW对地中海贫血初筛探讨

本文采用美国ＣＤ３５００型细胞分析仪，对４９例地中海贫血患者、２０例缺铁性贫血患者和１０４例健康人进行了红细胞平均体积（ＭＣＶ）／红细胞体积分布宽度（ＲＤＷ）检测。结果表明１０４例健康人ＭＣＶ／ＲＤＷ均在正常参考值范围，２０例缺铁性贫血为小细胞不均一性贫血（ＭＣＶ↓／ＲＤＷ↑），与文献报道相符。２４例重型和中间型β地中海贫血和１０例血红蛋白Ｈ病患者亦表现为小细胞不均一性，且ＲＤＷ值的改变较缺铁性贫血更显著（Ｐ＜０．０１）。１５例轻型β地中海贫血ＭＣＶ／ＲＤＷ较健康人轻度增高，其ＭＣＶ／ＲＤＷ值的改变与缺铁性贫血无显著差异（Ｐ＞０．０５），地中海贫血患者的贫血程度与ＲＤＷ值的增高呈平行的关系     

紫外线照射全血对红细胞免疫功能及脂质过氧化的影响

为了研究Ｂ波段紫外线（ＵＶＢ）照射全血对红细胞免疫功能及全血抗氧化能力的影响，利用１．５Ｊ／ｃｍ２的ＵＶＢ对全血进行照射，结果发现照射后红细胞Ｃ３ｂ受体花环促进率（ＲＦＥＲ）明显升高（Ｐ＜０．０５），而红细胞Ｃ３ｂ受体（ＲＣＲ）花环率升高更为明显（Ｐ＜０．０１），红细胞免疫复合物（ＲＢＣ－ＩＣ）花环率及与红细胞Ｃ３ｂ受体花环抑制率（ＲＦＩＲ）在照射前后无明显改变（Ｐ＞０．０５），红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性在照射后明显升高（Ｐ＜０．０１），而血浆中丙二醛（ＭＤＡ）含量无明显改变（Ｐ＞０．０５）。说明紫外线照射能改善红细胞免疫功能及全血的抗氧化能力。     

STUDY OF NOVEL MEMBRANOUS MATERIAL FOR CHARCOAL KIDNEY

ＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＣＨＡＲＣＯＡＬＫＩＤＮＥＹＳＴＵＤＹＯＦＮＯＶＥＬＭＥＭＢＲＡＮＯＵＳＭＡＴＥＲＩＡＬＦＯＲＣＨＡＲＣＯＡＬＫＩＤＮＥＹＧｕＨａｎｑｉｎｇ；ＬｕＭｏｚｕ（Ｔｉａｎｊｉｎｉｎｓｔｉｔｕ...     

当归对人红细胞变形性和聚集性的影响

目的 :研究当归对红细胞变形性和聚集性影响。方法 :健康献血者红细胞 ,自身血浆稀释至红细胞压积为 40 %。用红细胞聚集仪和激光衍射光学旋转细胞分析仪分别测定红细胞聚集性和变形性。结果 :当归组加入当归注射液 2 0mg/ml孵育后与正常对照组比较 ,可显著降低红细胞聚集速度 (Ta :2 .5 9± 0 .35 ,Tf:33.5 4± 2 .6 3vsTa :1.80±0 .16 ,Tf:2 7.11± 1.78,P <0 .0 5 ) ,但不影响红细胞解聚能力。加入Ca2 + 螯合剂可使红细胞变形性降低。当归可以显著逆转A2 3187导致的红细胞变形性降低 (EI:0 .2 9±0 .0 47vs 0 .17± 0 .0 2 4,P <0 .0 1)。结论 :当归可以降低正常红细胞聚集速度 ,减轻Ca2 + 螯合剂导致的红细胞变形性降低。     

β-淀粉样蛋白对原代培养大鼠海马神经细胞Sorcin、RyR2mRNA基因表达的影响

目的 研究β-淀粉样蛋白(Aβ)对原代培养的大鼠脑海马神经细胞内钙稳态相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的影响.方法 新生1-3天的Wistar大鼠,取其海马组织,原代培养8d后,用已老化过的Aβ25-35对海马神经细胞进行1μmol/L,10μmol/L和20 μmol/L剂量的染毒,培养24和48 h后分别观察海马神经细胞形态、和海马神经细胞内钙调节相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的基因表达水平.结果 随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长,可发现随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长,海马细胞出现细胞凋亡的比例增加,其中Aβ25-35 20 μmol/L染毒48 h培养海马细胞中出现了大量早期凋亡细胞和少量中期凋亡细胞.实时定量PCR结果显示,10 μmol/L Aβ5-35在对原代细胞染毒24和48 h后Sorcin mRNA的相对表达量为(1.42±0.03)和(1.63±0.02),与对照组相比,表达增加(P＜0.05);20μmol/L Aβ25-35在对原代细胞染毒24h和48 h后Sorcin mRNA的相对表达量(2.11±0.05)和(2.23±0.05),与对照组相比,表达增加(P＜0.05);20 μmo]/L Aβ25-35在对原代细胞染毒24和48h后RyR2mRNA的相对表达量为(1.64±0.03)和(1.95±0.03),表达显著高于对照组相(P＜0.05).结论 Aβ具有神经毒性,可抑制海马神经细胞的生长,可通过作用于钙调节相关蛋白的表达,诱发阿尔茨海默氏病(AD)的发生.     

地西他滨联合丙戊酸钠促进胃癌MGC-803细胞凋亡和G0/G1期阻滞的机制研究

目的: 探讨地西他滨(DCA)和丙戊酸钠(VPA)联用对胃癌细胞株MGC-803凋亡和细胞周期的影响及机制。方法: DCA 1.5 μmol·L^-1、DCA 3.0 μmol·L^-1、VPA 1.5 mmol·L^-1、DCA 1.5 μmol·L^-1+VPA 1.5 mmol·L^-1和DCA 3.0 μmol·L^-1+VPA 1.5 mmol·L^-1作用MGC-803细胞72 h。Annexin V/PI法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR检测nm23-H1 mRNA表达。结果: VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组 和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组 凋亡率均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。MGC-803细胞G₀/G₁期比例在VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组(61.55%±2.38%)和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组(66.75%±2.48%)的表达水平均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。nm23-H1 mRNA在VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组(1.84±0.46)和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组(2.88±0.42)的表达水平均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论: DCA联合VPA能显著促进MGC-803细胞凋亡及G₀/G₁期阻滞,其机制可能与促nm23-H1基因的表达有关。     

Selected biochemical values of yearling African blue neck ostriches (Struthio camelus) in Iran

Ten 12-month-old male clinically healthy young blue neck breed ostriches (Struthio camelus) from Zabol district of Sistan, Baluchestan province, Iran were blood sampled in plain tubes for harvesting serum. The concentrations of total protein, albumin, cholesterol, HDL cholesterol, LDL cholesterol, triglyceride, uric acid, calcium, inorganic phosphorus, and the activity of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), and gamma glutamyl transferase (GGT) were measured. The following results were obtained: total protein, 35.3?±?2 g/l; albumin, 16.4?±?1.53 g/l; globulin, 18.9?±?0.8 g/l; total cholesterol, 1.67?±?0.11 mmol/l; LDL cholesterol, 0.68?±?0.07 mmol/l; HDL cholesterol, 0.67?±?0.02 mmol/l; triglyceride, 0.70?±?0.1 mmol/l; uric acid, 302.15?±?20.81 μmol/l; calcium, 2.27?±?0.15 mmol/l; inorganic phosphorus, 1.81?±?0.13 mmol/l; AST, 246.3?±?22.4 IU/l; ALT, 8.4?±?0.52 IU/l; and GGT activity, 26.9?±?2.97 IU/l. Correlations between measured parameters were also determined. Blood biochemical values determined in this study can be considered as reference data for disease diagnosis in yearling African blue neck ostriches (S. camelus) in Iran.     

β-淀粉样蛋白对原代培养大鼠海马神经细胞钙稳态和线粒体线粒体通透性转运孔道的影响

目的 研究β-淀粉样蛋白(β-amyloid)对原代培养的大鼠脑海马神经细胞内钙稳态和线粒体通透性转运孔(mitochortrial permebility transition pore,MPTP)的影响,探讨其神经毒性作用的机制.方法 原代培养8d后的Wistar大鼠脑海马神经细胞,用老化的Aβ25-35对其进行1,10和20 μmol/L剂量的染毒,培养24和48h后观察海马神经细胞形态、游离钙浓度、Ca2+-ATP酶活性、线粒体膜电位,应用Western blot方法分析MPTP组成蛋白表达情况.结果 随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长,可以观察到原代培养的海马神经细胞呈现出弥漫性肿胀、开始变形、出现空泡、胞体边缘模糊的形态变化;原代培养海马神经细胞内的游离钙离子的浓度也呈逐渐上升趋势,其中Aβ25-35 20 μmol/L组在24h和48 h时,细胞内钙离子浓度分别为(31.04±4.16)和(32.80 ±0.43),均显著高于对照组(20.95±4.04)和(22.23 ±0.49)(P ＜0.05);Ca2+-ATP酶活性随着染毒剂量和染毒时间增加明显降低(P＜0.05),其中Aβ25-3520 μmoL/L组在24h和48h时,细胞内Ca2+-ATP酶活性为(2.14±0.01)和(1.10±0.05) U/mgprol,均显著低于对照组(5.17±0.08)和(4.57±0.06)(P＜0.05);线粒体膜电位Aβ25-35 20μmol/L组在24h和48 h时,细胞内线粒体膜电位分别为(20.34 ±7.05)和(19.05±6.15),均显著低于对照组(38.47 ±0.72)和(40.07±1.26)(P＜0.05);有明显剂量反应关系;MPTP孔道蛋白的WB结果显示蛋白表达量随着染毒剂量增加而增加.结论 Aβ25-35通过破坏细胞的钙稳态激活MPTP孔道影响线粒体功能从而发挥神经毒性作用.     

耳蜗外毛细胞两种胞内钙库的初步探讨

为探讨毛细胞胞内钙库的种类 ,本文观察了在无钠、无钙和含镧液体中 ,在不受胞外 Ca2 +内流和质膜上 Ca2 +转运机制影响的条件下 ,和在三磷酸肌醇敏感钙库的工具药 thapsigargin和 ryanodine敏感钙库的工具药 caffeine作用下 ,毛细胞胞内游离钙([Ca2 + ] i)的变化过程。分离的豚鼠耳蜗外毛细胞经钙敏荧光染料 5μmol/L fluo-3染色后 ,用激光扫描共聚焦显微镜监测 ,以 fluo-3荧光相对值指示毛细胞 [Ca2 + ] i的高低。 3 0 nmol/L thapsigargin使外毛细胞 [Ca2 + ] i由静态值 1.0增至 1.64± 0 .76,再加入 10mmol/L caffeine后更增至 2 .45± 1.5 9(x± s,n=11,F=7.90 ,P<0 .0 1)。Q值检验示两种试剂引起外毛细胞 [Ca2 + ] i增高程度的差别有极显著意义 (P<0 .0 1) ,表明毛细胞内有对三磷酸肌醇敏感和对 ryanodine敏感的两种钙库参与了胞内 Ca2 + 释放机制     

Serum biochemical parameters of endangered Caspian brown trout, Salmo trutta caspius (Kessler, 1870)

Serum biochemical parameters are important aspects in the management of endangered species such as endangered Caspian brown trout. The values of these parameters can be used for confirming any changes in the quality of waters and related soils. Serum samples of 20 (10 females?+?10 males) Caspian brown trout fish with same total weight and length were analysed. We compared the plasma concentrations of calcium (Ca; female, 2.4?±?0.4; male, 2.6?±?0.5 mmol/l), magnesium (Mg; female, 0.7?±?0.3 mmol/l; male, 0.8?±?0.3 mmol/l), sodium (Na; female, 139.9?±?3.9 mmol/l; male, 149.2?±?5.7 mmol/l), potassium (K; female, 3.4?±?0.3 mmol/l; male, 4.3?±?0.7 mmol/l), and chloride (Cl; female, 128.5?±?2.3 mmol/l; male, 133.3?±?3.8). According to the results, there were no differences in the Ca and Mg between the sexes. However, male fish have higher Na, K and Cl than females.     

MCU在高糖诱导心肌H9c2细胞凋亡中的作用机制

目的:探讨线粒体钙离子单向转运体(mitochondrial calcium uniporter, MCU)在高糖(high glucose, HG)诱导心肌H9c2细胞凋亡中的作用机制。方法:将心肌H9c2细胞随机分为3组:对照(control)组,5.5 mmol/L葡萄糖处理细胞;HG组,25 mmol/L葡萄糖处理细胞;精胺(spermine,Sp)干预(HG+Sp)组,25 mmol/L葡萄糖和5μmol/L Sp共同处理细胞。Western blot检测H9c2细胞MCU、caspase-9和caspase-3蛋白的表达;RT-qPCR检测H9c2细胞MCU的mRNA水平;Rhod-2 AM探针检测线粒体内Ca²⁺的荧光强度;吸光度法检测丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase, PDH)的活性;萤火虫萤光素酶检测细胞裂解液ATP的浓度;JC-1染色法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,Δψ_m);MitoSOX^TM染色法检测线粒体活性氧簇(re...     

Effects of Iptakalim on intracellular free calcium concentration of cultured rabbit pulmonary arterial smooth muscle cells

Objective:To explore the effects of Iptakalim on intracellular free calcium concentration and on the proliferation of cultured rabbit pulmonary arterial smooth muscle cells induced by endothelin-1(ET-1) in vitro. Methods:A cell culture model, [3H]-thymidine([3H]-TdR) incorporation test and confocal microscope were used to observe proliferation and intracellular free calcium concentration([Ca2+]i) of rabbit PASMC induced by ET-1 in vitro. Results:The value of [3H]-TdR incorporation in ET-1 group was increased 1.468 times higher than that in control group. Iptakalim at the concentration of 10-7mol/L,10-6 mol/L,10-5 mol/L lowered [3H]-TdR incorporation by (19.8±4.6)%, (41.2±9.5)%, (54.7±10.1)%, respectively, compared with the value of the cells treated with ET-1(P＜0.01); The intracellular fluorescence intensity of PASMC in ET-1 group was increased from 73.70±10.12 to 143.84±28.23, significantly higher than that in control group(P＜0.01); whereas with Iptakalim,the fluorescence intensity(FI) was only increased from 74.30±10.20 to 86.03±9.82, significantly lower than that in ET-1 group(P＜0.01). Conclusion:Iptakalim inhibited proliferation of PASMC and decreased intracellular free calcium concentration of cultured rabbit PASMC induced by ET-1.     

参与失血性休克血管钙敏感性调节的信号分子

目的：观察Rho-激酶、PKC、PKG对失血性休克大鼠血管钙敏感性的调控作用。 方法： 取失血性休克大鼠肠系膜上动脉，利用离体血管环张力测定技术，用去极化状态下(120 mmol/L K+)血管环对梯度浓度Ca2+的收缩力反映钙敏感性，观察Rho-激酶激动剂血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）、Rho-激酶抑制剂fasudil、PKC激动剂PMA、PKC拮抗剂staurosporine、PKG激动剂8Br-cGMP和PKG拮抗剂KT-5823对失血性休克血管钙敏感性的影响。 结果： Ang-Ⅱ、PMA、KT-5823可增高失血性休克血管的钙敏感性，表现为Ca2+的量效曲线明显左移，在Ca2+（3×10-2 mol/L）水平，Emax分别为0.630 g/mg、0.595 g/mg、0.624 g/mg，均明显高于休克组的0.377 g/mg(P<0.05，P<0.01)；fasudil、staurosporine、8Br-cGMP可降低失血性休克血管的钙敏感性，表现为Ca2+的量效曲线明显右移，在Ca2+（3×10-2 mol/L）水平，Emax分别为0.242 g/mg、0.230 g/mg、0.256 g/mg，均显著低于休克组(P<0.05，P<0.01)。 结论： Rho-激酶、PKC、PKG对失血性休克大鼠血管钙敏感性有调节作用，Rho-激酶、PKC可上调钙敏感性，PKG可下调钙敏感性。