人牙囊细胞的分离培养和生物学特性

目的：应用酶消化法体外培养人牙囊细胞并研究其生物学特性。方法：分离合法引产人胚胎乳牙胚的牙囊组织，消化法获得人牙囊细胞，HE染色观察细胞形态、免疫组织化学染色技术检测波形丝蛋白、Ⅰ型胶原表达，RT—PCR检测细胞的骨钙素、骨涎蛋白、碱性磷酸酶的表达。结果：原代培养的人牙囊细胞呈成纤维细胞形态，有部分一上皮成分混杂，经纯化后可排除；在牙囊细胞中Ⅰ型胶原和波形丝蛋白的表达呈阳性，定位于细胞的胞质中；RT—PCR结果显示骨涎蛋白、骨钙素、碱性磷酸酶表达。结论：体外培养的人牙囊细胞具有成纤维细胞的特性，具有合成Ⅰ型胶原的能力；不同程度表达Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白、碱性磷酸酶等矿化相关蛋白。     

白细胞介素-10对体外培养人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞增殖和牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取生长状态良好的第5代细胞,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测IL-10对细胞增殖的作用;用碱性磷酸酶试剂盒检测IL-10及其抑制剂对细胞碱性磷酸酶活性的作用。结果:0、1、10、25、50、100ng/mLIL-10对人牙囊细胞的增殖影响无显著性差异(P>0.05);10ng/mLIL-10作用0、1、3、5、7d对人牙囊细胞的增殖影响无显著性差异(P>0.05)。10ng/mLIL-10作用3～7d降低人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05),10ng/mLIL-10抑制剂作用5～7d增加人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P<0.05)。结论:IL-10对人牙囊细胞的增殖无影响。IL-10降低人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性,说明IL-10抑制人牙囊细胞向成骨方向分化。     

地塞米松对体外培养的人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:观察不同浓度地塞米松对体外培养人牙囊细胞增殖及分化的影响.方法:以不同浓度(0、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L)地塞米松为诱导剂,进行四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测和碱性磷酸酶(ALP)活性检测,评价细胞增殖和分化情况.结果:与空白对照组比较, 低浓度(10-10、10-9 mol/L)地塞米松对牙囊细胞增殖抑制不明显,高浓度(10-8、10-7、10-6 mol/L)的地塞米松明显抑制牙囊细胞的增殖(P<0.01).10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L地塞米松可以增强牙囊细胞碱性磷酸酶的表达,有显著性差异(P<0.01),随着地塞米松浓度增加,碱性磷酸酶活性逐渐增强,不同浓度间具有显著性差异(P<0.05).10-8 mol/l的地塞米松作用于牙囊细胞,其碱性磷酸酶的表达,从第3 d开始升高,第7、9 d达到最高.结论:高浓度地塞米松抑制牙囊细胞的增殖.地塞米松能够升高体外培养的人牙囊细胞中碱性磷酸酶的活性,并呈现剂量依赖性,特定浓度的地塞米松对牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响随时间的延长而升高,呈现时间依赖性.     

LIM矿化蛋白1在成骨分化前后人牙囊细胞中的表达

目的：研究人牙囊细胞成骨分化前后LIM矿化蛋白-1的表达。探讨LIM矿化蛋白-1在牙囊细胞向牙周组织分化过程中的作用。方法：组织块加酶消化法分离培养人牙囊细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养4周后,免疫细胞化学检测骨涎蛋白的表达;Von Kossa染色检测矿化结节的形成。矿化诱导前后,采用RT-PCR技术检测LIM矿化蛋白-1。结果：培养4周,实验组矿化结节形成,骨涎蛋白免疫细胞化学呈阳性表达, Von Kossa染色阳性;对照组未形成矿化结节,骨涎蛋白表达弱阳性,Von Kossa染色阴性。 RT-PCR结果显示LIM矿化蛋白-1在实验组强阳性表达,对照组弱表达。结论：LIM矿化蛋白-1与胚胎期人牙囊细胞的体外矿化过程相关,提示LIM矿化蛋白-1可能在胚胎期牙囊细胞的分化、矿化中发挥一定作用。     

胞内信号转导分子LIM矿化蛋白-1在人牙周膜细胞体外矿化过程中表达的实验研究

目的:研究胞内信号转导分子LIM矿化蛋白-1在人牙周膜细胞体外矿化过程中的表达。方法:利用组织块法体外培养人牙周膜细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养14 d后,免疫细胞化学检测骨涎蛋白的表达;von Kossa染色检测矿化结节的形成。培养期间,采用半定量RT-PCR技术监测LIM矿化蛋白-1、碱性磷酸酶的表达,SPSS11.0软件分析结果。结果:培养14 d,实验组骨涎蛋白免疫细胞化学呈阳性表达,von Kossa染色阳性,矿化结节形成;对照组骨涎蛋白表达阴性,von Kossa染色阴性。RT-PCR结果显示碱性磷酸酶、LIM矿化蛋白-1在实验组和对照组各时段均表达。培养期间,实验组LIM矿化蛋白-1的表达显著高于对照组,其中培养第3 d、14 d时表达分别达到两个高峰,约为对照组的1.4倍、1.5倍。培养期间,碱性磷酸酶的表达显著增高,其中培养14 d时约为对照组的1.5倍。结论:首次发现LIM矿化蛋白-1与人牙周膜细胞的体外矿化过程相关,提示LIM矿化蛋白-1可能在牙周膜细胞的分化、矿化中发挥一定作用。     

胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1在人牙髓细胞体外矿化过程中表达的实验研究

目的:研究胞内信号转导分子LIM矿化蛋白1在人牙髓细胞体外矿化过程中的表达。方法:利用组织块法体外培养人牙髓细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养14d后,免疫细胞化学检测牙本质涎蛋白的表达;von kossa染色检测矿化结节的形成。培养期间,采用半定量RT-PCR技术监测LIM矿化蛋白1及碱性磷酸酶的表达,SPSS11.0软件分析结果。结果:培养14d,实验组牙本质涎蛋白免疫细胞化学呈阳性表达,von kossa染色阳性,矿化结节形成;对照组牙本质涎蛋白表达阴性,von kossa染色阴性。RT-PCR结果显示碱性磷酸酶及LIM矿化蛋白1在实验组和对照组各时段均表达。培养期间,实验组LIM矿化蛋白1的表达显著性高于对照组,其中培养第2天及9天时表达分别达到两个高峰,约为对照组的1.8倍及3.0倍。培养期间,碱性磷酸酶的表达显著性增高,其中培养14d时约为对照组的2.0倍。结论:首次发现LIM矿化蛋白1与人牙髓细胞的体外矿化过程相关,提示LIM矿化蛋白1可能在牙髓细胞的分化及矿化中发挥一定作用。     

Balb/c胎鼠下颌突外胚间充质细胞向成骨细胞诱导分化的体外研究

目的：探讨矿化液体外诱导外胚间充质细胞向成骨细胞分化的过程。方法：取妊娠12．5d胎鼠第三代下颌突外胚间充质细胞，培养于含10mmol／L β-甘油磷酸钠、100μg/mL维生素C、10nmol／L地塞米松、150mL／L胎牛血清的DMEM中。相差显微镜下观察细胞的形态变化，免疫组化鉴定细胞性质，碱性磷酸酶染色及活性检测，矿化结节Von Kossa染色。结果：培养14d，细胞形态发生明显变化，呈多边形、立方形，抗I型胶原染色阳性。碱性磷酸酶活性增高，碱性磷酸酶染色阳性，矿化结节形成。结论：矿化液可诱导外胚间充质细胞向成骨细胞分化。     

巨噬细胞集落刺激因子对体外培养人牙囊细胞破骨细胞分化因子表达的影响

目的：研究巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的人牙囊细胞破骨细胞分化因子（RANKL）mRNA表达的影响。方法：原代培养人牙囊细胞，传至第3代，制备细胞爬片，进行RANKL免疫组化染色；选取生长状态良好的第3-6代人牙囊细胞，胰酶消化后制成单细胞悬液，培养基中分别加入25ng／mL的巨噬细胞集落刺激因子，共同孵育0．5、1、3、6、12h，提取总RNA进行RT-PCR，灰度值半定量分析RANKL mRNA的变化。结果：正常人牙囊细胞RANKL蛋白表达阳性；25ng／mL的巨噬细胞集落刺激因子可升高人牙囊细胞RANKL的表达；共同孵育3h，RANKL表达最高。结论：巨噬细胞集落刺激因子对体外培养的人牙囊细胞表达RANKL，具有正向调节作用。     

体外培养的SD大鼠类成牙骨质细胞生物学性状初步探讨

目的：对SD大鼠磨牙牙骨质的类成牙骨质细胞分泌碱性磷酸酶，骨钙素以及形成矿化结节的能力进行初步研究。方法：对12周龄SD大鼠第一磨牙类成牙骨质细胞进行骨钙素免疫组化染色和碱性磷酸酶活力测定，并利用茜素红S，检测在条件培养基下细胞形成钙化结节的情况；利用计算机图像分析仪对细胞骨钙素免疫组化染色切片进行光密度定量分析。结果：骨钙素在体外培养的类成牙骨质细胞中被强烈表达，而碱性磷酸酶在类成牙骨质细胞中几乎无活性。类成牙骨质细胞形成钙化结节茜素红S染色阳性。结论：体外培养的类成牙骨质细胞表达矿化相关蛋白，但几乎没有碱性磷酸酶活性，钙化条件下，能在体外形成钙化结节。     

小鼠牙囊细胞的体外分离培养鉴定及异质性研究

目的：建立小鼠牙囊细胞体外分离培养的方法，并对其起源进行鉴定，同时检测其生物学特性．．方法：用1％的胰蛋白酶消化分离7天龄Balb／c小乳鼠的下颌第一磨牙牙胚的牙囊组织进行体外培养，波形蛋白和角蛋白鉴定细胞起源，HE染色观察细胞的形态，Gomori改良钙钴法进行细胞的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase．ALPase)染色，免疫组化法检测细胞Ⅰ型胶原和骨钙素(osteocalcin，OCN)的表达。结果：分离培养的细胞具有多形性，现有3种基本的细胞类型：立方形或多角形；长梭形：非常细长的细胞形状，前2种细胞胞核内有2～4个清晰的核仁，胞质内有大量颗粒，且有大量的线状伪足。波形蛋白染色阳性。角蛋白染色阴性，ALPase染色显示72．7％的牙囊细胞内的ALPase呈强阳性；免疫组化染色显示48．8％的牙囊细胞Ⅰ型胶原及8．75％的牙囊细胞的OCN表达阳性。结论：所培养的牙囊细胞源自间充质，含有多种细胞表型．具有异质性。     

Evidence of the validity of a model of determinants of quality of restorative dental care

A model describing the relationship between self-reported quality of restorative dentistry and dentist characteristics for 119 Montana general dentists is presented. The best predictors formed a significant model explaining 22% of the variance of the quality measure. Results are contrasted with a previous estimation of the model for 102 Washington general practitioners. Evidence for the external validity of the model is presented.     

Experimental evidence of formation of imines in the course of reduction of hydrazones

The reduction of hydrazones is generally suggested to proceed through a reductive cleavage of the nitrogen–nitrogen bond followed by a reduction of the carbon–nitrogen bond. This sequence of reduction processes is here supported for fluorenone (V) and benzophenone (VI) hydrazones as well as by a comparison of the reduction of fluorenone and benzophenone hydrazonium ions (I,III) with corresponding imines (II,IV). Another proof of the presence of imines as intermediates is the splitting of four-electron waves of hydrazones V and VI and hydrazonium ions I and VIII into two waves at pH < 2. This has been interpreted as due to differences in slopes dE_1/2/dpH and pK_a-values of protonated hydrazine derivatives on one side and corresponding imines on the other. In this pH-range imines formed in reductions of VI and VIII are reduced in a single two-electron wave, those of I and V in two one-electron steps. Fluorenone imine (II) is sufficiently stable to allow recording of time-independent current–voltage curves between pH 6 and 11. In this pH-range the imine (II) is reduced in two one-electron steps. Benzophenone imine (IV) has been found stable between pH 4.6 and 12. At pH 4.6–8 the reduction of the imine IV takes place in a single two-electron step, at pH 8–12 in two one-electron steps. Final proof of the initial cleavage of the N–N bond is presented by comparison with the reduction of nitrones.     

不同剂型玻璃离子水门汀溶解性比较研究

目的:研究、比较不同剂型玻璃离子水门汀的溶解性和表面微观形态改变,为临床使用提供依据.方法:将3M树脂加强型玻璃离子水门汀(水粉剂型)、GC玻璃离子水门汀(水粉剂型)及GC玻璃离子水门汀(双糊剂型)分别在人工唾液中浸泡30 d,冷热循环15000次,烘干测重,比较前后质量变化,计算溶解率,并用扫描电镜观察表面微观改变.结果:不同剂型的玻璃离子水门汀溶解率由高到低分别为3M树脂加强型玻璃离子水门汀(水粉剂型)、GC玻璃离子水门汀(水粉剂型)、GC玻璃离子水门汀(双糊剂型).3种玻璃离子水门汀经浸泡溶解后,SEM扫描表面微观形态可观察到GE玻璃离子水门汀(双糊剂型)表面形态改变较少,其他2组玻璃离子水门汀表面微观改变较多.结论:双糊剂型玻璃离子水门汀理化性能及溶解率均低于传统水粉剂型,是未来临床修复治疗的的良好选择.     

Evaluation of efficacy of chemiluminescence for diagnosis of leukoplakia

ObjectiveLeukoplakia is the most common potentially malignant disorder preceding oral cancer. Chemiluminescence has been developed as an adjunct to conventional examination for the diagnosis of these potentially malignant disorders. This study was conducted to assess the efficacy of chemiluminescence in the diagnosis of leukoplakia and to compare the results with histopathological examination.Study designA total of 50 patients with leukoplakia were included from the outpatients attending the Department of Oral Medicine and Radiology, Dental Hospital, Bengaluru, Karnataka, India. These patients were subjected to conventional oral examination followed by chemiluminescent examination with Vizilite (Zila, Fort Collins, CO, USA) and biopsy for histopathological confirmation.ResultsThe sensitivity, specificity, positive predictive value, and negative predictive value of chemiluminescence were 93.75%, 55.56%, 78.95%, and 83.3%, respectively. The overall accuracy of chemiluminescence was 80%. A statistically significant association was observed between histopathology results and chemiluminescence results.ConclusionAlthough it is an easy, safe, minimal time consuming, and noninvasive technique, it has only adjunctive utility and it does not replace biopsy for the diagnosis of leukoplakia.     

颌骨动静脉畸形的栓塞治疗

目的：总结直接穿刺结合经血管内介入栓塞治疗颌骨动静脉静脉畸形的经验。方法：收治凳骨动静脉畸形患者6例,均进行了介入栓塞治疗。采用的栓塞材料为附凝血棉纤毛的螺圈,聚乙烯醇泡沫微粒和二氰基丙烯酸对丁酯。数字减影颈动脉造影在PHILIPSV300下完成。结果6例颌骨动静脉畸形患者中4,例急性出血得到了快速、有效控制,1例慢性渗血的右下 骨动静脉畸形患者,介入栓塞治疗,拔除松动的右下凳第一磨牙,有效地控制了出血,另1例伴局部软组织搏动性膨隆的上凳骨动静脉畸形患者,介入治疗后膨隆的搏动性得到明显改善,栓塞治疗后分别随访3－24个月,均未发现有口腔内渗血或出血。随访的X线片上,病灶区可见新骨形成。结论：局部穿刺结合经血管内介入栓塞治疗颌骨动静畸形是一种安全、有效的治疗方法。     

Design of clinical trials of traditional therapies of periodontitis

The present paper on the design of clinical trials of periodontal therapy first addresses the issue of the etiology of periodontal disease. It is suggested that most if not all forms of destructive periodontal disease are caused by microorganisms and that there are different forms of disease with different microbial etiologies. The progressive nature of destructive periodontal disease is subsequently discussed and it is emphasized that, in a given patient, periodontal sites which show signs of inflammation and attachment loss may not over a period of several months and years show further sign of attachment loss. The present methods of assessing periodontal disease do not allow us to discriminate between potentially active and inactive sites in untreated patients. The significance and variability of indicators of periodontal disease such as bleeding on probing, probing pocket depth and probing attachment level measurements are discussed. The errors inherent in the various measurements are analyzed and suggestions are presented describing how alterations in any of the above parameters could be identified and presented in a clinical trial. Of concern for the statistical analysis of clinical data of periodontal disease is the definition of the "experimental unit". For a number of years, the "experimental unit" in periodontal trials was the patient. It is clear, however, that different sites within the same individual show different patterns of disease progression and lesion morphology and often respond differently to periodontal therapy. Statistical analyses must consequently be designed which recognize differences in site-to-site infection and lesion morphology within a common host. Until such analyses are available, the investigator should be wary of pooling data within the same individual, since such pooling may obscure meaningful alternatives which may take place in individual periodontal sites. Some goals of periodontal therapy are subsequently identified. 4 goals are discussed more in detail, namely: to establish conditions which will allow the patient to maintain a dentition without further breakdown of the periodontium; to reduce pocket depth to establish an anatomy in the dentogingival region which with proper maintainance care will prevent the re-establishment of the subgingival infection; to gain attachment as a result of treatment; to assess the effect of a certain chemotherapeutic agent on periodontal disease.     

正畸患者切牙影像失真发生情况分析

目的研究正畸患者曲面体层片上的切牙影像失真发生情况，并分析其原因。 方法从中山大学附属口腔医院放射科影像数据库中选取500例正畸患者的曲面体层片和头影测量侧位片，所有曲面体层片均采用咬合杆投照，分别从切牙牙体影像放大、缩小、牙根变短、根尖模糊等评价指标分析上下颌切牙影像失真的发生情况，在头影测量侧位片上测量中切牙根尖-对颌切牙切缘的距离，探讨切牙影像失真发生的原因。采用SPSS 19.0统计软件对所得数据进行统计学检验。 结果500例患者中，切牙牙体影像正常者共417例，切牙牙体影像失真者共83例，影像失真发生率16.6%，其中切牙牙体影像放大17例、牙体影像缩小0例、牙根变短30例，牙根影像变短伴模糊36例。影像失真患者的根尖-切缘距离大于影像正常的患者，差异有统计学意义（F = 5 187.18，P = 0）；影像失真患者的覆盖值大于影像正常的患者，差异有统计学意义（F>477，P = 0）。 结论严重牙颌面畸形如反 、深覆盖是导致曲面体层片的切牙影像失真的主要原因之一。     

正常青年Monson球面半径的测量研究

目的测量正常青年Monson球面半径。方法选择60名(男30名,女30名)正常青年制取全口印模,应用立体摄影成像的原理与方法对Monson球面半径进行测量和统计学处理。结果Monson球面的半径平均为10.173 cm,大于理论值10.160 cm,差异有显著性(P<0.01);男、女性球面半径差异无显著性。结论本实验所得到的数据可作为全口义齿修复中记录颌位关系的一个参量。     

鼻测量法的进展

唇裂术后继发畸形是指唇裂修复术后,仍遗留或继发于手术操作和生长发育变化而表现出来的一类畸形[1]。包括唇畸形、鼻畸形和颌骨畸形。其修复较原发性唇裂修复更复杂,更灵活多变。而导致其修复复杂性的一个重要原因即是局部组织结构复杂变异和缺乏可靠的三维测量手段[2],鼻畸形     

《口腔医学》杂志2007年度有关信息的分析

目的通过对《口腔医学》2007年全年文献的回顾和分析,了解我国口腔临床医学的研究现状。方法阅读2007年《口腔医学》全年的文献,对各种信息进行了分类汇总,根据设计类型对临床一次性文献进行了分类,并对其中的试验性研究文章进行质量分析。结果《口腔医学》2007年全年的一次性文献274篇,基础和临床文献分别为108和166篇,以临床文献为主(60.58%)。在临床研究文献中,属于观察性、分析性和试验性的文献分别为97、9和60篇,观察性文献所占比例为36.14%,高于以往的报道。60篇观察性文献中,全都设有对照;统计方法应用得当者44篇;真正做到随机、盲法的分别只有4和2篇。结论我国口腔临床方面的研究水平近年来提高明显,但设计的科学性方面有待提高。